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盘龙参内生菌多样性及一株内生细菌的抑菌活性研究

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盘龙参内生菌多样性及一株内生细菌的抑菌活性研究

作者：裴东方长江大学

学位级别：硕士

盘龙参（Spiranthes sinensis（Pers.）Ames）是一种重要的中药材,也是一种生态指示植物,具有较高的药用价值及生态价值。近年来,由于人类过度开采及环境污染等问题,导致野生盘龙参的数量急剧下降。植物内生菌是一个潜在的资源宝库,其... 详细信息

盘龙参（Spiranthes sinensis（Pers.）Ames）是一种重要的中药材,也是一种生态指示植物,具有较高的药用价值及生态价值。近年来,由于人类过度开采及环境污染等问题,导致野生盘龙参的数量急剧下降。植物内生菌是一个潜在的资源宝库,其次级代谢产物丰富,在医疗、农业、工业各方面均有广泛应用。本文以盘龙参为研究对象,通过分离其可培养内生真菌和细菌,分析其内生菌多样性,测定内生菌抑菌活性,从中筛选出具有生防潜力的菌株,分析研究其抑菌机理,以期运用于农业生产中。本研究的主要内容为下:1.从野生盘龙参的根、茎、叶、花序组织中分离内生菌菌株共263株,通过形态学分类和分子生物学鉴定（ITS、16s-r RNA）,内生真菌分属于25个属,其中镰刀菌属（Fusarium,20%）,青霉菌属（Penicillium,8%）和链格孢属（Alternaria,8%）为优势菌属;内生细菌分属于11个属,其中克霍尔德菌属（Burkholderia,19%）、芽孢杆菌属（Bacillus,18%）、假单胞杆菌属（Pseudomonas,17%）和不动杆菌属（Acinetobacter,11%）为优势菌属。通过平板对峙法,将所有内生菌菌株与番茄灰霉病原菌、棉花枯萎病原菌和马铃薯早疫病原菌共培养,进行抑菌活性测定,筛选出具有拮抗活性的内生真菌9株和内生细菌8株,其中一株内生细菌YZU 173017表现出较高的抑菌活性。2.对菌株YZU 173017进行16S r RNA序列分析及其全基因组测序,通过构建系统发育树,均表明该菌株为贝莱斯芽孢杆菌。其全基因组共包含30条scaffolds,总长度为3,940,997 bp,GC含量46.414%,编码蛋白序列2512条,占全基因组全长的61.9%,共预测85个t RNA和10个r RNA,通过与GO数据库、COG数据库和KEEG数据库比对,在次级代谢物合成、运输与代谢方面的基因富集较多。在anti SMASH中分析,共获得次级代谢基因簇19个,其相关化合物包含fengycin、bacillaene、macrolactin、butirosin、bacilysin、bacillibactin、difficidin、surfactin、plipastatin、plantazolicin、kijanimicn等,大部分基因簇均与抗菌能力有关。3.对菌株YZU 173017的生物学特性进行分析研究,结果表明该菌株为革兰氏阳性菌;产蛋白酶和淀粉酶、不产纤维素酶;具有一定的生物被膜形成能力;不耐高盐和耐强酸碱。此外,对其抑菌活性成分进行分析测定,发酵液比菌体萃取物的抑菌活性强,且发酵液中抑菌物质耐高温、耐蛋白酶K,对九种重要农作物病原真菌均有较好的抑制效果,致使菌丝顶端膨大、畸形,生长受阻,且孢子无法萌发。进一步对发酵液中的脂肽类和蛋白类物质进行研究发现二者均有抑菌活性,但蛋白类物质表现出较好活性。因此,对蛋白类物质进行进一步分析研究,选择终浓度80%的硫酸铵沉淀蛋白,通过DEAE Sepharose交换层析和SDS-PAGE分离,其中表观分子量约为42k Da一条较为清晰的条带具有较高的抑菌活性,预测这可能是该菌株YZU 173017所产生的重要抑菌蛋白。

关键词：盘龙参内生菌贝莱斯芽孢杆菌全基因组抑菌蛋白

聚二乙二醇十六烷基醚单丙烯酸酯/氧化石墨烯复合定型相变材料的制备及表征

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天津工业大学学报 2016年第2期35卷 1-6页

作者：张兴祥李树芹陈赛裴东方天津工业大学先进纤维与储能技术重点实验室天津300387

利用溶液共混法制备了聚二乙二醇十六烷基醚单丙烯酸酯/氧化石墨烯(PC16E2AC/GO)复合定型相变材料.通过SEM、DSC和TG对复合材料的形态结构、热性能和热稳定性进行了研究.结果表明:GO的加入能显著提高PC16E2AC梳状聚合物相变材料的定型性... 详细信息

利用溶液共混法制备了聚二乙二醇十六烷基醚单丙烯酸酯/氧化石墨烯(PC16E2AC/GO)复合定型相变材料.通过SEM、DSC和TG对复合材料的形态结构、热性能和热稳定性进行了研究.结果表明:GO的加入能显著提高PC16E2AC梳状聚合物相变材料的定型性,当GO质量分数为5%时,PC16E2AC/GO复合定型相变材料具有较高的热焓值、良好的热稳定性和热定型性.该GO含量的复合相变材料不仅在远高于PC16E2AC熔融温度的条件下可保持良好的形态,而且经85℃恒温热处理100 min后没有出现PC16E2AC的渗漏.此外,300次冷热循环测试证实其具有良好的热循环稳定性.

关键词：聚合物相变材料定型相变材料梳状聚合物 GO改性

宝石能谱CT颅颈联合CTA对脑中风防治的临床应用价值研究

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中国实用医药 2014年第4期9卷 49-50页

作者：裴东方河南平顶山市第二人民医院CT室 467000

目的探讨宝石能谱CT颅颈联合CTA对脑中风防治的临床应用价值。方法对51例患者进行宝石能谱CTA、DSA及颈部彩超等检查,进行观察分析。结果能谱CTA在脑动脉瘤检出方面与金标准DSA相比优于MRA。能谱CT结合CTA有助于分析斑块的性质。结论利... 详细信息

目的探讨宝石能谱CT颅颈联合CTA对脑中风防治的临床应用价值。方法对51例患者进行宝石能谱CTA、DSA及颈部彩超等检查,进行观察分析。结果能谱CTA在脑动脉瘤检出方面与金标准DSA相比优于MRA。能谱CT结合CTA有助于分析斑块的性质。结论利用宝石能谱CT独特功能和优势,可以实现颅内金属植入物患者、难以耐受快速造影剂注射患者的CTA检查;明确脑动脉瘤弹簧圈植入术后疗效或动脉瘤栓塞术后复发出血;明确颈动脉斑块性质,有效预测脑中风发生;明确颈动脉支架术后有否合并支架内再狭窄及栓子性质。从而指导临床更好地预防脑中风的发生。

关键词：脑出血斑块

多层螺旋CT胸部低剂量扫描在肺结节鉴别诊断中的临床价值

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实用医学影像杂志 2019年第3期20卷 294-295页

作者：裴东方陈少武河南省平顶山市第二人民医院CT室 467000 河南省平顶山市第一人民医院MR室

肺结节是入侵人体全身性生理功能系统的一种典型慢性疾病。当前肺结节的发病机制尚未完全明确,但是根据文献资料报道,患者机体免疫细胞功能异常及体液代谢功能紊乱等因素和肺结节疾病具有密切关系[1]。随着现代医学研究的进步,CT诊断技... 详细信息

肺结节是入侵人体全身性生理功能系统的一种典型慢性疾病。当前肺结节的发病机制尚未完全明确,但是根据文献资料报道,患者机体免疫细胞功能异常及体液代谢功能紊乱等因素和肺结节疾病具有密切关系[1]。随着现代医学研究的进步,CT诊断技术在临床中得到广泛应用,对诊断肺结节具有理想的效果。尤其是多层螺旋CT不仅能够呈现出清晰的图像、检出有无病情,而且能够给出定性判断。和X线片相比较,CT检出肺结节的准确度更高,清晰显示出疾病细节,但是由于CT检查辐射剂量更高[2],因此容易对患者机体带来不利影响,因此在肺部病变普查中应用受到限制。本文对我院2016年9月至2017年9月来就诊的肺结核患者进行统计,随机分组后进行胸部常规剂量和胸部低剂量多层螺旋CT检查,现具体情况报告如下。

关键词：低剂量扫描临床价值鉴别诊断肺结节多层螺旋CT 多层螺旋CT检查胸部肺结核患者

低剂量螺旋CT联合肿瘤标志物CEA,SCC-Ag,ProGRP,NSE对良恶性孤立性肺结节的鉴别诊断价值

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实用癌症杂志 2021年第4期36卷 614-617页

作者：裴东方陈少武李静河南省平顶山市第二人民医院 467000 河南省平顶山市第一人民医院 467000

目的探讨低剂量螺旋CT联合肿瘤标志物癌胚抗原(CEA),鳞状上皮细胞癌相关抗原(SCC-Ag),胃泌素释放肽前体(ProGRP),神经特异性烯醇化酶(NSE)对良恶性孤立性肺结节的鉴别诊断价值。方法回顾性分析孤立性肺结节患者420例的临床资料,患者均... 详细信息

目的探讨低剂量螺旋CT联合肿瘤标志物癌胚抗原(CEA),鳞状上皮细胞癌相关抗原(SCC-Ag),胃泌素释放肽前体(ProGRP),神经特异性烯醇化酶(NSE)对良恶性孤立性肺结节的鉴别诊断价值。方法回顾性分析孤立性肺结节患者420例的临床资料,患者均有完整的低剂量螺旋CT及肿瘤标志物CEA、SCC-Ag、ProGRP、NSE检查结果和病理结果,以病理结果为金标准确定结节性质,比较良、恶性孤立性肺结节患者的低剂量螺旋CT的结节显示情况及肿瘤标志物CEA、SCC-Ag、ProGRP、NSE水平,比较低剂量螺旋CT和肿瘤标志物CEA、SCC-Ag、ProGRP、NSE单独检查及联合检查对良、恶性孤立性肺结节的检出率。结果病理结果提示420例孤立性肺结节患者中,良性287例,恶性133例。低剂量螺旋CT检查显示:良、恶性患者的结节直径、类型、结节形态、结节与肺的交界面、结节的边缘特征比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。肿瘤标志物检查显示良性患者的血清CEA、SCC-Ag、ProGRP、NSE水平均显著低于恶性患者(P<0.05)。低剂量螺旋CT和肿瘤标志物联合检查对良、恶性孤立性肺结节的检出率均显著高于单独检查(P<0.05)。结论低剂量螺旋CT联合肿瘤标志物CEA、SCC-Ag、ProGRP、NSE对良恶性孤立性肺结节检出率高,并且对良、恶性结节具有鉴别诊断价值,可以为临床诊治工作提供指导信息。

关键词：孤立性肺结节良性恶性低剂量螺旋CT 肿瘤标志物

64排螺旋CT低剂量扫描肺部结节检出状况及对早期肺癌的诊断价值

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实用癌症杂志 2021年第6期36卷 973-975,980页

作者：裴东方陈少武李静河南省平顶山市第二人民医院 467000 河南省平顶山市第一人民医院 467000

目的研究64排螺旋CT低剂量扫描肺部结节检出状况及对早期肺癌的诊断价值。方法选择体检筛出肺癌高危人群432例,其中,212例患者采用64排螺旋CT常规剂量进行肺部扫描,220例患者采用64排螺旋CT低剂量进行肺部扫描,观察64排螺旋CT常规剂量... 详细信息

目的研究64排螺旋CT低剂量扫描肺部结节检出状况及对早期肺癌的诊断价值。方法选择体检筛出肺癌高危人群432例,其中,212例患者采用64排螺旋CT常规剂量进行肺部扫描,220例患者采用64排螺旋CT低剂量进行肺部扫描,观察64排螺旋CT常规剂量组和低剂量组的肺部结节检出状况及早期肺癌检出率,组间结果进行对比分析。结果64排螺旋CT低剂量组的肺部结节和早期肺癌检出率分别为16.0%、5.2%,常规剂量组分别为14.5%、4.5%,组间差异无统计学意义(P>0.05)。64排螺旋CT常规剂量组和低剂量组的肺部结节平均直径以及毛刺、分叶、空洞、钙化的显示率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。低剂量组的最小红斑量(MERD)、剂量长度乘积(DLP)显著低于常规剂量组,扫描总电流时间积(mAs)、权重CT剂量指数(CTDIW)显著小于常规剂量组,有效扫描mAs显著长于常规剂量组,组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论64排螺旋CT低剂量肺部扫描的肺部结节显示情况及早期肺癌检出率与常规剂量相比并无显著差异,但明显降低了检查对机体的辐射损害,具有可靠的临床诊断价值。

关键词： 64排螺旋CT 肺部结节早期肺癌低剂量常规剂量诊断价值

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切实推进农村信息化基础设施建设

群众 2010年第7期 62-63页

作者：金同闯李高升裴东方中共泗洪县委宣传部

农村信息化是国民经济信息化的重要组成部分，党的十七届三中全会指出，要不断促进农业生产经营信息化、推进农业信息服务技术发展。2010年中央一号文件更加明确提出：“推进农村信息化，积极支持农村电信和互联网基础设施建设，健全农... 详细信息

农村信息化是国民经济信息化的重要组成部分，党的十七届三中全会指出，要不断促进农业生产经营信息化、推进农业信息服务技术发展。2010年中央一号文件更加明确提出：“推进农村信息化，积极支持农村电信和互联网基础设施建设，健全农村综合信息服务体系。”近年来，泗洪县认真贯彻落实中央、省、市关于农村信息化工作会议精神，大力推进农村信息化基础设施建设，取得了显著的成绩，广电网基础设施建设初具规模，电信网基础设施建设发展迅猛，移动、联通基础设施建设得到加强。

关键词：基础设施建设农村信息化综合信息服务体系国民经济信息化十七届三中全会农业生产经营农业信息服务 2010年

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盘龙参内生真菌多样性及其拮抗作用研究

江西农业大学学报 2019年第2期41卷 365-371页

作者：裴东方吴秋秋莫俊鑫金缘罗欢邓建新周燚长江大学农学院湖北荆州434025

为研究盘龙参内生真菌的多样性,并筛选具有抑菌活性的内生真菌。通过组织分离法分离重庆合川野生盘龙参内生真菌,利用ITS序列分析进行其多样性研究,并选用3种重要农作物病原菌进行平板对峙试验,最后对拮抗效果较好的菌株进行鉴定。结果... 详细信息

为研究盘龙参内生真菌的多样性,并筛选具有抑菌活性的内生真菌。通过组织分离法分离重庆合川野生盘龙参内生真菌,利用ITS序列分析进行其多样性研究,并选用3种重要农作物病原菌进行平板对峙试验,最后对拮抗效果较好的菌株进行鉴定。结果表明:从盘龙参的根、茎、叶和花序中共分离出内生真菌48株,从中挑选出17株代表菌株,经ITS序列分析其分属于10个属,其中假埃希氏菌属真菌Pseudallescheria minutispora对番茄灰霉病菌有较好的拮抗作用,抑菌带达7.1 mm。本研究为盘龙参内生真菌的开发利用提供了基础资料,首次在国内详细描述了P. minutispora的形态学特征,为P. minutispora的分类鉴定提供依据。

关键词：盘龙参内生真菌拮抗作用 Pseudallescheria minutispora

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一种波斯菊叶枯病新病原菌的分离与鉴定

植物保护 2017年第6期43卷 182-186页

作者：罗欢贾国庚范小燕刘海峰裴东方邓建新周燚长江大学农学院荆州434025

波斯菊是一种重要的观赏植物,叶枯病的发生影响其生长及市场价值。本文从陕西杨凌地区采集波斯菊病叶,通过保湿培养、单孢分离方法获得2株分离物。将分离菌的纯培养物接种健康寄主植物,发病后再分离的分离物与原接种病原菌菌株特征相同... 详细信息

波斯菊是一种重要的观赏植物,叶枯病的发生影响其生长及市场价值。本文从陕西杨凌地区采集波斯菊病叶,通过保湿培养、单孢分离方法获得2株分离物。将分离菌的纯培养物接种健康寄主植物,发病后再分离的分离物与原接种病原菌菌株特征相同。采用形态学及rDNA-ITS、EF-1α和GAPDH基因序列分析相结合的方法对分离菌进行鉴定,结果表明,两株菌株均为侵染向日葵链格孢Alternaria helianthiinficiens。这是国内外波斯菊上***的首次报道。

关键词：侵染向日葵链格孢波斯菊叶枯病形态学多基因序列