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破而后立:骨骼系统中破骨细胞新功能解析

陆军军医大学学报 2022年第1期44卷 79-88页

作者：董世武胡文辉陆军军医大学(第三军医大学)生物医学工程与影像医学系生物医学材料学教研室组织工程国家/地方联合工程实验室重庆400038

骨骼系统为支撑身体、协调躯体运动、控制矿物质稳态和造血提供了重要的基础。破骨细胞是由单核/巨噬细胞造血谱系前体细胞融合而成的特化细胞,在骨稳态和健康维持中至关重要。已有大量实验证实其细胞形成和功能失调与骨质疏松症、骨折... 详细信息

骨骼系统为支撑身体、协调躯体运动、控制矿物质稳态和造血提供了重要的基础。破骨细胞是由单核/巨噬细胞造血谱系前体细胞融合而成的特化细胞,在骨稳态和健康维持中至关重要。已有大量实验证实其细胞形成和功能失调与骨质疏松症、骨折愈合、骨关节炎和原发性/转移性骨肿瘤等密切相关。一直以来,破骨细胞作为“噬骨者(bone eaters)”被聚焦于探讨其在骨稳态和疾病中的角色。近年来,随着单细胞标记和检测技术的快速发展并在骨领域中的广泛应用,新的“破骨细胞亚型”概念及其功能不断得到解析和完善。骨微环境稳态是破骨细胞及其主导的细胞网络共同活动的结果;从细胞网络出发,系统阐释破骨细胞与骨/关节疾病的内在关系,才能更好地理解疾病的本质。“破而后立”——是本课题组所提出通过调控破骨细胞来重建骨微环境稳态、以延缓骨/关节疾病进程的新理念。同时,将“破骨细胞”概念引入传统组织工程骨与软骨构筑技术,有望实现骨/软骨疾病干预和再生修复的综合应用。

关键词：破骨细胞骨骼系统 H型血管血管相关破骨细胞 osteomorph 骨与关节疾病

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钙粘附蛋白及其在骨组织形成中的研究进展

免疫学杂志 2002年第B6期18卷 200-204页

作者：刘继周董世武第三军医大学健康教育教研室重庆400038 第三军医大学解剖学教研室重庆400038

钙粘附蛋白 (cadherin)是一类钙离子依赖性介导嗜同性细胞细胞间粘附的跨膜糖蛋白 ,根据其分子结构可分为 4类 :经典钙粘附蛋白、桥粒钙粘附蛋白、原钙粘附蛋白和钙粘附蛋白相关蛋白。钙粘附蛋白在胚胎发育、组织形成、肿瘤浸润转移... 详细信息

钙粘附蛋白 (cadherin)是一类钙离子依赖性介导嗜同性细胞细胞间粘附的跨膜糖蛋白 ,根据其分子结构可分为 4类 :经典钙粘附蛋白、桥粒钙粘附蛋白、原钙粘附蛋白和钙粘附蛋白相关蛋白。钙粘附蛋白在胚胎发育、组织形成、肿瘤浸润转移及细胞信号转导等方面具有多种生物学功能。

关键词：钙粘附蛋白骨组织形成研究进展细胞粘附成骨细胞

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成体干细胞参与创伤修复基本模式的思考

中华医学杂志 2007年第18期87卷 1227-1229页

作者：邹仲敏程天民粟永萍董世武第三军医大学预防医学院全军复合伤研究所国家重点实验室重庆400038

目前应用成体干细胞促进创伤修复的实验研究日益增多，但由于我们对于细胞参与创伤修复的细胞和分子机制所知甚少，所以难以产生有效的干预措施。来源于间充质的成体间充质干细胞（MSC）是创伤修复重要的种子细胞，其促进创伤愈合的过... 详细信息

目前应用成体干细胞促进创伤修复的实验研究日益增多，但由于我们对于细胞参与创伤修复的细胞和分子机制所知甚少，所以难以产生有效的干预措施。来源于间充质的成体间充质干细胞（MSC）是创伤修复重要的种子细胞，其促进创伤愈合的过程同时体现了自身的细胞分化过程。研究表明，在不同创伤和病损组织中，外源输注或内源性的MSC的生物学特性（表型、细胞骨架、增殖、黏附、迁移）和分子生物学特性（细胞的信号传导通路和基因表达发生变化）不断发生改变，

关键词：成体干细胞创伤修复分子生物学特性间充质干细胞信号传导通路实验研究分子机制干预措施

微小RNA-451靶向调节钙结合蛋白39对MSCs成骨分化的促进效应

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中国修复重建外科杂志 2013年第9期27卷 1122-1127页

作者：康夏康菲杨波郭洪峰权毅董世武第三军医大学解剖学教研室生物力学实验室重庆400038 解放军成都军区总医院骨科

目的探讨微小RNA-451(micro RNA-451,miRNA-451)靶向调节钙结合蛋白39(calcium binding protein 39,CAB39)表达,促进MSCs向成骨细胞分化的效应。方法选择pMIR-report质粒及pRL-TK质粒,通过双荧光素酶基因报告系统,鉴定CAB39是否为miRNA-451的靶基因。将pre-miRNA-451(A组)及anti-miRNA-451(C组)分别转染到C3H10T1/2细胞中,同时设置相应的pre-miRNA阴性对照组(B组)和anti-miRNA阴性对照组(D组);成骨诱导培养7、14 d,采用实时荧光定量PCR检测成骨标志物Runx2、ALP mRNA相对表达量;诱导培养14 d,采用Western blot检测细胞中CAB39蛋白表达,茜素红染色观察细胞外钙基质沉积情况。结果经鉴定,CAB39是miRNA-451的靶基因。实时荧光定量PCR检测示,成骨诱导培养7、14 d,A组Runx2、ALP mRNA相对表达量显著高于B组,C组显著低于D组,差异均有统计学意义(P<0.05)。成骨诱导培养14 d,Western blot检测示A组CAB39蛋白表达量为0.55±0.05,较B组1.00±0.07明显降低;而C组为1.21±0.05,较D组1.00±0.04明显增高;差异均有统计学意义(P<0.05)。茜素红染色示A组细胞外钙基质沉积较B组明显增多,而C组细胞外钙基质沉积较D组明显减少。结论 miRNA-451可通过抑制CAB39表达,促进MSCs成骨分化。

关键词：微小RNA-451 钙结合蛋白39 MSCs 成骨分化钙沉积

miRNA-144靶向调节钙粘蛋白11对间充质干细胞成骨分化的抑制效应

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第三军医大学学报 2013年第10期35卷 922-926页

作者：康夏康菲杨波郭洪峰权毅董世武第三军医大学基础医学部人体解剖学教研室重庆市生物力学重点实验室重庆400038 成都军区总医院骨科成都610083

目的证实miRNA-144靶向调节钙粘蛋白11(Cad-11)表达,抑制间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSCs)的成骨分化。方法通过双荧光素酶报告系统对Cad-11与miRNA-144的靶基因关系进行鉴定;将pre-miR-144及anti-miR-144分别转染MSCs,成骨诱导7、14 d后,实时定量PCR和蛋白印迹方法检测细胞中Cad-11及成骨标志物Runx2、ALP的表达情况,分析其与MSCs成骨分化的变化关系。黏附实验检测miRNA-144对MSCs成骨分化过程中黏附的影响。结果 Cad-11是miRNA-144的靶基因;miRNA-144在成骨诱导第7、14天可明显抑制Cad-11、Runx2和ALP的表达(P<0.05),同时降低MSCs的黏附性。结论 miRNA-144通过抑制Cad-11的表达对间充质干细胞的成骨分化起负向调控的作用。

关键词： miRNA-144 钙粘蛋白11 间充质干细胞骨生成

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火电厂灰(渣)浆泵配置调研分析

电力建设 1999年第11期20卷 18-19页

作者：于长友孙建兴董世武中国电力建设工程咨询公司北京市100011 西北电力设计院西安市710032

通过对１０多个火电厂３００ＭＷ及以上机组除灰系统灰（渣）浆泵运行应用情况调研，提出火电厂水力除灰系统灰（渣）浆泵配置原则，即：对于灰渣分除、混除或除渣系统，离心泵采用一运一备、二运二备或三运二备设置方式；对于除灰系统... 详细信息

通过对１０多个火电厂３００ＭＷ及以上机组除灰系统灰（渣）浆泵运行应用情况调研，提出火电厂水力除灰系统灰（渣）浆泵配置原则，即：对于灰渣分除、混除或除渣系统，离心泵采用一运一备、二运二备或三运二备设置方式；对于除灰系统，柱塞泵可采用一运一备、二运二备或三运二备的配置方式。此调研分析为《火力发电厂设计技术规程》有关条文的修编提供了依据。

关键词：火电厂灰浆泵除灰系统

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低阶煤载体浮选试验研究

煤炭工程 2019年第3期51卷 136-140页

作者：董世武黄根中国矿业大学(北京) 北京100083

以内蒙古麻黄梁地区某选煤厂低阶煤为研究对象,采用山西某炼焦煤选煤厂重选精煤作为载体原料,开展了低阶煤载体浮选试验研究。对低阶煤进行了工业分析和XRD分析,结果表明:煤样挥发分高,煤中黏土矿物主要有高岭石和蒙脱石。低阶煤载体浮... 详细信息

以内蒙古麻黄梁地区某选煤厂低阶煤为研究对象,采用山西某炼焦煤选煤厂重选精煤作为载体原料,开展了低阶煤载体浮选试验研究。对低阶煤进行了工业分析和XRD分析,结果表明:煤样挥发分高,煤中黏土矿物主要有高岭石和蒙脱石。低阶煤载体浮选试验结果表明:0. 5～0. 25mm粒级的载体可大幅提高低阶煤的浮选效果,随着载体粒度减小,低阶煤浮选回收率逐渐减弱。0. 5～0. 25mm粒级载体的回收率可达到98. 92%。最后对载体强化低阶煤浮选的机理进行了探讨。

关键词：低阶煤载体浮选浮选完善指标

核心结合因子α1对骨髓间充质干细胞成骨细胞标志基因表达的影响

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中国修复重建外科杂志 2005年第9期19卷 746-750页

作者：董世武应大君段小军朱楚洪刘光久糜建红第三军医大学解剖学教研室生物力学研究室重庆400038 西南医院骨科

目的探讨核心结合因子α1(core-binding factor α1,Cbfa1)对骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨定向分化的作用. 方法抽取3月龄日本大白兔股骨骨髓,密度梯度离心获得MSCs,以Cbfa1重组腺病毒转染第3代MSCs,3 d后免疫荧... 详细信息

目的探讨核心结合因子α1(core-binding factor α1,Cbfa1)对骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨定向分化的作用. 方法抽取3月龄日本大白兔股骨骨髓,密度梯度离心获得MSCs,以Cbfa1重组腺病毒转染第3代MSCs,3 d后免疫荧光法观察目的基因的表达,并于1～7 d MTT法检测其对细胞增殖的影响(Cbfa1腺病毒处理组).以正常培养组、单纯诱导组和对照腺病毒处理组作为对照,各组设置7、14 d两个时间点进行观察.RT-PCR法半定量分析Cbfa1腺病毒处理对MSCs碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(osteocalcin,OC)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)和I型胶原等多种成骨细胞标志基因的影响,同时观察Cbfa1对MSCs成脂、成肌分化指标过氧化物酶体增殖物激活受体γ2和生肌决定因子的影响. 结果①免疫荧光显示,转染Cbfa1重组腺病毒后MSCs可以表达Cbfa1;②各组MSCs增殖差异无统计学意义(P>0.05);③RT-PCR显示7、14 d,Cbfa1腺病毒处理组ALP、OC和OPN的表达均明显上调,Ⅰ型胶原的表达基本不变;④Cofa1使PPARγ、MyoD的表达受到抑制. 结论 Cbfa1能明显促进MSCs成骨方向的分化.

关键词：核心结合因子α1 骨髓间充质干细胞定向分化

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白藜芦醇促进软骨细胞肥大化的作用机制研究

第三军医大学学报 2016年第12期38卷 1392-1397页

作者：唐翔宇曹震董世武武继民军事医学科学院卫生装备研究所天津300161 第三军医大学生物医学工程学院生物医学材料学教研室重庆400038

目的探讨白藜芦醇(resveratrol,RES)对软骨前体细胞ATDC5肥大化的影响及其可能机制。方法通过CCK-8法研究不同浓度RES对ATDC5细胞活性的影响。建立软骨肥大化诱导体系,根据活性实验的安全浓度,设立对照组(0μmol/L)和RES组(1μmol/L)。q... 详细信息

目的探讨白藜芦醇(resveratrol,RES)对软骨前体细胞ATDC5肥大化的影响及其可能机制。方法通过CCK-8法研究不同浓度RES对ATDC5细胞活性的影响。建立软骨肥大化诱导体系,根据活性实验的安全浓度,设立对照组(0μmol/L)和RES组(1μmol/L)。qRT-PCR和Western blot法确定肥大化相关因子RUNX2、MMP13和COLX表达变化;甲苯胺蓝和免疫组化分析细胞外基质粘多糖及COLX、RUNX2表达;利用qRT-PCR检测软骨细胞肥大化经典通路WNT、IHH和FGF中相关因子的表达变化。结果 RES安全使用浓度为1μmol/L;与对照组相比,在肥大化诱导14 d后,RES组ATDC5细胞肥大化水平明显提升;RES组肥大化相关基因表达量在3、7、14 d时明显增加;WNT和IHH途径中促肥大化因子β-catenin和GLI2的表达水平在RES组较对照组升高,而GLI3表达水平下降。FGF途径中PI3K的表达水平较对照组没有变化。结论 RES通过激活β-catenin及GLI2,抑制GLI3,促进RUNX2表达,实现促进ATDC5肥大化的目的。

关键词：软骨前体细胞白藜芦醇肥大化软骨内成骨