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番茄环斑病毒及转基因产品的分子检测技术研究

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番茄环斑病毒及转基因产品的分子检测技术研究

作者：赵文军西北农林科技大学

学位级别：硕士

番茄环斑病毒(tomato ring spot virus ToRSV)广泛分布于欧美，危害多种重要经济作物，严重者导致绝产，目前国内尚未发现，因此被我国列为一类检疫有害生物，应实施严格检疫。目前广泛应用的植物病毒检测方法为血清学检测，其灵... 详细信息

番茄环斑病毒(tomato ring spot virus ToRSV)广泛分布于欧美，危害多种重要经济作物，严重者导致绝产，目前国内尚未发现，因此被我国列为一类检疫有害生物，应实施严格检疫。目前广泛应用的植物病毒检测方法为血清学检测，其灵敏度及可靠性不能达到出入境检验检疫的要求。反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction RT-PCR)是一种快速灵敏的分子生物学检测方法，但存在漏检和假阳性现象。本试验在RT-PCR的基础上设计了杂交诱捕引物及杂交探针，优化了杂交诱捕参数，建立了杂交诱捕RT-PCR-ELISA(hybridization capture RT-PCR-ELISA HC-RT-PCR-ELISA)。该方法的基本步骤是：将5’端氨基化的反向引物共价交链在PCR管上，在一定条件下特异性诱捕核酸粗提液中的靶标核酸，然后洗掉杂质及聚合酶抑制物质，完成核酸的诱捕。固相引物既参与核酸的诱捕，又参与PCR扩增。扩增中，在Taq酶的作用下，扩增产物沿着该引物延伸，形成一条固定在管壁上的链称之为固相产物。对液相产物进行凝胶电泳检测的同时对固相产物进行杂交检测。该方法将PCR与ELISA有机结合起来，利用了PCR的高效性与ELISA的高特异性，而建立的一种新的分子生物学检测技术。作为一种新的检测方法，与传统的RT-PCR相比有如下改进：1)改变了核酸提取方法，利用杂交诱捕法直接从核酸粗提液中诱捕核酸，尤其适合于病毒含量低、Taq酶抑制物质含量高的植物材料，减少了核酸提取的时间及试剂费用。2)结果可靠：杂交特异性诱捕靶标片段的同时去除了核酸中存在的PCR抑制物质，减少了因核酸提取不纯造成的漏检现象，减少了非特异性扩增，结果输出通过双重判定，保证了结果的可靠性。3)灵敏度高：通过杂交进行结果判定，灵敏度比传统的RT-PCR大约高10倍，可以检测出10ug植物材料中的ToRSV。实时荧光PCR(real time fluorescent PCR RT-F-PCR)是一种不需要进行凝胶电泳，而是在PCR反应中直接通过荧光探针杂交检测扩增产物的的方法。将杂交诱捕与实时荧光 PCR结合起来，诱捕后直接进行反转录 RTfPCR（HC－RTfPCR）检测，该方法检测灵敏度可达到 10fig。HC－RTfPCR方法比 HC－RTICRELISA方法减少了操作步骤;同时由于不走电泳也减少了核酸污染的可能，节省了检测时间，从核酸诱捕到病毒检测完成只需3h，提高了检测效率。 HC－RT－PCR－ELISA和 HC－RT－F－PCR同时作为的检测方法，结果输出都是通过探针杂交后仪器输出，灵敏度相当。前者仪器操作简单，费用低，易于推广应用。后者自动化程度高，工作量小，更快速，结果输出更直观，是一种很有应用前景的病原物检测方法，但目前仪器昂贵，试剂费用高，暂时还难以推广。利用所建立的 HC－RT－PCR－ELISA和 HC－RT－F－PCR对法国进口的 6株怀疑感染有ToRSV的葡萄种苗进行了检测，发现四株带有TORSV，两种方法检测结果完全一致。从南瓜花叶病毒kquash mosaic virus SqMV）RNAZ保守序列设计引物，用 HC－RTPCRELISA检测北京郊区采集的南瓜材料上的SqMV，结果发现所用的6 个样品全部带有 SqMV，用巢式 PCR（Nest PCR）对检测结果进行了验证，证明了 HC－RT－PCR－ELISA检测结果完全正确。由于转基因产品（genetically modified organisms GMOs）潜在的非安全性及国际贸易争端，包括中国在内的许多国家，尤其是欧盟要求对进口产品进行转基因检测。355启动子、NOS终止子及 NPT 11基因是目前转基因检测常用的 3个基因。将 180hp的 DNA片段包被到 PCR管上进行核酸诱捕，洗掉杂质后直接在该管内作 PCR，结果3个基因全部检测出。而非转基因样品未检测到任何基因，证明了HC－PCR 检测结果的准确性。

关键词：植物病毒番茄环斑病毒 ToRSV检测杂交诱捕-RT-PCR-ELISA 杂交诱捕-RT-F-PCR 转基因产品

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“河套”牌葵花籽油营销环境分析及战略研究

“河套”牌葵花籽油营销环境分析及战略研究

作者：赵文军内蒙古大学

学位级别：硕士

随着人民生活水平的提高，人们的饮食习惯和饮食结构已发生了很大的变化，对食品品质的要求越来越向绿色、营养方向发展。食用油作为人们日常生活饮食消费品，已由过去食用动物油为主而转向食用植物油为主，植物油的生产量和消费量逐年... 详细信息

随着人民生活水平的提高，人们的饮食习惯和饮食结构已发生了很大的变化，对食品品质的要求越来越向绿色、营养方向发展。食用油作为人们日常生活饮食消费品，已由过去食用动物油为主而转向食用植物油为主，植物油的生产量和消费量逐年增加，与此同时，人们对油脂的品质要求也越来越高，不仅对植物油脂的色、香、味有较高的要求，而且更加关注植物油的营养价值。本文从整个行业角度详细分析了各种食用油籽的种植、加工及消费情况，特别是对我国油脂行业的现状和竞争情况进行了详细的分析，从而对国内及地区整个油脂行业有了清楚的认识。在此基础上，明确了恒丰油脂公司在整个国内油脂行业所处的地位及优势，并通过市场细分确立了公司的目标市场，提出了明确的市场定位。为了提高企业在行业中的市场竞争力，提高企业的整体营销水平和管理水平，增强企业的获得能力，本文将新产品开发工作作为恒丰油脂公司总体营销战略的关键部分进行了重点阐述，并立足恒丰油脂公司现状和长远规划，制定了“河套”牌葵花籽油的整体营销策略，以指导恒丰油脂公司营销工作，并对公司总体营销作出规划，为公司的整体营销工作提供的理论指导，使企业在日趋激烈市场竞争立于不败之地。

关键词： “河套”牌葵花油环境分析策略

新型Al-Ti-C晶粒细化合金线材生产及其工业化评价

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新型Al-Ti-C晶粒细化合金线材生产及其工业化评价

作者：赵文军兰州理工大学

学位级别：硕士

本文采用铝熔体热爆合成法,以Al粉、Ti粉、C粉为原料合成制备20kg新型Al-Ti-C细化合金铸锭;挤压拉拔成Φ9.6mm新型Al-Ti-C细化合金线材,并将该细化合金线材在实际生产条件下应用于1235、5052和8011铝合金生产线上,对其细化效果进行工业... 详细信息

本文采用铝熔体热爆合成法,以Al粉、Ti粉、C粉为原料合成制备20kg新型Al-Ti-C细化合金铸锭;挤压拉拔成Φ9.6mm新型Al-Ti-C细化合金线材,并将该细化合金线材在实际生产条件下应用于1235、5052和8011铝合金生产线上,对其细化效果进行工业化评价。本文主要研究了在批量合成时铝液温度及搅拌时间的变化对合成的新型Al-Ti-C细化合金的微观组织及细化效果的影响;对铸轧板、冷扎板的晶粒度及力学性能进行分析。运用XRD、OM、SEM、EPMA等检测手段分析新型Al-Ti-C细化合金的微观组织及细化后的晶粒度,并与进口Al-Ti-B细化合金对比。实验结果表明:铝液温度和搅拌时间是两个重要的工艺参数,他们直接影响新型Al-Ti-C细化合金的细化效果。当铝液温度在780℃时,反应后搅拌15～20min,浇铸的铸锭的细化效果最佳。经挤压、拉拔成型的Al-Ti-C细化合金线材组织均匀,TiC粒子细小,尺寸0.5—1.5μm;AlTi粒子呈块状,尺寸8—20μm,在铝基体中均匀分布。在采用新型Al-Ti-C细化合金细化1235、5052、8011三种铝合金时,铸轧卷(锭)晶粒度均达到一级,化学成分和机械性能符合国家标准,加工双零箔材、家用铝箔、啤酒封箔材、管材共计16975kg,产品质量符合相关国家标准,已全部交付用户使用。

关键词：细化合金 Al-Ti-C 细化效果铝液温度搅拌时间工业化评价

经皮肾镜取石术灌洗液吸收对高血压患者循环的影响

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经皮肾镜取石术灌洗液吸收对高血压患者循环的影响

作者：赵文军新疆医科大学

学位级别：硕士

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内黄“光伏高效农业大棚”成本管控

内黄“光伏高效农业大棚”成本管控

作者：赵文军大连理工大学

学位级别：硕士

本文以河南内黄100MW光伏高效农业产业园项目的建设实例为背景,研究了在光伏行业与高效农业相结合的创新行业经营模式下,创新性的建立和完善项目成本管理控制系统,运用科学的管理手段和方法将项目成本支出过程与成本管控流程紧密结合,... 详细信息

本文以河南内黄100MW光伏高效农业产业园项目的建设实例为背景,研究了在光伏行业与高效农业相结合的创新行业经营模式下,创新性的建立和完善项目成本管理控制系统,运用科学的管理手段和方法将项目成本支出过程与成本管控流程紧密结合,形成互动。来促进项目成本计划控制目标任务的完成,提高项目成本管理控制的水平。本文共分四大部分,(1)绪论。重点论述本文研究的目的和意义,建立和完善项目成本管理控制管理模式和方法的目的和意义、研究的思路及主要内容。(2)项目成本管理控制相关理论。重点介绍了成本管理、成本控制的相关理论和方法步骤,并对成本控制的内容和实施方法进行了阐述。(3)内黄“光伏高效农业大棚”项目介绍。介绍了项目成本管理控制体系的构建原则、构建内容并着重介绍了成本控制体系的构建方法。(4)“光伏大棚”项目成本管理控制系统实施对策。描述了成本控制系统运行情况及控制结果以及成本控制系统运行产生的效果。本文研究的重点内容:(1)以“光伏高效农业大棚”项目的建设成本为目标,建立项目的成本管理控制系统。(2)确立以成本预算为重点的成本控制的方法步骤,注重成本控制环节中的事前和事中的控制。本文的特色和创新点主要表现在以下三个方面:(1)通过建立以“业务流程+组织流程”相结合的成本管理控制的工作流程模式。使成本控制的阶段目标与各阶段组织管理任务高度契合,增强了成本控制系统的过程化控制能力。改变了项目业务工作与项目管理工作脱节,控制效果差的顽疾,从而有效的提高了成本控制流程的对计划成本偏差的监管和处理速度。(2)通过改进成本控制的主要指标系统,加强了“成本预算”管理在成本控制系统中的引领作用,将成本控制的工作重点前置,注重成本控制的事前和事中的控制。解决了以往由于成本控制手段滞后和缺失带来的事后验尸,造成成本失控的现象,实现了成本控制指标的全面完成。(3)创建以成本控制为工作目标的各级“成本责任中心”系统,将目标成本控制指标层层分解到各中心,并作为各级“成本责任中心”的主要绩效评价内容。强化了“责任中心”对成本控制的职能。解决了项目成本控制的全员全过程参与的成本责任制度的落实问题;明晰了责任中心及成本责任人的成本目标责任。“成本责任中心”制度的建立,加强了对项目成本指标管控力度,推动了项目绩效评价工作效果。

关键词：成本管控光伏高效农业

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渎职罪主体问题研究

渎职罪主体问题研究

作者：赵文军山西大学

学位级别：硕士

近些年来,职务犯罪领域屡屡发生一系列特大案件。贪污贿赂所涉及数额之巨让人瞠目,渎职犯罪所导致的灾难性后果更是让人心痛。渎职罪的客体是国家机关的正常活动和国家工作人员职务的公正性、廉洁性后果是致使国家和人民的利益遭受重大... 详细信息

近些年来,职务犯罪领域屡屡发生一系列特大案件。贪污贿赂所涉及数额之巨让人瞠目,渎职犯罪所导致的灾难性后果更是让人心痛。渎职罪的客体是国家机关的正常活动和国家工作人员职务的公正性、廉洁性后果是致使国家和人民的利益遭受重大损失。所以,渎职犯罪往往导致国家或公民权利的重大损失,其重要性不言而喻。然而,由于我国现行刑法对这一罪名的规定不够严密,相关法律概念较为模糊,实践中不断出现新情况等种种原因,学者和司法工作人员在渎职罪主体的认定问题上出现了颇多争议。这些不确定因素直接导致在一些重大案件中的主要责任人员得不到应有的惩罚,最终逃脱其责任。针对实践中的此种情况,本文欲分三个部分来阐述笔者对渎职罪主体认定问题的探索,得出自己的判断结果,以期据此结果对现实中遇到的具体案件提出建议,寻求解决的标准和方法。第一部分是综观我国渎职罪主体的法律地位、当前我国的相关法律规定,我国渎职罪法律规定和在现实中遇到的具体案件问题。同时,陈述渎职罪主体相关的背景研究。希望通过纵向上熟悉渎职罪主体立法历程以更好地理解当前法律规定的立法目的和意义。用比较研究方法来帮助寻找解决问题的思路。第二部分通过对背景的了解,结合至今为止这一领域理论研究中学者们的各家之言,同时根据自己的分析,总结国家机关的认定标准,进而解决本文的核心问题即渎职罪主体的判定标准具体是什么。同时针对前文提出的问题,根据已得出的结论做出具体的解答。第三部分是针对当前立法及相关立法解释在渎职罪主体认定中规定的相互矛盾和遗漏之处,在明晰问题所在的基础上寻找解决的办法,提出有助于法律完善,解决实践问题的建议。在对论题进行研究的过程中,本文综合运用了案例分析、比较分析、文献研究、个案研究等方法,力求从理论与实际相结合的角度得出较为全面的结论。

关键词：渎职罪公务国家机关国家机关工作人员

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客户知识管理中的知识转移模式研究

现代情报 2008年第9期28卷 131-133页

作者：赵文军华中师范大学信息管理系湖北武汉430079

本文从客户知识转移的本体层次、知识转移的步骤以及知识转移的核心流程3个方面,构建了客户知识转移模式的基本框架,并从人力资源、组织结构、组织文化和信息技术4个方面探讨了知识转移流程模式的支持因。

关键词：知识转移知识流程知识流

基于CORBA的分布式网络入侵检测系统的研究与实现

维普期刊数据库

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基于CORBA的分布式网络入侵检测系统的研究与实现

作者：赵文军哈尔滨理工大学

学位级别：硕士

本文在对现有的分布式入侵检测系统模型分析和研究的基础上,提出了一种基于CORBA的分布式入侵检测系统模型,并从功能、结构和组成等方面对其进行了详细讨论。基于此模型,我们设计并实现了一个基于CORBA的分布式网络入侵检测系统CDNIDS(C... 详细信息

本文在对现有的分布式入侵检测系统模型分析和研究的基础上,提出了一种基于CORBA的分布式入侵检测系统模型,并从功能、结构和组成等方面对其进行了详细讨论。基于此模型,我们设计并实现了一个基于CORBA的分布式网络入侵检测系统CDNIDS(CORBA-based Distributed Network Intrusion Detection System)。该系统结合了入侵检测技术和CORBA的分布式计算技术,使用了误用检测和异常检测两种分析方法,且有多种入侵响应方式,实时性强、跨平台运行且能动态配置。本论文主要完成了以下工作:分析了目前网络中存在的主要问题,讨论了解决网络安全的一些主要技术,并着重分析了分布式入侵检测系统面临的问题以及入侵检测有关技术标准化的问题。讨论了分布式中间件CORBA中的安全性问题,提出了一种基于CORBA的分布式入侵检测系统模型,并对模型进行了详细讨论。基于我们提出的分布式入侵检测模型,设计并实现了一个基于CORBA的分布式网络入侵检测系统CDNIDS。介绍了该系统的各个组成部分并对这些组成部分的整体设计和具体实现作了详细的描述。总结了将CORBA系统应用于入侵检测系统所带来的好处和优势,并结合自己的研究成果,提出了今后的发展趋势及主要研究方向。我们所开发的系统结构清晰,分布性好,实时性强,易于扩展,对于目前的复杂网络架构具有良好的应用前景。

关键词：网络安全入侵检测 CORBA IDS

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迷迭香芳香油提取及成分分析

中草药 2003年第10期34卷 884-886页

作者：赵文军吴雪萍中国科学院新疆理化技术研究所新疆乌鲁木齐830011

迷迭捍Rosmarinus officinalis L.系唇形科多年迷迭香属植物，原产地中海沿岸，现在世界各地广为栽培。新犯不着迷迭担植物枝、叶中含有挥发油0.48%～0.52%，干品含挥发油0.5%～2%，广泛应用于皂类、化妆品、洗涤剂、除臭剂的加捍，其中... 详细信息

迷迭捍Rosmarinus officinalis L.系唇形科多年迷迭香属植物，原产地中海沿岸，现在世界各地广为栽培。新犯不着迷迭担植物枝、叶中含有挥发油0.48%～0.52%，干品含挥发油0.5%～2%，广泛应用于皂类、化妆品、洗涤剂、除臭剂的加捍，其中含a-蒎烯、莰烯、1,8－桉叶素、龙脑、樟脑、α－和β－松油醇、松油烯－4－醇、马鞭草烯醇、醋酸龙脑酯等成分。迷迭捍油对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、霍乱弧菌等有中等强度的抗菌作用。迷迭捍制剂有健胃、发汗、安神、亢进消化机能，治各种头痛，亦有驱蚊作用~[1]。此外迷迭捍中提取的鼠尾草本分、鼠尾草酸、迷迭捍酚及迷迭捍中提取的鼠尾草酚、鼠尾草酸、迷迭捍酚及迷迭捍二酚等有很强的抗氧化性能~[2]，从迷迭香中提取的食品抗氧化剂具有很好的应用前景。

关键词：迷迭香芳香油提取成分分析气相色谱一质谱