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中国大陆日本血吸虫品系的研究——Ⅻ.五地隔离群血吸虫DNA杂交

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1993年第1期11卷 6-8页

作者：谢觅何毅勋裘丽姝陈伟中国预防医学科学院寄生虫病研究所

以pSM889为探针,对分布于中国大陆安徽、湖北、广西、云南、四川5地日本血吸虫自然隔离群的雄虫DNA进行了杂交,分析其长度多态性差异。经限制性内切酶EcoRI和BamHI酶切的杂交图谱分析,结果表明其强杂交带虽相同,但在EcoRI酶切的杂交图谱... 详细信息

以pSM889为探针,对分布于中国大陆安徽、湖北、广西、云南、四川5地日本血吸虫自然隔离群的雄虫DNA进行了杂交,分析其长度多态性差异。经限制性内切酶EcoRI和BamHI酶切的杂交图谱分析,结果表明其强杂交带虽相同,但在EcoRI酶切的杂交图谱中,分子量分别在4.4-9.6kb和2.3-4.4kb的上述5地隔离群的弱杂交带上却呈现明显的差别。这表明5地自然隔离群日本血吸虫的DNA结构发生了某些变异,此结果进一步为中国大陆境内日本血吸虫存在品系差别提供了分子生物学的依据。

关键词：血吸虫品系 DNA杂交限制性内切酶

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棘球蚴特异性抗原的蛋白质印迹分析

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2004年第1期22卷 11-15页

作者：江莉薛海筹裘丽姝冯正中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织疟疾血吸虫病和丝虫病合作中心上海200025

目的　寻找细粒棘球蚴 (Eg)和多房棘球蚴 (Em)特异性抗原组分用于免疫诊断。　方法　对Eg、Em的囊液、原头节、囊壁角质层、囊壁生发层及犬泡状带绦虫、犬豆状带绦虫、羊细颈囊尾蚴、猪囊尾蚴等 4种异源性绦虫 ,共14种粗抗原进行免疫学... 详细信息

目的　寻找细粒棘球蚴 (Eg)和多房棘球蚴 (Em)特异性抗原组分用于免疫诊断。　方法　对Eg、Em的囊液、原头节、囊壁角质层、囊壁生发层及犬泡状带绦虫、犬豆状带绦虫、羊细颈囊尾蚴、猪囊尾蚴等 4种异源性绦虫 ,共14种粗抗原进行免疫学分析。采用蛋白质印迹试验 (Westernblotting)、Genesnap和Genetool分析软件比较分析不同抗原蛋白条带分别与囊型棘球蚴病 (CE)及泡型棘球蚴病 (AE)患者血清反应的差异。　结果　 14种粗抗原中与CE、AE患者血清发生交叉反应的 11条蛋白条带相对分子质量 (Mr)为 13 0 0 0 0、10 0 0 0 0、940 0 0、80 0 0 0、75 0 0 0、660 0 0、62 0 0 0、5 2 0 0 0、3 80 0 0、3 2 0 0 0及 2 40 0 0 ;与CE患者血清有特异性反应的 5条蛋白条带Mr为 410 0 0、40 0 0 0、2 2 0 0 0、160 0 0和12 0 0 0 ;与AE患者血清具有特异性反应的 8条蛋白条带Mr为 12 0 0 0 0、10 90 0 0、860 0 0、5 90 0 0、43 0 0 0、2 80 0 0、2 0 0 0 0及 180 0 0。　结论　确定了Eg和Em共有的交叉反应性抗原和具有进一步研究价值的特异性抗原组分。

关键词：棘球蚴抗原蛋白质印迹试验免疫诊断血清反应

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斑点—ELISA法诊断华枝睾吸虫病

中华传染病杂志 1989年第1期7卷 32-34页

作者：裘丽姝薛海筹中国预防医学科学院寄生虫病研究所

以华枝睾吸虫成虫抗原进行斑点-ELISA试验。检测30例华枝睾吸虫病患者血清，1:80稀释时阳性率达96.7%。45名正常人血清中未出现假阳性反应。10例囊虫病、21例慢性血吸虫病和10例包虫病患者血清的交叉反应阳性率依次为0、4.8%和0，而6例... 详细信息

以华枝睾吸虫成虫抗原进行斑点-ELISA试验。检测30例华枝睾吸虫病患者血清，1:80稀释时阳性率达96.7%。45名正常人血清中未出现假阳性反应。10例囊虫病、21例慢性血吸虫病和10例包虫病患者血清的交叉反应阳性率依次为0、4.8%和0，而6例肺吸虫病患者中有2例出现阳性反应。此外还用EITB法对枝睾吸虫抗原进行了分析，为进一步纯化抗原减少交叉反应提供参考。

关键词：华支睾吸虫病斑点 ELISA

DNA探针用于鉴别细粒棘球绦虫与多房棘球绦虫的研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1993年第3期11卷 198-200页

作者：陈伟薛海筹裘丽姝诸陈文中国预防医学科学院寄生虫病研究所上海200025

用DNA探针pHD5、pEG18、pSM889 对我国细粒棘球蚴与多房棘球蚴通过限制性内切酶 BamHI与 EcoRI 酶解后用 Southern 转移杂交法进行了虫种鉴别。该方法敏感、特异,尤其对在光镜下无法区分的标本更具有鉴别的优越性。它能够用于包虫病流... 详细信息

用DNA探针pHD5、pEG18、pSM889 对我国细粒棘球蚴与多房棘球蚴通过限制性内切酶 BamHI与 EcoRI 酶解后用 Southern 转移杂交法进行了虫种鉴别。该方法敏感、特异,尤其对在光镜下无法区分的标本更具有鉴别的优越性。它能够用于包虫病流行病学基线调查及监测,为包虫病的防治提供准确的依据。

关键词：包虫病虫科鉴别 DNA探针

我国与日本山梨不同地域品系日本血吸虫DNA的限制性片段长度多态性分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1997年第4期15卷 216-219页

作者：谢觅何毅勋裘丽姝陈伟中国预防医学科学院寄生虫病研究所上海200025

目的 :为了进一步了解中国各地日本血吸虫的特性 ,将其与日本山梨的日本血吸虫进行了虫体 DNA限制性片段长度多态性 ( RFLP)的分析和比较。方法 :以 p SM889为探针 ,与我国云南、四川、广西、湖北、湖南、江西、安徽、台湾和日本山梨的... 详细信息

目的 :为了进一步了解中国各地日本血吸虫的特性 ,将其与日本山梨的日本血吸虫进行了虫体 DNA限制性片段长度多态性 ( RFLP)的分析和比较。方法 :以 p SM889为探针 ,与我国云南、四川、广西、湖北、湖南、江西、安徽、台湾和日本山梨的日本血吸虫雄虫 DNA进行杂交。结果 :经限制性内切酶 Eco RI酶切的我国 7地日本血吸虫 DNA与探针杂交的图谱显示弱杂交带数目呈现差异 ,而其 4条强杂交带数目则相同。但是 ,台湾及日本山梨的日本血吸虫 DNA杂交图谱不仅弱杂交带数目呈现差异 ,而且强杂交带数目亦有不同 ;前者的强杂交带数目为 3条 ,后者则为 5条。结论 :我国与日本山梨不同地区的日本血吸虫核基因组存在着遗传变异 ,台湾省的日本血吸虫的遗传变异程度远较其他省份的更为显著。

关键词：日本血吸虫品系 DNA杂交 RFLP分析

多房棘球蚴病特异性诊断抗原Em18的基因克隆、表达和血清学评价

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2004年第4期22卷 193-198页

作者：江莉冯正薛海筹许学年裘丽姝中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所

目的　克隆从我国四川省分离的多房棘球绦虫Em18抗原基因片段 ,表达重组抗原 ,用于多房棘球蚴病(AE)的诊断 ,并用患者血清对其诊断价值进行评价。　方法　PCR扩增目的基因片段与质粒载体 pET2 8a (+ )连接构建表达质粒 ,转化大肠埃希菌B... 详细信息

目的　克隆从我国四川省分离的多房棘球绦虫Em18抗原基因片段 ,表达重组抗原 ,用于多房棘球蚴病(AE)的诊断 ,并用患者血清对其诊断价值进行评价。　方法　PCR扩增目的基因片段与质粒载体 pET2 8a (+ )连接构建表达质粒 ,转化大肠埃希菌BL2 1(DE3 )菌株表达重组蛋白 ,用镍次氮基三乙酸琼脂糖树脂 (NI NTAagarose)亲和层析纯化重组抗原 ,酶联免疫吸附测定 (ELISA)评价重组抗原的血清学诊断效果。　结果　获得两个高效表达克隆ReEm18 1和ReEm 18 2。其中ReEm18 1与预期序列一致 ,ReEm18 2为同一序列 ,但有 2 7bp的核苷酸缺失。两个克隆表达的融合蛋白相对分子质量 (Mr)分别为 2 80 0 0和 2 60 0 0。对 10 1例AE、 47例细粒棘球蚴病、3 0例囊尾蚴病、 10例肝癌、 9例血吸虫病和 40名健康人共 2 3 7份血清进行ELISA检测 ,结果显示 ,ReEm18 1和ReEm 18 2重组抗原对AE血清诊断的敏感性为 86 1%和 90 1%、特异性为 93 4%和 94 1%、阳性预期值为 90 6%和 91 9%、阴性预期值为 90 1%和 92 8%、诊断效率分别为 90 3 %和 92 4% ;对 5 8例AE患者肝脏病灶大小与重组抗原检测血清平均吸光度 (A )的相关性比较分析结果表明 ,抗体反应水平在病程早期有较好的相关性。

关键词：重组抗原特异性诊断抗原表达血清棘球蚴病患者病程性比基因克隆 ELISA检测

微量麻风分枝杆菌明胶凝集试验在黑热病中的交叉反应

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 1990年第2期8卷 61-62页

作者：瞿靖琦裘丽姝陶义训中国预防医学科学院寄生虫病研究所上海医学化验所世界卫生组织疟疾、血吸虫病及丝虫病合作中心

在应用微量酶标记免疫吸附试验(ELISA)检测黑热病患者血清时,杜氏利什曼原虫可溶性抗原与麻风病患者抗体具有25％的交叉反应。为观察麻风分枝杆菌三糖抗原对黑热病患者抗体的反应情况,进行了下列观察。材料和方法 1 检测血样的收集黑... 详细信息

在应用微量酶标记免疫吸附试验(ELISA)检测黑热病患者血清时,杜氏利什曼原虫可溶性抗原与麻风病患者抗体具有25％的交叉反应。为观察麻风分枝杆菌三糖抗原对黑热病患者抗体的反应情况,进行了下列观察。材料和方法 1 检测血样的收集黑热病患者和日本血吸虫病患者均为病原检出阳性者。麻风病和结核病患者为临床及细菌学诊断确诊者。血清标本如有沉淀出现,均离心后再使用。 2 麻风分枝杆菌明胶凝集试剂盒(MLPA)为日本Fujirebio公司生产,世界卫生组织赠送。 3 实验操作试剂盒包括:3.1液体试剂为恢复液及血清稀释液;3.2冻干试剂为麻风分枝杆菌三糖抗原致敏的明胶颗粒、对照明胶颗粒及阳性对

关键词：黑热病糖抗原抗体明胶分散剂麻风分枝杆菌交叉反应抗原-抗体反应

多克隆与单克隆抗体夹心ELISA法检测日本血吸虫病患者血清循环抗原

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2000年第2期18卷 92-93页

作者：裘丽姝冯正张永红李浩中国预防医学科学院寄生虫病研究所上海200025

[目的 ]检测血吸虫病患者的循环抗原。 [方法 ]用多抗与单抗夹心 EL ISA法检测日本血吸虫病患者血清循环抗原。 [结果 ]用于检测 15 0例血吸虫病患者的循环抗原 ,其敏感性平均为 84.7% (72 .0 %～ 91.0 % ) ,40例正常人未出现假阳性反应... 详细信息

[目的 ]检测血吸虫病患者的循环抗原。 [方法 ]用多抗与单抗夹心 EL ISA法检测日本血吸虫病患者血清循环抗原。 [结果 ]用于检测 15 0例血吸虫病患者的循环抗原 ,其敏感性平均为 84.7% (72 .0 %～ 91.0 % ) ,40例正常人未出现假阳性反应 ,74例其他寄生虫感染者中 ,有 2例并殖吸虫病患者阳性 ,其余均未出现交叉反应。 [结论 ]多抗与单抗夹心 EL ISA法是一种较为理想的循环抗原检测方法。

关键词：日本血吸虫病循环抗原检测夹心法ELISA

检测日本血吸虫病患者循环抗原及免疫复合物的初步观察

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中国医学科学院学报 1981年第3期3卷 207-208页

作者：裘丽姝张永红朱震霞中国医学科学院寄生虫病研究所中国医学科学院寄生虫病研究所上海

检出循环抗原可作为日本血吸虫活动性感染的指标,且有助于考核疗效。1972年我们还发现日本血吸虫循环抗原在实验动物体内常以抗原抗体复合物形式存在,不经处理的常规方法不易检出。本文报告应用对流免疫电泳法对实验感染动物和确诊患者... 详细信息

检出循环抗原可作为日本血吸虫活动性感染的指标,且有助于考核疗效。1972年我们还发现日本血吸虫循环抗原在实验动物体内常以抗原抗体复合物形式存在,不经处理的常规方法不易检出。本文报告应用对流免疫电泳法对实验感染动物和确诊患者血清中循环抗原及免疫复合物检测的初步结果。

关键词：循环抗原日本血吸虫动物检出免疫复合物对流电泳患者