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腹透液标本检出1株吉氏玫瑰单胞菌

临床检验杂志 2012年第6期30卷 479-479页

作者：蓝锴屈平华邹川张伟铮庞雪云唐小龙张文广东省中医院检验科广州510120 广东省中医院大学城分院检验科广州510006 广东省中医院肾内科广州510120

1病历摘要患者,女,67岁,2009年诊断为糖尿病肾病（V期）,2011年初行腹膜透析置管术,开始维持性腹膜透析治疗。3 d前出现腹痛腹泻,于我院门诊就诊,予＂气滞胃痛胶囊＂、＂固肠止泻丸＂治疗后腹泻得到控制,但腹痛未缓解,伴头晕不适,后收... 详细信息

1病历摘要患者,女,67岁,2009年诊断为糖尿病肾病（V期）,2011年初行腹膜透析置管术,开始维持性腹膜透析治疗。3 d前出现腹痛腹泻,于我院门诊就诊,予＂气滞胃痛胶囊＂、＂固肠止泻丸＂治疗后腹泻得到控制,但腹痛未缓解,伴头晕不适,后收入我院肾内科。入院时患者贫血貌,脐周压痛（＋）,反跳痛（＋）,双侧肾区扣击痛（-）,双侧肋脊点、肋腰点无压痛,双侧输尿管行经区无压痛,

关键词：腹透液玫瑰单胞菌 16S rRNA测序

MALDI-TOF-MS技术快速鉴定临床酵母样真菌的应用评价

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检验医学与临床 2015年第18期12卷 2659-2660,2663页

作者：梁铮柏彩英罗娅莎张文蓝锴李苗苗周强广州中医药大学第二临床医学院广州510120 广东省妇幼保健院检验科广州510010 广东医学院广州523808

目的评价基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)在快速鉴定临床分离的酵母样真菌中的应用价值。方法收集临床分离的酵母样真菌135株,分别用VITEK MS、API20C和CHROMargar显色培养同时进行鉴定与比较,χ2检验分析VITEK MS和AP... 详细信息

目的评价基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)在快速鉴定临床分离的酵母样真菌中的应用价值。方法收集临床分离的酵母样真菌135株,分别用VITEK MS、API20C和CHROMargar显色培养同时进行鉴定与比较,χ2检验分析VITEK MS和API及显色培养基鉴定结果的准确率,以真菌内转录间隔区(ITS)基因测序作为鉴定结果的金标准,同时比较各种方法在临床使用中的优缺点。结果 VITEK MS、API20C和显色培养基鉴定的准确率分别为98.5%(133/135)、78.5%(106/135)、59.3%(80/135),经χ2检验分析,差异有统计学意义(χ2=51.996,P<0.05)。结论 MALDI-TOF-MS可将酵母样真菌快速、准确地鉴定到种。

关键词：酵母样真菌 MALDI-TOF-MS质谱分析 ITS基因测序

VITEK2筛选鲍曼不动杆菌产头孢菌素酶可靠性评价

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国际检验医学杂志 2011年第14期32卷 1533-1534,1537页

作者：蓝锴邓光远何敏林海标张文庞雪云唐小龙广东省中医院检验科广州510120

目的验证和评价VITEK2高级专家系统（AES）判定鲍曼不动杆菌产头孢菌素酶AmpC的可靠性。方法首先收集2009年l～8月经VITEK2的AES判定为产AmpC酶鲍曼不动杆菌，用AmpC纸片法进行确证试验，最后用聚合酶链反应验证阳性株是否存在AmpC基因... 详细信息

目的验证和评价VITEK2高级专家系统（AES）判定鲍曼不动杆菌产头孢菌素酶AmpC的可靠性。方法首先收集2009年l～8月经VITEK2的AES判定为产AmpC酶鲍曼不动杆菌，用AmpC纸片法进行确证试验，最后用聚合酶链反应验证阳性株是否存在AmpC基因。结果15株AES判断为产AmpC酶的菌株，经AmpC纸片法确证试验为阳性，其中12株阳性产酶株可以检测到AmpC基因。132株AES判断为不产AmpC酶的菌株中，经AmpC纸片法验证均为阴性。结论VITEK2AES可以很好地预测鲍曼不动杆菌产AmpC酶情况，有助于快速、准确地检测鲍曼不动杆菌这一相关耐药机制，为临床治疗多重耐药鲍曼不动杆菌提供更有力的支持。

关键词：鲍氏不动杆菌头孢菌素酶耐药机制

2018—2020年多中心下呼吸道标本分离菌分布及耐药性分析

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中国抗生素杂志 2021年第11期46卷 1014-1018页

作者：冀旭峰王晓明蓝锴季萍刘平娟贾伟单斌刘家云喻华谢小芳鲍春梅耿荣华吉林大学第一医院长春130000 广东省中医院广州510120 新疆医科大学第一附属医院乌鲁木齐830054 中山大学附属第一医院广州510080 宁夏医科大学总医院银川750004 昆明医科大学第一附属医院昆明650032 空军军医大学第一附属医院西安710032 四川省人民医院成都610072 苏州大学附属第二医院苏州215004 解放军总医院第五医学中心北京100039 航空总医院北京100012

目的分析中国11家三级医院2018—2020年下呼吸道标本分离细菌分布及耐药性。方法采用纸片扩散法、E-test法、仪器法进行药敏试验,使用WHONET5.6软件,按照CLSI M100-S30标准进行统计分析。结果2018—2020年11家医院共分离细菌75553株(剔... 详细信息

目的分析中国11家三级医院2018—2020年下呼吸道标本分离细菌分布及耐药性。方法采用纸片扩散法、E-test法、仪器法进行药敏试验,使用WHONET5.6软件,按照CLSI M100-S30标准进行统计分析。结果2018—2020年11家医院共分离细菌75553株(剔除同一患者重复株),其中革兰阳性菌占11.5%,革兰阴性菌占88.5%。前4位细菌依次是肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌。下呼吸道标本中MRSA检出率为38.9%,未发现对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺及替加环素耐药的金黄色葡萄球菌。PRSP、PISP的检出率分别为0.7%和2.9%。肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率超过12%,而大肠埃希菌、阴沟肠杆菌和黏质沙雷菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率均低于6%。鲍曼不动杆菌对亚胺培南、美罗培南的耐药率分别为68.1%和72.3%。铜绿假单胞菌对亚胺培南、美罗培南的耐药率分别为24.1%和20.9%。结论下呼吸道标本分离细菌以革兰阴性杆菌为主,各病原菌耐药有其特点,实验室应定期统计分析,为合理使用抗菌药物提供依据。

关键词：下呼吸道感染细菌耐药分析

黄芩素对朊蛋白PrP106-126片段引起的神经毒性保护作用研究

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中国医药导报 2019年第34期16卷 7-10,I0002页

作者：秦笙彭健愉柏彩英郑水兰蓝锴曹楠楠程招敏周强广东省中医院检验科广东广州510120 广东省妇幼保健院检验科广东广州511400 广州惠广林科技有限公司广东广州510032

目的利用PrP106-126多肽感染的SH-SY5Y细胞,探究黄芩素对PrP106-126引起的神经毒性保护作用及其机制。方法将SH-SY5Y细胞按照不同的处理分成细胞对照组、药物对照组、PrP106-126对照组、PrPScr对照组、黄芩素作用组。采用细胞病变法及MT... 详细信息

目的利用PrP106-126多肽感染的SH-SY5Y细胞,探究黄芩素对PrP106-126引起的神经毒性保护作用及其机制。方法将SH-SY5Y细胞按照不同的处理分成细胞对照组、药物对照组、PrP106-126对照组、PrPScr对照组、黄芩素作用组。采用细胞病变法及MTT法检测PrP106-126对SH-SY5Y细胞形态和活性的影响,采用MTT法检测黄芩素抑制PrP106-126多肽神经毒性的药效,TUNEL法检测黄芩素对PrP106-126多肽所致细胞凋亡的影响。结果与细胞对照组比较,PrP106-126感染的SH-SY5Y细胞形态明显不同,可见细胞折光性变强,细胞聚集呈破碎样。与PrPScr对照组比较,PrP106-126感染的细胞抑制率显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与PrP106-126对照组比较,在治疗模式和预防模式中黄芩素作用组细胞增殖率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与细胞对照组比较,PrP106-126对照组的细胞凋亡指数(AI)明显升高(P<0.01);与PrP106-126对照组比较,黄芩素作用组的细胞AI明显降低(P<0.05)。结论黄芩素在体外对朊病毒具有治疗和预防作用,其作用机制可能与细胞凋亡有关。

关键词： PrP106-126 黄芩素 SH-SY5Y 神经保护

耐碳青霉烯类大肠埃希菌对替加环素异质性耐药的机制

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分子诊断与治疗杂志 2021年第2期13卷 178-182页

作者：刘宇阳蓝锴熊蕊鲁洋蔡依玫向国秀陈茶黄彬中山大学附属第一医院检验科广东广州510080 广州中医药大学第二附属医院检验科广东广州510120

目的研究耐碳青霉烯类大肠埃希菌(CREC)对替加环素异质性耐药的分子机制,为临床治疗和合理应用抗生素提供依据。方法收集2017年1月至2019年3月间多中心分离的CREC,用改良E-test法和菌群谱型分析微量滴定法(MPAP)初筛,群体谱分析法(PAP)... 详细信息

目的研究耐碳青霉烯类大肠埃希菌(CREC)对替加环素异质性耐药的分子机制,为临床治疗和合理应用抗生素提供依据。方法收集2017年1月至2019年3月间多中心分离的CREC,用改良E-test法和菌群谱型分析微量滴定法(MPAP)初筛,群体谱分析法(PAP)确认CREC对替加环素的异质性耐药情况,并用荧光定量RT-qPCR分析外排泵相关基因、外排泵调节基因和膜孔蛋白基因的表达。结果改良E-test法和MPAP法筛查CREC对替加环素异质性耐药(CREC-TGC-HR)的阳性率分别为25.0%(14/56)和39.3%(22/56)。经PAP法确认,有37.5%(21/56)为阳性。改良E-test法的CREC-TGC-HR检出率低于PAP法,差异有统计学意义(P0.05)。与CREC-TGC-HR原始菌株相比,耐药亚群外排泵基因acrA、acrB表达分别上调1.79倍、5.01倍;其相关调控基因marA、marB表达分别上调5.38和2.18倍;膜孔蛋白基因ompC表达下调2.35倍,差异均有统计学意义(P0.05)。结论首次报道CREC对替加环素异质性耐药,且异质性耐药率较高,需要采用有效的方法检测CREC-TGC-HR,为临床治疗和合理应用抗生素提供依据。

关键词：耐碳青霉烯类大肠埃希菌 RND外排泵异质性耐药替加环素

中药对多重耐药铜绿假单胞菌外排泵的作用研究

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分子诊断与治疗杂志 2017年第6期9卷 401-407页

作者：王淋荆曾建明鲁洋蓝锴罗强林冬玲张伟铮陈茶广东省中医院检验医学部广东广州510006 广州中医药大学第二临床医学院广东广州510006

目的研究中药与常用抗生素的相互作用和对多重耐药铜绿假单胞菌(multi drug resistant Pseudomonas aeruginosa,MDR-PA)外排泵的作用。方法采用外排泵抑制剂联合纸片扩散法(Kirby-Bauer,K-B)筛选外排泵阳性MDR-PA,并用实时荧光定量PCR(r... 详细信息

目的研究中药与常用抗生素的相互作用和对多重耐药铜绿假单胞菌(multi drug resistant Pseudomonas aeruginosa,MDR-PA)外排泵的作用。方法采用外排泵抑制剂联合纸片扩散法(Kirby-Bauer,K-B)筛选外排泵阳性MDR-PA,并用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,q PCR)确认外排泵基因高表达菌株。检测10种常用中药对抗生素的作用和对外排泵阳性MDR-PA外排泵基因表达的影响。结果从34株MDR-PA中筛选到5株外排泵阳性菌,q PCR法检测到这5株菌外排泵基因的表达水平是野生型铜绿假单胞菌PAOl的2倍或2倍以上(P<0.05)。黄芩、金银花和夏枯草对环丙沙星有较强的拮抗作用,穿心莲和五倍子对庆大霉素的拮抗作用最强,穿心莲和夏枯草对美罗培南的协同作用最强。穿心莲、金银花、夏枯草和五倍子具有促进外排泵基因表达的作用。结论中药穿心莲、金银花、夏枯草和五倍子可通过促进外排泵基因的表达拮抗抗生素的抗菌作用,临床抗感染治疗时需谨慎使用。

关键词：铜绿假单胞菌多重耐药外排泵穿心莲金银花夏枯草五倍子

基于细菌16SrRNA基因的PCR扩增与测序分析在临床不常见菌鉴定中的应用

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中华检验医学杂志 2012年第7期35卷 612-619页

作者：陈茶屈平华顾全黄彬张伟铮穆小萍张磊陈默蕊王露霞鄂顺梅叶金艳唐小龙蓝锴罗强戴小波袁慧广东省中医院检验医学部 510006 中山大学公共卫生学院卫生检验检疫专业中山大学附属第一医院检验医学部广东省妇幼保健院检验科广州金域医学检验中心有限公司微生物室潮州市中心医院检验科广州军区广州总医院检验科嘉兴市妇幼保健院检验科广州中医药大学医学检验系

目的探讨细菌16SrRNA基因的广谱PCR扩增与测序分析在临床分离的少见病原菌的鉴定及分类中的价值。方法收集2010年12月至2011年9月来自7家不同医院和机构，常规方法难以鉴定或具有特殊表型的少见菌48株，以及仪器法连续监测报警阳性、但... 详细信息

目的探讨细菌16SrRNA基因的广谱PCR扩增与测序分析在临床分离的少见病原菌的鉴定及分类中的价值。方法收集2010年12月至2011年9月来自7家不同医院和机构，常规方法难以鉴定或具有特殊表型的少见菌48株，以及仪器法连续监测报警阳性、但二次传代无细菌生长的液体增菌培养瓶7个，采用细菌16S核糖体核糖核酸（rRNA）基因MicroSeq500试剂盒、通用引物27f-1492r、27f-1525r进行广谱PCR扩增及目的片段的基因测序。运用美国国立生物信息中心“基于局部比对算法的搜索工具（Blast）”，结合“具有法定分类学地位的原核生物名称目录（http：／／W^***／）”提供的分类学信息，比较待鉴定细菌与近缘种模式菌株基因序列的相似程度；参考美国临床与实验室标准化协会（CLSI）MM18-A的解释标准，以确定待鉴定细菌的种属及分类学位置。结果采用广谱PCR测定，7份假阳性血培养瓶中，2份扩增到细菌的16SrRNA基因，经序列分析鉴定均为肺炎链球菌。48株不同来源、不同种属的少见菌，均扩增到16SrRNA基因目的片段并成功测序，参考CLSIMM18-A的解释标准，35株（72．9％）直接鉴定到“种”，11株（22．9％）鉴定到“属”，另2株鉴定为可能的新属新种。进一步结合细菌的生化反应特征及其他管家基因序列分析结果，则可鉴定到“种”的细菌可增加到42株（87．5％），其中包括链杆菌、嗜二氧化碳噬纤维菌、玫瑰单胞菌、奴卡菌、弯曲菌、分枝杆菌等具有明确临床意义的少见菌，以及多株近十年内命名的新细菌，如小不动杆菌、富西亚分枝杆菌、黏液玫瑰单胞菌、Halomonasjohnsoniae等。此外，还发现了1个新亚型的胎儿弯曲菌。结论16SrRNA基因测序鉴定能明确提供细菌的遗传学信息，且无种属选择性，对临床少见菌、苛养菌、以及固体培养基不生长的纯培养物等具有独特的优势，是病原微生物鉴定的发展责向.

关键词： RNA,核糖体,16S 聚合酶链反应序列分析细菌学技术

临床微生物学检验技术理论课线上教学新模式探索与实践

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中华医学教育探索杂志 2021年第6期20卷 644-647页

作者：蓝锴林冬玲曹楠楠程招敏王丽娜陈茶黄宪章广州中医药大学第二临床医学院检验教研室 510006

为顺利开展线上教学,多种智慧工具并用,实施在线多元混合式教学模式,以发挥大学生自主学习、独立思考为主要目标,以培养医学检验生的学习能力、建立临床微生物思维模式为首要任务。线上教学模式以中国大学慕课异步小规模限制性在线课程(... 详细信息

为顺利开展线上教学,多种智慧工具并用,实施在线多元混合式教学模式,以发挥大学生自主学习、独立思考为主要目标,以培养医学检验生的学习能力、建立临床微生物思维模式为首要任务。线上教学模式以中国大学慕课异步小规模限制性在线课程(small private online course,SPOC)为主体,问卷星测验、微信答疑作为辅助,形成以异步SPOC为核心,问卷星、微信为辅助的"一体两翼"的教学体系。该线上教学模式充分体现"以学生为中心"的教学理念,推动线上教学在高校教学专业课中的推广和应用。

关键词：慕课异步SPOC 线上教学