检索结果-南通市图书馆

羽衣甘蓝泛素结合酶ubc7基因分离、原核表达及纯化

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中国农学通报 2013年第34期29卷 76-80页

作者：蓝兴国李晓屿杨佳王艳红李玉花东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040

为分离羽衣甘蓝(Brassica oleracea ***)自交不亲和系(S13-b S13-b)泛素结合酶7(ubc7)基因,探讨Ubc7重组蛋白的原核表达及纯化。利用CTAB的方法提取羽衣甘蓝柱头总RNA,通过RT-PCR的方法分离ubc7基因,将编码ubc7基因的cDNA序列亚克隆到pE... 详细信息

为分离羽衣甘蓝(Brassica oleracea ***)自交不亲和系(S13-b S13-b)泛素结合酶7(ubc7)基因,探讨Ubc7重组蛋白的原核表达及纯化。利用CTAB的方法提取羽衣甘蓝柱头总RNA,通过RT-PCR的方法分离ubc7基因,将编码ubc7基因的cDNA序列亚克隆到pET-14b原核表达载体中,将阳性重组表达质粒转化到大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)pLysS中,利用IPTG进行诱导表达,并通过Ni2+-NTA树脂进行亲和层析的方法纯化重组蛋白。结果表明,获得的Boubc7含有一个长度为501 bp的开放读码框,编码一个含有166个氨基酸残基的蛋白质。预测BoUbc7的相对分子质量约为18.7 kDa,理论等电点(pI)为5.35。利用IPTG诱导的细菌蛋白中,SDS-PAGE显示出在分子量大小23 kDa处有蛋白特异性的表达,这与预测的His6融合的BoUbc7蛋白分子量相符;利用Ni2+-NTA树脂进行亲和层析纯化后,成功获得了BoUbc7融合蛋白。该试验分离了羽衣甘蓝ubc7基因,并通过原核表达系统获得了BoUbc7重组蛋白,为进一步分析其生物学功能奠定了基础。

关键词：羽衣甘蓝泛素结合酶 Ubc7 原核表达

人DJ-1蛋白在NIH3T3细胞中的表达与定位

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中国生物化学与分子生物学报 2006年第7期22卷 530-534页

作者：唐靖刘靖华蓝兴国李志杰刘亚伟赵明哲邓鹏姜勇南方医科大学广东省功能蛋白质组学重点实验室和病理生理学教研室广州510515

采用增强型绿色荧光蛋白（EGFP）示踪的方法,研究人DJ-1蛋白在真核细胞中的定位及其对刺激的反应.将克隆在pGEX-KG上的DJ-1亚克隆到载体pEGFP-C2上,对阳性克隆进行PCR、酶切和测序鉴定,用脂质体转染NIH3T3细胞;并用荧光显微镜观察pEGFP-... 详细信息

采用增强型绿色荧光蛋白（EGFP）示踪的方法,研究人DJ-1蛋白在真核细胞中的定位及其对刺激的反应.将克隆在pGEX-KG上的DJ-1亚克隆到载体pEGFP-C2上,对阳性克隆进行PCR、酶切和测序鉴定,用脂质体转染NIH3T3细胞;并用荧光显微镜观察pEGFP-DJ-1在细胞内的定位以及在血清刺激时的移位;探讨在氧化应激时DJ-1对细胞的保护作用,以及其在细胞内定位的变化.重组质粒在NIH3T3细胞中得到高效表达,绿色荧光弥散分布于胞质、胞核中,但以胞质居多;血清刺激后,细胞中的绿色荧光从胞质移位到胞核;在200～600 μmol/L H2O2刺激下,DJ-1能有效保护细胞抵抗氧化应激,并且也能从胞质移位到胞核.上述研究结果为进一步研究DJ-1蛋白的功能提供了一个重要依据.

关键词： DJ-1蛋白增强型绿色荧光蛋白双氧水血清转染

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DNA去甲基化机制的研究进展

现代生物医学进展 2012年第1期12卷 160-162页

作者：曹领改张旸蓝兴国李玉花东北林业大学生命科学学院发育生物学研究室黑龙江哈尔滨150040

DNA甲基化作为动植物体内一种重要的表观遗传修饰形式,在调控基因表达、维持基因组的稳定性等方面发挥重要的生物学作用。固有DNA甲基化水平和模式的变化会导致生物的表型异常甚至死亡。而5-甲基胞嘧啶的水平和模式是由DNA甲基化和去甲... 详细信息

DNA甲基化作为动植物体内一种重要的表观遗传修饰形式,在调控基因表达、维持基因组的稳定性等方面发挥重要的生物学作用。固有DNA甲基化水平和模式的变化会导致生物的表型异常甚至死亡。而5-甲基胞嘧啶的水平和模式是由DNA甲基化和去甲基化共同决定的。DNA去甲基化可以分为主动去甲基化与被动去甲基化,而基因组甲基化模式的形成主要依赖于主动去甲基化。本文综述了生物体内DNA主动去甲基化五种潜在机制:DNA转葡糖基酶参与的碱基切除修复途径、脱氨酶参与的碱基切除修复途径、核苷酸切除修复途径、氧化作用去甲基化与水解作用去甲基化。

关键词： DNA去甲基化 DNA转葡糖基酶碱基切除修复核苷酸切除修复

羽衣甘蓝S_(13-b)位点受体激酶基因的克隆及激酶结构域的原核表达

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生物技术通讯 2010年第2期21卷 210-212页

作者：蓝兴国杨佳王艳红李玉花东北林业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150040

目的:分离羽衣甘蓝S13-b位点受体激酶(SRK13-b)基因并进行序列及结构域分析,构建SRK13-b结构域的原核表达载体并进行重组蛋白质的原核表达和纯化。方法:提取羽衣甘蓝S13-bS13-b自交不亲和系花期柱头的RNA,用RT-PCR法分离SRK13-b基因;将... 详细信息

目的:分离羽衣甘蓝S13-b位点受体激酶(SRK13-b)基因并进行序列及结构域分析,构建SRK13-b结构域的原核表达载体并进行重组蛋白质的原核表达和纯化。方法:提取羽衣甘蓝S13-bS13-b自交不亲和系花期柱头的RNA,用RT-PCR法分离SRK13-b基因;将编码SRK13-b激酶结构域的序列插入大肠杆菌表达载体pET-14b中,构建原核表达质粒pET-SRK13-bCT,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS菌株,经0.1mmol/LIPTG诱导,用Ni-NTA亲和层析柱对SRK13-b激酶结构域蛋白进行纯化。结果:分离获得羽衣甘蓝SRK13-b基因的长度为2571bp,编码856个氨基酸,GenBank收录号为EU180597;对SRK13-b激酶结构域蛋白进行诱导表达及纯化,SDS-PAGE显示相对分子质量约43×103的蛋白质特异表达,对表达产物进行分离纯化,获得了SRK13-b激酶结构域的融合蛋白。结论:羽衣甘蓝SRK13-b基因的克隆及激酶结构域的原核表达,为研究SRK的功能及自交不亲和性奠定了基础。

关键词：羽衣甘蓝自交不亲和 S13-b位点受体激酶原核表达纯化

羽衣甘蓝柱头酵母双杂交cDNA文库的构建与分析

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生物技术通讯 2010年第2期21卷 206-209页

作者：杨佳王艳红李玉花蓝兴国东北林业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150040

目的:构建应用于酵母双杂交系统的羽衣甘蓝柱头cDNA文库。方法:以羽衣甘蓝S13-bS13-b自交不亲和系为材料,提取柱头的总RNA,用亲和层析法分离纯化mRNA,利用CytoTrapXR建库试剂盒构建羽衣甘蓝柱头cDNA文库。结果:羽衣甘蓝柱头cDNA原始文... 详细信息

目的:构建应用于酵母双杂交系统的羽衣甘蓝柱头cDNA文库。方法:以羽衣甘蓝S13-bS13-b自交不亲和系为材料,提取柱头的总RNA,用亲和层析法分离纯化mRNA,利用CytoTrapXR建库试剂盒构建羽衣甘蓝柱头cDNA文库。结果:羽衣甘蓝柱头cDNA原始文库的库容量为2.5×105;扩增后文库的库容量约为4×108,重组率为96%,插入片段大小为0.4～3kb,平均长度在0.8kb左右。结论:构建了应用于酵母双杂交系统的羽衣甘蓝自交不亲和系柱头的cDNA文库,为探讨芸苔属植物自交不亲和的分子机理奠定了基础。

关键词：羽衣甘蓝柱头 cDNA文库酵母双杂交

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植物增殖细胞核抗原的结构与功能

生物技术通讯 2016年第1期27卷 133-137页

作者：李治龙李晗李晓屿李玉花蓝兴国东北林业大学生命科学学院发育生物学研究室黑龙江哈尔滨150040

增殖细胞核抗原(PCNA)是真核生物细胞中一类保守蛋白,在DNA复制、DNA修复及细胞周期调控过程中具有非常重要的作用。我们简要介绍植物PCNA的结构、表达调控及其功能的研究进展。

关键词：增殖细胞核抗原表达调控 DNA复制 DNA修复细胞周期调控

ESG表现与智力资本积累——基于A股上市公司的研究

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会计之友 2025年第2期 65-72页

作者：宫兴国刘星晖王贤龙河北工业大学经济管理学院

党的二十大提出要加快经济发展方式的绿色转型。作为绿色发展的重要衡量标准,企业ESG表现对履行低碳环保发展理念、承担社会责任及提高绿色治理透明度非常重要,而智力资本是公司价值的源泉,研究ESG表现对智力资本的影响有助于理解和践... 详细信息

党的二十大提出要加快经济发展方式的绿色转型。作为绿色发展的重要衡量标准,企业ESG表现对履行低碳环保发展理念、承担社会责任及提高绿色治理透明度非常重要,而智力资本是公司价值的源泉,研究ESG表现对智力资本的影响有助于理解和践行高质量发展。文章选取2016—2022年A股上市公司为样本,研究上市公司ESG表现对智力资本的影响。研究发现,ESG表现对智力资本积累具有显著促进作用,其中对人力资本和结构资本影响显著,而对关系资本的积累作用不明显。进一步,员工离职率、企业家精神以及客户和供应商集中度在不同影响路径中均起到正向调节作用。研究结论为促进公司优化智力资本投资、提升市场竞争优势提供了有益的参考。

关键词： ESG表现智力资本人力资本结构资本关系资本

师生同行的新生态教学模式探索——以车载网络系统检修课程为例

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汽车实用技术 2025年第1期 117-122页

作者：杨兴国重庆工商职业学院智能制造与汽车学院

案例以新能源汽车技术专业核心课为研究对象，针对传统教学法难以适应数字时代下知识类型、载体和传播方式发生变革的问题，开展以学生为教学主体，教师为学习向导的师生同行的共建职业教育课堂“四育”新生态教学模式探索。教师利用数... 详细信息

案例以新能源汽车技术专业核心课为研究对象，针对传统教学法难以适应数字时代下知识类型、载体和传播方式发生变革的问题，开展以学生为教学主体，教师为学习向导的师生同行的共建职业教育课堂“四育”新生态教学模式探索。教师利用数字技术建设优质的数字课程资源、设计合理的教学活动和评价学生的学习成果；学生利用数字资源、数字平台和数字工具完成课前预习、课中任务和课后拓展；师生共同参与教学活动，携手共建培育教师数字化素养、学习型向导和学生独立思考、创新实践的“四育”课堂生态。通过开展教学改革，该课程分别获评市级在线精品课程、校级一流课程和校级优秀课程标准一等奖等成果，为同类课程改革提供良好示范作用。

关键词：数字化师生同行向导四育车载网络系统检修

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混合博弈问题的求解与应用综述

软件学报 2025年第1期36卷 107-151页

作者：董绍康李超杨光葛振兴曹宏业陈武兵杨尚东陈兴国李文斌高阳计算机软件新技术国家重点实验室(南京大学) 南京邮电大学计算机学院软件学院网络空间安全学院

近年来,随着人工智能技术在序贯决策和博弈对抗等问题的应用方面取得了飞速发展,围棋、游戏、德扑和麻将等领域取得了巨大的进步,例如, AlphaGo、OpenAI Five、AlphaStar、DeepStack、Libratus、Pluribus和Suphx等系统都在这些领域中达... 详细信息

近年来,随着人工智能技术在序贯决策和博弈对抗等问题的应用方面取得了飞速发展,围棋、游戏、德扑和麻将等领域取得了巨大的进步,例如, AlphaGo、OpenAI Five、AlphaStar、DeepStack、Libratus、Pluribus和Suphx等系统都在这些领域中达到或超过人类专家水平.这些应用集中在双人、两队或者多人的零和博弈问题中,而对于混合博弈问题的研究缺乏实质性的进展与突破.区别于零和博弈,混合博弈需要综合考虑个体收益、集体收益和均衡收益等诸多目标,被广泛应用于公共资源分配、任务调度和自动驾驶等现实场景.因此,对于混合博弈问题的研究至关重要.通过梳理当前混合博弈领域中的重要概念和相关工作,深入分析国内外研究现状和未来发展方向.具体地,首先介绍混合博弈问题的定义与分类;其次详细阐述博弈解概念和求解目标,包含纳什均衡、相关均衡、帕累托最优等解概念,最大化个体收益、最大化集体收益以及兼顾公平等求解目标;接下来根据不同的求解目标,分别对博弈论方法、强化学习方法以及这两种方法的结合进行详细探讨和分析;最后介绍相关的应用场景和实验仿真环境,并对未来研究的方向进行总结与展望.

关键词：混合博弈博弈论强化学习