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慢性鼻窦炎患者MMP-9的表达及与上皮间质转化的相关性研究

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天津医药 2024年第3期52卷 245-249页

作者：宋喜葛益林李殷宋辉成嘉明长沙市第一医院耳鼻咽喉头颈外科 410005

目的探讨基质金属蛋白酶(MMP)-9参与慢性鼻窦炎(CRS)上皮间质转化(EMT)的过程及机制。方法收集42例需手术治疗的CRS患者息肉样变的中鼻甲组织以及8例行鼻中隔成形术患者的中鼻甲组织,免疫组织化学染色、qPCR和Western blot检测MMP-9的... 详细信息

目的探讨基质金属蛋白酶(MMP)-9参与慢性鼻窦炎(CRS)上皮间质转化(EMT)的过程及机制。方法收集42例需手术治疗的CRS患者息肉样变的中鼻甲组织以及8例行鼻中隔成形术患者的中鼻甲组织,免疫组织化学染色、qPCR和Western blot检测MMP-9的表达。体外培养原代人鼻上皮细胞HNEpc,分为Control组、TGF-β1组(5μg/L TGF-β1干预)和TGF-β1+si-MMP-9组(转染si-MMP-9和5μg/L TGF-β1干预)。细胞免疫荧光染色检测MMP-9表达,Western blot检测TGF-β1、MMP-9和EMT相关蛋白E-钙黏蛋白(E-Cadherin)、波形蛋白(vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达。结果(1)CRS伴鼻息肉(CRSwNP)组患者鼻黏膜组织中MMP-9表达阳性率(54.5%,12/22)明显高于CRS不伴息肉(CRSsNP)组(25.0%,5/20)和对照组(12.8%,1/8)。CRSwNP组患者鼻黏膜中MMP-9 mRNA和蛋白相对表达水平均高于CRSsNP组和对照组(P<0.05)。(2)与Control组相比,TGF-β1组TGF-β1、MMP-9、vimentin、α-SMA表达升高,E-cadherin表达下降(P<0.05)。与TGF-β1组相比,TGF-β1+si-MMP-9组TGF-β1、MMP-9、vimentin、α-SMA表达下降,E-cadherin表达升高(P<0.05)。结论CRS患者MMP-9表达升高,其可能通过调控EMT来参与CRS发生发展。

关键词：慢性鼻窦炎 MMP-9 TGF-β1 上皮间质转化组织重塑

葛根素对豚鼠耳蜗缺血再灌注后细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

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葛根素对豚鼠耳蜗缺血再灌注后细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

作者：葛益林中南大学

学位级别：硕士

内耳微循环障碍是引起多种内耳疾病的主要致病因素之一。以往研究表明，突发性感音神经性聋、噪声性聋、老年性聋等都与内耳血流障碍有关。研究内耳微循环障碍对内耳功能和组织形态学的影响具有重要的临床意义。本研究通过建立豚鼠椎基... 详细信息

内耳微循环障碍是引起多种内耳疾病的主要致病因素之一。以往研究表明，突发性感音神经性聋、噪声性聋、老年性聋等都与内耳血流障碍有关。研究内耳微循环障碍对内耳功能和组织形态学的影响具有重要的临床意义。本研究通过建立豚鼠椎基底动脉缺血再灌注耳蜗损伤模型，观察了再灌注后各时间段耳蜗听功能及形态学的影响;运用TUNEL法、免疫组化法检测缺血耳蜗细胞凋亡情况及对凋亡相关蛋白bcl-2、bax进行分析，同时应用中药葛根素进行干预，探讨凋亡发生的可能机制及葛根素对缺血再灌注凋亡损伤的影响。研究发现，缺血再灌注造成豚鼠耳蜗明显听功能及形态学改变，TUNEL染色证实椎基底动脉缺血再灌注耳蜗细胞凋亡性损伤;葛根素对缺血再灌注耳蜗听功能及形态学有明显保护作用，同时能上调凋亡抑制因子bcl-2，下调凋亡诱导因子bax，从而达到抑制耳蜗缺血再灌注凋亡损伤的作用。

关键词：耳蜗豚鼠缺血再灌注凋亡 bcl-2 bax 葛根素 TUNEL

葛根素对豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤时听功能和NF-к Bp65的影响

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中国现代医学杂志 2008年第20期18卷 2972-2975页

作者：刘斌任基浩葛益林湖南郴州市第一人民医院耳鼻咽喉科湖南郴州423000 中南大学湘雅二医院耳鼻咽喉-头颈外科湖南长沙410011

目的探讨葛根素在豚鼠椎基底动脉缺血/再灌注耳蜗损伤中的保护作用及分子机制。方法纯白雄性豚鼠32只随机分为4组:正常对照组(n=8)、缺血再灌注7d组(n=8)、生理盐水组(n=8)和用药组(n=8)。除正常对照组外的所有豚鼠均进行手术造模。用... 详细信息

目的探讨葛根素在豚鼠椎基底动脉缺血/再灌注耳蜗损伤中的保护作用及分子机制。方法纯白雄性豚鼠32只随机分为4组:正常对照组(n=8)、缺血再灌注7d组(n=8)、生理盐水组(n=8)和用药组(n=8)。除正常对照组外的所有豚鼠均进行手术造模。用药组在缺血再灌注开始时,腹腔注射葛根素150mg/(kg·d),每日1次,连用6d。生理盐水组操作同用药组,但以等容量生理盐水代替葛根素。应用听觉脑干反应评价听功能。采用石蜡包埋的免疫组织化学技术,对各组近中轴位切片行NF-кBp65免疫组织化学染色。结果用药组ABR各波潜伏期、Ⅰ～Ⅲ波间期明显缩短,阈值降低。正常对照组、缺血再灌注7d组、用药组与生理盐水对照组ABR各波潜伏期、Ⅰ～Ⅲ波间期和阈值比较差异有显著性(P0.05)。用药组NF-кBp65表达与缺血再灌注7d组比较明显下调差异有显著性(P葛根素具有保护耳蜗缺血再灌注损伤的作用。其保护作用的机制可能与下调NF-кBp65表达表达有关。

关键词：耳蜗缺血—再灌注耳蜗损伤核转录因子-κB 葛根素

地塞米松鼓室内注射治疗难治性突发性感音神经性聋

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临床耳鼻咽喉科杂志 2006年第5期20卷 219-221页

作者：任基浩卢永德殷团芳刘斌葛益林中南大学湘雅二医院耳鼻咽喉科长沙410011

目的:观察鼓室内地塞米松注射(IDI)治疗难治性突发性感音神经性聋(突聋)的疗效。方法:25例常规方法治疗无效的突聋患者采用IDI,首次剂量为2.5mg,此后,每2天重复注药1次(每次2.5mg),共4次,总剂量10mg。用药期间密切观察记录听力改变、耳... 详细信息

目的:观察鼓室内地塞米松注射(IDI)治疗难治性突发性感音神经性聋(突聋)的疗效。方法:25例常规方法治疗无效的突聋患者采用IDI,首次剂量为2.5mg,此后,每2天重复注药1次(每次2.5mg),共4次,总剂量10mg。用药期间密切观察记录听力改变、耳鸣和眩晕等情况。结果:2例失访,23例治疗完成后1个月纯音测听检查:显效3例,0.25～4.00kHz听阈平均提高48.5dB;有效5例,平均提高18.5dB;无效15例;有效率为34.8%(8/23)。结论:IDI治疗突聋,能保证药物高浓度作用于内耳,避免全身用药可能产生的不良反应;治疗操作不复杂,创伤性小,为常规方法治疗无效的突聋患者提供了再次治疗的机会。

关键词：聋,突发性地塞米松鼓室注射

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试论医源性鼻中隔穿孔的病因及防治

中国医学工程 2013年第10期21卷 184-185页

作者：葛益林长沙市第一医院湖南长沙410005

鼻中隔穿孔在临床中相对比较常见,它在一般人群中的发病率约为0.9%。它可由多种原因引起,现在此就鼻中隔穿孔医源性病因和防治作一综述。

关键词：鼻中隔穿孔病因预防和治疗

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耳蜗缺血／缺血再灌注与细胞凋亡

中外医学研究 2010年第16期8卷 17-20页

作者：葛益林任基浩长沙市第一医院耳鼻喉科湖南长沙410005 湘雅二医院耳鼻喉头颈外科

细胞凋亡在生物体内广泛存在，研究表明，缺血／缺血再灌注损伤与细胞凋亡有密切的联系，本文仅对耳蜗缺血／缺血再灌注中细胞凋亡的发生、影响因素、调控机制及防治进行综述。

关键词：细胞凋亡耳蜗缺血/缺血再灌注

豚鼠椎基底动脉缺血/再灌注耳蜗损伤NF-кBp65表达的研究

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中国医学工程 2008年第2期16卷 110-112,118页

作者：刘斌任基浩葛益林湖南省郴州市第一人民医院耳鼻咽喉科湖南郴州423000 中南大学湘雅二医院耳鼻咽喉头颈外科湖南长沙410011

目的探讨豚鼠椎基底动脉缺血/再灌注时是否存在NF-кBp65的激活。方法经颅底径路建立豚鼠椎基底动脉缺血/再灌注耳蜗损伤模型,采用石蜡包埋免疫组织化学技术,对各组动物近中轴位切片行NF-кBp65免疫组织化学染色,光学显微镜下观察在耳... 详细信息

目的探讨豚鼠椎基底动脉缺血/再灌注时是否存在NF-кBp65的激活。方法经颅底径路建立豚鼠椎基底动脉缺血/再灌注耳蜗损伤模型,采用石蜡包埋免疫组织化学技术,对各组动物近中轴位切片行NF-кBp65免疫组织化学染色,光学显微镜下观察在耳蜗组织中的表达情况;提取缺血再灌注侧耳蜗组织的细胞核和细胞浆蛋白,应用电泳迁移率滞后分析检测细胞核内NF-кBDNA结合活性。结果正常豚鼠耳蜗螺旋神经节、Corti's器、血管纹、螺旋韧带的细胞浆和细胞核内NF-кBp65染色呈阴性,缺血再灌注12h可见明显表达,24h表达最强,48h表达逐渐减弱;正常耳蜗组织中可见少量的NF-кB活化,在缺血再灌注的耳蜗组织中NF-кBDNA的结合活性显著上调,再灌注24h的结合活性最高,再灌注48h后NF-кBDNA的结合活性下降。结论耳蜗缺血再灌注损伤时,NF-κBp65在耳蜗出现异常表达,NF-κBDNA结合活性增高。

关键词：耳蜗缺血再灌注损伤核转录因子-κB

豚鼠椎基底动脉缺血/再灌注致耳蜗损伤的iNOS表达

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中国医学工程 2009年第4期17卷 256-258页

作者：刘斌任基浩葛益林湖南省郴州市第一人民医院耳鼻咽喉-头颈外科湖南郴州423000 中南大学湘雅二医院耳鼻咽喉-头颈外科湖南长沙410011

目的探讨豚鼠椎基底动脉缺血/再灌注时是否存在iNOS异常表达。方法经颅底径路建立豚鼠椎基底动脉缺血/再灌注耳蜗损伤模型,采用免疫组织化学技术,对各组动物近中轴位切片行iNOS免疫组织化学染色,光学显微镜下观察在耳蜗组织中的表达情... 详细信息

目的探讨豚鼠椎基底动脉缺血/再灌注时是否存在iNOS异常表达。方法经颅底径路建立豚鼠椎基底动脉缺血/再灌注耳蜗损伤模型,采用免疫组织化学技术,对各组动物近中轴位切片行iNOS免疫组织化学染色,光学显微镜下观察在耳蜗组织中的表达情况。结果正常豚鼠耳蜗螺旋神经节、Corti's器、血管纹、螺旋韧带的细胞浆和/或细胞核内iNOS染色呈弱阳性,缺血再灌注12h可见明显表达,24h表达最强,48h表达逐渐减弱。结论iNOS在耳蜗缺血再灌注损伤出现异常表达,参与耳蜗缺血再灌注损伤。

关键词：耳蜗缺血再灌注损伤诱导型一氧化氮合酶

葛根素对豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤时听功能和IκBα的影响

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中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志 2009年第5期17卷 244-247页

作者：刘斌任基浩葛益林湖南郴州市第一人民医院耳鼻咽喉科 423000 中南大学湘雅二医院耳鼻咽喉科

目的探讨葛根素在豚鼠椎基底动脉缺血/再灌注耳蜗损伤中的保护作用及分子机制,为葛根素治疗耳蜗缺血再灌注损伤提供理论依据。方法纯白雄性豚鼠32只,随机分为4组;正常对照组、缺血再灌注7d组、生理盐水组(即缺血再灌注7d加生理盐水对照... 详细信息

目的探讨葛根素在豚鼠椎基底动脉缺血/再灌注耳蜗损伤中的保护作用及分子机制,为葛根素治疗耳蜗缺血再灌注损伤提供理论依据。方法纯白雄性豚鼠32只,随机分为4组;正常对照组、缺血再灌注7d组、生理盐水组(即缺血再灌注7d加生理盐水对照组)和用药组(即缺血再灌注7d加葛根素保护组)。除正常对照组外,所有豚鼠均进行手术造模。用药组在缺血再灌注开始时即腹腔注射葛根素150mg·kg-1·d-1,每天1次,连用6天,于再灌注7天时处死。生理盐水组操作同用药组,但以等容量生理盐水代替葛根素。应用听觉脑干反应评价听功能。采取石蜡包埋免疫组织化学技术,对各组耳蜗近中轴位切片行IκBα免疫组织化学染色以观察葛根素IκBα的影响。结果用药组动物ABR各波潜伏期、Ⅰ～Ⅲ波间期明显缩短,阈值降低。各组各波潜伏期、Ⅰ～Ⅲ波间期和阈值比较差异均有统计学意义(P0.05)。用药组IκBα表达与缺血再灌注7d组比较活性明显上调,差异有统计学意义(P葛根素具有保护耳蜗缺血再灌注损伤的作用,其作用机制可能与上调IκBα表达活性有关。

关键词：耳蜗缺血-再灌注损伤葛根素保护效应抑制因子IκBα