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共抑制分子PD-1的研究进展

免疫学杂志 2010年第7期26卷 639-642页

作者：郭国宁谢谆怡陈永文第三军医大学附属西南医院急诊科重庆400038 第三军医大学附属西南医院全军免疫学研究所重庆400038

免疫共抑制分子PD-1为CD28超家族成员,其最初是从凋亡的小鼠T细胞杂交瘤2B4.11克隆出来。PD-1基因敲除小鼠可诱导多种自身免疫性疾病,表明PD-1是一种重要的免疫抑制分子并在外周耐受中发挥着重要的作用。因此,以PD-1为靶点的免疫调节对... 详细信息

免疫共抑制分子PD-1为CD28超家族成员,其最初是从凋亡的小鼠T细胞杂交瘤2B4.11克隆出来。PD-1基因敲除小鼠可诱导多种自身免疫性疾病,表明PD-1是一种重要的免疫抑制分子并在外周耐受中发挥着重要的作用。因此,以PD-1为靶点的免疫调节对抗肿瘤、抗感染、抗自身免疫性疾病及器官移植存活等均有重要的意义。

关键词： PD-1 PD-L1 外周耐受免疫调节

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肝细胞性肝癌相关miRNA的筛选和鉴定

免疫学杂志 2013年第4期29卷 310-313页

作者：沈雁兵马德宾邹丽云谢谆怡万瑛陈平第三军医大学大坪医院野战外科研究所肝胆外科重庆400042 第三军医大学大坪医院基础部免疫学研究所重庆400042

目的检测正常肝细胞与肝癌细胞中微小RNA(microRNA,miRNA)的表达差异,探讨其参与肝癌发病的可能机制。方法首先利用miRNA微阵列试剂盒,以正常肝细胞株L02为对照,筛选出肝癌细胞株HepG2中差异表达的miRNA,然后采用定量RT-PCR以及另外1株... 详细信息

目的检测正常肝细胞与肝癌细胞中微小RNA(microRNA,miRNA)的表达差异,探讨其参与肝癌发病的可能机制。方法首先利用miRNA微阵列试剂盒,以正常肝细胞株L02为对照,筛选出肝癌细胞株HepG2中差异表达的miRNA,然后采用定量RT-PCR以及另外1株肝癌细胞株Huh7对筛选结果进行验证,最后选取肝癌细胞特异性的miRNA,运用生物信息学技术对其靶基因进行预测,并对其靶基因功能进行分类。结果发现9种表达下调的miRNA,分别为let-7a、miR-10a、miR-107、miR-124a、miR-132、miR-133a、miR-154、miR-302c、miR-373。靶基因预测结果显示其主要参与了19种生物学事件,且大部分生物学事件与肿瘤的发病机制有关。结论发现肝癌细胞中9种表达下调的miRNA,且其潜在靶基因参与的生物学事件中的大部分与肿瘤的发病机制有关。

关键词：肝细胞性肝癌 microRNA 表达谱

LEF-1协助TCF-1决定蛋白免疫应答中滤泡辅助T细胞的功能

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免疫学杂志 2023年第2期39卷 93-101页

作者：张瑜杨燕谢东京谢谆怡黄煌周新元陆军军医大学全军免疫学研究所重庆400038 中国人民解放军联勤保障部队第九八一医院儿科承德067000 中国人民解放军联勤保障部队第九八一医院心血管内科重庆400038 陆军军医大学附属新桥医院神经内科重庆400037

目的探讨在蛋白免疫应答中转录因子TCF-1与LEF-1在滤泡辅助T细胞的分化与功能中的地位。方法对他莫昔芬诱导的条件敲除Tcf7与Lef1小鼠采用NP-KLH联合铝佐剂免疫或者NP-CGG联合完全弗氏佐剂免疫,分析应答过程中滤泡辅助T细胞的分化与功能... 详细信息

目的探讨在蛋白免疫应答中转录因子TCF-1与LEF-1在滤泡辅助T细胞的分化与功能中的地位。方法对他莫昔芬诱导的条件敲除Tcf7与Lef1小鼠采用NP-KLH联合铝佐剂免疫或者NP-CGG联合完全弗氏佐剂免疫,分析应答过程中滤泡辅助T细胞的分化与功能,检测蛋白免疫应答中T细胞与B细胞TCF-1与LEF-1的表达量,并用脾脏嵌合小鼠模型验证TCF-1与LEF-1对于滤泡辅助T细胞功能的重要性。结果Tcf7与Lef1敲除小鼠的滤泡辅助T细胞分化是正常的,而B细胞应答严重缺陷。同时,Tcf7敲除小鼠的B细胞应答也是缺陷的,而Lef1敲除小鼠的B细胞应答是完整的;TCF-1与LEF-1在滤泡辅助T细胞中大量表达,而在B细胞中不表达;脾脏嵌合小鼠模型提示,在有正常滤泡辅助T细胞的帮助下,B细胞中TCF-1与LEF-1的缺失不会导致B细胞应答缺陷。结论在蛋白免疫应答中,TCF-1与LEF-1对于滤泡辅助T细胞的分化是不重要的,LEF-1协助TCF-1通过影响滤泡辅助T细胞的功能而影响B细胞应答。

关键词：蛋白免疫滤泡辅助T细胞 B细胞应答 TCF-1 LEF-1

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PPARγ与代谢性疾病

生命的化学 2004年第2期24卷 152-155页

作者：谢谆怡彭家和江渝第三军医大学生物化学与分子生物学教研室重庆400038

过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)是一种可由多种脂肪酸及其衍生物激活的核转录因子 ,在机体糖脂代谢中起重要调节作用 ,一些可作为其配体的合成化合物现已应用于Ⅱ型糖尿病的临床治疗。该文简单介绍PPARγ作用的分子机制以及PPAR... 详细信息

过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)是一种可由多种脂肪酸及其衍生物激活的核转录因子 ,在机体糖脂代谢中起重要调节作用 ,一些可作为其配体的合成化合物现已应用于Ⅱ型糖尿病的临床治疗。该文简单介绍PPARγ作用的分子机制以及PPARγ与一些代谢性疾病的关系。

关键词： PPARγ 核受体胰岛素抵抗动脉粥样硬化

慢性乙型肝炎患者外周血淋巴及单核细胞表面B7-H1表达研究

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南方医科大学学报 2007年第11期27卷 1635-1637,1641页

作者：谢谆怡陈永文付晓岚杨承英吴玉章第三军医大学全军免疫学研究所重庆400038

目的探讨B7家族共刺激分子B7-H1在慢性乙型病毒性肝炎(乙肝)患者外周血淋巴细胞及单核细胞表面的表达情况。方法利用荧光抗体标记结合多色流式技术,检测慢性乙肝患者外周血T淋巴细胞、B淋巴细胞、单核细胞群体表面B7-H1分子的表达。结... 详细信息

目的探讨B7家族共刺激分子B7-H1在慢性乙型病毒性肝炎(乙肝)患者外周血淋巴细胞及单核细胞表面的表达情况。方法利用荧光抗体标记结合多色流式技术,检测慢性乙肝患者外周血T淋巴细胞、B淋巴细胞、单核细胞群体表面B7-H1分子的表达。结果在慢性乙肝患者,T、B淋巴细胞表面B7-H1低表达,与健康对照无差异;单核细胞表面B7-H1的表达率为(19.17±11.64)%,显著高于健康对照的(7.30±5.49)%(P<0.01),且B7-H1的表达与患者血浆ALT水平成正相关(r=0.423,P<0.01)。结论慢性乙肝患者外周血T、B淋巴细胞表面B7-H1低表达,单核细胞B7-H1表达上调,且与ALT水平正相关,提示B7-H1可能与乙肝病毒感染慢性化相关。

关键词：乙型肝炎慢性 T淋巴细胞 B淋巴细胞单核细胞 B7-H1

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HBV颗粒的纯化及生物学活性鉴定

免疫学杂志 2010年第4期26卷 340-343页

作者：曾兴光石统东韩俊峰邹丽云谢谆怡刘宏利吴玉章第三军医大学.基础医学部全军免疫学研究所重庆40038 重庆医科大学附属第二医院病毒性肝炎研究所 400013

目的优化纯化HBV患者血清中HBV颗粒的技术方法。方法在蔗糖介质中,分别以100 000 g和70 000 g进行不连续蔗糖梯度(60%,45%,35%,25%,15%)离心5 h,离心后,分段吸取6份收集液,PCR荧光定量检测各组分HBV滴度;收集前5份收集液进行超滤,去蔗糖... 详细信息

目的优化纯化HBV患者血清中HBV颗粒的技术方法。方法在蔗糖介质中,分别以100 000 g和70 000 g进行不连续蔗糖梯度(60%,45%,35%,25%,15%)离心5 h,离心后,分段吸取6份收集液,PCR荧光定量检测各组分HBV滴度;收集前5份收集液进行超滤,去蔗糖,PCR荧光定量检测HBV超滤液;电镜观察70 000g纯化后的HBV超微形态;70000 g纯化后的HBV颗粒感染树鼩肝细胞,检验70 000 g纯化后的HBV感染活性。结果100 000 g离心造成大量HBV在离心过程中损失,收获率只有21%,70 000g离心不仅降低了离心中的病毒损失,而且可有效对HBV和血清进行分离,收获率达到78%以上,较100 000g还提高3.7倍多。电镜可观察到纯化后病毒液中有大量的病毒颗粒;纯化后的HBV颗粒感染活性良好,可有效感染原代树鼩肝细胞。结论70 000 g不连续蔗糖梯度离心可有效分离纯化HBV病毒,较100 000 g收获率明显提高,纯化后的HBV不但具有典型的HBV特征,还具有良好的生物学感染活性。

关键词：乙型肝炎病毒不连续蔗糖梯度离心纯化树鼩肝细胞

应用CompBeads建立流式多色分析补偿的方法

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免疫学杂志 2008年第3期24卷 340-345页

作者：傅晓岚周伟王晴杨空明谢谆怡吴玉章第三军医大学全军免疫学研究所重庆400038

目的探讨一种快速简便的流式细胞仪多色分析时的关键参数(荧光补偿)设置方法。方法以BDComp-Beads、实验样品(本实验为慢性乙型肝炎患者外周全血)分别与单克隆荧光抗体染色,结合流式细胞仪Diva软件调节细胞仪光电倍增管(PMT)电压,计算... 详细信息

目的探讨一种快速简便的流式细胞仪多色分析时的关键参数(荧光补偿)设置方法。方法以BDComp-Beads、实验样品(本实验为慢性乙型肝炎患者外周全血)分别与单克隆荧光抗体染色,结合流式细胞仪Diva软件调节细胞仪光电倍增管(PMT)电压,计算建立荧光补偿矩阵。同时以获得的参数设置仪器,运行慢性乙型肝炎患者外周全血6色荧光标记实验样品。结果用CompBeads建立的补偿参数稳定可靠,能有效消除荧光光谱之间的交叉重叠。6色荧光标记实验样品检测的结果,可见细胞亚群分布清晰,荧光强度比例表达适当,与通常采用的实验样品单染色方法补偿结果一致(P>0.05)。结论该方法能快速方便进行流式细胞仪检测时仪器参数最佳化设置调整,在多色免疫标记流式检测中有较大的应用价值。

关键词：流式细胞仪多色补偿

慢性乙型肝炎患者HBV特异性细胞毒性T细胞PD-1的表达研究

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免疫学杂志 2007年第6期23卷 602-605页

作者：谢谆怡陈永文付晓岚赵婷婷吴玉章第三军医大学全军免疫学研究所重庆400038

目的检测慢性乙型病毒性肝炎患者外周血中HBV特异性CD8+细胞毒性T淋巴细胞表面细胞程序性死亡受体1(programmed cell death1,PD-1)的表达情况。方法采集慢性乙型肝炎患者外周血,直接离体情况下利用MHC-I-肽-五聚体技术标定HBV表位特异... 详细信息

目的检测慢性乙型病毒性肝炎患者外周血中HBV特异性CD8+细胞毒性T淋巴细胞表面细胞程序性死亡受体1(programmed cell death1,PD-1)的表达情况。方法采集慢性乙型肝炎患者外周血,直接离体情况下利用MHC-I-肽-五聚体技术标定HBV表位特异性细胞毒性T淋巴细胞以及荧光抗体标记细胞表面PD-1分子,经流式细胞仪检测分析。结果在慢性乙型肝炎患者,HBV核心抗原18-27特异性CTL表达PD-1上调,达(79.0±12.5)%,显著高于总CD8+T细胞(27.7±14.8)%,以及CMV特异性CTL(20.6±5.9)%。结论慢性乙肝患者HBV特异性CTL高表达PD-1分子,可能与慢性乙肝患者HBV特异性CTL功能低下密切相关。

关键词：慢性乙型肝炎细胞毒性T淋巴细胞细胞程序性死亡受体1(PD-1)

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核受体PPARγ结合小肽的筛选及其功能

中国生物化学与分子生物学报 2005年第5期21卷 661-664页

作者：谢谆怡江渝叶治家彭家和何凤田曹廷兵第三军医大学生物化学与分子生物学教研室重庆400038

为筛选与核受体过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)结合的功能短肽,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达PPARγ配体结合域(LBD)的融合蛋白,并利用Ni2+-NTA离子交换树脂对表达蛋白进行纯化.以此纯化蛋白为靶,采用固体包被法对噬菌体展示随机十... 详细信息

为筛选与核受体过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)结合的功能短肽,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达PPARγ配体结合域(LBD)的融合蛋白,并利用Ni2+-NTA离子交换树脂对表达蛋白进行纯化.以此纯化蛋白为靶,采用固体包被法对噬菌体展示随机十二肽库及环七肽库进行亲和筛选.经ELISA法鉴定特异结合的高亲和力阳性噬菌体单克隆并测序.同时利用PPARγ的配体rosiglitazone与噬菌体小肽进行竞争性结合抑制实验.最终获得与PPARγ-LBD高亲和力的十二肽3个,环七肽5个,分别含LXXLL和DXXRW(其中X为非特异氨基酸残基)保守序列.Rosiglitazone不影响噬菌体小肽与靶蛋白的结合,说明获得与配体rosiglitazone结合位点不同的目的肽.

关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体γ 噬菌体表面呈现亲和筛选