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胶质细胞成熟因子β在肝细胞癌中的表达及其临床意义

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中国普通外科杂志 2020年第1期29卷 69-77页

作者：陈新陆慧葛勇胜荚卫东安徽医科大学附属省立医院肝脏外科/肝胆胰外科安徽省重点实验室

背景与目的:胶质细胞成熟因子β(GMFB)是一种17 kDa、高度保守的脑蛋白,近年来研究发现,GMFB在多种恶性肿瘤中表达上调且与患者的不良预后密切相关。然而,GMFB在肝细胞癌(HCC)中的表达及其作用的研究尚不够深入。本研究通过检测GMFB在HC... 详细信息

背景与目的:胶质细胞成熟因子β(GMFB)是一种17 kDa、高度保守的脑蛋白,近年来研究发现,GMFB在多种恶性肿瘤中表达上调且与患者的不良预后密切相关。然而,GMFB在肝细胞癌(HCC)中的表达及其作用的研究尚不够深入。本研究通过检测GMFB在HCC组织中的表达,分析其与患者临床病理特征、预后以及Ki-67表达的关系,探讨GMFB在HCC中的临床意义。方法:用qRT-PCR和Western bolt方法检测36对新鲜冷冻HCC组织及其癌旁组织中GMFB的mRNA和蛋白的表达。用免疫组化法分别检测91例HCC组织及其癌旁组织石蜡组织标本中GMFB和Ki-67蛋白的表达,用统计学方法分析GMFB与HCC患者临床病理因素、术后生存时间的关系以及与Ki-67表达的相关性。结果:qRT-PCR和Western bolt结果显示,HCC组织中GMFB mRNA与蛋白的相对表达量较癌旁组织均明显升高(均P<0.001)。免疫组化结果显示,GMFB和Ki-67在HCC组织中的阳性表达率均较癌旁组织明显升高(均P<0.001);GMFB的表达与HCC微血管侵犯(P=0.045)、Edmondson分级(P=0.032)、BCLC分期(P=0.012)明显有关;在HCC组织中,GMFB和Ki-67的表达呈正相关(rs=0.265,P=0.011)。Kaplan-Meier生存分析显示,GMFB阳性表达患者的无病生存时间(DFS)及总生存时间(OS)均明显短于GMFB阴性表达患者(DFS:4.52个月vs.10.48个月,P=0.001;OS:27.67个月vs.39.75个月,P=0.007);Cox多因素回归模型分析显示,GMFB与Ki-67的表达上调是影响HCC患者DFS(HR=0.441,95%CI=0.242~0.801,P=0.007;HR=1.818,95%CI=1.012~3.269,P=0.046)与OS(HR=0.504,95%CI=0.287~0.886,P=0.017;HR=1.787,95%CI=1.083~2.935,P=0.023)的独立危险因素。结论:GMFB在HCC中呈现高表达,且与HCC进展及患者的不良预后密切相关,GMFB的表达与Ki-67的表达呈正相关,故推测其可能通过对肿瘤细胞增殖活性的调控发挥作用。

关键词：癌,肝细胞胶质细胞成熟因子β 细胞增殖预后

hnRNP L在肝癌中的表达及与巨噬细胞极化相关性研究

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安徽医科大学学报 2019年第10期54卷 1601-1606页

作者：石旭葛勇胜荚卫东王涛任超安徽医科大学附属省立医院肝脏外科肝胆胰外科安徽省重点实验室

目的探讨核不均一核糖核蛋白L(hnRNP L)在肝癌(HCC)组织中的表达,并分析其与肝癌患者临床病理特征及巨噬细胞极化的关系。方法通过免疫组织化学(IHC)检测90例HCC患者的癌组织和相对应癌旁组织中hnRNP L和巨噬细胞极化相关标志物(CD68、C... 详细信息

目的探讨核不均一核糖核蛋白L(hnRNP L)在肝癌(HCC)组织中的表达,并分析其与肝癌患者临床病理特征及巨噬细胞极化的关系。方法通过免疫组织化学(IHC)检测90例HCC患者的癌组织和相对应癌旁组织中hnRNP L和巨噬细胞极化相关标志物(CD68、CD206和CD11c)的表达。qRT-PCR和Western blot法分析评估20对新鲜冰冻肝癌和癌旁组织中hnRNP L的表达水平。结果免疫组化结果显示hnRNP L在肝癌组织中显著高表达(P=0.001),肝癌及癌旁组织的阳性表达率分别为77.7%(72/90)和53.3%(48/90);qRT-PCR及Western blot结果显示,在转录和翻译水平,hnRNP L在肝癌组织的表达显著高于相对应癌旁组织(P<0.001);hnRNP L在肝癌组织中的高表达与年龄、血管侵犯、Edmondson分级和BCLC分期显著相关(P=0.018、0.039、0.001、0.018);同时hnRNP L在肝癌组织的表达强度与CD68(总巨噬细胞标志物)和CD206(M2型巨噬细胞标志物)的浸润密度呈正向的一致性(κ=0.448、0.455,P<0.001),与CD11c(M1型巨噬细胞标志物)浸润密度呈负向的一致性(κ=-0.394,P<0.001)。结论hnRNP L在肝癌组织中的表达显著高于癌旁组织,并与肝癌的恶性特征相关。同时hnRNP L的表达与巨噬细胞的极化相关,提示hnRNP L可能通过参与巨噬细胞极化调控肝癌的发生发展。

关键词：核不均一核糖核蛋白L 肝细胞癌巨噬细胞极化肿瘤相关巨噬细胞

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亚砷酸对人肝癌细胞生长增殖及分化的影响

安徽医科大学学报 2005年第1期40卷 10-13页

作者：张传海许戈良葛勇胜翟志敏安徽医科大学附属省立医院普外科合肥230001 安徽省立医院中心实验室合肥230001

目的探讨亚砷酸对人肝癌细胞BEL-7402增殖、分化的作用.方法通过体外细胞培养,用四氮唑盐(MTT)比色法观察细胞生长曲线的变化,台盼蓝拒染法观察细胞群体倍增时间(TD)的改变,并分别用自动化学发光法、生化法检测亚砷酸对细胞甲胎蛋白(AFP... 详细信息

目的探讨亚砷酸对人肝癌细胞BEL-7402增殖、分化的作用.方法通过体外细胞培养,用四氮唑盐(MTT)比色法观察细胞生长曲线的变化,台盼蓝拒染法观察细胞群体倍增时间(TD)的改变,并分别用自动化学发光法、生化法检测亚砷酸对细胞甲胎蛋白(AFP)合成及谷氨酰转肽酶(GGT)、乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响,用苏木精-伊红(HE)染色法及透射电镜观察细胞的分化形态特点.结果亚砷酸(1.0～8.0 μmol/L)能抑制BEL-7402细胞生长增殖,呈剂量、时间依赖性.亚砷酸(8.0 μmol/L)对BEL-7402细胞AFP合成及GGT、LDH活性有显著的抑制作用,HE染色及透射电镜观察可见部分细胞呈现分化的形态改变.结论亚砷酸体外能够抑制人肝癌细胞生长增殖,并具有一定的诱导分化作用.

关键词：亚砷酸/药理学癌,肝细胞/代谢

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KLK7在肝细胞癌中的表达及其意义

安徽医科大学学报 2019年第10期54卷 1637-1641页

作者：陈康荚卫东葛勇胜陈新安徽医科大学研究生学院合肥230032 安徽医科大学附属省立医院肝脏外科合肥230001

目的探讨KLK7在肝细胞癌(HCC)中的表达情况及临床意义。方法收集88例术后病理证实为HCC患者的石蜡组织标本及其临床病理资料,用免疫组化法检测KLK7在HCC组织及相对应癌旁组织中的表达,分析KLK7的表达情况与HCC患者临床病理因素的关系;用... 详细信息

目的探讨KLK7在肝细胞癌(HCC)中的表达情况及临床意义。方法收集88例术后病理证实为HCC患者的石蜡组织标本及其临床病理资料,用免疫组化法检测KLK7在HCC组织及相对应癌旁组织中的表达,分析KLK7的表达情况与HCC患者临床病理因素的关系;用Western blot及qRT-PCR方法检测20对冷冻HCC及癌旁组织中KLK7 mRNA与蛋白的表达。结果88例石蜡组织标本的免疫组化结果显示,58例(65.9%)HCC组织中KLK7表达上调,癌旁组织中26例(29.5%)表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。qRT-PCR检测显示,KLK7 mRNA的表达在肝癌组织中明显高于癌旁组织[(18.39±18.18)vs(9.11±13.73)]。KLK7/β-actin的灰度比值分别为(1.45±0.24)、(0.65±0.16),两项实验结果差异均有统计学意义(P<0.001);Western blot与qRT-PCR结果一致。KLK7在HCC组织中的表达上调与肿瘤直径(P=0.011)、肿瘤Edmondson分级(P=0.016)以及肿瘤TNM分期(P=0.006)有关。结论KLK7在HCC中的表达上调,其高表达可能与HCC的恶性进程密切相关。

关键词：癌肝细胞肿瘤抑制肿瘤侵袭

Fibulin-2在肝癌中的表达及其与MMPs、VEGF的相关性研究

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安徽医科大学学报 2021年第1期56卷 109-116页

作者：任超葛勇胜荚卫东石旭陈新刘松安徽医科大学附属省立医院肝脏外科肝胆胰外科安徽省重点实验室合肥230001

目的探讨原纤维蛋白2(Fibulin-2)在肝细胞肝癌(HCC)组织中的表达情况,并探究Fibulin-2对HepG2肝癌细胞的生物学变化以及对细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的影响。方法对20例HC... 详细信息

目的探讨原纤维蛋白2(Fibulin-2)在肝细胞肝癌(HCC)组织中的表达情况,并探究Fibulin-2对HepG2肝癌细胞的生物学变化以及对细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的影响。方法对20例HCC癌组织和癌旁组织中Fibulin-2的表达水平采用Western blot和qRT-PCR检测分析。在细胞实验中,将肝癌细胞分为7组:未经处理的Normal组,进行Fibulin-2沉默处理的Si1、Si2、Si3组及其阴性对照组(Si-NC组),进行Fibulin-2过表达处理的overexpresion-Fibulin2组及其阴性对照组(overexpresion-NC组)。使用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法、细胞划痕实验、Transwell法以及流式细胞术分别检测细胞增殖、迁移、侵袭能力、凋亡率;并使用Western blot检测Fibulin-2过表达或沉默后对应的MMP-2、MMP-9及VEGF的表达情况。结果 qRT-PCR及Western blot实验结果显示,在翻译和转录水平,Fibulin-2在肝癌癌组织中的表达低于相对应的癌旁组织(P<0.05);Fibulin-2沉默组较普通肝癌组细胞中MMP-2、MMP-9及VEGF的表达水平出现相应的增高(P<0.05),肝癌细胞的迁移、侵袭、增殖能力增强以及细胞凋亡率减少(P<0.05);Fibulin-2过表达组较普通肝癌组细胞中MMP-2、MMP-9及VEGF的表达水平出现相应的降低(P<0.05),肝癌细胞的迁移、侵袭、增殖能力受抑制以及细胞凋亡增加(P<0.05)。结论 Fibulin-2在肝癌组织中的表达低于癌旁组织,过表达Fibulin-2可抑制肝癌细胞的恶性特征,沉默Fibulin-2则增强肝癌细胞进程。Fibulin-2可能通过调节MMP-2、MMP-9及VEGF的表达水平从而影响肝癌细胞的生物学特征。

关键词：原纤维蛋白2 肝细胞癌基质金属蛋白酶血管内皮生长因子

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经皮射频消融治疗肝癌的疗效评估

安徽医科大学学报 2012年第10期47卷 1260-1262页

作者：刘力隋秀芳叶显俊刘卫勇葛勇胜安徽医科大学附属省立医院超声科合肥230001

83例肝癌患者的95个病灶接受经皮肝穿射频消融(RFA)治疗,行超声造影检查评估经皮RFA的疗效,并随访其复发情况。RFA治疗后,<3 cm的病灶完全消融率95.4%,≥3 cm的病灶完全消融率76.9%;单个病灶的完全消融率87.7%,多发病灶的完全消融率... 详细信息

83例肝癌患者的95个病灶接受经皮肝穿射频消融(RFA)治疗,行超声造影检查评估经皮RFA的疗效,并随访其复发情况。RFA治疗后,<3 cm的病灶完全消融率95.4%,≥3 cm的病灶完全消融率76.9%;单个病灶的完全消融率87.7%,多发病灶的完全消融率71.4%。RFA治疗肝癌的完全消融率与病灶的大小有关。

关键词：肝癌射频消融超声检查

TUSC3基因在肝细胞癌中的表达及其临床意义

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中国普通外科杂志 2018年第1期27卷 75-80页

作者：盛须仁邢松歌葛勇胜荚卫东中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院)肝脏外科/肝胆胰外科安徽省重点实验室安徽合肥230001

目的:探讨TUSC3基因在肝细胞癌(HCC)中的表达及临床意义。方法:收集92例行肝切除术且术后病理证实为HCC患者的石蜡组织标本及其临床病理资料,用免疫组化法检测TUSC3在HCC组织及相对应癌旁组织中的表达,分析TUSC3的表达情况与HCC患者临... 详细信息

目的:探讨TUSC3基因在肝细胞癌(HCC)中的表达及临床意义。方法:收集92例行肝切除术且术后病理证实为HCC患者的石蜡组织标本及其临床病理资料,用免疫组化法检测TUSC3在HCC组织及相对应癌旁组织中的表达,分析TUSC3的表达情况与HCC患者临床病理因素的关系;用qRT-PCR及Western blot方法检测20对冷冻HCC及癌旁组织中TUSC3 mRNA与蛋白的表达。结果:92例石蜡组织标本的免疫组化结果显示,56例(60.9%)HCC组织中TUSC3表达下调,癌旁组织中33例(35.9%)TUSC3表达下调,差异有统计学意义(P<0.001);TUSC3在HCC组织中的低表达与肿瘤Edmondson分级(P=0.008)、TNM分期(P=0.031)、肿瘤直径有关(P=0.0 2 0)。20对新鲜标本的qRT-PCR与Western blot检测结果显示,肝癌组织中TUSC3的mRNA[(0.99±1.46)vs.(1.96±2.18)]与蛋白[(0.49±0.35)vs.(1.04±0.43)]相对表达量均明显低于癌旁组织(均P<0.05)。结论:TUSC3基因在HCC中的表达下调,其低表达可能与HCC的恶性进程密切相关。

关键词：癌肝细胞基因肿瘤抑制肿瘤侵润

亚砷酸对人肝癌细胞凋亡及ERK-1蛋白表达的影响

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安徽医科大学学报 2005年第5期40卷 412-414页

作者：葛勇胜许戈良张传海陈跃余继海翟志敏安徽医科大学附属省立医院普外科合肥230001 安徽医科大学附属省立医院中心实验室合肥230001

目的探讨亚砷酸对人肝癌细胞BEL-7402凋亡及ERK-1蛋白表达的影响.方法通过体外细胞培养,用流式细胞术观察BEL-7402细胞周期及凋亡率变化;HE染色法、荧光显微镜观察细胞的凋亡形态变化;并用免疫组化法检测细胞ERK-1蛋白的表达.结果亚砷酸... 详细信息

目的探讨亚砷酸对人肝癌细胞BEL-7402凋亡及ERK-1蛋白表达的影响.方法通过体外细胞培养,用流式细胞术观察BEL-7402细胞周期及凋亡率变化;HE染色法、荧光显微镜观察细胞的凋亡形态变化;并用免疫组化法检测细胞ERK-1蛋白的表达.结果亚砷酸(1.0～8.0 μmol/L)能诱导BEL-7402细胞凋亡并阻滞细胞周期于S、G2/M期,呈剂量依赖性;亚砷酸(8.0 μmol/L)作用BEL-7402细胞48 h后, HE染色、荧光显微镜观察可见BEL-7402细胞呈现明显的凋亡形态改变;免疫组化法检测发现8.0 μmol/L的亚砷酸作用48 h 后BEL-7402细胞的ERK-1蛋白表达明显减弱. 结论亚砷酸体外有诱导人肝癌细胞凋亡及降低ERK-1蛋白表达的作用.

关键词：亚砷酸盐类/药理学癌,肝细胞/代谢细胞凋亡

体外siRNA-GAS5干扰肝癌HepG2细胞生物学行为改变

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安徽医科大学学报 2018年第8期53卷 1210-1216页

作者：黄海锋葛勇胜刘文斌马金良安徽医科大学附属省立医院普外科合肥230001

目的探究生长特异性调节转录因子5(GAS5)在肝癌组织表达及GAS5小干扰RNA(siRNA-GAS5)转染对HepG2肝癌细胞的侵袭增殖的影响,并进一步分析其可能的调控机制。方法选取手术肝癌切除的癌组织及其癌旁组织20例,qRT-PCR检测肝癌及其癌旁组织... 详细信息

目的探究生长特异性调节转录因子5(GAS5)在肝癌组织表达及GAS5小干扰RNA(siRNA-GAS5)转染对HepG2肝癌细胞的侵袭增殖的影响,并进一步分析其可能的调控机制。方法选取手术肝癌切除的癌组织及其癌旁组织20例,qRT-PCR检测肝癌及其癌旁组织长链非编码RNA GAS5(GAS5)表达以及Western blot检测周期依赖性蛋白激酶6(CDK6)表达。利用脂质体转染siRNA-GAS5干扰HepG2细胞株中GAS5表达水平,划痕实验、Transwell和CCK-8检测转染后HepG2细胞的迁移、侵袭及增殖能力,流式细胞仪检测干扰后HepG2细胞凋亡周期变化。Western blot、qRT-PCR验证细胞周期调控蛋白周期素D1(Cyclin D1)、CDK6、E2F-1表达。结果肝癌组织中GAS5表达水平低于对应癌旁组织,CDK6表达高于癌旁组织。转染siRNAGAS5的HepG2细胞迁移侵袭增殖能力明显增强。转染siRNA-GAS5的HepG2细胞Cyclin D1、CDK6、E2F-1蛋白表达下降,干扰后的HepG2细胞周期发生G1/S期改变。结论GAS5在肝癌组织的表达出现下调;GAS5可明显抑制肝癌细胞迁移、侵袭及增殖能力;GAS5调控肝癌细胞周期变化可能是通过Cyclin D1/CDK6/E2F-1通路。

关键词：非编码RNA GAS5 肝细胞癌细胞周期调控蛋白