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诱导性多能干细胞研究及应用

自然科学进展 2009年第8期19卷 793-797页

作者：习佳飞李艳华裴雪涛军事医学科学院输血医学研究所干细胞与再生医学研究室北京100850

诱导性多能干细胞(iPS细胞)是通过向体细胞中导入Oct4,Sox2,c-myc和Klf4等基因,使体细胞重编程获得具有胚胎干细胞样特性的多能干细胞.iPS细胞的产生可谓干细胞领域的新里程碑.近两年,iPS细胞的研究突飞猛进,文中结合最新的研究结果,综... 详细信息

诱导性多能干细胞(iPS细胞)是通过向体细胞中导入Oct4,Sox2,c-myc和Klf4等基因,使体细胞重编程获得具有胚胎干细胞样特性的多能干细胞.iPS细胞的产生可谓干细胞领域的新里程碑.近两年,iPS细胞的研究突飞猛进,文中结合最新的研究结果,综述了iPS细胞的研究现状、进展,如新的iPS细胞诱导方法的建立、诱导iPS细胞产生效率的提高、iPS细胞的定向诱导分化及其在疾病模型治疗中的作用等.针对iPS细胞研究领域存在的问题,包括如何提高iPS细胞生成的效率、解决其临床应用的安全性、iPS细胞重编程的机制等进行了讨论,为今后进一步开展iPS细胞的研究提供了帮助.

关键词：诱导性多能干细胞细胞治疗重编程

HyTK基因用于膀胱癌基因放射治疗的实验研究

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中华放射医学与防护杂志 2000年第1期20卷 43-45页

作者：叶传忠裴雪涛李梁冯凯杜楠陈仕平福建医科大学附属协和医院泌尿外科福州350001 北京放射医学研究所第三军医大学

目的　了解放射治疗协同单纯疱疹病毒胸苷激酶 (HSV TK) /更昔洛韦 ( gancyclovir,GCV)对膀胱癌细胞的联合杀伤作用。方法　通过逆转录病毒介导 ,将潮霉素磷酸转移酶和HSV TK的融合基因 (HyTK)基因转入膀胱肿瘤细胞株EJ中并获得表达 ,... 详细信息

目的　了解放射治疗协同单纯疱疹病毒胸苷激酶 (HSV TK) /更昔洛韦 ( gancyclovir,GCV)对膀胱癌细胞的联合杀伤作用。方法　通过逆转录病毒介导 ,将潮霉素磷酸转移酶和HSV TK的融合基因 (HyTK)基因转入膀胱肿瘤细胞株EJ中并获得表达 ,联合应用放射治疗及低剂量GCV ,了解基因放射治疗对转基因细胞EJ/HyTK的杀伤作用。结果　SouthernBlot、DotBlot检测证实HyTK在转基因细胞的表达 ,联合应用低剂量GCV可使转入HyTK基因的膀胱癌细胞株对放疗的敏感性明显增高 (SER =1.3 6)。结论　放疗协同HSV TK/GCV系统可作为膀胱癌基因治疗的一种有效方法。

关键词：膀胱肿瘤基因-放射治疗 HyTK基因实验研究

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脂质体介导的HSV-TK基因治疗人膀胱癌

中华实验外科杂志 1999年第1期16卷 24-25页

作者：叶传忠陈仕平裴雪涛冯凯李梁杨光福建医科大学附属协和医院泌尿外科福州350001 军事医学科学院放射医学研究所

目的探讨HSV－TK基因/GCV系统对人膀胱癌细胞的杀伤作用．方法以潮霉素磷酸转移酶和HSV-HK的融合基因（HyTK）作为目的基因，利用阳离子脂质体将其转入膀胱癌细胞株，检测其表达及GCV对转基因细胞的杀伤作用。结果RT-PCR检测证实HyTK在... 详细信息

目的探讨HSV－TK基因/GCV系统对人膀胱癌细胞的杀伤作用．方法以潮霉素磷酸转移酶和HSV-HK的融合基因（HyTK）作为目的基因，利用阳离子脂质体将其转入膀胱癌细胞株，检测其表达及GCV对转基因细胞的杀伤作用。结果RT-PCR检测证实HyTK在转基因细胞的表达，MTT法测定示GCV对EJ／HyTK细胞有明显的杀伤作用；其IC50值为2.4mg／L，而对其亲代EJ细胞无明显毒性（P＜005）。按不同比例混合EJ／HyTK细胞和亲代EJ细胞，发现GCV不仅能杀伤转入TK基因的细胞，而且对其周围未转基因的膀胱细胞存在旁观者效应。结论HSV－TK基因／GCV系统可作为膀胱癌基因治疗的一种有效方法。

关键词：膀胱肿瘤基因治疗 HSV-TK 脂质体

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胚胎干细胞的诱导分化研究

中国科学（C辑） 2005年第5期35卷 384-388页

作者：杨印祥刘大庆裴雪涛军事医学科学院输血医学研究所北京100850

胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES细胞)是指由胚胎内细胞团(innercellmass,ICM)细胞经体外抑制培养而筛选得到的细胞,具有发育上的全能性.近两年在ES细胞诱导分化方面的研究取得了一些突破性的进展,其中,ES细胞向生殖细胞分化(2003年... 详细信息

胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES细胞)是指由胚胎内细胞团(innercellmass,ICM)细胞经体外抑制培养而筛选得到的细胞,具有发育上的全能性.近两年在ES细胞诱导分化方面的研究取得了一些突破性的进展,其中,ES细胞向生殖细胞分化(2003年)以及首次克隆成功人ES细胞(2004年)先后被评为《科学》杂志当年度十大科学进展之一;另外,维持ES细胞不分化状态的关键基因(Nanog)及相关化合物(BIO)的发现,其自身分化状态调控机理的深入研究,以及向不同方向诱导分化和应用等的研究成果,同样受人关注.

关键词：胚胎干细胞诱导分化诱导分化 ES细胞《科学》杂志 cell 相关化合物 stem 内细胞团

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肝细胞微囊化移植——肝病细胞治疗的新希望

自然科学进展 2007年第6期17卷 701-706页

作者：滕越王韫芳裴雪涛军事医学科学院输血医学研究所干细胞与再生医学研究室北京100850

介绍了一种新的肝病细胞治疗方法,即肝细胞微囊化移植.对其概念、优缺点、安全性、时效性及其在国际医学界的使用和发展情况做一简要综述.

关键词：肝细胞微囊化肝衰竭细胞治疗

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CD34^＋造血祖细胞的定向诱导分化研究

中华血液学杂志 1998年第6期19卷 289-293页

作者：裴雪涛王立生徐黎冯凯李梁龙红吴祖泽军事医学科学院放射医学研究所中日友好医院血液科

加强造血调控的基础与临床研究裴雪涛血细胞的生成及其调控涉及生命科学中的许多热点问题，如细胞的增殖、分化、迁移、发育、成熟、衰老、凋亡、癌变，也涉及细胞因子及其受体的相互作用与信号传导，细胞与细胞、细胞与基质的相互作用... 详细信息

加强造血调控的基础与临床研究裴雪涛血细胞的生成及其调控涉及生命科学中的许多热点问题，如细胞的增殖、分化、迁移、发育、成熟、衰老、凋亡、癌变，也涉及细胞因子及其受体的相互作用与信号传导，细胞与细胞、细胞与基质的相互作用等。同时，许多血液恶性肿瘤、造血障...

关键词：造血祖细胞抗原 CD34 细胞因子诱导分化

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肝干细胞及其在肝再生医学中的应用

自然科学进展 2005年第2期15卷 129-133页

作者：南雪王韫芳裴雪涛军事医学科学院输血医学研究所干细胞生物学研究室北京100850

成体干细胞具有多向分化的潜能,在适宜的环境中,它们可以跨系、甚至跨胚层分化,这种现象称为"可塑性"(plasticity).多种成体组织来源的干细胞可在受者(包括小鼠、大鼠和人)肝脏内分化为肝细胞和胆管上皮细胞,为成体干细胞移植治疗终末... 详细信息

成体干细胞具有多向分化的潜能,在适宜的环境中,它们可以跨系、甚至跨胚层分化,这种现象称为"可塑性"(plasticity).多种成体组织来源的干细胞可在受者(包括小鼠、大鼠和人)肝脏内分化为肝细胞和胆管上皮细胞,为成体干细胞移植治疗终末期肝病提供了新思路.文中就不同来源的肝干细胞是否可以向肝细胞分化、影响干细胞分化的因素和调控机制以及干细胞在肝再生医学中的应用等方面做一综述.

关键词：肝再生肝干细胞医学肝细胞多向分化成体干细胞移植治疗调控机制可塑性肝脏

自体BMSCs复合胶原膜修复猪全层皮肤缺损

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中国修复重建外科杂志 2009年第3期23卷 348-352页

作者：何丽娟刘大庆白慈贤闫迎军管利东裴雪涛军事医学科学院输血医学研究所干细胞与再生医学研究室北京100850 煤炭总医院整形外科

目的探讨自体BMSCs与胶原膜复合构建组织工程皮肤修复小型香猪全层皮肤缺损,为组织工程皮肤的临床应用提供实验依据。方法取4只贵州小型香猪骨髓各20mL培养BMSCs,传至第3代。取新鲜牛肌腱通过化学交联的方法制备成直径为5cm的圆形Ⅰ型... 详细信息

目的探讨自体BMSCs与胶原膜复合构建组织工程皮肤修复小型香猪全层皮肤缺损,为组织工程皮肤的临床应用提供实验依据。方法取4只贵州小型香猪骨髓各20mL培养BMSCs,传至第3代。取新鲜牛肌腱通过化学交联的方法制备成直径为5cm的圆形Ⅰ型胶原膜。将密度为2×107个/mL第3代BMSCs用DAPI标记后种植到Ⅰ型胶原膜上孵育24h,制备组织工程皮肤。在猪背部正中线两侧分别由前向后切取5个直径5cm、深达筋膜的圆形全层皮肤缺损创面,随机分为两组(n=10)。对照组行单纯Ⅰ型胶原膜修复,实验组行组织工程皮肤修复。于术后3、8周,观察创面愈合情况,并取材行HE染色及透射电镜观察,并于术后3周对实验组行荧光显微镜及糖原染色观察。结果动物均存活至实验完成。术后3周对照组创面约40%皮肤发黑、结痂、坏死,8周时仍见坏死组织且瘢痕挛缩明显;术后3周实验组创面皮肤成活,无明显瘢痕形成,8周创面愈合良好;两组创面愈合率差异有统计学意义(P<0.01)。组织学观察:术后3周对照组可见肉芽组织增生,无表皮层覆盖;实验组具有良好的表皮和真皮结构,糖原染色可见基底膜呈完整连续深红染色。术后8周两组均形成正常皮肤样结构。透射电镜观察:术后3周对照组真皮层有大量中性粒细胞和成纤维细胞,未见表皮超微结构;实验组可见大量表皮细胞并以桥粒相连,表皮基底细胞与基膜以半桥粒连接;真皮层可见大量成纤维细胞,以及细胞外大量胶原微纤维沉积,可见内皮细胞形成的毛细血管。术后3周实验组荧光显微镜观察,带有DAPI标记的BMSCs定位于重建的表皮和真皮组织中,表皮主要定位于基底膜附近,真皮层可见大量荧光标记的BMSCs。结论以自体BMSCs为种子细胞与胶原膜复合构建组织工程皮肤,可有效修复猪全层皮肤缺损,有望成为一种较理想的组织工程皮肤。

关键词：组织工程皮肤自体BMSCs 胶原膜全层皮肤缺损修复猪

腺病毒载体介导的人β_2肾上腺素能受体基因在心肌细胞特异性表达的研究

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中华心血管病杂志 2001年第8期29卷 494-496页

作者：高文谦李小鹰李梁裴雪涛北京解放军总医院老年心内科 100853 军事医学科学院国家生物医学分析中心

目的　观察构建的重组腺病毒载体介导的人 β2 肾上腺素能受体 (β2 AR)基因能否在心肌细胞中特异性表达。方法　构建含心肌肌凝蛋白轻链 (mlc 2v)启动子携带 β2 AR基因的重组腺病毒载体 (Admlcβ2 AR) ,用重组病毒感染大鼠心肌细胞... 详细信息

目的　观察构建的重组腺病毒载体介导的人 β2 肾上腺素能受体 (β2 AR)基因能否在心肌细胞中特异性表达。方法　构建含心肌肌凝蛋白轻链 (mlc 2v)启动子携带 β2 AR基因的重组腺病毒载体 (Admlcβ2 AR) ,用重组病毒感染大鼠心肌细胞、3T3细胞、HFCL细胞及HeLa细胞 ,检测感染的细胞中人β2 AR基因的表达。结果　RT PCR显示只有感染的心肌细胞表达人 β2 ARmRNA ;Western免疫印迹杂交分析表明感染的心肌细胞有人 β2 AR表达 ;放射性配基检测显示感染的心肌细胞 β AR密度 (15 3± 5 .2 )fmol/mg蛋白 ,明显高于未感染的心肌细胞 (76± 2 .8)fmol/mg蛋白 ,P <0 .0 1)。结论构建的重组腺病毒载体可有效地将 β2

关键词：腺病毒载体心肌细胞特异性表达心力衰竭肾上腺素能受体基因