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弓形虫影响前列腺素E_2合成的细胞内信号调节途径

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2004年第1期22卷 42-45页

作者：彭碧文郑大利蒋雪梅林建银蒋明森福建医科大学分子医学研究中心福州350004 武汉大学医学院武汉430071

目的　探讨弓形虫感染巨噬细胞过程中花生四烯酸 (AA)及前列腺素E2 (PGE2 )的产生及其相关的细胞内信号调节途径。　方法　构建刚地弓形虫小鼠巨噬细胞侵染模型 ,应用气相色谱、酶联免疫吸附测定 (ELISA)、逆转录聚合酶链反应 (RT P... 详细信息

目的　探讨弓形虫感染巨噬细胞过程中花生四烯酸 (AA)及前列腺素E2 (PGE2 )的产生及其相关的细胞内信号调节途径。　方法　构建刚地弓形虫小鼠巨噬细胞侵染模型 ,应用气相色谱、酶联免疫吸附测定 (ELISA)、逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)和蛋白质印迹法 (Westernblotting)检测钙离子调节剂乙二醇双 ( 2 氨基乙醚 )四乙酸 (EG TA)、钙离子螯合剂 (BAPTA/AM )、钙调蛋白抑制剂三氟拉嗪 (TFP)及蛋白激酶C (PKC)抑制剂 1 ( 5 磺酰基 ) 异喹啉 2 甲基哌嗪盐酸盐 (H7)对弓形虫诱导的AA、PGE2 含量及促细胞分裂剂诱导性环加氧酶 2 (COX 2 )mRNA和蛋白质表达水平的影响。　结果　EGTA、BAPTA/AM及TFP均可抑制弓形虫诱导的巨噬细胞AA和PGE2 合成 ;PKC抑制剂H7可明显抑制弓形虫和脂多糖 (LPS)诱导的巨噬细胞PGE2 合成 ,并伴随着COX 2mRNA和蛋白质表达呈剂量依赖性减少。　结论　弓形虫侵染巨噬细胞过程可能通过钙信号转导途径调节COX 2底物AA的含量和PKC依赖的COX 2代谢途径调节PGE2 的合成。

关键词：弓形虫前列腺素E2 细胞内信号调节花生四烯酸环加氧酶-2 巨噬细胞

β-巯基乙醇与肝基质对日本血吸虫培养细胞的影响

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中国地方病学杂志 2004年第4期23卷 307-310页

作者：彭延董惠芬蒋明森钟沁萍胡世全武汉大学医学院寄生虫病教研室血吸虫病研究室 430071 武汉市血吸虫病防治办公室

目的研究β鄄巯基乙醇与肝基质对日本血吸虫培养细胞的影响。方法将18d虫龄的日本血吸虫童虫细胞联合法接种于小盖玻片上。实验被随机分为4个组,分别为对照组、β鄄巯基乙醇组、肝基质组、β鄄巯基乙醇+肝基质联合处理组。培养第7天,对... 详细信息

目的研究β鄄巯基乙醇与肝基质对日本血吸虫培养细胞的影响。方法将18d虫龄的日本血吸虫童虫细胞联合法接种于小盖玻片上。实验被随机分为4个组,分别为对照组、β鄄巯基乙醇组、肝基质组、β鄄巯基乙醇+肝基质联合处理组。培养第7天,对各组细胞进行核仁组织区相关嗜银蛋白(AgNORs)与乳酸脱氢酶(LDH)细胞化学染色,并结合图像分析比较4个组培养细胞的AgNORs水平及LDH活性。结果与对照组比较,肝基质组、β鄄巯基乙醇组、β鄄巯基乙醇+肝基质联合处理组培养细胞的AgNORs颗粒数目、颗粒面积与核面积百分比、平均光密度以及LDH的平均光密度等4个参数均有不同程度升高(P0.05),其余组间3个参数两两比较差异均有显著意义(P<0.01或P<0.05)。结论β鄄巯基乙醇与肝基质均能促进日本血吸虫培养细胞的增殖、代谢,但β鄄巯基乙醇的作用比肝基质显著;二者联合使用对培养细胞的增殖无协同作用。

关键词： β-巯基乙醇肝基质日本血吸虫细胞培养核仁组织区嗜银蛋白乳酸脱氢酶

甲基硝基亚硝基胍对日本血吸虫成虫培养细胞骨架作用的研究

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中国地方病学杂志 2001年第6期20卷 401-403页

作者：范虹董惠芬蒋明森明珍平钟沁萍武汉大学医学院寄生虫学教研室血吸虫病研究室湖北武汉430071

目的　通过观察 N-甲基 - N-硝基 - N-亚硝基胍 (MNNG)诱导日本血吸虫培养细胞后骨架的改变 ,研究 MNNG对培养细胞转化、增殖的作用。方法　将日本血吸虫成虫培养细胞接种于小盖玻片上 ,培养 1周时用浓度为 3mg/ L 的 MNNG处理 48h,然后... 详细信息

目的　通过观察 N-甲基 - N-硝基 - N-亚硝基胍 (MNNG)诱导日本血吸虫培养细胞后骨架的改变 ,研究 MNNG对培养细胞转化、增殖的作用。方法　将日本血吸虫成虫培养细胞接种于小盖玻片上 ,培养 1周时用浓度为 3mg/ L 的 MNNG处理 48h,然后用 RPMI- 16 40含 2 0 %小牛血清附加常量抗菌素的培养基培养 2周 ,再换用 RPMI- 16 40含 5 %小牛血清的培养基继续培养 ,用考马斯亮兰染色法和鬼笔环肽荧光染色法显示培养细胞骨架。结果　 MNNG诱导后 ,在培养第 4、5周时部分培养细胞骨架排列紊乱 ,微丝集聚于细胞边缘。结论　 MNNG有一定诱导日本血吸虫成虫培养细胞转化。

关键词：日本血吸虫成虫培养细胞 N-甲基-N-硝基-N亚硝基胍细胞骨架

小鼠中性粒细胞在抗体及补体参与下对日本血吸虫童虫杀伤作用的体外实验

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动物学报 1994年第3期40卷 226-230页

作者：陈静卿华先欣蒋明森湖北医学院寄生虫学教研室血吸虫病研究室武汉430071

用光镜及电镜观察小鼠中性粒细胞及中性粒细胞依赖抗体及补体对体外培养的日本血吸虫童虫的作用。结果表明：单纯中性粒细胞很少粘附到童虫表面，仅个别十分疏松地粘附在童虫表面，被粘附的童虫结构正常。提示：单纯中性粒细胞对童虫... 详细信息

用光镜及电镜观察小鼠中性粒细胞及中性粒细胞依赖抗体及补体对体外培养的日本血吸虫童虫的作用。结果表明：单纯中性粒细胞很少粘附到童虫表面，仅个别十分疏松地粘附在童虫表面，被粘附的童虫结构正常。提示：单纯中性粒细胞对童虫无明显作用，在抗体及补体协同下，中性粒细胞成群且紧密地粘附在童虫体表，在细胞集聚的周围，虫体体被出现隧道样及火山口样变化，紧贴童虫的中性粒细胞伸出伪足，虫体体棘紊乱，皮层变平，体被剥脱，虫体变形，说明中性粒细胞在抗体及补体协同下，对童虫有杀伤作用、文中对杀伤机制进行了扼要的讨论。

关键词：日本血吸虫童虫中性粒细胞抗体

日本血吸虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白的研究

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中国人兽共患病杂志 2004年第6期20卷 492-494,499页

作者：董惠芬彭延蒋明森明珍平钟沁萍武汉大学医学院人体寄生虫学教研室血吸虫病研究室武汉430071

目的通过研究日本血吸虫成虫与童虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白(AgNORs)含量及β-巯基乙醇对培养细胞AgNORs的影响,探讨AgNORs能否作为评价日本血吸虫培养细胞增殖的指标以及β-巯基乙醇对培养细胞的促增殖作用。方法联合法培养... 详细信息

目的通过研究日本血吸虫成虫与童虫培养细胞核仁组织区相关嗜银蛋白(AgNORs)含量及β-巯基乙醇对培养细胞AgNORs的影响,探讨AgNORs能否作为评价日本血吸虫培养细胞增殖的指标以及β-巯基乙醇对培养细胞的促增殖作用。方法联合法培养虫龄分别为18d和24d的日本血吸虫童虫与成虫,将童虫细胞随机分成对照组和实验组,对照组细胞与成虫细胞使用常规培养基培养,实验组在常规培养基中加入50μmoL/L β-巯基乙醇和1mmoL/L丙酮酸钠。培养第5d,运用胶银法染色,使用HPIAS-2000图像分析系统,计算培养细胞核内AgNORs颗粒数,测定银染颗粒面积与核面积的百分比和平均光密度。结果日本童虫培养细胞(对照组)的AgNORs颗粒数目、颗粒面积与核面积百分比、平均光密度均高于成虫培养细胞。统计学分析显示,两者之间的AgNORs颗粒数日,银染颗粒面积与核面积百分比、平均光密度两两比较均有统计学差异(P<0.01或P<0.05);实验组培养细胞与对照组比较,AgNORs颗粒数目明显增多颗粒面积与核面积百分比、平均光密度均显著升高。统计学分析可知,两组细胞三组参数之间均有统计学差异(P<0.01或P<0.05)。结论 AgNORs可作为评价日本血吸虫培养细胞增殖的一个简便、敏感的指标。日本血吸虫童虫培养细胞较成虫培养细胞更具增殖潜能;

关键词：日本血吸虫细胞培养核仁组织区相关嗜银蛋白 β-巯基乙醇

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TGF-β信号传导通路及其生物学功能

中国病原生物学杂志 2014年第1期9卷 77-83页

作者：刘镕赵琴平董惠芬蒋明森武汉大学基础医学院医学寄生虫学教研室湖北武汉430071

TGF-β信号传导通路是一个包含众多成员的多功能细胞因子大家族,根据配体分子激活的不同的下游特异性通路可以分为TGF-β/Activin/Nodal和BMP/GDF/MIS两个亚家族通路。该信号通路的激活首先是TGF-βs配体分子与受体结合,从而使受体TβR... 详细信息

TGF-β信号传导通路是一个包含众多成员的多功能细胞因子大家族,根据配体分子激活的不同的下游特异性通路可以分为TGF-β/Activin/Nodal和BMP/GDF/MIS两个亚家族通路。该信号通路的激活首先是TGF-βs配体分子与受体结合,从而使受体TβRs磷酸化,磷酸化的TβR-I直接作用于底物Smads蛋白,活化的Smads就将配体与受体作用的信号从细胞膜、胞浆传递到细胞核内,再与其他核内因子协同激活或者抑制靶基因的转录。TGF-β信号通路就是通过调节细胞的生长、增殖、分化、迁移和凋亡等过程,在组织与器官的发生和形成(胚胎发育、骨骼等器官形成)、机体的免疫反应等生物过程发挥重要的功能。

关键词： TGF—β信号传导通路生物学功能生殖发育胚胎发育免疫应答综述

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血吸虫分子生物学检测技术研究进展

中国血吸虫病防治杂志 2017年第6期29卷 798-801页

作者：张燕董惠芬蒋明森赵琴平武汉大学基础医学院人体寄生虫学教研室武汉430071

血吸虫的诊断是血吸虫病防治工作中的重要环节,早期诊断可有效控制传染源和阻止晚期血吸虫病的发生。目前常用的血吸虫病诊断方法为病原学检测和血清学检测。随着我国血吸虫病防治工作的有效进行,日本血吸虫病在人群中的感染率和感染强... 详细信息

血吸虫的诊断是血吸虫病防治工作中的重要环节,早期诊断可有效控制传染源和阻止晚期血吸虫病的发生。目前常用的血吸虫病诊断方法为病原学检测和血清学检测。随着我国血吸虫病防治工作的有效进行,日本血吸虫病在人群中的感染率和感染强度均显著降低,病原学和血清学检测的敏感性和时效性受到了一定的限制。分子生物学诊断方法以其高特异性、敏感性和时效性等优点,极大地促进了血吸虫病诊断方法和相关检测技术的改进和发展,为日本血吸虫病人群感染率低的流行区中进行早期诊断和微量检测奠定了基础。本文围绕国内外血吸虫分子生物学检测和诊断方法的研究进展进行一概述。

关键词：血吸虫分子生物学诊断方法检测技术

丙烯硫脲对日本血吸虫酚酶抑制作用的组织化学研究

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中国地方病学杂志 2003年第5期22卷 389-391页

作者：何立章莹蒋明森蔡国斌赵琴平杨孟祥武汉大学医学院人体寄生虫学教研室血吸虫病研究室湖北武汉430071

目的　通过组织化学方法研究丙烯硫脲对小鼠体内、体外日本血吸虫成虫酚酶 (phenol oxidase,PO)活性的抑制作用。方法　将 4 2 d日本血吸虫活成虫置于含 2 5 mmol/L 邻苯二酚的磷酸盐缓冲液 (p H6 .8)中 ,2 8℃下孵育 30 min,取出虫体... 详细信息

目的　通过组织化学方法研究丙烯硫脲对小鼠体内、体外日本血吸虫成虫酚酶 (phenol oxidase,PO)活性的抑制作用。方法　将 4 2 d日本血吸虫活成虫置于含 2 5 mmol/L 邻苯二酚的磷酸盐缓冲液 (p H6 .8)中 ,2 8℃下孵育 30 min,取出虫体置载玻片上 ,加 2滴含 0 .1%戊巴比妥钠的 PBS溶液 ,置 L eica荧光显微镜下 ,分别在普通光照和紫外光激发下观察酚酶在虫体内的组织学定位。体外抑制实验时 ,加底物前先将成虫置于含 5mm ol/L 丙烯硫脲的 PBS溶液中 ,2 8℃下孵育 10 min;体内抑制实验时 ,在小鼠感染日本血吸虫尾蚴 2 0 d后 ,按30 0 m g/kg隔日 1次腹腔注射丙烯硫脲。结果　体外抑制实验组雌虫卵黄腺及子宫内虫卵卵壳和雄虫体壁表层的桔黄色荧光或赭褐色颜色反应均基本消失 ;体内抑制实验组雌虫子宫内未见虫卵或虫卵样物质 ,仅见大量泥沙样卵黄颗粒 ,其荧光或颜色反应也基本消失。结论　通过一种更灵敏的显示酚酶活性的组织学定位方法 ,观察到不仅雌虫含有酚酶 ,雄虫也有酚酶活性。证明丙烯硫脲对血吸虫成虫的酚酶活性有明显的抑制作用。

关键词：丙烯硫脲日本血吸虫酚酶活性抑制作用组织化学

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血吸虫感染新模型小鼠细胞因子的诱生实验

中国地方病学杂志 2003年第4期22卷 308-309页

作者：赵琴平何立蒋明森蔡国斌杨孟祥武汉大学医学院寄生虫学教研室湖北武汉430071

目的　在已建立了一种血吸虫感染伴随免疫新模型的基础上 ,检测该模型小鼠脾细胞培养诱生白细胞介素 -2 (IL-2 )和白细胞介素 -5(IL-5)的水平 ,初步探讨该新模型抗再感染的细胞免疫机制。方法　小鼠感染日本血吸虫尾蚴 2 0 d后 ,按 3 0 ... 详细信息

目的　在已建立了一种血吸虫感染伴随免疫新模型的基础上 ,检测该模型小鼠脾细胞培养诱生白细胞介素 -2 (IL-2 )和白细胞介素 -5(IL-5)的水平 ,初步探讨该新模型抗再感染的细胞免疫机制。方法　小鼠感染日本血吸虫尾蚴 2 0 d后 ,按 3 0 0 mg/ (kg· d)腹腔注射酚酶抑制剂——丙烯基硫脲 ,同时设立未用药对照组和正常小鼠组 ,感染后第 42 d剖杀动物 ,分别用成虫抗原 (SWAP)、虫卵抗原 (SEA)及刀豆素 A(Con A)体外刺激脾细胞诱生细胞因子 ,并检测 IL -2和 IL -5的诱生水平。结果　新模型小鼠经 SWAP诱生 IL -2的水平高于未用药对照组和正常组小鼠 ;经 SEA诱生 IL-2的水平低于对照组小鼠 ,而与正常组小鼠无差异 ;经 Con A诱生 IL-2的水平与对照组小鼠和正常小鼠无差异。此外 ,新模型小鼠经 SWAP、SEA及 Con A 3种抗原刺激诱生 IL -5的水平均明显低于对照组和正常组小鼠。结论　伴随免疫新模型小鼠体内成虫诱导的细胞免疫似以 Th1细胞功能占优势 ,而

关键词：血吸虫感染小鼠细胞因子白细胞介素-2 白细胞介素-5 IL-5 IL-2 抗原