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作者：谢景梅西南大学

学位级别：硕士

甘蓝型油菜（Brassica napus, AACC,2n=4x=38）是世界上的第二大油料作物,也是我国五大油料作物之首。但它对磷、硼缺乏很敏感,并表现出基因型差异。磷是植物生长发育所必需的大量营养元素,对植物的光合、呼吸、抗逆、产量和品质性... 详细信息

甘蓝型油菜（Brassica napus, AACC,2n=4x=38）是世界上的第二大油料作物,也是我国五大油料作物之首。但它对磷、硼缺乏很敏感,并表现出基因型差异。磷是植物生长发育所必需的大量营养元素,对植物的光合、呼吸、抗逆、产量和品质性状有着重要影响。虽然多数土壤中总磷含量都不低,但有效磷缺乏,多数土壤中仅有2μmol/L,己成为世界作物的重要限制因子之一。为了降低磷缺乏对植株生长发育的影响,确保产量和品质,全世界每年要施用约3500万吨的磷肥,其中80%被酸性土壤中的铁／铝氧化物及石灰性土壤中的碳酸钙化合物所固定,使土壤中有效磷的含量只有全磷含量的1/200-1/500。不同的作物和作物品种对低磷土壤的适应能力存在差异,仅有少数作物和作物品种吸收和利用磷素的能力较强。因此,筛选磷高效基因型品种,提高作物对土壤中储备态磷的利用效率,对于减少磷肥消费量和保护农业生态环境具有重要意义。此外,长江流域是我国油菜的主产区,也是世界上最大的油菜生产带,油菜种植面积和总产量均占全国的80%以上。但是由于该地区土壤偏酸,储备态磷富集比较严重,导致有效磷缺乏,准确筛选磷高效基因型材料,提高油菜对磷的利用效率成为解决这一问题的关键。硼是植物生长发育所必需的另一重要元素,油菜缺硼往往“花而不实”,是导致油菜减产甚至绝收的又一限制因子,但是硼过量会对植物产生毒害。土壤有效硼的缺乏是世界性问题,据报道约有80个国家的132种植物出现缺硼症状,全世界每年硼肥施用面积约为1.5×107hm2。当土壤有效硼缺乏时,油菜、小麦等主要农作物均生长发育不良,结实率显著下降。然而,植物对硼适宜浓度的范围很窄,一旦土壤有效硼浓度偏高,就可能对植物产生毒害。不同植物或同一植物的不同品种在耐低硼胁迫或硼毒的能力上存在显著的基因型差异。硼高效基因型的筛选成为解决问题的关键,一方面可以克服有效硼的缺乏,另一方面可以克隆硼高效吸收利用和耐硼毒的基因。本研究引入了TOPSIS综合分析方法,寻求并验证营养液培养试验苗期与磷、硼营养相关的指标,根据苗期与磷、硼营养相关的形态和生理指标进行综合排序分析,然后结合沙基质培养和田间试验结果,对甘蓝型油菜磷高效基因型品系和硼高效基因型品系进行了筛选,获得了磷高效基因型品系P67,硼高效基因型品系P67和P119,说明P67同为磷高效和硼高效基因型品系。具体研究结果如下： 1.试验探索出了营养液培养的筛选效果较佳的有效磷、硼浓度和培养时间利用已证实的磷高效品系W17和磷低效品系W39进行了不同磷浓度范围以及不同培养时间的营养液培养,最终得到了甘蓝型油菜磷高效品种和低效品种筛选的最佳磷（Pi）浓度范围,在磷浓度为10μmol/L～1mmol/L时,磷效极端型品系的筛选效果更为显著,筛选时只需选择1个该范围内的浓度,不必再设置不同浓度的磷处理,单因素磷水平筛选大大减少了筛选的工作量。同理得出,营养液培养的最佳苗期筛选生长期为30天,硼效极端型品系的最佳筛选硼浓度为0.001-0.005mg/kg。 2.利用TOPSIS法筛选出典型的磷高效甘蓝型油菜品系P67 以124个经田间初步筛选的不同磷、硼营养效率代表品系为材料,在低磷和常磷条件下进行营养液培养试验,通过研究证明苗期根长、单株鲜重、单株干重、根冠比、单株全磷含量、冠部和根部酸性磷酸酶活性以及硼含量8个指标与磷营养效率相关程度较高,引入TOPSIS法进行综合排序,筛选出了磷高效甘蓝型油菜品系P67、磷偏高效甘蓝型油菜品系P40、磷低效甘蓝型油菜品系P6以及P107等3个磷偏低效甘蓝型油菜品系。 3.利用TOPSIS法筛选出典型的硼高效甘蓝型油菜品系P119 硼高效基因型甘蓝型油菜品系的筛选方法与磷高效基因型甘蓝型油菜相似,在低硼和常硼条件下进行营养液培养试验,通过研究证明苗期根长、单株鲜重、单株干重、根冠比、单株全磷含量和硼含量6个指标与硼营养效率相关程度较高,引入TOPSIS法进行综合排序,筛选出了硼高效甘蓝型油菜品系P119、磷偏高效甘蓝型油菜品系P67。 4.利用TOPSIS法对营养液培养试验、沙基质培养试验和田间试验进行综合比较 3种基质的筛选结果综合比较知：营养液培养试验、沙基质培养试验和田间试验的结果基本吻合,获得了典型的磷高效、硼高效甘蓝型油菜品系P67和磷低效、硼低效甘蓝型油菜品系P107以及硼高效甘蓝型油菜品系P119、磷低效甘蓝型油菜品系P6。一定程度上说明了磷高效和硼高效间的紧密连锁性,有待进一步分子水平的研究。同时,对营养液和沙基质培养试验结果及各指标值进行比较分析,发现其变化趋势基本一致,基质的不同并不影响筛选的整体结果。综合考虑各种因素,营养液培养试验更为快捷、准确,更

关键词：甘蓝型油菜磷高效磷低效硼高效硼低效营养液培养沙基质培养

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温度胁迫下甘蓝型油菜苗期生理生化指标的研究

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作物杂志 2013年第2期 53-59页

作者：王敏曲存民刘晓兰谢景梅李加纳西南大学农学与生物科技学院/南方山地农业教育部工程研究中心重庆北碚400715

以不同来源的16个甘蓝型油菜骨干系亲本为材料,对温度胁迫处理前后超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)含量、可溶性蛋白含量、脯氨酸(Pro)含量、电导率和叶绿素含量的变化进行了研究。结果表明:电导率、可溶性... 详细信息

以不同来源的16个甘蓝型油菜骨干系亲本为材料,对温度胁迫处理前后超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)含量、可溶性蛋白含量、脯氨酸(Pro)含量、电导率和叶绿素含量的变化进行了研究。结果表明:电导率、可溶性蛋白、MDA含量和Pro含量变化在材料间存在显著差异,在一定程度上反映了甘蓝型油菜品种的抗逆性强弱,可作为甘蓝型油菜苗期鉴定抗逆性强弱筛选的生理指标,叶绿素、SOD活性和CAT活性变化趋势不明显,不宜作为抗逆性鉴定的生理指标。对多个生理指标综合分析后证明单一生理指标对材料抗逆性筛选比较困难。通过对温度胁迫下材料的电导率、可溶性蛋白、Pro含量及MDA含量比较得知,15号材料在温度胁迫条件下表现出较强的耐热性与抗寒性,14号材料表现出较好的耐热性,2号材料表现出较好的抗寒性,可以作为育种材料加以利用。

关键词：甘蓝型油菜高温处理低温处理生理生化指标

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甘蓝型油菜成熟籽粒DNA快速提取方法探讨

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作物杂志 2012年第1期 17-21页

作者：谢景梅刘晓兰曲存民卢坤吕俊李加纳西南大学南方山地农业教育部工程技术中心重庆北碚400716

以室温保存不同年份的甘蓝型油菜种子为材料,采用改良的CTAB法和DNA抽提试剂盒分别提取甘蓝型油菜籽粒DNA,探讨适合甘蓝型油菜籽粒DNA提取的方法。结果表明,不同保存年份种子提取的DNA含量无显著差异;受种皮色泽的影响也较小;用改良的C... 详细信息

以室温保存不同年份的甘蓝型油菜种子为材料,采用改良的CTAB法和DNA抽提试剂盒分别提取甘蓝型油菜籽粒DNA,探讨适合甘蓝型油菜籽粒DNA提取的方法。结果表明,不同保存年份种子提取的DNA含量无显著差异;受种皮色泽的影响也较小;用改良的CTAB法比试剂盒所提DNA产量高,结构完整性好,成本较低。PCR扩增检测结果表明两种方法获得的DNA均能满足一般的分子实验。因此,从油菜干籽粒中直接提取DNA可以节约时间,显著提高工作效率,为快速高效地进行甘蓝型油菜种质资源和遗传多样性分析奠定了基础,同时,也利于快速鉴定推广品种是否带有外源基因。

关键词：甘蓝型油菜种子基因组DNA 改良CTAB法试剂盒

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下调PTEN基因对慢性偏头痛大鼠NR2B亚基酪氨酸磷酸化和一氧化氮的影响

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重庆医学 2016年第35期45卷 4897-4900页

作者：李王文秦光成陈力学谢景梅吴白雪周冀英重庆医科大学附属第一医院实验研究中心重庆400016 重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆400016

目的利用RNAi重组腺病毒下调第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白基因(PTEN)的表达,探讨PTEN基因对慢性偏头痛大鼠三叉神经脊束核尾核(TNC)内N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基酪氨酸磷酸化(NR2B-pTyr)蛋白表达水平和一氧化氮(NO)含量的... 详细信息

目的利用RNAi重组腺病毒下调第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白基因(PTEN)的表达,探讨PTEN基因对慢性偏头痛大鼠三叉神经脊束核尾核(TNC)内N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基酪氨酸磷酸化(NR2B-pTyr)蛋白表达水平和一氧化氮(NO)含量的影响。方法将SD雄性大鼠分为对照组、对照干预组、模型组和模型干预组。硬脑膜滴注炎性汤(IS)建立慢性偏头痛大鼠模型,TNC注射AdR-siPTEN,7d后观察大鼠行为学改变,检测大鼠TNC内PTEN、NR2B-pTyr和NO含量。结果 AdR-siPTEN可下调慢性偏头痛大鼠模型TNC中PTEN的表达;与模型组比较,IS干预慢性偏头痛大鼠的行为学症状明显缓解,大鼠的TNC内NR2B-pTyr表达水平及NO水平明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 PTEN参与调节慢性偏头痛的病理过程,下调PTEN基因可缓解IS诱导的慢性偏头痛大鼠的疼痛行为学,其机制可能与下调PTEN引起NR2BpTyr表达量及NO水平降低有关。

关键词：慢性偏头痛第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白基因 N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基磷酸化一氧化氮

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SSR标记对不同黄子甘蓝型油菜亲本材料的遗传分析

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植物遗传资源学报 2012年第4期13卷 632-638页

作者：刘晓兰曲存民谢景梅卢坤王敏王瑞徐新福谌利李加纳西南大学农学与生物科技学院重庆北碚400716 南方山地农业教育部工程研究中心重庆北碚400716

杂交育种中,亲本选配是育种成败的关键。本研究以重庆市油菜工程技术研究中心提供的180份甘蓝型黄子油菜亲本种质为材料,应用分布于不同连锁群的60对SSR标记进行了分析,共检测出308个标记位点,每对引物在不同亲本材料之间的等位基因数在... 详细信息

杂交育种中,亲本选配是育种成败的关键。本研究以重庆市油菜工程技术研究中心提供的180份甘蓝型黄子油菜亲本种质为材料,应用分布于不同连锁群的60对SSR标记进行了分析,共检测出308个标记位点,每对引物在不同亲本材料之间的等位基因数在1～11个之间,平均位点为5.1个。其中多态性位点207个,多态率达67.2%。对SSR扩增结果进行UPGMA分析,在遗传距离0.566处,180个品种(系)分为3个类群,聚类结果与种质来源比较一致,本研究为甘蓝型油菜黄子杂交育种和优势组合的选配提供了理论依据。

关键词：甘蓝型油菜亲本骨干系 SSR标记核心种质遗传多样性

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蓝、紫粒小麦籽粒蛋白营养及抗氧化性研究

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西南师范大学学报（自然科学版） 2010年第3期35卷 197-203页

作者：谢景梅马永甫胡雪琴范曾丽宗学凤张建奎西南大学农学与生物科技学院重庆400715 重庆文理学院生命科学与技术学院重庆永川402168 重庆医药高等专科学校重庆401331 西华大学生物系四川南充637002

以白粒小麦川麦107为对照,将蓝、紫粒小麦籽粒蛋白营养与黄酮粗提物对猪油的抗氧化性进行研究.结果表明:参试蓝、紫粒小麦籽粒的蛋白含量、蛋白质氨基酸总量,非必需氨基酸和必需氨基酸含量都高于白粒对照小麦川麦107;蓝、紫粒小麦籽粒... 详细信息

以白粒小麦川麦107为对照,将蓝、紫粒小麦籽粒蛋白营养与黄酮粗提物对猪油的抗氧化性进行研究.结果表明:参试蓝、紫粒小麦籽粒的蛋白含量、蛋白质氨基酸总量,非必需氨基酸和必需氨基酸含量都高于白粒对照小麦川麦107;蓝、紫粒小麦籽粒有较高的蛋白质氨基酸评分和化学评分.蓝、紫粒小麦籽粒黄酮粗提物对猪油的抗氧化性结果表明:蓝、紫粒小麦籽粒黄酮粗提物的抗猪油氧化能力都较60%乙醇强.参试材料中,除031-1的酸败时间较川麦107稍早之外,其余4个蓝、紫粒小麦品种发生酸败的时间均比川麦107要晚.

关键词：小麦黄酮粗提物蛋白营养猪油抗氧化性

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PTEN下调表达对反复发作性偏头痛大鼠模型行为学的影响

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中国疼痛医学杂志 2016年第1期22卷 11-16页

作者：秦光成谢景梅刘春晓陈力学桂蓓周冀英重庆医科大学附属第一医院实验研究中心重庆400016 重庆医科大学附属第一医院肾脏内科重庆400016 重庆市神经病学重点实验室重庆400016

目的:探讨下调第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)对反复发作性偏头痛大鼠模型行为学的影响。方法:SD大鼠分4组,对照组(Normal组,n=8),假手术组(Sham+Ad-RFP组,n=8),模型组(IS组,n=15),干预组(IS+Ad R-si PTEN组,n=15)。炎性汤(inflammation soup,IS)刺激大鼠硬脑膜,建立反复发作性偏头痛大鼠模型,干预组在建立模型前1周三叉神经核(trigeminal nucleus caudalis,TNC)注射Ad R-si PTEN干预,通过畏光、痛阈等方法对大鼠行为学评价。结果:滴注IS后大鼠出现抓耳挠头,过度理毛等症状;9次IS后大鼠的痛阈阈值下降到<2.0 g;12次IS后大鼠表现为恐光,但是下调PTEN能有效逆转上述行为学改变(P<0.05)。结论:下调PTEN基因能有效逆转反复发作性偏头痛大鼠模型的行为学改变,对反复发作性偏头痛具有保护作用。

关键词： PTEN 反复发作性偏头痛大鼠模型行为学研究

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蛋白激酶C参与大鼠慢性偏头痛中枢敏化

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中国疼痛医学杂志 2017年第5期23卷 331-337页

作者：吴白雪王莎秦光成肖垚谢景梅谭戈周冀英陈力学重庆医科大学附属第一医院实验研究中心重庆400016 重庆市神经病学重点实验室重庆400016

目的:本文旨在研究蛋白激酶C(PKC)是否通过中枢敏化参与慢性偏头痛病理生理过程。方法:SD雄性大鼠随机分为7组,假手术组(n=11),模型组(n=12),模型+溶剂组(n=8),PKC抑制剂4μg组(n=11),PKC抑制剂8μg组(n=10),PKC激动剂100 ng组(n=10),PK... 详细信息

目的:本文旨在研究蛋白激酶C(PKC)是否通过中枢敏化参与慢性偏头痛病理生理过程。方法:SD雄性大鼠随机分为7组,假手术组(n=11),模型组(n=12),模型+溶剂组(n=8),PKC抑制剂4μg组(n=11),PKC抑制剂8μg组(n=10),PKC激动剂100 ng组(n=10),PKC激动剂200 ng组(n=11)。"炎性汤"反复刺激硬脑膜,模拟硬脑膜痛觉感受器的反复激活,建立慢性偏头痛大鼠模型,侧脑室给予PKC抑制剂和PKC激动剂,使用von Frey test测定大鼠面部及后足的机械痛阈值,Western blot检测PKC、CGRP、c-Fos蛋白的表达变化。结果:"炎性汤"反复刺激硬脑膜后,大鼠面部及足底的机械痛阈值显著降低,而三叉神经脊束尾核部位的CGRP、c-Fos及PKC蛋白表达显著增加。使用CHE抑制PKC可以显著增高大鼠面部及足底痛阈值,显著降低CGRP、c-Fos的表达;而使用PMA激活PKC则降低痛阈值,显著增高CGRP、c-Fos的表达。结论:本研究表明PKC可以调节机械痛阈值以及CGRP、c-Fos的表达变化,提示PKC参与慢性偏头痛中枢敏化的病理生理过程。

关键词：蛋白激酶C 慢性偏头痛中枢敏化三叉神经脊束尾核

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不同环境中甘蓝型油菜种皮木质素含量的QTL定位

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作物学报 2011年第8期37卷 1398-1405页

作者：曲存民付福友卢坤谢景梅刘晓兰黄杰恒李波王瑞谌利唐章林李加纳西南大学重庆市油菜工程技术研究中心重庆400716 Plant Gene Resources of Canada Agriculture and Agri-Food Canada

以甘蓝型黄籽油菜GH06和甘蓝型黑籽油菜中油821为亲本杂交,后代通过"一粒传法"连续自交7代构建重组自交系,2007年分别在重庆市北碚区和万州区2个试验基地种植重组自交系群体,利用本实验室已构建的遗传连锁图谱和复合区间作图法(CIM),对... 详细信息

以甘蓝型黄籽油菜GH06和甘蓝型黑籽油菜中油821为亲本杂交,后代通过"一粒传法"连续自交7代构建重组自交系,2007年分别在重庆市北碚区和万州区2个试验基地种植重组自交系群体,利用本实验室已构建的遗传连锁图谱和复合区间作图法(CIM),对种皮木质素含量进行测定及QTL定位分析。结果表明,在2个环境中共检测到12个种皮木质素含量相关的QTL,分别位于4个不同的连锁群,单个QTL可解释性状表型变异的4.50%～8.79%;在第3连锁群上检测到1个QTL与同一标记EM19ME23/130连锁,其余10个QTL位置不同;在北碚检测到的QTL主要分布于第20连锁群,在万州检测到的QTL主要位于第3连锁群;部分种皮木质素的QTL与种胚类黄酮和种皮色泽的QTL位于相近区间,在北碚和万州种皮木质素含量与种胚类黄酮存在极显著和显著正相关关系。甘蓝型油菜种皮木质素含量表现为多基因控制的数量性状,基因表达受环境影响较大;油菜种皮木质素合成和类黄酮的积累可能受相同关键基因调控或者具有部分相同的合成代谢途径。

关键词：甘蓝型油菜种皮木质素含量 QTL 重组自交系

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小学生个性化阅读能力培养初探

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新课程学习(上) 2012年第12期 79-79页

作者：谢景梅江苏省宿迁市泗阳县来安中心小学

阅读可以激发学生的学习兴趣,开拓学生视野,使学生获得丰富的知识,同时能够培养和提高学生的阅读与写作能力。个性化阅读是以学生自己的阅读、研读为主,是学生感知、理解、评价、鉴赏文本的过程。阅读教学必须把自主阅读的权利还给学生... 详细信息

阅读可以激发学生的学习兴趣,开拓学生视野,使学生获得丰富的知识,同时能够培养和提高学生的阅读与写作能力。个性化阅读是以学生自己的阅读、研读为主,是学生感知、理解、评价、鉴赏文本的过程。阅读教学必须把自主阅读的权利还给学生,积极鼓励和引导学生进行个性化阅读。

关键词：小学生阅读能力个性化阅读引导学生能力培养

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