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三维培养间充质干细胞来源的分泌组物对海水浸泡合并创伤小鼠海马神经元的保护作用

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解放军医学杂志 2024年

作者：兰晓娟谢胜强王秉贤马文静陈巧汨程岗吕文英张剑宁安徽医科大学第五临床医学院海军临床学院解放军总医院第六医学中心神经外科解放军总医院第一医学中心神经外科医学部军事科学院军事医学研究院军事认知与脑科学研究所南华大学衡阳医学院安徽医科大学基础医学院

目的探究三维培养的间充质干细胞(MSCs)释放的分泌组物对海水浸泡(SW)合并拉伸损伤(SI)神经元的作用，为SW合并创伤性脑损伤(TBI)后的神经元修复提供新思路。方法采用悬滴法培养MSCs，收集含有MSCs释放的分泌组物的条件培养基(CM)。... 详细信息

目的探究三维培养的间充质干细胞(MSCs)释放的分泌组物对海水浸泡(SW)合并拉伸损伤(SI)神经元的作用，为SW合并创伤性脑损伤(TBI)后的神经元修复提供新思路。方法采用悬滴法培养MSCs，收集含有MSCs释放的分泌组物的条件培养基(CM)。采用小鼠海马神经元(HT22细胞)建立SW合并SI细胞模型。将HT22细胞随机分为对照组、SI组、SI+SW组、SI+CM组和SI+SW+CM组。采用CCK-8法检测各组细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡率，细胞划痕实验观察细胞迁移能力，Western blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bcl-2关联X蛋白(Bax)和铁死亡相关蛋白长链酰基辅酶A合酶4(ACSL4)、环氧化酶-2(Cox-2)的表达水平。结果 15%浓度海水浸泡12 h后，HT22细胞活力明显下降(P<0.05)。CCK-8法检测结果显示，处理12 h后，与对照组比较，SI组和SI+SW组HT22细胞活力均明显下降(P<0.05)；经MSCs分泌组物处理后，SI+CM组细胞活力明显高于SI组(P<0.0001),SW+SI+CM组细胞活力明显高于SI+SW组(P<0.001)。流式细胞术检测结果显示，SI组和SI+SW组细胞凋亡率明显高于对照组，而SI+CM组细胞凋亡率明显低于SI组，SI+SW+CM组细胞凋亡率明显低于SI+SW组，差异均有统计学意义(P<0.05)。Westernblotting检测结果显示，与对照组比较，SI组和SI+SW组Bcl-2表达水平降低(P<0.01或P<0.0001),Bax、ACSL4和Cox-2表达水平升高(P<0.01或P<0.0001)；与SI组比较，SI+CM组细胞Bcl-2蛋白表达水平增高(P<0.05)，而Bax、ACSL4和Cox-2蛋白表达水平降低(P<0.05)；与SI+SW组比较，SI+SW+CM组细胞Bcl-2表达水平升高(P<0.01),Bax、ACSL4和Cox-2蛋白表达水平降低(P<0.01或P<0.001)。细胞划痕实验结果显示，12h和24h时，SI组和SI+SW组细胞迁移率低于对照组(P<0.01或P<0.0001)，而SI+CM组细胞迁移率高于SI组(P<0.01),SI+SW+CM组细胞迁移率高于SI+SW组(P<0.0001)。结论悬滴法培养的MSCs分泌组物可减轻SW合并TBI神经元的损伤，有望成为SW合并TBI的潜在治疗措施。

关键词：间充质干细胞分泌组物海水浸泡创伤性脑损伤

基质金属蛋白酶响应性脑源性神经营养因子控释材料的合成与表征

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解放军医学杂志 2024年

作者：黑俊如王翠宋梦文谢胜强王秉贤兰晓娟张涵博程岗刘志强杨锡琴张剑宁解放军医学院解放军总医院第一医学中心神经外科医学部军事科学院军事医学研究院军事认知与脑科学研究所解放军总医院第六医学中心神经外科

目的研制基质金属蛋白酶（MMP）响应性透明质酸（HA）基脑源性神经营养因子（BDNF控释材料，以期为创伤性脑损伤的干预及损伤修复提供新的治疗方案。方法 HA经过氨基化处理后，与Sulfo-SMCC羧基缩合成酰胺，再与谷胱甘肽（GSH）进行连... 详细信息

目的研制基质金属蛋白酶（MMP）响应性透明质酸（HA）基脑源性神经营养因子（BDNF控释材料，以期为创伤性脑损伤的干预及损伤修复提供新的治疗方案。方法 HA经过氨基化处理后，与Sulfo-SMCC羧基缩合成酰胺，再与谷胱甘肽（GSH）进行连接，合成HA-GSH；通过分子克隆技术经Bam HI和Eco RI双酶切，DNA测序后构建重组谷胱甘肽S-转移酶（GST）-金属蛋白酶组织抑制剂（TIMP）-BDNF表达质粒，在大肠埃希菌原核表达系统中诱导表达GST-TIMP-BDNF重组蛋白，采用离子交换层析分离纯化，Westernblotting验证纯化后的重组蛋白；在MMP稀释液中分别加入PBS、MMP抑制剂Marimastat和不同浓度（0.4、0.6、0.8mg/ml）的GST-TIMP-BDNF或GST-BDNF，采用MMP活性检测试剂盒分析不同组别MMP-2的活性，评价该重组蛋白对MMP的抑制作用。提取大鼠原代神经元，培养后建立谷胱甘肽过氧化物酶4抑制剂（RSL3）诱导神经元铁死亡模型，采用免疫荧光染色检测GSTTIMP-BDNF对神经元损伤的影响。结果 MRI氢谱鉴定结果显示，成功合成了HA-GSH;Western blotting检测结果显示，利用大肠埃希菌原核表达系统成功表达了含GST标签的重组蛋白GST-TIMPBDNF;MMP活性检测结果显示，重组蛋白GST-TIMP-BDNF对MMP-2活性的抑制作用优于GST-BDNF(P强度明显增高（P<0.05）。结论成功研制了一种MMP响应性HA基BDNF控释材料，对神经元损伤具有一定的保护作用。

关键词：透明质酸基质金属蛋白酶脑源性神经营养因子创伤性脑损伤控释

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高科技风险投资项目的风险效应研究

科学管理研究 2003年第3期21卷 109-112,117页

作者：谢胜强同济大学经济与管理学院上海200092

本文分析了高科技风险投资项目的风险类型及特征 ,并重点研究了风险客观存在的效应机制 ,建立了风险诱惑效应、约束效应及其平衡过程的模型。

关键词：高科技风险投资项目风险效应风险类型特征风险诱惑效应约束效应模型风险投资决策

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风险企业成长过程风险控制体系的建立

财贸研究 2008年第2期19卷 153-154页

作者：谢胜强同济大学投资研究所上海200093

风险企业发展过程一般分为：种子期、起步期、成长期、成熟期等阶段。各个阶段由于风险企业面临的外部发展环境和内部资源状况的差异，带来各个阶段风险企业各不相同的风险类型和特点。具体来说：

关键词：风险控制体系企业成长过程企业发展过程外部发展环境风险企业资源状况风险类型种子期

种子期风险投资项目的风险分布与风险控制研究

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科学学与科学技术管理 2003年第5期24卷 83-86页

作者：谢胜强同济大学投资研究所

从风险和风险分布的定义出发,对种子期风险投资项目的风险因素进行了较详尽的分析,从理论上探讨了风险因素的联合概率分布和条件概率分布,以及相应的风险分布,在此基础上,进一步探讨了种子期风险投资项目风险控制的最优化管理模型,为种... 详细信息

从风险和风险分布的定义出发,对种子期风险投资项目的风险因素进行了较详尽的分析,从理论上探讨了风险因素的联合概率分布和条件概率分布,以及相应的风险分布,在此基础上,进一步探讨了种子期风险投资项目风险控制的最优化管理模型,为种子期风险投资项目的风险分析和风险控制提供了可靠的理论依据,具有相当的应用价值。

关键词：种子期风险风险分布风险控制风险投资

科技型创业企业技术创新能力模型和塑造路径研究

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科学管理研究 2008年第2期26卷 24-27页

作者：谢胜强同济大学投资研究所上海200093

研究了科技型创业企业技术创新的内涵、影响因素及其能力模型,并在此基础上,从创业企业成长的各个阶段分析了科技型创业企业技术创新能力的特点和问题,最后提出了该类企业技术创新能力的塑造路径。

关键词：创业企业技术创新能力路径

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我国能源供需波动变化研究

科学管理研究 2005年第6期23卷 20-24页

作者：谢胜强同济大学经济与管理学院上海200092

本文从我国近20年来能源产业产品供需量和消费结构的状况着手,研究了能源供需量波动和消费结构变化的特性,并从产业政策、产业结构和经济增长方式演变的角度重点分析了供需量波动和消费结构变化的原因和特点,在此基础上,分析了我国近年... 详细信息

本文从我国近20年来能源产业产品供需量和消费结构的状况着手,研究了能源供需量波动和消费结构变化的特性,并从产业政策、产业结构和经济增长方式演变的角度重点分析了供需量波动和消费结构变化的原因和特点,在此基础上,分析了我国近年能源短缺的原因和解决办法。

关键词：能源供应需求波动研究

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基于CBR与RBR的设备采购决策支持系统

计算机工程与应用 2003年第12期39卷 71-73页

作者：谢胜强吴忠同济大学经济与管理学院上海200092

该文通过分析制造行业新产品试制部门的设备采购过程,说明采购决策支持系统引入的必要性,并基于CBR(Case-BasedReasoning)案例推理和RBR(Rule-BasedReasoning)规则推理,构造了混合框架的推理系统及相应的案例表示结构,解决了设备采购等... 详细信息

该文通过分析制造行业新产品试制部门的设备采购过程,说明采购决策支持系统引入的必要性,并基于CBR(Case-BasedReasoning)案例推理和RBR(Rule-BasedReasoning)规则推理,构造了混合框架的推理系统及相应的案例表示结构,解决了设备采购等复杂决策领域中决策支持系统冗余推理的问题。最后将该混合推理框架及案例表示结构应用于某大型制造企业试制部门的决策支持系统中,取得了较好的效果。

关键词： CBR RBR 设备采购决策支持系统

创业企业技术创新风险和技术创新能力培育方法研究

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科学学研究 2008年第A1期26卷 230-233页

作者：谢胜强同济大学经济与管理学院上海200092

研究了创业企业技术创新的内涵、风险特征,以及技术创新能力体系,并在此基础上,探讨了创业企业技术创新能力的影响因素,最后提出了创业企业技术创新能力的培育方法。

关键词：创业企业技术创新风险能力方法