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福建猕猴桃细菌性枯萎病的病原菌鉴定

中国农业科技导报 2024年第4期26卷 144-152页

作者：季梦婷陈长江罗流河林志坚詹梦琳杨丙烨胡方平蔡学清福建农林大学植物保护学院福州350002 福建农林大学计算机与信息学院福州350002

为明确近年来在福建省宁德市蕉城区石后乡猕猴桃苗圃新发生的一种细菌性病害病的原菌,并进一步探讨其发生流行规律,采用稀释分离法对采集病株进行病原菌的分离和纯化,对获得的细菌菌株进行致病性测定,通过柯赫氏法则验证、常规的细菌生... 详细信息

为明确近年来在福建省宁德市蕉城区石后乡猕猴桃苗圃新发生的一种细菌性病害病的原菌,并进一步探讨其发生流行规律,采用稀释分离法对采集病株进行病原菌的分离和纯化,对获得的细菌菌株进行致病性测定,通过柯赫氏法则验证、常规的细菌生物学特性、生理生化反应、Biolog鉴定、16S rDNA和内切葡聚糖酶基因(egl)序列分析对病原菌进行分类鉴定。结果表明,从发病猕猴桃病株上获得9株细菌菌株,将其接种在健康的猕猴桃植株后,其发病症状与田间自然发病症状基本一致,且从接种后病株的茎秆和根部又重新分离到与原菌落形态相同的细菌。柯赫氏法则证实这9株细菌菌株为猕猴桃细菌性枯萎病的致病菌。这9株菌株在NA培养基上的菌落形态一致,均呈不规则型、扁平,并逐渐向四周扩散,不产生粘稠状物质,不会使培养基变色;在TTC培养基上,菌落颜色呈暗红色,产生可扩散至培养基中的红褐色色素,其流动性较差;在YDC培养基上,菌落呈乳白色。经综合分析,这9株细菌菌株均被鉴定为假茄科雷尔氏菌(Ralstonia pseudosolanacearum),生化型Ⅲ和演化型Ⅰ(亚洲组),序列变种14。这是首例青枯菌侵染猕猴桃的报道。以上研究结果为制定猕猴桃细菌性枯萎病精准有效的综合防控提供了理论依据。

关键词：猕猴桃细菌性枯萎病病原菌鉴定生理生化测定假茄科雷尔氏菌 16S rDNA

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内生枯草芽孢杆菌BS-2（Bacillus subtilis）在植物体内的定殖及促生作用

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内生枯草芽孢杆菌BS-2（Bacillus subtilis）在植物体内的定殖及...

作者：蔡学清福建农林大学

学位级别：硕士

以抗利福平(300μg/ml)和拮抗病原真菌双抗性为标记,测定枯草芽孢杆菌BS-2(Bacillus subtilis)菌株在辣椒、白菜和水稻体内的内生定殖,结果表明:通过浸种、灌根和涂抹叶片等方法接种,该菌株均可在辣椒和白菜体内定殖,通过浸种处理也可... 详细信息

以抗利福平(300μg/ml)和拮抗病原真菌双抗性为标记,测定枯草芽孢杆菌BS-2(Bacillus subtilis)菌株在辣椒、白菜和水稻体内的内生定殖,结果表明:通过浸种、灌根和涂抹叶片等方法接种,该菌株均可在辣椒和白菜体内定殖,通过浸种处理也可在水稻体内定殖。用浓度为5×10cfu/ml的菌液浸泡辣椒种子24h,出苗后可从辣椒体内分离到大量目标细菌,而同样方法浸泡白菜和水稻种子,在白菜和水稻体内却分离不到目标细菌。此外,如果用菌液浓度为5×10-10cfu/ml浸种,从辣椒苗中分离到的菌量则比白菜和水稻多。采用浸种、灌根和涂抹叶片等方法室内测定该菌株在辣椒体内和田间测定在白菜体内的定殖动态,结果表明,三种方法接种后,该菌株均可主动进入辣椒和白菜体内定殖,同时迅速向接种点上部的未接种组织器官转移传导,并可在辣椒和白菜体内长期定殖,其中以涂抹接种进入植物体内的菌量最多。促生效果研究表明,无论是浸种、涂抹或浇灌土壤接种均对小白菜和辣椒表现出明显的促生作用,其中以涂抹接种效果最好,小白菜和辣椒鲜重分别比对照增加151.20%、168.70%,干重分别增加182.30%、181.25%;再者该菌的菌体或外分泌物均可促进小白菜(福州山西白)和水稻(佳早6号和汕优63)的生长,其中菌体处理小白菜和水稻的鲜重分别比对照增加82.75%、60.34%、14.08%,分泌物处理的鲜重分别增加了50.46%、28.51%、25.67%;菌体处理小白菜和水稻的干重分别比对照增加82.58%、37.71%、33.90%,分泌物处理的干重分别增加了70.24%、13.63%、32.94%:用浓度为5×10-10cfu/ml的BS-2菌液浸泡小白菜和水稻种子,均表现出明显的促生作用。促生机制研究结果表明:(1) BS-2菌株能够进入植物体内定殖并传导,该菌在植物体内定殖量的多少与其促生作用呈正相关;(2) BS-2菌株对小白菜和水稻苗起促生作用的并不单单是菌体或其外分泌物,而是这两者之间共同起作用的结果;(3) 能提高作物体内的叶绿素含量;(4) 能提高作物光合作用,研究中发现经内生菌处理后作物体内光合速率、气孔导度和蒸腾速率比对照高;(5) 能诱导寄主植物体内内源激素的变化,研究表明经BS-2菌株处理后的辣椒苗在出芽后10d体内的生长素(IAA)与赤霉素(GA)分别比对照高出33.50%和70.42%,而脱落酸(ABA)却一直比对照低,在其出芽后15d表现最明显,其比对照低60.60%;(6) 能增强植株体内的保护酶活性,从而

关键词：辣椒内生枯草芽孢杆菌定殖促生作用促生机制

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花生疮痂病的研究进展

花生科技 2000年第2期29卷 12-13页

作者：蔡学清胡方平福建农业大学植保系福建福州350002

综述了花生疮痂病 (SphacelomaarachidisBitaucourtetjexkins)国内外的研究进展概况 ,包括病害发生为害 ,病原菌的生物学特性 (病原菌的寄主范围、形态特征、传播途径以及培养基种类、菌落的形态特征等 )以及病害的防治措施。

关键词：花生疮痂病病原菌生物学特性防治

辣椒内生枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BS-2和BS-1防治辣椒炭疽病研究

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植物病理学报 2003年第2期33卷 170-173页

作者：何红蔡学清关雄胡方平福建农林大学植保学院

辣椒内生枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BS-莉和BS-1,对胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)引起的辣椒苗和果炭疽病有良好的防治效果,菌株培养液对苗炭疽病的防效分别为81.5％～93.3％和66.1％～79.2％;对果炭疽病的防效分别... 详细信息

辣椒内生枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BS-莉和BS-1,对胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)引起的辣椒苗和果炭疽病有良好的防治效果,菌株培养液对苗炭疽病的防效分别为81.5％～93.3％和66.1％～79.2％;对果炭疽病的防效分别为80.0％～100％和60.0％～100％,喷施菌株培养液后间隔24h以上接种病原菌的防病效果比两者同时接种的高。菌株外分泌物对病菌菌丝生长、分生孢子产生和萌发及附着胞形成均有明显的抑制作用。菌株菌体及其胞外分泌物均有防病作用,菌体可能起主导作用。另外,2菌株培养液浸种,对辣椒还有明显的促生效果。BS-2菌株的防病和促生效果均比BS-1高。

关键词：辣椒枯草芽孢杆菌胶孢炭疽菌防治效果菌株培养液接种病原菌

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内生菌BS-2菌株的抗菌蛋白及其防病作用

植物病理学报 2003年第4期33卷 373-378页

作者：何红蔡学清关雄胡方平谢联辉福建农林大学植保学院

BS 2菌株为一株能在多种植物体内定殖 ,对多种植物炭疽病具有良好防治效果 ,并对植物生长具有良好促进作用的枯草芽孢杆菌 ,其BPY培养液经 30 %～ 70 %硫酸铵盐析、高温 (10 0℃ )处理后 ,以SDS PAGE、MALDI TOF检测 ,该菌株分泌的抗菌... 详细信息

BS 2菌株为一株能在多种植物体内定殖 ,对多种植物炭疽病具有良好防治效果 ,并对植物生长具有良好促进作用的枯草芽孢杆菌 ,其BPY培养液经 30 %～ 70 %硫酸铵盐析、高温 (10 0℃ )处理后 ,以SDS PAGE、MALDI TOF检测 ,该菌株分泌的抗菌蛋白为分子量≤ 2 884 .39D的多肽 ;该抗菌多肽对热稳定并抗紫外线照射 ,对植物炭疽病菌和番茄青枯病菌等多种植物病原真菌和细菌有强烈的抑制作用 ,并对辣椒果炭疽病具有 6 9.79% (9d后 )的防病效果 ;抑制病菌生长 ,引起菌丝 (或芽管 )细胞消融 ,导致菌丝畸形以及抑制病菌分生孢子的产生和萌发等可能是该抗菌多肽主要的防病机制。

关键词：内生菌 BS-2菌株抗菌蛋白防病作用定殖防治效果植物病害枯草芽孢杆菌 BPY培养液

双抗标记法测定枯草芽孢杆菌BS-2和BS-1在辣椒体内的定殖动态

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福建农林大学学报（自然科学版） 2003年第1期32卷 41-45页

作者：蔡学清何红胡方平福建农林大学植物保护学院福建福州350002

利福平抗性和抗病原真菌标记测定结果表明,分离自辣椒的2株枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)菌株BS-2和BS-1经浸种、涂抹、浇灌土壤等接种处理均能进入辣椒植株体内.涂抹接种1-5d后,接种上部叶中的菌量逐渐上升;浇灌土壤接种,在1-15d内... 详细信息

利福平抗性和抗病原真菌标记测定结果表明,分离自辣椒的2株枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)菌株BS-2和BS-1经浸种、涂抹、浇灌土壤等接种处理均能进入辣椒植株体内.涂抹接种1-5d后,接种上部叶中的菌量逐渐上升;浇灌土壤接种,在1-15d内植株体内菌量逐渐上升;浸种接种,植株从子叶出现到第1片真叶刚展开时,植株茎和叶中的菌量逐渐上升,之后下降.说明两菌株为辣椒的内生定殖细菌,且可在辣椒体内繁殖和传导.

关键词：双抗标记法枯草芽孢杆菌辣椒内生细菌定殖传导生物防治植物病害

辣椒内生菌BS-2在白菜体内的定殖、促生和防炭疽病作用

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植物保护学报 2004年第4期31卷 347-352页

作者：何红蔡学清兰成忠关雄胡方平福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室

辣椒体内的枯草芽孢杆菌BS-2菌株在白菜体内定殖、促生和防病作用表明:①用抗利福平标记BS-2r株浸种、浇灌土壤和涂抹叶片等方法接种,菌株均能进入白菜体内,并可在其全生育期内定殖;②菌液浸种24h后播种20天,其苗的鲜重比清水对照增加了... 详细信息

辣椒体内的枯草芽孢杆菌BS-2菌株在白菜体内定殖、促生和防病作用表明:①用抗利福平标记BS-2r株浸种、浇灌土壤和涂抹叶片等方法接种,菌株均能进入白菜体内,并可在其全生育期内定殖;②菌液浸种24h后播种20天,其苗的鲜重比清水对照增加了91.20%～138.04%;③菌株对白菜炭疽病有较好的防治效果,但对不同时间接种病原菌的防治效果有所不同,以叶表面喷雾接种菌液后,立即接种病原菌的防效最好,其第3天和第6天的防效分别达95.12%和46.71%;而对接种菌液之前已接种病原菌的处理无防病效果.④菌株胞外分泌物对炭疽病菌菌丝生长、分生孢子产生与萌发均有很强的抑制作用.由此可见,来自辣椒体内的枯草芽孢杆菌BS-2 菌株不仅可在白菜体内定殖传导,而且对白菜有明显的促生作用,同时对炭疽病还有良好的防治作用.

关键词：白菜定殖辣椒接种菌株浸种促生枯草芽孢杆菌内生菌萌发

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辣椒内生细菌的分离及拮抗菌的筛选

中国生物防治 2002年第4期18卷 171-175页

作者：何红蔡学清洪永聪关雄胡方平福建农林大学植保学院福州350002

对健康辣椒植株体内的内生细菌及拮抗菌进行了分离筛选。结果表明 ,不同品种、部位及种植地 ,内生细菌的数量有所不同 ,品种间内生细菌的数量变化为 2 83× 1 0 3 ～ 1 346×1 0 4cfu/g(FW) ;各品种以叶片中内生细菌的数量最多 ,其次... 详细信息

对健康辣椒植株体内的内生细菌及拮抗菌进行了分离筛选。结果表明 ,不同品种、部位及种植地 ,内生细菌的数量有所不同 ,品种间内生细菌的数量变化为 2 83× 1 0 3 ～ 1 346×1 0 4cfu/g(FW) ;各品种以叶片中内生细菌的数量最多 ,其次为根 ,再次为茎 ,果最少 ;不同种植地中 ,前作为水稻田种植辣椒叶片中内生细菌的数量比旱地种植的多 ,而根、茎、果中内生细菌的数量正相反。拮抗、防病测定表明 ,1 0 8株辣椒内生细菌中 ,有 2 8 7%的菌株对香蕉枯萎菌和黄瓜枯萎菌有拮抗作用 ;来自辣椒叶片和茎杆内的BS 2和BS 1两菌株 ,对 1 3种植物病原真菌有较强和稳定的拮抗作用 ,其中对辣椒炭疽病有 57 34%～ 94 0 8%的防病效果 ,并可以在辣椒体内定殖。经鉴定该两菌株为枯草芽孢杆菌。

关键词：分离辣椒内生细菌鉴定拮抗菌筛选

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花生品种(系)对青枯菌的抗性鉴定

福建农林大学学报（自然科学版） 2002年第2期31卷 174-176页

作者：袁宗胜胡方平洪永聪蔡学清福建农林大学植物保护学院福建福州350002

在大田中用菌液浸种法对 1 0 8个花生品种 (系 )对福建地区青枯病菌的抗性进行鉴定 .结果表明 :供试花生品种 (系 )中没有高抗品种 (系 ) ;中抗品种 (系 )有金花 1 0 1 2、泉花 1 0号、泉花 646、粤油 1 93、3 8F5-45 -2 1 -CS1 等 3 0... 详细信息

在大田中用菌液浸种法对 1 0 8个花生品种 (系 )对福建地区青枯病菌的抗性进行鉴定 .结果表明 :供试花生品种 (系 )中没有高抗品种 (系 ) ;中抗品种 (系 )有金花 1 0 1 2、泉花 1 0号、泉花 646、粤油 1 93、3 8F5-45 -2 1 -CS1 等 3 0个 ,占全部供试品种的 2 7.78% ;其余均为感病品种 (系 ) ,占 72 .2 2 % .花生不同品种 (系 )

关键词：花生品种青枯菌抗性鉴定抗病育种