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曼地亚红豆杉悬浮培养细胞产紫杉醇条件优化研究

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曼地亚红豆杉悬浮培养细胞产紫杉醇条件优化研究

作者：赵继鹏西北农林科技大学

学位级别：硕士

本试验以实验室中经过5次以上继代且生长稳定的曼地亚红豆杉愈伤组织为材料，采用单因素试验和正交试验的方法进行试验。研究曼地亚红豆杉细胞悬浮培养的培养条件、蔗糖浓度、初始培养浓度、植物生长调节物质和防褐化物质对细胞生长的影... 详细信息

本试验以实验室中经过5次以上继代且生长稳定的曼地亚红豆杉愈伤组织为材料，采用单因素试验和正交试验的方法进行试验。研究曼地亚红豆杉细胞悬浮培养的培养条件、蔗糖浓度、初始培养浓度、植物生长调节物质和防褐化物质对细胞生长的影响;天然添加物对曼地亚红豆杉细胞生长和细胞内紫杉醇含量的影响;碳源对曼地亚红豆杉细胞生长和细胞内紫杉醇含量的影响;诱导物质对曼地亚红豆杉细胞内紫杉醇含量的影响。通过上述试验，来获得最佳的培养基配方，筛选出最优的防褐化试剂配比，通过培养条件的确立，建立稳定的曼地亚红豆杉细胞悬浮培养体系;研究天然添加物在曼地亚红豆杉细胞悬浮培养过程中，对曼地亚红豆杉细胞生长和细胞内紫杉醇含量的影响，获得了最佳的天然添加物种类和添加浓度;通过碳源对曼地亚红豆杉细胞生长和细胞内紫杉醇含量影响的研究，来确定最适的碳源种类和浓度及其添加时间;通过对诱导物质对曼地亚红豆杉细胞生长和细胞内紫杉醇含量影响的研究，来确定最佳诱导物质配比和添加时间。通过这些研究，来建立稳定的悬浮培养体系和诱导生产紫杉醇的方法，为之后的大规模培养提供基础。试验的结果如下： 1.曼地亚红豆杉细胞悬浮培养体系：通过对不同蔗糖浓度、接种量、植物生长调节物质组合和防褐化试剂配比对曼地亚红豆杉细胞生长的影响研究，通过单因素试验和正交试验进行筛选，确定曼地亚红豆杉细胞悬浮培养的条件：B5培养基+2.4-D0.6mg/L+NAA0.8mg/L+KT1.0mg/L+柠檬酸0.22g/L+PVP0.35g/L+水解乳蛋白0.45g/L+蔗糖30g/L、pH=5.8、接种量0.1g/mL、培养箱转速110r/min、25℃、暗培养、继代时间为15d。 2.天然添加物对曼地亚红豆杉细胞的影响：以香蕉汁、马铃薯汁、苹果汁3种天然添加物为材料。通过试验发现，3种天然添加物对红豆杉细胞生长和细胞内紫杉醇含量均有影响，其中以75g/L马铃薯汁对红豆杉细胞的增殖的影响最大，并且其对细胞内紫杉醇含量也具有显著的提高作用。3种天然物质对愈伤组织增殖的影响从大到小依次为：马铃薯汁、香蕉汁、苹果汁。而3种天然物质对红豆杉细胞中的紫杉醇含量的作用从大到小依次为：苹果汁、马铃薯汁、香蕉汁。 3.碳源物质对曼地亚红豆杉细胞的影响：以蔗糖、麦芽糖、乳糖、果糖、葡萄糖、山梨醇、甘露醇、75％蔗糖+25％果糖、75％果糖+25％山梨醇和75％蔗糖+25％山梨醇10种碳源物质为材料进行试验，通过单因素试验确定最佳的碳源种类和添加浓度。对曼地亚红豆杉悬浮细胞生长和细胞内紫杉醇含量影响最大的碳源种类为蔗糖，其最适的浓度为40g/L，添加时间为在开始培养时添加蔗糖的浓度为30g/L，在培养到第15d时再添加10g/L的蔗糖。试验中发现多糖类物质对细胞生长的促进作用比单糖类和醇类物质要大，在对细胞的紫杉醇含量影响方面，醇类的影响作用较大，但是醇类物质不能支持细胞的生长。 4.诱导物质对曼地亚红豆杉细胞的影响：以硝酸银、乙酸钠、水杨酸、苯丙氨酸和甘氨酸5种试剂为诱导物质，通过单因素和正交试验来确定曼地亚红豆杉细胞生产紫杉醇的最佳诱导配比为：硝酸银3mg/L+乙酸钠4mg/L+水杨酸15mg/L+苯丙氨酸10mg/L+甘氨酸10mg/L，添加诱导物质的时间为培养的第18d。5种诱导物质对曼地亚红豆杉细胞产紫杉醇的影响从大到小依次为：苯丙氨酸、甘氨酸、硝酸银、乙酸钠、水杨酸。 5.对研究的结果进行验证，验证试验的结果为：曼地亚红豆杉悬浮培养细胞的增殖倍数为3.21;其紫杉醇含量为93.57μg/mL。

关键词：曼地亚红豆杉细胞悬浮培养天然添加物碳源物质诱导物质

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曼地亚红豆杉细胞悬浮培养体系的建立

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2014年第1期42卷 189-195页

作者：赵继鹏杨淑慎西北农林科技大学生命科学学院陕西杨凌712100

【目的】建立曼地亚红豆杉的愈伤组织细胞悬浮培养体系,为紫杉醇生产提供参考。【方法】以曼地亚红豆杉幼茎诱导的愈伤组织为材料,以B5培养基为基本培养基,利用单因素试验或正交试验,研究愈伤组织接种量、蔗糖质量浓度、激素类型及配比... 详细信息

【目的】建立曼地亚红豆杉的愈伤组织细胞悬浮培养体系,为紫杉醇生产提供参考。【方法】以曼地亚红豆杉幼茎诱导的愈伤组织为材料,以B5培养基为基本培养基,利用单因素试验或正交试验,研究愈伤组织接种量、蔗糖质量浓度、激素类型及配比和防褐化试剂对曼地亚红豆杉细胞生长的影响。【结果】曼地亚红豆杉细胞悬浮培养的最佳培养基和培养条件为:B5+2,4-D 0.6mg/L+NAA 0.8mg/L+KT 1.0mg/L+柠檬酸220mg/L+PVP350mg/L+水解乳蛋白450mg/L+蔗糖30g/L(pH=5.8),接种量0.1g/mL,在培养箱中110r/min、25℃暗培养。【结论】曼地亚红豆杉愈伤组织细胞在所建立的培养体系中经过多次继代后,生长状况良好,表明该细胞悬浮体系比较稳定,可以用于大规模培养红豆杉细胞。

关键词：曼地亚红豆杉愈伤组织细胞悬浮培养植物生长激素防褐化试剂

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浅谈全封闭高密度蛋鸡舍冬春季的通风技术

中国动物保健 2024年第2期26卷 105-106页

作者：赵继鹏阳泉市动物疫病预防控制中心山西阳泉045000

封闭式鸡舍环境控制是一个技术含量非常高的系统工程,尤其是全面实现自动化控制以后,高密度养殖必然带来更加严格的环控挑战,本文旨在通过对全封闭高密度大型养鸡场通风技术的观察和试验,探讨从细节入手通过精细控制通风来全面做好舍内... 详细信息

封闭式鸡舍环境控制是一个技术含量非常高的系统工程,尤其是全面实现自动化控制以后,高密度养殖必然带来更加严格的环控挑战,本文旨在通过对全封闭高密度大型养鸡场通风技术的观察和试验,探讨从细节入手通过精细控制通风来全面做好舍内环境控制的可行性。

关键词：全封闭高密度蛋鸡养殖通风

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石墨烯在金属防护中的应用与展望

表面技术 2017年第3期46卷 202-208页

作者：付红丽赵继鹏方露胡吉明浙江大学化学系杭州310027

石墨烯(类)材料作为明星材料,是诸多应用领域的研究热点。主要从两个方面综述了石墨烯材料在金属腐蚀防护中的应用研究现状,简要概述了单纯的石墨烯薄膜用于金属防护的发展历程,并对该防护手段的弊端进行了分析与讨论,得出石墨烯薄膜不... 详细信息

石墨烯(类)材料作为明星材料,是诸多应用领域的研究热点。主要从两个方面综述了石墨烯材料在金属腐蚀防护中的应用研究现状,简要概述了单纯的石墨烯薄膜用于金属防护的发展历程,并对该防护手段的弊端进行了分析与讨论,得出石墨烯薄膜不适合直接覆于金属表面用于防腐蚀的结论。详细介绍了石墨烯复合防护涂层的制备方法与性能,针对将石墨烯类材料作为填料改性防护涂层的研究现状,概括了该防护手段的缺点与改进策略,即通过在氧化石墨烯表面进行分子(硅烷偶联剂、聚合物单体等)修饰和表面覆盖纳米粒子(纳米Si O2、Al2O3、Ti O2颗粒等),达到增强石墨烯材料与防护涂层之间的相容性的目的。在此基础上,提出了"主动防护"的概念,构想出一种以石墨烯材料为基础的新型缓蚀剂纳米存储器,同时提出石墨烯材料的深层防护机制仍亟待解决。最后,立足于整个石墨烯行业,从工业化应用的角度出发,对石墨烯防护技术进行了展望。

关键词：石墨烯薄膜复合涂层金属腐蚀防护缓蚀剂纳米存储器

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微通道气体流动特性研究进展

真空与低温 2021年第3期27卷 296-302页

作者：赵继鹏徐涛杨兵兰州空间技术物理研究所兰州730000

微机电系统内部存在微尺度流动现象,伴随微机电系统出现的微流量系统目前已广泛应用于气体微流控领域。研究微通道气体流动特性能够为微机械结构设计提供理论指导。在对气体流动尺度划分分析的基础上,阐述了各尺度流动特征及流动模型。... 详细信息

微机电系统内部存在微尺度流动现象,伴随微机电系统出现的微流量系统目前已广泛应用于气体微流控领域。研究微通道气体流动特性能够为微机械结构设计提供理论指导。在对气体流动尺度划分分析的基础上,阐述了各尺度流动特征及流动模型。重点调研了国内外微直通道和非直通道中充分发展段及进出口区域气体流动阻力特性,并对微尺度流场可视化实验方法中的显微粒子图像测速技术和流场特性研究进行了总结。分析了当前微尺度气体流动特性研究现状,指出进一步开展对微通道进出口气体阻力、非直通道流动特性及非稳态流动特性的研究有助于微机械结构设计优化,拓宽其应用范围。

关键词：微通道流动阻力特性显微粒子图像测速流场特性

略论国民党主导的中国反日国际宣传战——以“九一八”事变为中心

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新闻记者 2019年第11期 60-70页

作者：刘继忠赵佳鹏南京师范大学新闻与传播学院复旦大学新闻学院

为配合完全诉诸国联的外交政策,国民党当局发动了持续三年多的"九一八"反日国际宣传战。本文基于原始史料首次勾勒了"九一八"反日国际宣传战历史概貌。反日国际宣传活动揭开了中国促成"全世界结成反日统一战线"的序幕,中国现代公共关系... 详细信息

为配合完全诉诸国联的外交政策,国民党当局发动了持续三年多的"九一八"反日国际宣传战。本文基于原始史料首次勾勒了"九一八"反日国际宣传战历史概貌。反日国际宣传活动揭开了中国促成"全世界结成反日统一战线"的序幕,中国现代公共关系由是发轫。受制于国民党内耗性权力结构,原本稀缺的外交外宣资源未得到有效整合,中国国际宣传被动局面未得到根本改观,其教训成为全面抗战时期国民党强化国际公关,扭转中国国际宣传被动的重要因素。

关键词：国民党中国反日国际宣传战九一八国联

基于CEEMDAN样本熵与FWA-SVM的高压断路器机械故障诊断

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电力自动化设备 2020年第3期40卷 181-186页

作者：赵书涛马莉朱继鹏李建鹏赵慧华北电力大学电气与电子工程学院河北保定071003 贵州省电网公司贵阳花溪供电局贵州贵阳550000 国网河北省电力有限公司检修分公司河北石家庄050000

针对振动信号判别断路器机械故障过程受干扰影响的特征提取问题,提出一种自适应白噪声完整集合经验模态分解(CEEMDAN)与样本熵相结合的故障特征提取方法。通过CEEMDAN提取若干反映断路器操动过程机械状态信息的本征模态函数(IMF)分量,... 详细信息

针对振动信号判别断路器机械故障过程受干扰影响的特征提取问题,提出一种自适应白噪声完整集合经验模态分解(CEEMDAN)与样本熵相结合的故障特征提取方法。通过CEEMDAN提取若干反映断路器操动过程机械状态信息的本征模态函数(IMF)分量,依据各IMF相关系数与能量分布,将前7阶IMF分量进行小波包软阈值去噪,计算其样本熵作为特征量,最后采用基于免疫浓度思想的烟花算法(FWA)优化支持向量机(SVM)分类器,对断路器不同运行状态进行分类识别。实验结果表明:基于CEEMDAN样本熵特征对于信号干扰不敏感,FWA-SVM诊断方法对于高压断路器分闸操动过程故障辨识效果良好。

关键词：高压断路器振动信号自适应白噪声完整集合经验模态分解支持向量机故障诊断

遥感技术在苹果园精准种植管理中的应用现状及展望

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自然资源遥感 2023年第2期35卷 1-15页

作者：赵海岚蒙继华纪云鹏中国科学院空天信息创新研究院数字地球重点实验室北京100094 中国科学院大学北京100049 陕西果业集团有限公司西安710016

在果园种植管理向精准化和数字化发展的趋势下,苹果栽培对果园种植管理支撑技术提出了更高的要求。近些年,遥感技术的空间分辨率和重访频率不断突破,已经成为苹果园精准种植管理的主要支撑技术,然而目前鲜有综述文章进行这方面的现状梳... 详细信息

在果园种植管理向精准化和数字化发展的趋势下,苹果栽培对果园种植管理支撑技术提出了更高的要求。近些年,遥感技术的空间分辨率和重访频率不断突破,已经成为苹果园精准种植管理的主要支撑技术,然而目前鲜有综述文章进行这方面的现状梳理和展望,因此对这类研究进行总结很有必要。通过分析遥感技术在苹果园精准种植管理中的主要应用情况,将遥感技术的应用领域归纳为果园基础信息调查、果林参数反演和果园种植管理支撑3大类,并综述遥感技术在各领域中的应用方法、效果,探讨应用潜力。最后,总结出当前研究和应用存在机理性研究少且部分应用领域研究不足、多技术集成化程度不高、缺乏大范围的示范应用3类问题,并指出苹果树生长模拟机理模型、一体化苹果种植管理支撑系统、基于卫星数据的单木监测、遥感监测产品多元服务4个研究主题将成为下一步的研究和应用热点。

关键词：遥感苹果园精准农业果树监测

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动物疫病防控助力畜牧业增效 007