检索结果-南通市图书馆

蛋白激酶C抑制剂Staurosporine对A类清道夫受体胞浆域结构去除后功能的影响

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

生物化学与生物物理进展 2004年第8期31卷 693-698页

作者：管晓翔陈琪范乐明南京医科大学动脉硬化研究中心

A类清道夫受体 (scavengerreceptor,SR A)是一种主要位于巨噬细胞膜表面的同源三聚体糖蛋白 ,能够结合和摄取多种配基并介导内移 .在清道夫受体胞浆域有几个潜在的磷酸化位点 ,有关这些磷酸化位点与受体功能之间的确切关系目前尚所知甚... 详细信息

A类清道夫受体 (scavengerreceptor,SR A)是一种主要位于巨噬细胞膜表面的同源三聚体糖蛋白 ,能够结合和摄取多种配基并介导内移 .在清道夫受体胞浆域有几个潜在的磷酸化位点 ,有关这些磷酸化位点与受体功能之间的确切关系目前尚所知甚少 .为深入探讨A类清道夫受体胞浆域与磷酸化之间的关系 ,以及受体胞浆域磷酸化对受体功能的影响 ,实验以含有SR AcDNA质粒为模板 ,采用PCR方法扩增不含胞浆域序列的清道夫受体 ,同时扩增全长清道夫受体作为对照 .PCR产物经纯化酶切后 ,进一步亚克隆到PcDNA3 1/HisB中 ,测序结果表明 ,重组产物能够编码正确的氨基酸序列 .重组产物经脂质体Lipofectamine (LF2 0 0 0 )介导转化入CHO细胞中 ,在含G4 18选择性培养液中培养筛选 14天后 ,分离阳性克隆 ,继续培养 .采用流式细胞计数仪 (FACS)鉴定转化筛选后细胞能否表达具有功能的清道夫受体 .结果发现 ,转化的CHO细胞可以稳定表达SR A的蛋白质 ,但受体胞浆域去除后 ,摄取配基的能力明显弱于全长组 (1∶1 337) .用荧光DiI标记乙酰化低密度脂蛋白(DiI AcLDL) ,37℃孵育转化细胞 5h后 ,激光共聚焦显微镜下观察到 :全长受体转化组细胞荧光散在分布于细胞膜和细胞器 ,而去除胞浆域组荧光只局限于细胞膜 ,说明SR

关键词： A类清道夫受体胞浆域磷酸化蛋白激酶C抑制剂巨噬细胞

家族性高胆固醇血症纯合子家系低密度脂蛋白受体功能检测及基因突变分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华医学遗传学杂志 2003年第2期20卷 138-142页

作者：管晓翔郦明芳范乐明陈琪南京医科大学动脉粥样硬化研究中心 210029 南京市鼓楼医院心内科

目的　分析家族性高胆固醇血症 (familialhypercholesterolemia ,FH)患者低密度脂蛋白受体(lowdensitylipoproteinreceptor ,LDLR)的功能改变及基因突变。方法　分离FH患者外周血淋巴细胞 ,用流式细胞仪观察淋巴细胞结合和摄取荧光标... 详细信息

目的　分析家族性高胆固醇血症 (familialhypercholesterolemia ,FH)患者低密度脂蛋白受体(lowdensitylipoproteinreceptor ,LDLR)的功能改变及基因突变。方法　分离FH患者外周血淋巴细胞 ,用流式细胞仪观察淋巴细胞结合和摄取荧光标记的低密度脂蛋白的情况。抽提FH患者外周血基因组DNA为模板 ,进行聚合酶链反应单链构象多态性分析 ( polymerasechainreaction singlestrandconformationpolymor phism ,PCR SSCP)及DNA序列分析。结果　对一家两例临床诊断为FH纯合子的患儿及其父母的外周血淋巴细胞LDLR功能进行了分析 ,发现均表现为低密度脂蛋白 (LDL)摄取和结合障碍。进一步从基因水平进行了研究 ,发现LDLR基因突变是位于第 6外显子编码第 2 97位氨基酸的碱基发生缺失 ,导致移码突变并使得终止密码子TGA在第 3 69位提前出现 ,从而不能表达正常的LDLR ,体内胆固醇的代谢发生障碍。结论　对 1例家族性高胆固醇血症纯合子家系应用流式细胞仪方法初步发现LDLR功能缺陷 ,进一步结合PCR SSCP方法证实其LDLR存在新的突变类型。

关键词：家庭性高胆固醇血症低密度脂蛋白受体淋巴细胞聚合酶链反应-单链构象多态性基因突变

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

集落刺激因子与动脉粥样硬化

生理科学进展 1994年第4期25卷 360-362页

作者：陈兵范乐明南京医学院动脉粥样硬化研究中心

集落刺激因子（ＣＳＦｓ）可通过激活ＬＤＬ受体依赖性和非依赖性途径，使含ＡＰＯＢ－１００的脂蛋白水平降低。另一方面，动脉壁内ＣＳＦｓ则吸引循环单核细胞而聚集、衍化为巨噬细胞，并增强其摄取脂蛋白和酯化胆固醇的能力。提示Ｃ... 详细信息

集落刺激因子（ＣＳＦｓ）可通过激活ＬＤＬ受体依赖性和非依赖性途径，使含ＡＰＯＢ－１００的脂蛋白水平降低。另一方面，动脉壁内ＣＳＦｓ则吸引循环单核细胞而聚集、衍化为巨噬细胞，并增强其摄取脂蛋白和酯化胆固醇的能力。提示ＣＳＦｓ对动脉粥样硬化可能具有抑制和促进双重作用。对ＷＨＨＬ兔的整体实验显示，Ｍ－ＣＳＦ能减缓其自发性动脉粥样硬化的进程。对ＣＳＦｓ的进一步研究可能有助于加深对动脉粥样硬化发病机理的认识，进而开辟防治新途径。

关键词：动脉粥样硬化集落刺激因子

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

仓鼠与大鼠脂代谢的比较研究

中国病理生理杂志 1991年第4期7卷 382-387页

作者：范乐明 Rita Hackmiller 南京医学院病理生理教研室美国Louisville大学医学院

通过肝灌流方法比较研究了仓鼠与大鼠脂代谢的异同及仓鼠对高胆固醇饲料的反应。结果发现大鼠血浆VLDL中的apoB_(48)具有肝和肠两个来源,而仓鼠血浆VLDL的apoB_(48)则仅来源于肠。两种动物的肝新生VLDL进入血浆后,均发生载脂蛋白和脂质... 详细信息

通过肝灌流方法比较研究了仓鼠与大鼠脂代谢的异同及仓鼠对高胆固醇饲料的反应。结果发现大鼠血浆VLDL中的apoB_(48)具有肝和肠两个来源,而仓鼠血浆VLDL的apoB_(48)则仅来源于肠。两种动物的肝新生VLDL进入血浆后,均发生载脂蛋白和脂质组分的转移或交换。仓鼠肝胆汁中胆固醇、胆汁酸和磷脂的相对浓度(分别为3.4±0.5mol%、78.9±1.8mol%和17.7±1.6mol%)不同于大鼠(P<0.05、P<0.01和P<0.05)而与人类相似。喂饲胆固醇可使仓鼠肝的胆固醇脂产率显著增加(由0.14±0.02增至0.57±0.12μg/g肝/分钟,P<0.001)而并不增加自胆道的排出。与大鼠相比,仓鼠似更适宜用于复制实验性动脉粥样硬化的动物模型。

关键词：脂蛋白类动脉粥样硬化动物模型

前胡丙素对牛主动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

Acta Pharmacologica Sinica 2002年第2期23卷 37-40页

作者：魏恩会饶曼人陈秀英范乐明陈琪中国 210029 南京医科大学动脉粥样硬化研究中心南京医科大学动脉粥样硬化研究中心南京南京医科大学心血管药理研究室

目的:探讨前胡丙素(pra-C)对牛主动脉平滑肌细胞(SMC)增殖的影响方法:细胞DNA的合成量由~3H-胸腺嘧啶核苷[~3H]TdR)掺入试验测定,应用流式细胞术测定细胞周期,用乳酸脱氢酶活性测定观察药物的毒性.结果:无论有无血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),在... 详细信息

目的:探讨前胡丙素(pra-C)对牛主动脉平滑肌细胞(SMC)增殖的影响方法:细胞DNA的合成量由~3H-胸腺嘧啶核苷[~3H]TdR)掺入试验测定,应用流式细胞术测定细胞周期,用乳酸脱氢酶活性测定观察药物的毒性.结果:无论有无血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),在0.01μmol/L到10μmol/L浓度范围内,pra-C均可呈浓度依赖性地抑制SMC的增殖,抑制作用主要与阻止细胞进入有丝分裂期有关,而与细胞毒性无关.结论:pra-C能够完全阻断Aug Ⅱ诱导SMC的增殖效应,部分阻止小牛血清诱导的细胞分裂,这对于血管增生性疾病的防治有重要意义.

关键词：前胡丙素牛主动脉平滑肌细胞分裂

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

腺病毒载体及其在基因治疗研究中的应用

生物化学与生物物理进展 1996年第1期23卷 8-12页

作者：姜传仓范乐明南京医科大学动脉粥样硬化研究中心

腺病毒载体在基因治疗研究中初露锋芒，引起关注，文章就腺病毒基因组的基本结构、腺病毒载体的类型及构建、重组腺病毒在基因治疗研究中的应用及其主要优、缺点等方面进行了较为全面的综述．

关键词：基因治疗腺病毒表达载体

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

胆固醇逆转运相关蛋白基因在骨骼肌的表达

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2000年第2期32卷 109-114页

作者：范乐明张慧陈琪魏恩会蔡海江南京医科大学动脉粥样硬化研究中心!南京210029

构建载脂蛋白AI(apoAI)、载脂蛋白E(apoE)和卵磷脂胆固醇酰基转移酶 (LCAT)的病毒或非病毒载体 ,分别转染离体成肌细胞或直接注入小鼠骨骼肌 ,观察其表达程度及分泌入血等情况 ,探讨借用骨骼肌异源表达这些在胆固醇逆转运中起关键作用... 详细信息

构建载脂蛋白AI(apoAI)、载脂蛋白E(apoE)和卵磷脂胆固醇酰基转移酶 (LCAT)的病毒或非病毒载体 ,分别转染离体成肌细胞或直接注入小鼠骨骼肌 ,观察其表达程度及分泌入血等情况 ,探讨借用骨骼肌异源表达这些在胆固醇逆转运中起关键作用的重要候选基因 ,进而发展一种简易安全基因治疗方法的可能性。结果显示 ,质粒表达载体 pCMVapoE3和重组腺病毒载体Ad RSV apoAI在原代培养小鼠成肌细胞和成肌细胞株C2C12成功表达并分泌至培养液 ;直接肌肉注射重组病毒使apoAI在小鼠骨骼肌表达并分泌进入血液循环 ,持续 3 0d。LCAT的质粒表达载体和重组腺辅助病毒 (AAV)质粒DNA均可使C2C12和 2 93细胞表达出有功能的LCAT ;重组AAV质粒DNA的表达效果比常规质粒表达载体高 2～ 5倍。

关键词：载脂蛋白AI 载脂蛋白E 卵磷脂胆固醇酰基转移酶胆固醇逆转运基因转移

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

肝脏脂蛋白代谢细胞分子水平的研究进展

中国病理生理杂志 1989年第1期5卷 55-58页

作者：范乐明蔡海江南京医学院病理生理教研室

肝脏是脂蛋白代谢的中心久已为人所知。脂蛋白代谢紊乱可致多种疾病,特别是冠状动脉粥样硬化性心脏病尤受人们关注。近年来,由于细胞培养技术的进展。

关键词：肝脂蛋白代谢

结缔组织生长因子在血管紧张素Ⅱ诱导的人近端肾小管上皮细胞肥大中的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华医学杂志 2004年第17期84卷 1470-1474页

作者：刘必成孙静刘宏陈珑陈琪范乐明东南大学肾脏病研究所东南大学附属中大医院肾内科南京210009 南京医科大学病理生理学系

目的　探讨结缔组织生长因子 (CTGF)在介导血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )诱导的人肾近端小管细胞肥大中的作用。方法　用 [3 H] 亮氨酸掺入、考马斯亮蓝蛋白质定量技术分别观察抗CTGF抗体对AngⅡ诱导的人肾近端小管上皮细胞株 (HK 2 )细胞内蛋... 详细信息

目的　探讨结缔组织生长因子 (CTGF)在介导血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )诱导的人肾近端小管细胞肥大中的作用。方法　用 [3 H] 亮氨酸掺入、考马斯亮蓝蛋白质定量技术分别观察抗CTGF抗体对AngⅡ诱导的人肾近端小管上皮细胞株 (HK 2 )细胞内蛋白质从头合成及细胞内蛋白质含量的影响 ;用流式细胞分析技术观察抗CTGF抗体对AngⅡ诱导的细胞周期分布改变的影响 ;用扫描电镜技术观察抗CTGF抗体对AngⅡ诱导细胞形态变化的影响。结果　AngⅡ可以显著诱导细胞内[3 H] 亮氨酸掺入和细胞内总蛋白质含量增加的作用 ,呈浓度和时间依赖性 ;抗CTGF抗体对AngⅡ诱导的细胞内总蛋白质含量、[3 H] 亮氨酸掺入量的增加有抑制作用 ,呈浓度和时间依赖性。AngⅡ作用于细胞 4 8h后 ,细胞平均直径、G0 G1期细胞百分比显著增加 (均P <0 0 1) ,抗CTGF抗体可显著抑制AngⅡ诱导的细胞直径增加和细胞周期阻滞 (均P <0 0 5或P <0 0 1)。结论　AngⅡ可以诱导肾小管上皮细胞发生肥大 ,CTGF可能介导了AngⅡ诱导的肾小管上皮细胞肥大效应。

关键词：结缔组织生长因子血管紧张素Ⅱ 近端肾小管上皮细胞肥大 CTGF