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芸苔属植物自交不亲和性中的细胞识别

植物生理学通讯 2009年第12期45卷 1246-1250页

作者：王艳红李玉花蓝兴国东北林业大学生命科学学院发育生物学科哈尔滨150040

从细胞识别的角度概述芸苔属植物自交不亲和信号的产生和转导机制的研究进展。

关键词：芸苔属自交不亲和性 SCR SRK

羽衣甘蓝自交不亲和系的选育及S_(13b)单倍型的鉴定

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北京林业大学学报 2006年第S2期28卷 31-39页

作者：蓝兴国解莉楠于晓敏李玉花东北林业大学花卉生物工程研究所

该文采用亲和指数法(种子数/自交授粉花朵数)分别在羽衣甘蓝‘赤兔’和‘白波’栽培品种的自交后代中,经过3年的自交选育获得1个自交不亲和系4·1·1和一个自交亲和系3·2·3·由于在芸苔属植物F1代杂交种的生产和自交不亲和分子机制的... 详细信息

该文采用亲和指数法(种子数/自交授粉花朵数)分别在羽衣甘蓝‘赤兔’和‘白波’栽培品种的自交后代中,经过3年的自交选育获得1个自交不亲和系4·1·1和一个自交亲和系3·2·3·由于在芸苔属植物F1代杂交种的生产和自交不亲和分子机制的研究方面S单倍型鉴定是必要的,因此在该文中我们采用了PCR方法利用引物PK1和PK4获得了BoSRKx的基因组序列,此序列的大小为919bp.经过数据库检索比对后发现BoSRKx的序列与BoSRK13b的序列完全一致.通过反转录PCR的方法获得了BoSRKx的cDNA序列,结果发现BoSRKx和BoSRK13b的序列在转录水平上也是完全一致的;另一方面,我们采用SCR保守信号肽编码区和NotⅠ-oligo(dT)设计的引物获得了BoSCRx的cDNA序列,经过数据库的检索比对后发现BoSCRx的序列比BoSCR13的序列只多出3个连续的碱基.根据上述结果我们推断出Sx单倍型就是S13b单倍型;最后,通过遗传分析结合PCR-RFLP方法和DNAblot方法对自交不亲和系进行了S13b纯合体的鉴定.

关键词：羽衣甘蓝自交不亲和 S位点受体蛋白激酶 S位点富含半胱氨酸蛋白 S13b单倍型

羽衣甘蓝ARC1蛋白的原核表达、纯化及泛素连接酶活性分析

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园艺学报 2013年第12期40卷 2472-2478页

作者：蓝兴国李晓屿杨佳李玉花东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040

ARC1是植物特有的一类含有U-box/ARM结构域的蛋白,在芸薹属植物自交不亲和(self-incompatibility,SI)信号转导中起着正向调控因子的作用。将羽衣甘蓝(Brassica oleracea ***)BoARC1编码区的序列连接到原核表达载体pET-14b上,通过酶切鉴... 详细信息

ARC1是植物特有的一类含有U-box/ARM结构域的蛋白,在芸薹属植物自交不亲和(self-incompatibility,SI)信号转导中起着正向调控因子的作用。将羽衣甘蓝(Brassica oleracea ***)BoARC1编码区的序列连接到原核表达载体pET-14b上,通过酶切鉴定和测序分析,构建pET-14bBoARC1表达质粒;将获得的阳性表达质粒转化到大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)pLysS中,利用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE结果显示,在分子量69 kD处有BoARC1蛋白特异性地诱导表达;利用Ni2+-NTA树脂通过亲和层析的方法获得BoARC1融合蛋白。在泛素激活酶(E1)、泛素结合酶UBC7(E2)和泛素体外泛素化反应后,通过免疫印迹的方法检测,显示出BoARC1融合蛋白能够将底物进行多泛素化修饰;当U-box中保守位点第323位Pro突变为Ala或其他泛素化组分缺少时,底物不能被泛素化修饰。

关键词：羽衣甘蓝自交不亲和性 ARC1 原核表达泛素连接酶

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配子体自交不亲和信号转导的研究进展

遗传 2005年第4期27卷 677-685页

作者：蓝兴国于晓敏李玉花东北林业大学花卉生物工程研究所哈尔滨150040 东北林业大学花卉生物工程研究所

自然界中大多数自交不亲和(selfincompatibility,SI)显花植物表现为配子体SI。配子体SI植物虽然都具有其SI的功能而阻止自我受精,但它们采取的信号转导途径是不同的。目前关于配子体SI信号转导的途径主要有两种:一是茄科、玄参科、蔷薇... 详细信息

自然界中大多数自交不亲和(selfincompatibility,SI)显花植物表现为配子体SI。配子体SI植物虽然都具有其SI的功能而阻止自我受精,但它们采取的信号转导途径是不同的。目前关于配子体SI信号转导的途径主要有两种:一是茄科、玄参科、蔷薇科中以雌蕊SRNase为基础的信号转导途径;另一是罂粟科中以花粉管胞质自由钙离子为第二信使的转导途径。文章就配子体SI信号转导的研究进展作一综述。

关键词：配子体自交不亲和信号转导 SRNase 胞质自由钙离子

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植物U-box／ARM蛋白

植物生理学通讯 2008年第6期44卷 1216-1222页

作者：杨佳蓝兴国李玉花东北林业大学生命科学学院发育生物学研究室哈尔滨150040

文章介绍了高等植物特有的U-box/ARM蛋白在结构、植物自交不亲和性、抗病性和激素信号转导等方面的研究进展。

关键词： U-box/ARM蛋白自交不亲和抗病性激素信号转导

植物NADPH氧化酶-RBOH的结构与功能

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分子植物育种 2022年

作者：纪妍赵若曦蓝兴国吴莹东北林业大学东北盐碱植被恢复与重建教育部重点实验室

植物NADPH氧化酶(NADPH oxidase， NOX)也被称为呼吸爆发氧化酶同系物(respiratory burst oxidase homolog， RBOH)，是植物中活性氧(ROS)的关键生产者。目前已在拟南芥、水稻、烟草、马铃薯、草莓、中国白菜等物种中鉴定到150余个RBOH...

植物NADPH氧化酶(NADPH oxidase， NOX)也被称为呼吸爆发氧化酶同系物(respiratory burst oxidase homolog， RBOH)，是植物中活性氧(ROS)的关键生产者。目前已在拟南芥、水稻、烟草、马铃薯、草莓、中国白菜等物种中鉴定到150余个RBOH成员。植物RBOH结构保守，由2个EF手性结构、6个α-跨膜螺旋结构域(TMD-I到TMD-VI)、1个FAD结构域和1个NADPH结构域组成。植物RBOH产生的ROS，可以作为第二信使参与植物生长发育、植物生殖、激素调节、生物胁迫与非生物胁迫应答等众多生物过程。RBOH功能的解析，很可能对提高农作物产量与质量，保持农业的可持续发展具有重要意义。本文主要综述了植物RBOH蛋白的结构、特定位点的磷酸化修饰、相关调控蛋白以及RBOH生物学功能等方面的进展，为RBOH的研究提供理论基础。

关键词：

羽衣甘蓝花粉SCR_(13-b)基因的分离及其功能分析

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园艺学报 2009年第4期36卷 539-544页

作者：蓝兴国杨佳李玉花东北林业大学生命科学学院哈尔滨150040

以羽衣甘蓝(Brassica oleracea ***)S13-bS13-b自交不亲和系为试验材料,分离了控制花粉自交不亲和基因——S13-b单倍型富含半胱氨酸基因(SCR13-b),GenBank收录号为EF577028。SCR13-bcDNA序列含有237bp的开放读码框(ORF),编码一个含78个氨基酸的蛋白。SCR13-bgDNA含有一个758bp的内含子,内含子5′供体位点和3′受体位点边界序列符合GU-AG规则;DNA blot分析表明SCR13-b在基因组中只有单一拷贝;授粉生物活性分析试验显示原核表达SCR13-b融合蛋白能够启动SI反应,抑制杂交亲和花粉的萌发和生长。

关键词：羽衣甘蓝自交不亲和原核表达

抗人CA50单克隆抗体的制备、鉴定及其应用

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细胞与分子免疫学杂志 2015年第1期31卷 110-113,118页

作者：蓝兴国冯玥魏德强李玉花东北林业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150040 大庆麦伯康生物技术有限公司黑龙江大庆163316 东北林业大学大庆生物技术研究院黑龙江大庆163316

目的制备抗人糖抗原50（CA50）单克隆抗体（m Ab）,鉴定其免疫学特性并建立化学发光免疫分析法检测体系。方法将人CA50抗原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术进行细胞融合,筛选后得到稳定分泌抗CA50抗体的杂交瘤细胞株。经细胞扩大培养及... 详细信息

目的制备抗人糖抗原50（CA50）单克隆抗体（m Ab）,鉴定其免疫学特性并建立化学发光免疫分析法检测体系。方法将人CA50抗原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术进行细胞融合,筛选后得到稳定分泌抗CA50抗体的杂交瘤细胞株。经细胞扩大培养及纯化获得m Ab后,建立化学发光免疫分析法检测体系,并对其线性范围、准确度、灵敏度、重复性进行评估,同时进行血样的测定。结果筛选出4株抗人CA50的杂交瘤细胞株,效价均在1∶108以上,2株配对抗体不与CA125、CA153、CA199、CA724交叉。建立的化学发光免疫分析法检测范围为0~500 U/m L,回收率为107.08%,灵敏度为0.83 U/m L,重复性CV值〈10%,与参比试剂检测血样的结果比较符合率为96.7%,Kappa值为0.911。结论成功制备了抗人CA50m Ab,建立了人CA50的化学发光免疫分析法检测体系。

关键词： CA50 单克隆抗体化学发光免疫分析法

泛素/26S蛋白酶体途径与显花植物自交不亲和反应

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植物学通报 2006年第2期23卷 197-206页

作者：于晓敏蓝兴国李玉花东北林业大学花卉生物工程研究所哈尔滨150040

植物的生长和发育离不开短命调控蛋白的有选择性降解,其中一种重要的降解方式就是泛素/26S蛋白酶体途径。在这个途径中,泛素(ubiquitin)和26S蛋白酶体起着至关重要的作用,需要被降解的蛋白会通过E1-E2-E3酶接合反应由Ub进行标记,随后标... 详细信息

植物的生长和发育离不开短命调控蛋白的有选择性降解,其中一种重要的降解方式就是泛素/26S蛋白酶体途径。在这个途径中,泛素(ubiquitin)和26S蛋白酶体起着至关重要的作用,需要被降解的蛋白会通过E1-E2-E3酶接合反应由Ub进行标记,随后标记蛋白会被26S蛋白酶体识别并降解。自交不亲和反应也正是通过此途径实现的,ARC1(armrepeatcontaining1)和SCFs(skp1-cul1-F-box-proteins)作为E3s分别在孢子体自交不亲和和配子体自交不亲和反应中起作用。本文综述了就泛素/26S蛋白酶体途径的组成及其在自交不亲和反应中的作用。

关键词： 26S蛋白酶体蛋白质水解泛素自交不亲和性