检索结果-南通市图书馆

奶牛结合珠蛋白生物信息学分析及其多克隆抗体的制备

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医学报 2024年第3期44卷 558-564,594页

作者：刘佩雯董伟韬陈艳赵晓萱贺海健卢挺张全伟张勇刘光远甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 甘肃省动物生殖生理与繁殖调控重点实验室甘肃兰州730070 中国农业科学院、兰州兽医研究所、家畜疫病病原生物学国家重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046 甘肃农业大学生命科学技术学院甘肃兰州730070

结合珠蛋白(haptoglobin,Hp)是奶牛罹患乳房炎期间一种重要的标志性蛋白,其在血液和乳汁中含量变化与患牛乳房炎病情密切相关。为制备奶牛Hp多克隆抗体及了解其理化性质、结构和功能,本研究通过PCR成功扩增获得奶牛Hp完整CDS区序列,对... 详细信息

结合珠蛋白(haptoglobin,Hp)是奶牛罹患乳房炎期间一种重要的标志性蛋白,其在血液和乳汁中含量变化与患牛乳房炎病情密切相关。为制备奶牛Hp多克隆抗体及了解其理化性质、结构和功能,本研究通过PCR成功扩增获得奶牛Hp完整CDS区序列,对其进行生物信息学分析和pQE-80L-Hp原核表达载体的构建。将测序成功的重组质粒转化至M15感受态细胞,用1 mmol/L IPTG诱导重组蛋白的表达。重组蛋白表达后用亲和层析法进行纯化。利用纯化后的蛋白免疫动物制备多克隆抗体,利用ELISA方法和Western blot对多克隆抗体进行效价检测和反应性分析。结果显示,Hp是一种不稳定亲水性蛋白,分子式为C_(1936)H_(3049)N_(545O567)S_(19),编码388个氨基酸残基,由α-螺旋、延伸链、β-转角和无规则卷曲4种结构组成,有15个抗原决定族,36个磷酸化位点。在1~42氨基酸位置存在信号肽,无跨膜结构域与CD163、MMP9、CP等蛋白具有较好的互作关系。pQE-80L-Hp在大肠杆菌中经诱导表达的重组蛋白的相对分子质量为42 kDa,主要以包涵体的形式存在,用其免疫兔子制备得到的多克隆抗体效价可达到1∶25600。本研究结果不仅有助于了解Hp的结构,而且为后续进行其功能的研究以及利用其作为标志物进行奶牛乳房炎早期高效快速诊断技术的研发奠定了基础。

关键词：结合珠蛋白生物信息学原核表达多克隆抗体奶牛

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

处理函数方程问题的基本方法——赋值和代换

数学通讯 2015年第Z4期 105-107页

作者：董伟韬华中师范大学一附中高三(21)班

在国内外数学竞赛和高校自主招生考试中,经常出现与函数方程有关的问题,这类问题一般不给出具体的函数形式,只给出函数的一些性质和一些关系式或函数方程.含有未知函数的等式叫做函数方程,使这个等式成立的未知函数叫做函数方程的解,求... 详细信息

在国内外数学竞赛和高校自主招生考试中,经常出现与函数方程有关的问题,这类问题一般不给出具体的函数形式,只给出函数的一些性质和一些关系式或函数方程.含有未知函数的等式叫做函数方程,使这个等式成立的未知函数叫做函数方程的解,求函数方程的解的过程叫做解函数方程.函数方程的变化比较多,求解技巧性很强,往往涉及不同领域的数学知识,本文介绍解决函数方程问题的常见方法——赋值法和代换法.

关键词：函数方程基本方法赋值法方程的解代换法

非靶向脂质组学探究花生四烯酸对奶牛乳腺上皮细胞的影响

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医学报 2023年第10期43卷 2086-2092页

作者：卢挺董伟韬陈艳赵晓萱刘佩雯贺海健张全伟贺钰烜赵兴绪张勇甘肃农业大学动物医学学院甘肃兰州730070 甘肃省动物生殖生理及繁殖调控重点实验室甘肃兰州730070 甘肃农业大学生命科学与技术学院甘肃兰州730070

为探讨外源性花生四烯酸(arachidonic acid,AA)对奶牛乳腺上皮细胞脂质代谢的影响,本试验采用超高效液相色谱-四级杆静电轨道阱质谱(ultra high performance liquid chromatography Q-exactive orbitrap mass spectrometry,UHPLC-QE-MS)的非靶向脂质组学技术,识别和量化AA处理奶牛正常乳腺上皮细胞后改变的内源性脂质代谢产物。通过非靶向脂质组学分析,共检测到1145种脂质代谢物,涉及6个脂质类别,根据正交偏最小二乘判别分析(orthogonal-partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)显示有10种脂质代谢物含量存在显著性差异。其中,AA处理组中AcylGlcADG(14:1/14:1/14:1)、GlcADG(18:2/22:2)、MAG(18:1)、PC(22:5/22:5)、PC(4:0/27:0)、PC(7:0/26:1)、PEtOH(16:0/16:1)、PEtOH(16:1/18:1)和TG(16:0/18:0/20:4)的含量显著降低;SHexCer(d35:2)含量显著升高。综上,AA显著改变了奶牛乳腺上皮细胞的脂质代谢谱,这些差异表达的脂质分子可能成为奶牛乳房炎发展过程中的相关脂类干预靶点。

关键词：花生四烯酸非靶向脂质组学 UHPLC-QE-MS 奶牛乳腺上皮细胞

信息素质教育在细胞生物学课程中的探索与改革

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

贵阳学院学报（自然科学版） 2022年第1期17卷 113-116页

作者：董伟韬杜向宏贺钰烜赵兴绪张勇甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

信息素养技能对于本科生来说至关重要,它涵盖了检索、理解、评估以及使用信息的能力。细胞生物学作为生物学相关专业的主流学科,其大多数课程内容都涉及到很多的前沿研究,也容易激发学生的自主想象力和探索意识。但是很多专业课程没有... 详细信息

信息素养技能对于本科生来说至关重要,它涵盖了检索、理解、评估以及使用信息的能力。细胞生物学作为生物学相关专业的主流学科,其大多数课程内容都涉及到很多的前沿研究,也容易激发学生的自主想象力和探索意识。但是很多专业课程没有涉及信息素质教育,这阻碍学生对相关知识的深入探讨。通过在细胞生物学课程中穿插以及发布一系列作业任务,来引导学生进行信息素质教育,并针对性通过实际完成度的探讨来说明信息素质教育的重要性。

关键词：信息素养细胞生物学改革

绵羊SYCE1基因的克隆及其在雄性生殖轴系中的表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2020年第12期48卷 1-8,17页

作者：杨洋李宗帅董伟韬胡俊杰赵兴绪张勇甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 甘肃农业大学生命科学技术学院甘肃兰州730070

【目的】克隆分析绵羊联会复合中心组分蛋白1(synaptonemal complex central element protein 1,SYCE1)基因,检测其在雄性生殖轴系中的表达,探索SYCE1对雄性动物生殖发育的调控机制。【方法】以雄性绵羊(小尾寒羊)为研究对象,通过RT-PC... 详细信息

【目的】克隆分析绵羊联会复合中心组分蛋白1(synaptonemal complex central element protein 1,SYCE1)基因,检测其在雄性生殖轴系中的表达,探索SYCE1对雄性动物生殖发育的调控机制。【方法】以雄性绵羊(小尾寒羊)为研究对象,通过RT-PCR技术克隆SYCE1基因序列,并对该序列及其编码的蛋白进行生物信息学分析;利用qRT-PCR、Western blotting技术分析SYCE1在绵羊下丘脑-垂体-睾丸生殖轴及不同发育阶段(40日龄、3月龄和12月龄)睾丸中的表达情况;采用免疫组织化学染色方法检测SYCE1蛋白在不同发育阶段睾丸组织中的分布情况。【结果】核苷酸序列分析表明,SYCE1基因CDS全长972 bp,编码274个氨基酸。进化树结果表明,绵羊SYCE1氨基酸序列与山羊、欧洲普通牛、野牛、白尾鹿等的氨基酸同源性高;不同物种之间同源性分析发现,SYCE1基因在进化中高度保守;qRT-PCR、Western blotting检测结果表明,SYCE1 mRNA及其蛋白在绵羊的下丘脑、垂体、睾丸及附睾组织中均有表达,其中睾丸组织表达量极显著高于其他组织(P<0.01),对于不同发育阶段的睾丸组织SYCE1表达水平随着绵羊年龄的增加逐渐升高;免疫组织化学染色结果显示,SYCE1蛋白在40日龄定位于睾丸间质细胞和少量精原细胞,在3月龄定位于睾丸初级精母细胞、精原细胞和间质细胞,在12月龄定位于睾丸初级精母细胞、次级精母细胞、精原细胞、间质细胞和支持细胞。【结论】SYCE1在雄性绵羊生殖轴和不同发育阶段睾丸中均有表达,随着绵羊年龄的增加SYCE1在睾丸组织中的表达水平逐渐上调,说明其与绵羊睾丸器官发育成熟度相关,推断其参与雄性绵羊生殖轴调控。

关键词：联会复合中心组分蛋白1(SYCE1)基因绵羊生殖轴睾丸

双峰母驼肌肉中TPM2与TPM3表达模式及对肌纤维细胞凋亡的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

动物医学进展 2021年第3期42卷 36-41页

作者：李海江王琪李宗帅董伟韬张勇赵兴绪甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

为了验证原肌球蛋白2(TPM2)与原肌球蛋白3(TPM3)在繁殖季节和非繁殖季节双峰母驼不同肌肉组织(平滑肌、骨骼肌、心肌)中的具体差异表达情况,揭示TPM2肌纤维细胞中的分布以及敲低后对其凋亡的影响,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白免... 详细信息

为了验证原肌球蛋白2(TPM2)与原肌球蛋白3(TPM3)在繁殖季节和非繁殖季节双峰母驼不同肌肉组织(平滑肌、骨骼肌、心肌)中的具体差异表达情况,揭示TPM2肌纤维细胞中的分布以及敲低后对其凋亡的影响,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹,分别对TPM2和TPM3对应的mRNA及蛋白在繁殖季节和非繁殖季节双峰母驼不同肌肉组织的表达进行分析,结合免疫荧光技术检测TPM2在细胞中定位情况,设计TPM2-siRNA序列瞬时转染双峰驼肌纤维细胞,检测0 h、24 h、48 h时促凋亡蛋白(Bax)和细胞淋巴瘤2(Bcl-2)的表达情况。结果显示,繁殖季节双峰驼肌肉组织中TPM2与TPM3对应的mRNA的表达极显著高于非繁殖季节(P<0.01),蛋白的表达显著高于非繁殖季节(P<0.05);TPM2与TPM3对应的mRNA和蛋白在繁殖季节与非繁殖季节骨骼肌肌肉组织中的表达量均极显著高于同期其他组织(P<0.01);肌纤维细胞敲低TPM2基因后,Bax基因表达上调,Bcl-2基因表达下调。TPM2与TPM3在繁殖季节各肌肉中的表达高于非繁殖季节肌肉组织,且在同期中表现出它们在骨骼肌中表达量较高的规律,敲低TPM2基因,能促进肌纤维细胞凋亡。

关键词：双峰驼原肌球蛋白2 原肌球蛋白3 siRNA 凋亡

外源性花生四烯酸对脂磷壁酸引起的奶牛乳腺上皮细胞炎症的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

外源性花生四烯酸对脂磷壁酸引起的奶牛乳腺上皮细胞炎症的影响

《兽医内科学》在知农爱农新型人才培养中的应用

中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第八届会员代表大会暨第十五次学术研讨会

作者：陈艳卢挺董伟韬张勇赵兴绪甘肃农业大学动物医学院甘肃省动物生殖生理及繁殖调控重点实验室

引言奶牛的乳腺特别容易感染多种病原菌,其中金黄色葡萄球菌(***)和大肠杆菌(***)是奶牛乳房炎最常见的病原体,而金黄色葡萄球菌通常会引起亚临床性乳房炎,这种乳房炎的炎症反应更加持久,对治疗更有抵抗力[1]。脂磷壁酸(LTA)是金黄色葡...

引言奶牛的乳腺特别容易感染多种病原菌,其中金黄色葡萄球菌(***)和大肠杆菌(***)是奶牛乳房炎最常见的病原体,而金黄色葡萄球菌通常会引起亚临床性乳房炎,这种乳房炎的炎症反应更加持久,对治疗更有抵抗力[1]。脂磷壁酸(LTA)是金黄色葡萄球菌的细胞壁成分,也是诱发奶牛乳房炎的病原体相关分子模式(PAMPs),在一定剂量下能使奶牛乳腺上皮细胞产生炎症,迅速入侵奶牛乳腺组织进而产生奶牛乳房炎[2,3]。

关键词：

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

陇东学院学报 2021年第2期32卷 83-85页

作者：贺钰烜胡俊杰张勇杜向宏董伟韬赵兴绪甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070

为了做好《兽医内科学》的教学工作,为学生毕业后解决动物生产实际问题奠定基础,以《兽医内科学》在知农爱农新型人才培养中的应用为背景,从加强课堂教学、建立课程文化、以实践激励学生进取、完善课程考核方式四个方面,就《兽医内科学... 详细信息

为了做好《兽医内科学》的教学工作,为学生毕业后解决动物生产实际问题奠定基础,以《兽医内科学》在知农爱农新型人才培养中的应用为背景,从加强课堂教学、建立课程文化、以实践激励学生进取、完善课程考核方式四个方面,就《兽医内科学》教学提出自己的思考与见解,以期引导学生领会和应用兽医学专业知识,促进该课程的教学相长,从而为培养知农爱农新型人才做出贡献。

关键词：《兽医内科学》知农爱农新型人才应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

家蚕蚕蛹蛋白质组二维电泳体系探究

家蚕蚕蛹蛋白质组二维电泳体系探究