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鼻咽癌相关新基因NPCEDRG表达对CNE2细胞生长的影响

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生物化学与生物物理进展 2010年第2期37卷 167-174页

作者：阳帅胡华邓敏董娟慧王妍罗桥贺修胜陈主初南华大学肿瘤细胞与分子病理重点实验室衡阳421001 南华大学附属第一医院病理科衡阳421001 南华大学附属第二医院病理科衡阳421001 中南大学肿瘤研究所长沙410078

为研究鼻咽癌相关新基因NPCEDRG的功能,探讨其对鼻咽癌细胞生长特性的影响,利用Tet-on调控系统,建立受强力霉素(deoxycycline,Dox)诱导NPCEDRG基因表达的CNE2细胞系.运用RT-PCR选择背景表达低、诱导活性高的细胞克隆,以不同浓度Dox诱导C... 详细信息

为研究鼻咽癌相关新基因NPCEDRG的功能,探讨其对鼻咽癌细胞生长特性的影响,利用Tet-on调控系统,建立受强力霉素(deoxycycline,Dox)诱导NPCEDRG基因表达的CNE2细胞系.运用RT-PCR选择背景表达低、诱导活性高的细胞克隆,以不同浓度Dox诱导CNE2/Tet/TRE-NPCEDRG细胞,确定Dox的最佳诱导浓度.借助形态学观察、细胞生长曲线、软琼脂克隆形成试验和流式细胞仪分析等方法,对Dox诱导NPCEDRG高表达后CNE2细胞的生物学行为进行了检测.结果显示,NPCEDRG高表达后CNE2细胞增殖速度显著减慢(P<0.05),克隆形成能力显著降低(P<0.01),瘤细胞群体中处于G0/G1期细胞数增加,S期细胞数减少,细胞阻滞于G0/G1期.Tet调控NPCEDRG基因表达CNE2细胞系成功建立,恢复NPCEDRG表达能部分逆转CNE2的恶性表型,证明NPCEDRG是一个鼻咽癌相关的抑瘤基因.

关键词：鼻咽癌 NPCEDRG基因抑癌基因 Tet系统基因表达

Runx3基因启动子CpG岛甲基化对胃组织癌变影响的研究

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中华肿瘤防治杂志 2012年第14期19卷 1069-1073页

作者：唐国华赵强贺修胜孙少卫南华大学生命科学研究中心湖南衡阳421001 南华大学附属第一医院病理科湖南衡阳421001 南华大学医学院肿瘤研究所湖南衡阳421001

目的:研究Runx3基因CpG岛甲基化对胃癌病变的影响;探讨甲基化特异性聚合酶链法(MSP)和焦磷酸测序法(PS)对Runx3基因甲基化检测的特异性。方法:选取150例胃癌患者胃切除标本及50例无癌变胃黏膜标本,以MSP法和PS法同时检测其Runx3启动子... 详细信息

目的:研究Runx3基因CpG岛甲基化对胃癌病变的影响;探讨甲基化特异性聚合酶链法(MSP)和焦磷酸测序法(PS)对Runx3基因甲基化检测的特异性。方法:选取150例胃癌患者胃切除标本及50例无癌变胃黏膜标本,以MSP法和PS法同时检测其Runx3启动子的甲基化程度。结果:与正常胃黏膜相比,胃癌组织Runx3的甲基化程度差异有统计学意义(MSP法:67.3%vs 40.0%;PS法:76.0%vs 30.0%)。MSP结果显示,Runx3甲基化只与肿瘤大小相关,P<0.05。而PS法分析显示进展期胃癌的Runx3甲基化率高于早期胃癌;且其甲基化状态与肿瘤的大小(P=0.001)、Lauren分级(P=0.043)、浸润的深度(P<0.001)、淋巴结转移(P=0.004)及肿瘤TNM临床分期(P=0.003)等临床病理特征之间存在相关性。结论:Runx3启动子甲基化与胃癌临床病理特征密切相关,对于胃癌的早期诊断和治疗有重要意义。

关键词：甲基化 Runx3基因胃肿瘤

hTERT启动子调控rVBMDMP基因表达载体的构建与功能研究

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生物化学与生物物理进展 2010年第4期37卷 416-425页

作者：张志伟贺修胜罗招阳李艳兰曹建国南华大学医学院肿瘤研究所衡阳421001 南华大学医学院病理学教研室衡阳421001 南华大学肿瘤细胞与分子病理学湖南省高校重点实验室衡阳421001 湖南师范大学医学院药理学教研室长沙410013

为了探讨端粒酶催化亚单位(hTERT)启动子调控重组血管基膜衍生多功能肽(rVBMDMP)基因表达抑制肺癌细胞生长的作用机制,采用PCR方法,克隆hTERT启动子核心区片段,并检测其功能活性.然后,构建pLNSX/hTERT/rVBMDMP逆病毒载体,获取逆病毒,感... 详细信息

为了探讨端粒酶催化亚单位(hTERT)启动子调控重组血管基膜衍生多功能肽(rVBMDMP)基因表达抑制肺癌细胞生长的作用机制,采用PCR方法,克隆hTERT启动子核心区片段,并检测其功能活性.然后,构建pLNSX/hTERT/rVBMDMP逆病毒载体,获取逆病毒,感染肺癌A549细胞,检测hTERT启动子调控rVBMDMP基因表达对细胞形态、细胞生长、细胞凋亡以及Caspase-3表达的影响.另外,观察hTERT启动子调控rVBMDMP基因表达对裸鼠成瘤的抑制作用、瘤组织细胞的凋亡及Caspase-3表达情况.结果发现:***启动子核心区能调控rVBMDMP基因的表达(n=3,P<0.05);***启动子调控rVBMDMP基因的表达具有抑制肺癌A549细胞的生长和裸鼠成瘤作用(n=6,P<0.05);***基因表达能促进肺癌A549细胞凋亡和Caspase-3蛋白表达.以上结果说明,hTERT启动子调控rVBMDMP基因表达后,通过提高Caspase-3的表达水平,促进细胞凋亡而抑制肺癌A549细胞的生长.

关键词： hTERT启动子 rVBMDMP基因细胞凋亡 Caspase-3蛋白

Runx3基因CpG岛甲基化与胃癌发生的关系

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中华病理学杂志 2012年第5期41卷 314-319页

作者：唐国华孙少卫贺修胜南华大学生命科学研究中心湖南衡阳421001 南华大学肿瘤所湖南衡阳421001

目的通过研究Runx3基因CpG岛甲基化对胃癌病变的影响，探讨甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）法与焦磷酸测序（PS）法对Runx3基因甲基化检测的特异性。方法选取150例胃癌患者胃切除标本及50例无癌变胃黏膜标本，以MSP法和Ps法同时检测其R... 详细信息

目的通过研究Runx3基因CpG岛甲基化对胃癌病变的影响，探讨甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）法与焦磷酸测序（PS）法对Runx3基因甲基化检测的特异性。方法选取150例胃癌患者胃切除标本及50例无癌变胃黏膜标本，以MSP法和Ps法同时检测其Runx3启动子的甲基化程度。结果与正常胃黏膜相比，胃癌组织Runx3的甲基化程度差异有显著性意义（MSP法：67．3％比40．0％，P=0．002；PS法：76．0％比30．0％，P〈0．01）。MSP法显示Runx3甲基化只与肿瘤大小相关（P〈0．05）。而Ps法分析显示进展期胃癌的Runx3甲基化率高于早期胃癌（P〈0．05）；且其甲基化状态与肿瘤的大小（P=0．004）、Lauren分型（P=0．043）、浸润的深度（P〈0．01）、淋巴结转移（P=0．021）及肿瘤TNM临床分期（P=0．045）等临床病理特征之间存在相关性。结论Runx3启动子甲基化与胃癌临床病理特征包括肿瘤大小、Lauren分型、浸润的深度、淋巴结转移以及肿瘤TNM临床分期密切相关；与MSP法相比，Ps法敏感性更高，且检测结果与临床病理学结果之间有显著相关性，对于胃癌的早期诊断和治疗有着重要意义。

关键词：胃肿瘤 DNA甲基化核心结合因子仪3亚基

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实验性胃平滑肌肉瘤——光镜与透射电镜观察

中国肿瘤临床 1993年第2期20卷 137-139,F002页

作者：苏琦刘盛惠李一琴张日汝贺修胜衡阳医学院病理学教研室衡阳市421001

表研究以MNNG诱发了13例大白鼠胃平滑肌肉瘤。肿瘤原发于肌层,向胃外(7例)、胃壁内(3例)与胃腔内(3例)生长。均经HE、嗜银、VG、Masson’s三色与PTAH染色及电镜证实,低度恶性8例,高度恶性5例。其发生机理可能与MNNG浓度高、胃粘膜通透... 详细信息

表研究以MNNG诱发了13例大白鼠胃平滑肌肉瘤。肿瘤原发于肌层,向胃外(7例)、胃壁内(3例)与胃腔内(3例)生长。均经HE、嗜银、VG、Masson’s三色与PTAH染色及电镜证实,低度恶性8例,高度恶性5例。其发生机理可能与MNNG浓度高、胃粘膜通透性增高、粘液细胞增生取代壁细胞致胃酸分泌减少,MNNG活性增强以及吐温加速MNNG溶解更易渗入肌层有关。

关键词：肉瘤光镜透射电镜胃肿瘤

Tet调控STGC3基因表达CNE2细胞系的建立及其功能初步研究

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生物化学与生物物理进展 2006年第1期33卷 39-44页

作者：邓敏贺修胜罗桥赵帅曾超李艳兰南华大学肿瘤研究所衡阳421001

利用Tet-on调控系统,建立受强力霉素诱导STGC3基因表达的CNE2细胞系,为进一步研究STGC3的功能提供了一个理想的实验平台.先后将调控质粒pTet-on和反应质粒pTRE-STGC3转染入CNE2细胞,并用G418和潮霉素分别进行两轮筛选,运用RT-PCR选择对... 详细信息

利用Tet-on调控系统,建立受强力霉素诱导STGC3基因表达的CNE2细胞系,为进一步研究STGC3的功能提供了一个理想的实验平台.先后将调控质粒pTet-on和反应质粒pTRE-STGC3转染入CNE2细胞,并用G418和潮霉素分别进行两轮筛选,运用RT-PCR选择对强力霉素诱导敏感的细胞克隆.用不同浓度强力霉素诱导CNE2/Tet/pTRE-STGC3细胞,RT-PCR检测STGC3的表达,确定强力霉素的最佳诱导浓度.采用此浓度的强力霉素分别诱导CNE2、CNE2/Tet/pTRE、CNE2/Tet/pTRE-STGC3三组细胞,测定细胞的生长曲线、克隆形成率和细胞周期分布.诱导STGC3基因高表达,CNE2细胞增殖速度显著减慢(P<0.05),克隆形成能力显著降低(P<0.01);流式细胞仪检测结果显示,瘤细胞群体中处于G0/G1期细胞数增加,细胞阻滞于G0/G1期.Tet调控STGC3基因表达CNE2细胞系的成功建立,为进一步研究STGC3基因的功能提供一个理想的细胞模型.

关键词：鼻咽癌 STGC3基因 Tet-on基因表达系统

石蜡切片厚度对流式细胞仪检测细胞DNA的影响

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中华病理学杂志 2004年第6期33卷 575-576页

作者：唐国华龙治峰贺修胜唐朝克南华大学科研试验中心衡阳421001

在肿瘤研究中,应用流式细胞仪技术分析肿瘤细胞的DNA含量及周期细胞群体数目,已成为肿瘤临床诊断、疗效评价及预后推测的重要参考依据[1,2].DNA双螺旋结构碱基对与某些核酸荧光染料有良好的亲和力,在激发光的激发下,产生特定的荧光,运... 详细信息

在肿瘤研究中,应用流式细胞仪技术分析肿瘤细胞的DNA含量及周期细胞群体数目,已成为肿瘤临床诊断、疗效评价及预后推测的重要参考依据[1,2].DNA双螺旋结构碱基对与某些核酸荧光染料有良好的亲和力,在激发光的激发下,产生特定的荧光,运用流式细胞仪检测并分析这些荧光强度,从而了解细胞群体中各周期的分布状况,即G0/G1期、S期、G2/M细胞所占的百分比例。

关键词：流式细胞仪检测石蜡切片诊断 M细胞细胞DNA 细胞群体流式细胞仪技术碱基对 DNA双螺旋结构核酸

雌激素对转STGC3基因CNE2细胞系生长增殖的影响

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生物化学与生物物理进展 2007年第5期34卷 538-545页

作者：胡波邱青朝贺修胜罗桥唐国华龙治峰廖银花南华大学肿瘤研究所衡阳421001

为探讨雌激素对STGC3基因抑瘤的促进作用,将重组的pcDNA3.1(+)-STGC3真核表达载体导入鼻咽癌细胞系CNE2,经G418筛选,RT-PCR及蛋白质印迹检测STGC3的表达,获得稳定高表达STGC3基因的pcDNA3.1(+)/STGC3/CNE2细胞系.采用细胞计数法,检测雌... 详细信息

为探讨雌激素对STGC3基因抑瘤的促进作用,将重组的pcDNA3.1(+)-STGC3真核表达载体导入鼻咽癌细胞系CNE2,经G418筛选,RT-PCR及蛋白质印迹检测STGC3的表达,获得稳定高表达STGC3基因的pcDNA3.1(+)/STGC3/CNE2细胞系.采用细胞计数法,检测雌二醇(β-estradiol)对体外培养pcDNA3.1(+)/STGC3/CNE2细胞生长增殖的影响.将pcDNA3.1(+)/STGC3/CNE2细胞接种于裸小鼠前肢背部皮下,观察分析雌性与雄性裸鼠成瘤的差别.运用RT-PCR、免疫组织化学及蛋白质印迹方法,分别从mRNA及蛋白质水平,分析STGC3基因在裸鼠移植瘤组织中的表达状况.移植瘤组织病理切片检查,观察瘤细胞形态学变化.用流式细胞仪测定移植瘤组织的细胞周期分布.研究结果表明:细胞体外培养,pcDNA3.1(+)/STGC3/CNE2细胞经β-estradiol处理后,其生长速度明显减缓(P0.05);接种pcDNA3.1(+)/STGC3/CNE2细胞的雌性裸鼠组移植瘤,阻滞于G0/G1期细胞数大于其他各组(P<0.05).上述体内外研究结果显示,雌激素可能具有增强STGC3基因对CNE2细胞系的生长抑制作用.

关键词： STGC3基因雌激素鼻咽癌 CNE2细胞系裸鼠

Exosomes在肿瘤发展与转移中的研究进展

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临床与实验病理学杂志 2013年第12期29卷 1348-1350页

作者：郭杏丹贺修胜吴冬梅文容南华大学肿瘤研究所湖南衡阳421001

生物物质的跨膜转运是一个进化上保守的过程,也是维持正常细胞内环境稳定的重要部分。外泌体(Exosomes)是一种小囊泡,含有丰富的蛋白质、mRNA、miRNA等生物分子,可在细胞之间转运并介导细胞间物质与信息的传递,从而影响细胞的生理功能... 详细信息

生物物质的跨膜转运是一个进化上保守的过程,也是维持正常细胞内环境稳定的重要部分。外泌体(Exosomes)是一种小囊泡,含有丰富的蛋白质、mRNA、miRNA等生物分子,可在细胞之间转运并介导细胞间物质与信息的传递,从而影响细胞的生理功能。研究显示,Exosomes主要通过介导物质转运影响肿瘤相关途径,如缺氧介导的上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)、血管生成以及肿瘤转移参与调节肿瘤微环境。现对Exosomes的生物学功能及其在肿瘤发展、转移中的新进展作一综述。

关键词：肿瘤 Exosomes 微环境转移文献综述