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云南省西部地区宿主和媒介感染伯氏疏螺旋体的基因多样性调查与分析

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中国人兽共患病学报 2024年第3期40卷 208-213页

作者：何志海和仙孙毅蒋宝贵邵宗体张云李玉琼浦恩念姚明国王帆别双双高子厚江佳富杜春红云南省地方病防治所云南省自然疫源性疾病防控重点实验室大理671000 深圳市光明区疾病预防控制中心深圳518106 云南省迪庆州疾病预防控制中心香格里拉674400 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的了解云南省西部地区宿主动物和媒介蜱感染伯氏疏螺旋体的基因多样性,为进一步掌握该地区莱姆病菌株的特性奠定基础。方法对采用伯氏疏螺旋体5S~23S rRNA间隔区基因筛查阳性的云南西部地区采集的家畜、小型兽类、蜱虫样本,进行伯氏... 详细信息

目的了解云南省西部地区宿主动物和媒介蜱感染伯氏疏螺旋体的基因多样性,为进一步掌握该地区莱姆病菌株的特性奠定基础。方法对采用伯氏疏螺旋体5S~23S rRNA间隔区基因筛查阳性的云南西部地区采集的家畜、小型兽类、蜱虫样本,进行伯氏疏螺旋体鞭毛蛋白基因(FLA基因)和16S rRNA基因的检测,综合分析病原体的基因信息,了解当地流行株的生物学特性及流行特征。结果共检测301份样本,共检出7种基因型伯氏疏螺旋体,其中宿主动物共检出5种:***(阿弗西尼疏螺旋体)、***(伽氏疏螺旋体)、*** s.s.(狭义伯氏疏螺旋体)、***(日本疏螺旋体)、***(法雷斯疏螺旋体);媒介蜱检出7种:***(阿弗西尼疏螺旋体)、***(伽氏疏螺旋体)、*** s.s.(狭义伯氏疏螺旋体)、***(日本疏螺旋体)、***(法雷斯疏螺旋体)、***(中华基因型伯氏疏螺旋体)及未定种Borrelia sp.。***、***和*** s.s.为优势流行株,占总阳性的85.04%(256/301)。不同地区、不同来源的相同基因型株基因序列存在种内差异,同一地区的宿主和媒介中检出的相同基因型螺旋体具有较高的同源性和较近的遗传进化关系。结论云南西部地区宿主和媒介感染伯氏疏螺旋体基因型具有较高的多样性特征,存在多种致病基因型,给当地人群的健康造成一定危害,需加强防范。

关键词：云南西部伯氏疏螺旋体宿主动物蜱多样性

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解磷解钾自生固氮菌的分离筛选及鉴定

华中农业大学学报 2005年第1期24卷 43-48页

作者：蒋宝贵赵斌华中农业大学农业微生物国家重点实验室武汉430070

　从华中农业大学农场试验田不同土壤中分离到一系列解磷、解钾及自生固氮菌,经比较筛选得到 1组菌株PJ07、P01、HZ03、NY03,它们分别具有较强的降解难溶态的磷、分解有机磷、降解难溶态的钾和固定空气中游离态氮的能力。各菌株经鉴定... 详细信息

　从华中农业大学农场试验田不同土壤中分离到一系列解磷、解钾及自生固氮菌,经比较筛选得到 1组菌株PJ07、P01、HZ03、NY03,它们分别具有较强的降解难溶态的磷、分解有机磷、降解难溶态的钾和固定空气中游离态氮的能力。各菌株经鉴定分别属于或接近假单胞菌属(Pseudomonas)、巨大芽孢杆菌 (Bacillusmegateri um)、胶质芽孢杆菌(Bacillusmucilaginosus)和圆褐固氮菌(Azotobacterchrococcum)。统计学分析表明由各菌株组成的复合菌剂在玉米盆栽试验中可显著增加作物的总生物量。

关键词：解磷细菌解钾细菌自生固氮菌筛选与鉴定

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复合微生物肥料高效菌株的筛选

安徽农业科学 2005年第1期33卷 56-57页

作者：董昌金蒋宝贵湖北师范学院生物系湖北黄石435002 华中农业大学农业微生物国家重点实验室湖北武汉430070

从供试土壤样品中筛选出几株高效解磷、解钾和自生固氮菌菌株 ,其中 ,以菌株P1 、K1 、N1 解磷、解钾和固氮效果最好。盆栽试验结果显示 :与对照相比 ,高效菌株组合P1 K1 N1 能使番茄和油菜的生物量分别提高 65 .9%和 68.4%。

关键词：解磷细菌解钾细菌自生固氮菌微生物肥料

复合微生物肥料有效菌株的筛选及代表菌株的分子标记

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复合微生物肥料有效菌株的筛选及代表菌株的分子标记

作者：蒋宝贵华中农业大学

学位级别：硕士

过量的施用化学肥料，对维持生态平衡和保护环境不利，微生物肥料具有长效、无毒、无污染、节约能源、成本低等特点，可弥补化学肥料的缺点和不足。开发和利用微生物肥料的一个关键问题是继续寻找具有高效固氮、解磷、解钾等为作物提供... 详细信息

过量的施用化学肥料，对维持生态平衡和保护环境不利，微生物肥料具有长效、无毒、无污染、节约能源、成本低等特点，可弥补化学肥料的缺点和不足。开发和利用微生物肥料的一个关键问题是继续寻找具有高效固氮、解磷、解钾等为作物提供大量或微量元素或对作物具有促生功能的菌株。本实验以解磷、解钾和自生固氮细菌为研究目标，从华中农业大学校园内的土壤样品中分离和筛选到解磷细菌9株、解钾细菌5株和自生固氮细菌4株，将初筛得到的解磷细菌用只含有难溶磷矿粉的基本培养基摇瓶培养，然后用钼锑抗比色法测速效磷含量，结果显示供试的解磷菌株中菌株PJ07和PJ06的可溶性磷浓度分别达到4.7me/kg和3.7me/kg，比对照(2.4mg／kg)增加95.8％和54.1％，大豆盆栽结果显示，接种菌株PJ07的处理比不接种的对照生物量增加43.7％和40.2％，经统计学分析差异达到显著水平(P＜0.05)。将初筛得到的解钾细菌接种到只含有钾长石矿粉的基本培养基摇瓶培养，用原子吸收法测速效钾含量，结果显示供试的5个菌株中速效钾浓度分别为55.9mg／kg、45.6mg／kg、43.3mg／kg、42mg／kg、38.8mg／kg，最低的比对照(21.4mg/g)多34.6％，最高的为HZ03，达到55.9mg／kg，比对照多161％，大豆盆栽结果显示，接种HZ03的处理比不接种的对照生物量增加32％，经统计分析差异也达到显著水平(P＜0.05)。将平板初筛得到的自生固氮菌株用气相色谱法测固氮酶活性，得到两个有较高固氮酶活的菌株NY03和NY02，其酶活分别达到0.43和0.39μmol CH／发酵液(mL)×反应时间(h)。将上述各菌株经过微生物形态学和生理生化鉴定，结果为菌株PJ07属于假单胞菌属(Pseudomonas);菌株P01为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium);菌株HZ03为胶质芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus);菌株NY03为圆褐固氮菌(Azotobacter chrococcum)。实验以这4个菌株为供试菌株，研究了它们的生长曲线、最佳碳源、最佳氮源、最佳碳氮比、最适初始pH、液体发酵最佳接种量、以及固体发酵生长情况和堆肥试验等常规发酵特征，以期在生产中具有指导作用。结果显示，菌株PJ07生长迅速，第6h即进入对数生长期，第30h活菌数达到10个／mL，其最佳碳源为葡萄糖或蔗糖，最佳氮源为NHCl，最佳C／N介于20～25之间，最佳接种量6％;菌株P01和NY03对数生长期在9h～27h之间，最大活菌数109个／mL，最佳碳源分别为淀粉和蔗糖，最佳氮源均为NHNO，最佳C／N均为20，最佳接种量均为3％;菌株HZ03生长较为缓慢，对数期介于15h～27h之间，对数期短暂，稀释平板计数显示最大活菌数只能达到10个／mL，最佳碳源和氮源分别为淀粉和NHCl，最佳C／N为25，最佳接种量6％;各菌株最适初始pH均为7，在以麸皮和草糠为基质的固体培养基上，无论单独接种还是混合接种，生长情况良好，没有出现相互抑制的现象，最大活菌数在2d内都能达到10个/g。为了能够观察菌株在土壤中的定殖与分布情况，试验对菌株PJ07成功进行了绿色荧光蛋白基因(睁)和发光酶基因(l讼月B)的基因标记，但遗憾的是未能得到稳定的遗传。在上述实验结果的基础上，将各菌株经斜面培养、摇瓶培养、固体发酵制成复合菌剂，经2种不同的方法应用到盆栽中去，其一接种到堆肥基质再施用到土壤，种植油菜;其二直接接种到土壤，种植番茄和玉米;记载植株总生物量。结果显示，油菜盆栽比对照增加64%，番茄盆栽比对照增加82%，玉米盆栽比对照增加1倍，统计分析表明差异达到显著水平(P<0 .05)，在玉米盆栽中，除了对照外还设了三种市售的微生物肥料作比较，这三种微生物肥料分别来自北京、上海、河北，结果显示接种这三种肥料的处理分别比对照增加85%、6%、n%，本试验的复合菌剂肥效优于其它的生物肥。

关键词：微生物肥料解磷细菌解钾细菌自生固氮菌

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解磷细菌PD01的分离与分子标记

湖北农业科学 2005年第1期44卷 62-63页

作者：董昌金蒋宝贵湖北师范学院生物系华中农业大学农业微生物国家重点实验室武汉430070 华中农业大学农业微生物国家重点实验室

分离筛选出了一株解磷细菌PD01菌株,该菌株被鉴定为巨大芽孢杆菌。利用luxAB基因对该菌株进行了荧光标记,传代实验证明,携带luxAB基因的质粒在细菌分裂过程中能稳定遗传。

关键词：解磷细菌分离鉴定分子标记检测

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蜱传莱姆螺旋体跨物种传播的信号调控

中国人兽共患病学报 2012年第3期28卷 298-301页

作者：杨章女朱函坪蒋宝贵徐海君曹务春浙江省疾病预防与控制中心杭州310053 中国军事医学科学研究院微生物流行病研究所北京100071 浙江大学昆虫科学研究所杭州310058

莱姆病（LD）是由硬蜱属（Ixodes）传播的自然疫源性疾病,其病原体是呈革兰氏阴性的伯氏疏螺旋体（Borrelia burgdorferi sensu lato）。莱姆病可引起皮肤、关节、心血管和中枢神经系统组织等多系统感染,从而被世界卫生组织列为应重点... 详细信息

莱姆病（LD）是由硬蜱属（Ixodes）传播的自然疫源性疾病,其病原体是呈革兰氏阴性的伯氏疏螺旋体（Borrelia burgdorferi sensu lato）。莱姆病可引起皮肤、关节、心血管和中枢神经系统组织等多系统感染,从而被世界卫生组织列为应重点防治研究的新发现传染病之一。

关键词：莱姆螺旋体信号调控 burgdorferi 传播自然疫源性疾病物种蜱传伯氏疏螺旋体

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青少年体验式法治教育的理念与实践

青少年法治教育 2019年第3期 11-13页

作者：蒋宝贵辽宁省阜新市太平区实验小学

为切实履行维护青少年合法权益的基本职能,充分发挥社会教育在青少年教育格局中的重要作用,我在积极探索少先队组织服务青少年发展新举措的同时,结合学校少先队建设的现状,不断探索体验式法治教育新模式。少先队法治教育,是通过向教育对... 详细信息

为切实履行维护青少年合法权益的基本职能,充分发挥社会教育在青少年教育格局中的重要作用,我在积极探索少先队组织服务青少年发展新举措的同时,结合学校少先队建设的现状,不断探索体验式法治教育新模式。少先队法治教育,是通过向教育对象(少先队队员)传授法律知识、法律理论,达到培养其法治意识、树立其法治观念、提高其法律素质目的的教育活动。

关键词：法治教育模拟法庭法律知识体验式

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茶薪菇高产栽培技术

河南农业科学 2001年第7期30卷 44-45页

作者：康源春蒋宝贵袁瑞奇孔维丽王守刚河南省农业科学院食用菌研究开发中心郑州450002

茶薪菇又名茶树菇、杨树菇,隶属伞菌目、田蘑属.茶薪菇子实体盖肥、柄脆,气味香浓,口感细嫩滑爽,风味极佳.长期食用能治疗胃冷、肾炎、水肿、小便不利等疾病,并且具有降血压、降胆固醇之功效.自然条件下茶薪菇多发生于春秋两季,经试验... 详细信息

茶薪菇又名茶树菇、杨树菇,隶属伞菌目、田蘑属.茶薪菇子实体盖肥、柄脆,气味香浓,口感细嫩滑爽,风味极佳.长期食用能治疗胃冷、肾炎、水肿、小便不利等疾病,并且具有降血压、降胆固醇之功效.自然条件下茶薪菇多发生于春秋两季,经试验在人为条件下能周年栽培,而且栽培原料丰富,技术容易掌握.

关键词：食用菌茶薪菇栽培技术

伯氏疏螺旋体活体成像动物模型穿梭载体的构建

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中华微生物学和免疫学杂志 2008年第2期28卷 170-171页

作者：蒋宝贵何静褚宸一张泮河赵秋敏詹琳杨红孙毅曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

莱姆病是由伯氏疏螺旋体（Borrelia burgdorferi，又称莱姆病螺旋体）引起的重要的动物疫源性疾病。伯氏疏螺旋体的分子遗传学研究缺乏相关载体，遗传学转化异常困难，因此对于伯氏疏螺旋体致病因子的研究进展缓慢。伯氏疏螺旋体具有较... 详细信息

莱姆病是由伯氏疏螺旋体（Borrelia burgdorferi，又称莱姆病螺旋体）引起的重要的动物疫源性疾病。伯氏疏螺旋体的分子遗传学研究缺乏相关载体，遗传学转化异常困难，因此对于伯氏疏螺旋体致病因子的研究进展缓慢。伯氏疏螺旋体具有较大的遗传差异性，如果在动物实验中采用活体成像技术便可直接观察病原体在小鼠体内的分布、迁移和定植规律，

关键词：伯氏疏螺旋体穿梭载体动物模型体成像莱姆病螺旋体分子遗传学疫源性疾病