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神经节苷酯联合早期康复治疗急性脑梗死的临床研究

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山东大学学报（医学版） 2010年第8期48卷 131-132页

作者：范新蕾山东医学高等专科学校内科教研室山东临沂276000

单唾液酸四己糖神经节苷酯是最重要的一种神经节苷酯, 易于通过血脑屏障, 在神经损伤区浓度最高, 与损伤区的神经组织有高度亲和力, 能明显清除自由基, 保护细胞膜, 促进细胞膜各种酶活性恢复~[3], 减轻神经细胞水肿, 减少细胞凋亡, 对... 详细信息

单唾液酸四己糖神经节苷酯是最重要的一种神经节苷酯, 易于通过血脑屏障, 在神经损伤区浓度最高, 与损伤区的神经组织有高度亲和力, 能明显清除自由基, 保护细胞膜, 促进细胞膜各种酶活性恢复~[3], 减轻神经细胞水肿, 减少细胞凋亡, 对神经细胞功能损伤具有保护作用, 还能促进其他神经生长因子的表达~[4], 促进细胞再生, 是目前少数已经证实能够促进神经修复和再生的药物. 本研究亦发现应用神经节苷酯早期即可促进运动功能恢复, 效果明显优于对照组

关键词：神经节苷酯早期康复脑梗死

产葡萄糖氧化酶菌株的诱变选育及发酵条件优化

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产葡萄糖氧化酶菌株的诱变选育及发酵条件优化

作者：范新蕾江南大学

学位级别：硕士

本论文以实验室现有的黑曲霉PCTC菌株作为原始菌株，利用常压常温等离子体（ARTP）诱变育种技术对黑曲霉PCTC菌株进行诱变处理。首先通过邻联茴香胺平板对黑曲霉PCTC菌株进行初筛，共获得了40株显色圈较大的突变菌株。然后在摇瓶中进行... 详细信息

本论文以实验室现有的黑曲霉PCTC菌株作为原始菌株，利用常压常温等离子体（ARTP）诱变育种技术对黑曲霉PCTC菌株进行诱变处理。首先通过邻联茴香胺平板对黑曲霉PCTC菌株进行初筛，共获得了40株显色圈较大的突变菌株。然后在摇瓶中进行复筛，确定了最优的突变菌株为黑曲霉PCTC-8，其总酶活为14.36U·mL-1，与初始菌株的总酶活6.61U·mL-1相比提高了117.25%。对该菌株的发酵条件、破壁处理方法等进行初步研究，研究内容和结果如下：（1）为了促进细胞内的葡萄糖氧化酶的释放，实验中采用不同的方法进行破壁处理，结果如下：超声波法破壁的最优条件为：稀释倍数5倍，超声功率630W，时间25min，在该条件下释放出的胞内葡萄糖氧化酶的活力为16.66U·mL-1。酶解法破壁最优的破壁用酶为蜗牛酶，酶解时间为3.5h，该条件下测定的胞内葡萄糖氧化酶的酶活为13.25U·mL-1。将以上两种破壁方法结合后进行破壁处理，其中先超声后酶解破壁的酶解时间为1.5h，释放的胞内酶的活力为23.39U·mL-1，而采用先酶解后超声破壁释放的胞内酶活为19.13U·mL-1。（2）培养基和培养条件优化：利用单因素实验和响应面分析法（Response SurfaceMethodology，RSM）对黑曲霉PCTC-8菌株的发酵培养基进行优化。优化所得最优培养基配方为（g·L-1）：蔗糖87.5，牛肉浸膏3.15，硝酸铵1.88，（NH4）2HPO40.34，KH2PO40.25，吐温-6030.47，玉米粉12.5。优化后全酶活为87.50U·mL-1，与初始培养基所得酶活相比，提高了5.09倍。在250mL挡板摇瓶中，利用单因素实验对黑曲霉PCTC-8的发酵条件进行优化，确定了最优的发酵条件：接种量10%，装液量30mL，种龄24h，发酵时间48h，转速225r·min-1，在此条件下全酶活可达到93.26U·mL-1。（3）考察了7L发酵罐放大发酵及不同时间添加吐温-60对发酵产酶的影响，结果表明：前期添加、对数期流加以及稳定期添加吐温-60的菌丝体干重和酶活分别可达21.92g·L-1、24.34g·L-1、28.92g·L-1和62.18U·mL-1、92.88U·mL-1、42.87U·mL-1。（4）葡萄糖氧化酶的最适温度、最适pH以及对温度和pH稳定性的研究显示：40℃为该酶的最适反应温度，将酶液于不同温度下放置1h，其在20℃~40℃的温度范围内相对酶活高达95%以上;该酶的最适pH为6.0，在不同pH下放置10h，其中葡萄糖氧化酶在酸性pH3.0~7.0内的稳定性较好，并且pH在4.0~7.0范围内的相对酶活在80%以上。

关键词：黑曲霉葡萄糖氧化酶诱变育种条件优化

银杏叶提取物对糖尿病性脑病大鼠海马细胞凋亡的影响

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中国糖尿病杂志 2010年第2期18卷 143-146页

作者：范新蕾山东医学高等专科学校内科教研室临沂276000

目的研究糖尿病性脑病与海马区细胞凋亡的关系以及银杏叶提取物(EGb)治疗的效果和机制。方法大鼠分为对照(NC)组、糖尿病性脑病(DM+B)组和EGb治疗(EGb)组,分1个月和3个月两个时间点。水迷宫实验观察行为学改变,免疫组化、RT-PCR检测Bc1-... 详细信息

目的研究糖尿病性脑病与海马区细胞凋亡的关系以及银杏叶提取物(EGb)治疗的效果和机制。方法大鼠分为对照(NC)组、糖尿病性脑病(DM+B)组和EGb治疗(EGb)组,分1个月和3个月两个时间点。水迷宫实验观察行为学改变,免疫组化、RT-PCR检测Bc1-2和Bax蛋白及mRNA的表达,ELISA检测脑组织细胞凋亡的水平。结果 (1)DM+B_1组已出现学习、记忆功能障碍,DM+B_3组更加加重,EGb组则明显减轻。(2)DM+B_1、DM+B_3组Bc1-2表达较NC组增加,EGb_1、EGb_3组表达更强。(3)DM+B_1、DM+B_3组Bax表达较对照组明显增加,EGb_1、EGb_3组则明显减弱。(4)DM+B_1组脑组织细胞凋亡水平升高,DM+B_3组更加明显,治疗组则显著减轻。结论海马区细胞凋亡是糖尿病性脑病发病的重要因素,银杏叶提取物可能通过抑制细胞凋亡而对糖尿病性脑病有保护作用。

关键词：糖尿病性脑病海马凋亡银杏叶提取物

PTEN和DPC4基因缺失、突变诊断恶性胸腔积液的价值

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实用医学杂志 2013年第7期29卷 1089-1091页

作者：范新蕾田锋山东医学高等专科学校内科教研室山东省临沂市276000 山东省临沂市人民医院呼吸内一科 276003

目的:探讨检测胸腔积液中PTEN、DPC4基因缺失、突变诊断恶性胸腔积液的价值。方法:良性胸腔积液组44例、恶性胸腔积液组47例,从胸腔积液中提取DNA,PCR-SSCP法检测PTEN第5～8外显子、DPC4第8～11外显子缺失、突变情况。结果:良性胸腔积... 详细信息

目的:探讨检测胸腔积液中PTEN、DPC4基因缺失、突变诊断恶性胸腔积液的价值。方法:良性胸腔积液组44例、恶性胸腔积液组47例,从胸腔积液中提取DNA,PCR-SSCP法检测PTEN第5～8外显子、DPC4第8～11外显子缺失、突变情况。结果:良性胸腔积液组未发现缺失及突变。恶性胸腔积液组PTEN基因总改变率为46.8%,DPC4基因总改变率为36.2%,联合检测PTEN、DPC4诊断恶性胸腔积液的灵敏度为74.5%,显著高于胸水细胞学检查的53.2%(P<0.05)。结论:PCR-SSCP技术检测胸腔积液中PTEN、DPC4基因缺失、突变可作为鉴别良恶性胸腔积液的辅助指标,具有一定的临床应用价值。

关键词：胸腔积液恶性结核 PTEN DPC4

神经节苷脂对糖尿病脑病大鼠认知功能影响的实验研究

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中华神经医学杂志 2012年第11期11卷 1093-1097页

作者：范新蕾田锋山东医学高等专科学校内科教研室临沂276002 临沂市人民医院呼吸内一科 276003

目的评价神经节苷脂对糖尿病脑病大鼠模型认知功能的作用，并探讨其影响机制。方法60只大鼠按随机数字表法分为正常对照组、糖尿病脑病组和糖尿病脑病＋神经节苷脂治疗组3组，每组再根据观察时间点不同分为1月、3月两亚组（A1、B1、C1... 详细信息

目的评价神经节苷脂对糖尿病脑病大鼠模型认知功能的作用，并探讨其影响机制。方法60只大鼠按随机数字表法分为正常对照组、糖尿病脑病组和糖尿病脑病＋神经节苷脂治疗组3组，每组再根据观察时间点不同分为1月、3月两亚组（A1、B1、C1、A3、B3、C3组1，每亚组各10只。采用链脲佐菌素建立大鼠糖尿病脑病模型，糖尿病脑病＋神经节苷脂治疗组每天腹腔注射神经节苷脂10mg／kg。应用水迷宫行为学测试观察各组大鼠认知功能改变，免疫组化染色、***检测海马区神经元特异性烯醇化酶（NSE）和S-100B蛋白及mRNA的表达。结果（1）A1、B1、C1组水迷宫行为学测试成绩分别为（6．7±O．5）S、（14．1±1．7）S、（6．9±0．6）s，A3、B3、C3组测试成绩分别为（7．0±0．5）S、（26．6±2．1）S、（14．3±1．7）S。B1已出现学习、记忆功能障碍，B3组更加加重，治疗组则明显减轻。（2）A1、B1、C1组海马部脑组织NSE蛋白表达量分别为0．081±O．009、0．292±0．034、0．090±0．011，A3、B3、C3组分别为0．089±0．013、0．402±0．068、0．184±0．028。B1、B3组较对照组明显增加，C1、C3组则明显减弱。S．100B变化与NSE结果有相似趋势。（31A1、B1、C1组海马部脑组织NSEmRNA相对表达量分别为0．121±O．011、0．532±0．047、0．130±0．019．A3、B3、C3组分别为0．135±0．024、1．178±0．128、0．371±0．039。B1、B3组较对照组明显增加，C1、C3组则明显减弱。S-100B变化与NSE结果有相似趋势。（4）NSE和S-100B表达与水迷宫行为学测试成绩均呈显著正相关。结论海马区NSE和S-100B表达升高是糖尿病脑病发病的重要因素，神经节苷脂可能通过降低NSE和S-100B的表达从而改善糖尿病脑病的认知功能障碍。

关键词：糖尿病脑病神经节苷脂认知功能神经元特异性烯醇化酶 S-IOOB

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高职高专院校临床技能教学改革与探索

山东医学高等专科学校学报 2015年第5期37卷 387-389页

作者：范新蕾山东医学高等专科学校山东临沂276000

临床技能实践教学是在临床教学过程中,重点培训临床实践技能,对医学生的三基能力（基础理论、基本知识、基本技能）进行综合训练的重要途径;是医学高职高专院校培养技能型人才的重要途径;是医学生理论与实践结合、基础过渡到临床的重要... 详细信息

临床技能实践教学是在临床教学过程中,重点培训临床实践技能,对医学生的三基能力（基础理论、基本知识、基本技能）进行综合训练的重要途径;是医学高职高专院校培养技能型人才的重要途径;是医学生理论与实践结合、基础过渡到临床的重要阶段;是一名医学生成长为一名合格医生的起点。因此,构建新型的实践教学体系、培养符合社会发展和医疗卫生发展所需要的技能型人才，已经成为医学高职高专教育迫在眉捷的任务。在临床技能实践教学中，加强医学生实践能力的培养、提高医学生素质教育和创新能力则是实现这一任务的关键。

关键词：临床技能教学改革高职高专

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高职高专院校内科学临床教学改革探索

中国实用医药 2011年第8期6卷 272-273页

作者：范新蕾山东临沂医学高等专科学校内科学教研室 276000

内科学是高职高专医学院校的一门临床课程,对内科学进行改革探索,是适应高职高专院校教学改革的需要。通过对我校内科学教学工作的分析,认为对内科学进行教学改革,满足教学质量,提升教学质量,是完全可行的。

关键词：高职高专内科学教学改革

黑曲霉葡萄糖氧化酶基因在毕赤酵母SMD1168中的表达

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食品与生物技术学报 2017年第9期36卷 975-981页

作者：陈楠肖成建范新蕾李汉广余晓斌江南大学生物工程学院江苏无锡214122

在毕赤酵母SMD1168中利用乙醇氧化酶AOX1强启动子表达黑曲霉葡萄糖氧化酶(Glucose oxidase,GOD)。提取黑曲霉Aspergillus niger PCTC的基因组DNA,以此为模板进行PCR扩增获得葡萄糖氧化酶基因,将目的基因插入到具有AOX1强启动子的表达载... 详细信息

在毕赤酵母SMD1168中利用乙醇氧化酶AOX1强启动子表达黑曲霉葡萄糖氧化酶(Glucose oxidase,GOD)。提取黑曲霉Aspergillus niger PCTC的基因组DNA,以此为模板进行PCR扩增获得葡萄糖氧化酶基因,将目的基因插入到具有AOX1强启动子的表达载体p PICZαA上,经电转化导入毕赤酵母SMD1168中。经zeocin抗性平板初筛、摇床复筛以及SDS-PAGE蛋白质电泳的检测,获得了一株产葡萄糖氧化酶活力的菌株,该株菌在30℃、200 r/min的培养条件下,经体积分数1.0%的甲醇诱导发酵1 d可获得1.12 U/mL的酶活。对该菌株进行了摇瓶产酶条件优化,其最佳发酵条件为:在pH 5、30℃下经体积分数1.5%甲醇诱导7 d,酶活为32 U/mL。

关键词：葡萄糖氧化酶黑曲霉毕赤酵母异源表达启动子

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医学高职院校教师教学信息化素养调查和分析

中国新通信 2016年第18期18卷 132-133页

作者：范新蕾山东医学高等专科学校

目的:以山东医学高等专科学校为例,探究教师的教学信息化素养对于提升教学效果的作用和价值。方法:通过对山东医学高等专科学校院校教师利用调查问卷的方式调查医学高职院校教师的教学信息化素养。结果:教师的信息化素养与年龄有一定的... 详细信息

目的:以山东医学高等专科学校为例,探究教师的教学信息化素养对于提升教学效果的作用和价值。方法:通过对山东医学高等专科学校院校教师利用调查问卷的方式调查医学高职院校教师的教学信息化素养。结果:教师的信息化素养与年龄有一定的关系,教师获取信息和资源的主要方式是利用互联网,同时大部分的教师具有较强的信息化意识,但仍需加强对于教师的信息化素养培养。结论:在教育过程中应该拓宽教师的信息获取渠道,学校应为教师提供交流和培训的机会来提升教师的信息化素养,提高教学效果。

关键词：教学信息化医学高职院校教师素养调查