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基于UPLC-Q-Orbitrap-MS的整合定性策略分析茯苓类药材差异化学成分

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：王佳媛范晓涵魏晓晓曹蓉王进王蕾许凤清黄顺旺吴德玲赵宏苏安徽中医药大学药学院国家中医药管理局中药炮制传承基地省部共建安徽道地中药材品质提升协同创新中心中药饮片制造新技术安徽省重点实验室合肥济生源药业饮片有限公司合肥创新医药技术有限公司

目的：基于超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法（UPLC-Q-Orbitrap-MS），联合质量亏损过滤（MDF）和分子网络整合技术，建立快速鉴定茯苓类药材中差异化学成分的分析方法。方法：采用UPLC-Q-Orbitrap-MS在正负离子模式下... 详细信息

目的：基于超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法（UPLC-Q-Orbitrap-MS），联合质量亏损过滤（MDF）和分子网络整合技术，建立快速鉴定茯苓类药材中差异化学成分的分析方法。方法：采用UPLC-Q-Orbitrap-MS在正负离子模式下对茯苓类药材进行质谱数据采集及鉴定，借助MDF对三萜类成分进行裂解行为研究和结构鉴定，基于各成分MS/MS离子碎片的相似度创建全球天然产物社会分子网络（GNPS），利用软件Cytoscape 3.6.1可视化结构相似的分子簇，对主要的化合物类别的结构进行鉴定及确证。采用主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）等多元统计分析，以变量重要性投影（VIP）值>1、P<0.05为标准筛选5种茯苓类药材的差异成分。结果：通过数据库比对鉴定出66种化合物，经MDF新鉴定出8种化合物，经GNPS新鉴定出28种化合物，共鉴定出102种化学成分，其中三萜类成分43种，糖类成分16种，氨基酸及肽类26种，核苷类3种，其他类化合物14种，并筛选出15种共有差异化学成分，包括D-色氨酸、丝氨酸、鸟嘌呤核苷、没食子酸、2-辛烯醛、木糖、麦芽三糖、栓菌酸、去氢齿孔酸、松苓新酸、茯苓酸A、茯苓酸B、茯苓酸E、茯苓酸G、过氧去氢土莫酸，在不同茯苓类药材中的相对含量有明显差异。结论：在5种茯苓类药材中，成分的种类整体相似，但其相对含量存在显著差异，尤其是在三萜类成分的分布上。UPLC-Q-Orbitrap-MS、MDF与GNPS整合技术的联用，可为其他中药的快速定性分析提供思路。

关键词：分子网络质量亏损过滤超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-Q-Orbitrap-MS) 多元统计分析差异化合物成分鉴定三萜类成分

多花黄精炮制前后化学成分差异的UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS分析

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：任萃姣丁杨飞李靖季历帅帅李鹏飞张伟赵宏苏许凤清金传山刘军玲安徽中医药大学药学院国家中医药管理局中药炮制传承基地省部共建安徽道地中药材品质提升协同创新中心中药饮片制造新技术安徽省重点实验室安徽省食品药品检验研究院国家药监局中药质量研究与评价重点实验室

目的：基于超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱法（UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS）探讨多花黄精生品与酒制品化学成分差异。方法：采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm），流动相0.1%甲酸水溶液... 详细信息

目的：基于超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱法（UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS）探讨多花黄精生品与酒制品化学成分差异。方法：采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm），流动相0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）梯度洗脱（0～5 min，5%B；5～10 min，5%～15%B；10～12 min，15%～20%B；12～15 min，20%B；15～18 min，20%～40%B；18～22 min，40%～65%B；22～25 min，65%～95%B；25～32 min，95%B；32～32.5 min，95%～5%B；32.5～38 min，5%B），使用电喷雾离子源（ESI），正、负离子模式检测，扫描范围m/z 80～1 200。使用Compound Discoverer v.3.3软件对原始数据处理后提取有效响应离子，结合多元统计分析并根据VIP>1，P2或FC<0.5条件筛选多花黄精炮制前后的差异化合物，基于保留时间、准分子离子、碎片离子等信息结合并结合对照品及文献信息进行成分鉴定，通过聚类分析进一步分析显著性差异化合物并进行半定量分析黄精炮制前后主要成分变化规律。结果：共鉴定出多花黄精生品与酒制品差异成分72个，包括生物碱类15个、有机酸类12个、氨基酸类12个、黄酮类6个、糖类4个、其他类23个。共有显著性差异成分18个，其中L-苹果酸、乳酸、天师酸、L-焦谷氨酸、新甘草素、黄精碱A、黄精碱B、果糖、5-羟甲基糠醛、3-（2，6-dioxocyclohexyl）propanenitrile、8-羟基色原酮、3-（9，12）-十八碳二烯酰基甘油和邻苯二甲酸二丁酯炮制后含量呈现上升趋势；反式-3-吲哚丙烯酸、L-精氨酸、D-色氨酸、disporopsin和5，7-dihydroxy-3-（4'-hydroxybenzyl）-chroman-4-one炮制后含量呈现下降趋势。结论：多花黄精炮制前后化学成分存在明显差异，主要为有机酸类、糖类、氨基酸类、黄酮类、生物碱类成分，可为黄精炮制机理的深入研究奠定基础。

关键词：黄精酒制多花黄精超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS) 半定量分析化学成分差异

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中药配方颗粒研究现状与展望

中草药 2022年第22期53卷 7221-7233页

作者：张伟孙叶芬金传山高波任萃姣赵宏苏安徽中医药大学药学院安徽合肥230012 安徽中医药大学国家中医药管理局中药炮制传承基地安徽合肥230012 中药饮片制造新技术安徽省重点实验室安徽合肥230012 省部共建安徽道地中药材品质提升协同创新中心安徽合肥230012 华润三九现代中药制药有限公司广东惠州516007

随着《结束中药配方颗粒试点工作的公告》发布以及中药配方颗粒国家标准的陆续出台,中药配方颗粒行业发展进入了新的阶段。通过对中药配方颗粒的相关文献进行梳理、归纳,从政策法规、工艺研究、质量评价研究、化学成分及其药效学研究等... 详细信息

随着《结束中药配方颗粒试点工作的公告》发布以及中药配方颗粒国家标准的陆续出台,中药配方颗粒行业发展进入了新的阶段。通过对中药配方颗粒的相关文献进行梳理、归纳,从政策法规、工艺研究、质量评价研究、化学成分及其药效学研究等方面对中药配方颗粒的研究现状进行总结,对中药配方颗粒发展过程中存在的问题进行分析,并提出发展建议,以促进中药配方颗粒标准体系的不断完善,保障我国中药配方颗粒的产业健康有序发展。

关键词：中药配方颗粒政策法规工艺研究质量评价化学评价药效评价

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凤丹种苗质量分级标准及其方法的优选

中药材 2020年第10期43卷 2374-2377页

作者：周慧银赵宏苏宋芊芊王瑞孙慧娟方成武安徽中医药大学药学院安徽合肥230012 中药饮片制造新技术安徽省重点实验室/安徽道地中药材品质提升协同创新中心安徽合肥230012

目的:研究制订凤丹种苗质量分级标准。方法:观察并测量2年生不同产地凤丹实生苗较为客观的根长、根粗、根状茎及枝长农艺性状,采用相关性、主成分分析确定种苗分级指标,并采用AHP综合评价K⁃均值聚类、K⁃均值聚类中心值±标准差、均值±... 详细信息

目的:研究制订凤丹种苗质量分级标准。方法:观察并测量2年生不同产地凤丹实生苗较为客观的根长、根粗、根状茎及枝长农艺性状,采用相关性、主成分分析确定种苗分级指标,并采用AHP综合评价K⁃均值聚类、K⁃均值聚类中心值±标准差、均值±标准差分级方法。结果:参考较好的两种分级结果并结合生产实际将2年生凤丹种苗分为3级,其中Ⅰ级根长≥25 cm、根粗≥1 cm、根状茎及枝长≥14 cm,主要所属产地为十八里镇;Ⅱ级根长≥19 cm、根粗≥0.9 cm、根状茎及枝长≥12 cm,主要所属产地为颜集镇、十八里镇、金凤村、闸口村;Ⅲ级根长≥13 cm、根粗≥0.7 cm、根状茎及枝长≥9 cm,主要所属产地为凤凰山村、缪山村、古井镇、魏岗镇。结论:初步建立了2年生凤丹实生苗的分级质量标准,该分级标准简便易用,可为凤丹种苗繁育及标准化生产提供质量评价依据。亳州十八里镇和铜陵金凤村为安徽省省内育苗选种的优质产区。

关键词：凤丹种苗质量分级分级方法

基于指纹图谱结合化学模式识别绿萼梅质量标志物的评价研究

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中草药 2022年第5期53卷 1345-1353页

作者：赵宏苏赵茹乔金为金传山王灿灿张伟吴德玲安徽中医药大学药学院安徽合肥230012 新安医学教育部重点实验室安徽合肥230012 中药饮片制造新技术安徽省重点实验室安徽合肥230012 安徽中医药大学第二附属医院安徽合肥230061

目的利用化学模式识别技术对绿萼梅药材指纹图谱数据进行分析,筛选特征性指标成分从而建立绿萼梅Q-Marker的定量分析策略,为绿萼梅质量评价提供科学依据。方法采用超高液相色谱法建立3个产地绿萼梅的指纹图谱,运用相似度分析、聚类分析... 详细信息

目的利用化学模式识别技术对绿萼梅药材指纹图谱数据进行分析,筛选特征性指标成分从而建立绿萼梅Q-Marker的定量分析策略,为绿萼梅质量评价提供科学依据。方法采用超高液相色谱法建立3个产地绿萼梅的指纹图谱,运用相似度分析、聚类分析、主成分分析和偏最小二乘判别分析等化学模式识别技术筛选出不同产地绿萼梅化学成分的特征成分作为绿萼梅Q-Marker,并定量分析。结果30批绿萼梅UPLC指纹图谱标定8个共有峰,相似度在0.816~0.969;通过聚类分析、主成分分析和偏最小二乘判别分析较好的区分各产地绿萼梅,综合分析筛选绿原酸、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷作为绿萼梅Q-Marker,质量分数分别在3.08%~4.71%、0.41%~0.71%、0.13%~0.25%、0.25%~0.38%。结论通过指纹图谱结合化学模式识别技术的分析策略可快速有效的筛选绿萼梅Q-Marker,为绿萼梅质量评价提供参考。

关键词：绿萼梅质量标志物定量指纹图谱化学模式识别技术绿原酸芦丁金丝桃苷异槲皮苷

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构建大型仪器共享平台培养创新医药科研人才

实验室研究与探索 2014年第12期33卷 304-307页

作者：赵宏苏金传山宣自华张群英安徽中医药大学药学院安徽合肥230031

随着高校促进学科建设发展,新型人才培养模式要求不断提高,如何构建大型仪器共享平台来适应创新医药科研人才的培养,是每个中医药院校炙热研究的课题。本文以安徽中医药大学药学院大力建设发展大型仪器共享平台为契机,探讨大型仪器共享... 详细信息

随着高校促进学科建设发展,新型人才培养模式要求不断提高,如何构建大型仪器共享平台来适应创新医药科研人才的培养,是每个中医药院校炙热研究的课题。本文以安徽中医药大学药学院大力建设发展大型仪器共享平台为契机,探讨大型仪器共享平台建设发展中存在问题,并针对主要问题提出相应的可行性对策。以期与国内同行在培养高素质创新型医药人才的改革实践中交流和学习,共同建立有利于培养学生实践能力和创新能力的大型仪器共享平台。

关键词：仪器共享平台创新人才培养

苯甲酰芍药苷灌胃给药的代谢产物芍药苷的药动学研究

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中药新药与临床药理 2019年第12期30卷 1490-1496页

作者：章芳珍吴德玲赵宏苏许凤清张伟郑良超安徽中医药大学药学院安徽合肥230012 中药饮片制造新技术安徽省重点实验室安徽合肥230012 安徽省高校科研创新平台团队—中药饮片产地加工与炮制一体化关键技术研究创新团队安徽合肥230012 安徽道地中药材品质提升协同创新中心安徽合肥230012

目的研究苯甲酰芍药苷灌胃给药后的代谢产物芍药苷的药动学特征。方法苯甲酰芍药苷分别在人工胃肠液及大鼠全血中孵育,采用UPLC-Q-TOF-MS/MS法检测苯甲酰芍药苷的代谢产物;采用UPLC法检测正常大鼠灌胃150 mg·kg^-1的苯甲酰芍药苷后不... 详细信息

目的研究苯甲酰芍药苷灌胃给药后的代谢产物芍药苷的药动学特征。方法苯甲酰芍药苷分别在人工胃肠液及大鼠全血中孵育,采用UPLC-Q-TOF-MS/MS法检测苯甲酰芍药苷的代谢产物;采用UPLC法检测正常大鼠灌胃150 mg·kg^-1的苯甲酰芍药苷后不同时间点血浆样品内的芍药苷及苯甲酰芍药苷水平,使用DAS 2.0软件计算药动学参数。结果在人工胃肠液孵育样品中只检测到苯甲酰芍药苷原型,在全血孵育6个时间点的样品中均检测到苯甲酰芍药苷原型及其代谢产物芍药苷;给大鼠灌胃苯甲酰芍药苷后,得到的代谢产物芍药苷的达峰浓度(Cmax)为(13.08±1.24)μg·mL^-1,达峰时间(Tmax)为5 min。结论全血孵育实验可检测到苯甲酰芍药苷的代谢产物芍药苷;苯甲酰芍药苷灌胃给药后,得到代谢产物芍药苷的药-时曲线及药动学参数,揭示了苯甲酰芍药苷灌胃给药后的体内药动学特点,为苯甲酰芍药苷的研究提供了基础。

关键词：苯甲酰芍药苷芍药苷人工胃肠液全血孵育药动学 UPLC-Q-TOF-MS/MS法 UPLC法

UPLC测定醉鱼草不同部位中4种黄酮类成分

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中国实验方剂学杂志 2017年第6期23卷 74-77页

作者：李正吴德玲赵宏苏许凤清张伟安徽中医药大学药学院合肥230012 安徽省现代中药重点实验室合肥230012

目的:建立超高效液相色谱(UPLC)同时测定醉鱼草Buddleja lindleyana茎、叶、花、果实中蒙花苷、木犀草素、金合欢-7-O-β-D-葡萄糖苷、金合欢素4种黄酮类成分含量方法,比较在醉鱼草各个部位中4种成分的分布情况。方法:采用Waters Acquit... 详细信息

目的:建立超高效液相色谱(UPLC)同时测定醉鱼草Buddleja lindleyana茎、叶、花、果实中蒙花苷、木犀草素、金合欢-7-O-β-D-葡萄糖苷、金合欢素4种黄酮类成分含量方法,比较在醉鱼草各个部位中4种成分的分布情况。方法:采用Waters Acquity BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相乙腈-0.1%甲酸水溶液(梯度洗脱),流速0.15 m L·min-1,检测波长330 nm,柱温30℃,进样体积2μL。结果:蒙花苷、木犀草素、金合欢-7-O-β-D-葡萄糖苷和金合欢素的进样量分别在0.002 0~0.600 3μg(r=0.999 7),0.000 4~0.040 1μg(r=0.999 9),0.000 4~0.039 9μg(r=0.999 9),0.000 2~0.020 0μg(r=0.999 9)和峰面积呈良好的线性关系,仪器精密度及方法重复性均良好,符合定量测定要求。平均回收率分别为100.2%,97.1%,94.3%,92.4%,RSD分别为0.7%,1.1%,2.3%,1.9%。结论:4种黄酮类成分含量在醉鱼草不同部位存在较大差异,其中醉鱼草花中4种黄酮总含量最高,通过比较各不同部位成分的含量差异,为醉鱼草的进一步开发利用提供实验依据。该检测方法操作简单,分离效果好,灵敏度高,可用于醉鱼草不同部位中多个黄酮成分的含量测定。

关键词：醉鱼草蒙花苷木犀草素金合欢-7-O-β-D-葡萄糖苷金合欢素茎叶花果实

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牡丹根不同部位成分差异性分析

天然产物研究与开发 2023年第2期35卷 250-259页

作者：张树蓉赵宏苏欧迎雪翟宏焱吴德玲张村张伟安徽中医药大学药学院中药饮片制造新技术安徽省重点实验室合肥230012 安徽省食品药品检验研究院合肥230051 国家药品监督管理局中药质量研究与评价重点实验室安徽中医药大学国家中医药管理局中药炮制传承基地合肥230012 中国中医科学院中药研究所北京100700

本研究比较了连丹皮、刮丹皮、栓皮、木心、须根这五个牡丹根加工过程中分成的不同部位成分差异,探究牡丹药用部位的科学性,评价牡丹根部非药用部位的开发利用的价值。采用超高效液相色谱建立牡丹根不同部位特征图谱,通过化学计量学进... 详细信息

本研究比较了连丹皮、刮丹皮、栓皮、木心、须根这五个牡丹根加工过程中分成的不同部位成分差异,探究牡丹药用部位的科学性,评价牡丹根部非药用部位的开发利用的价值。采用超高效液相色谱建立牡丹根不同部位特征图谱,通过化学计量学进行聚类分析(hierarchical clustering analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)、偏最小二乘判别分析(partial least squares discrimination analysis,PLS-DA)等模式识别技术对牡丹根不同部位中酚及酚苷组分、单萜及其苷组分、鞣酸组分等类别化学成分进行差异性分析,筛选的10个差异性成分中可指认的7个及含量大于0.1 mg/g的化学成分作为定量分析指标,进行成分含量测定。特征图谱结合化学计量学分析表明连丹皮、刮丹皮和须根三者化学成分相似;木心和栓皮与前三者的化学成分存在明显差异,木心中化学成分较少,且含量均较低;栓皮化学成分最为丰富,且单萜及其苷类成分占比较大。本研究表明连丹皮、刮丹皮与栓皮等部位在主成分上无显著性差异,为牡丹皮在产地加工中留栓皮去木心提供依据;牡丹须根与木心也具有一定药用价值,可考虑综合开发利用。

关键词：牡丹根特征图谱含量测定化学计量学分析