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流行分支H5亚型禽流感病毒单克隆抗体的制备及应用

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流行分支H5亚型禽流感病毒单克隆抗体的制备及应用

作者：柳苏函扬州大学

学位级别：硕士

H5N1亚型高致病性禽流感病毒(avianinfluenzavirus,AIV)在我国最早于1996年在广东省首次被分离,命名为A/Goose/Guangdong/1/96(GD/96)。此后,GD/96-like病毒在我国多个地区流行并演变出众多基因型,又迅速扩散到亚欧大陆和非洲多个国家,... 详细信息

H5N1亚型高致病性禽流感病毒(avianinfluenzavirus,AIV)在我国最早于1996年在广东省首次被分离,命名为A/Goose/Guangdong/1/96(GD/96)。此后,GD/96-like病毒在我国多个地区流行并演变出众多基因型,又迅速扩散到亚欧大陆和非洲多个国家,引起大量禽鸟感染并死亡,造成全球各地养禽业重大的经济损失。不仅如此,H5N1还能够跨越种属障碍从禽直接传播到人,对公共卫生安全也造成了巨大的威胁。H5N1病毒变异速度极快,目前已进化出多个具有遗传和抗原差异的HA分支,并与多种亚型NA重配形成H5NX病毒,使得其防控形势愈发严峻。因此,加强H5病毒的流行病学监测并解析其进化变异规律、开发快速诊断制剂与疫苗产品,对于疫情的早期预警和有效防控而言显得尤为重要。本研究基于clade2.***.4.4与clade2.***.2.1两大进化分支H5亚型AIV在我国的长期优势流行,研制了针对HA蛋白和NP蛋白的单克隆抗体,并对其在病毒抗原性变异分析和广谱性检测中的应用进行了初步研究。*** 2.***.4.4和clade 2.***.2.1 H5亚型禽流感病毒单克隆抗体的制备及鉴定选取流行分支 clade 2.***.4.4(QD1 株)、clade 2.***.4.4d(0205 株)、clade 2.***.2.1d(1033株)和clade 2.***.2.1e(HF9株)上的不同H5病毒,经灭活和超速离心等方法制备全病毒灭活疫苗,分别通过腹部皮下多点注射的方法对6周龄BALB/c小鼠进行三次常规免疫,再经腹腔注射的方式进行加强免疫,3天后取其脾脏细胞和骨髓瘤细胞进行融合,制备杂交瘤细胞。通过血凝抑制试验(Hemagglutinationinhibition,HI)和酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)对融合孔进行筛选,阳性孔经过三次亚克隆后最终获得8株以0205、3株以1033、6株以HF9为免疫原的共计17株针对 HA 蛋白的阳性杂交瘤细胞系 2B2、2E10、4F3、6F4、6C11、5F2、4E3、7E9,1G10、2G5、3D9,3A6、6F6、6A5、6H2、5H4、7G3;以及 3 株以 QD1 为免疫原针对 NP 蛋白的阳性杂交瘤细胞系3D4、4B9、5F10。经测定,各HA单抗腹水的HI效价均在11～14 log2之间,中和价在1:508～1:28963之间;各NP单抗腹水的ELISA效价均在1:320000以上。进一步对这20株单抗进行特性鉴定,结果显示除2G5、6H2为IgA,其他均属于IgG类抗体;所有单抗在免疫荧光试验中均具有良好的反应原性;其中,3D9、1G10、6A5、3A6、7G3、5H4 的 HA 单抗和 3D4、5F10 的 NP 单抗在蛋白印迹(Western blot,WB)试验中能够分别与对应免疫原的HA蛋白、NP蛋白分别在75kDa、55kDa处发生特异性结合反应。2.H5亚型禽流感病毒HA蛋白单抗在抗原变异研究中的应用为了探究clade 2.***.4.4和clade 2.***.2.1 H5亚型AIV分支间和分支内的抗原性差异及其分子基础,选取分布于不同流行分支的43株H5亚型AIV与第一章中制备的17株HA单抗通过交叉HI试验进行排谱反应。结果显示,17株单抗与受试H5病毒的反应性各不相同,可将43株病毒划分为8个抗原型。进一步运用分子生物学软件Mega7.0对不同抗原型毒株的HA基因序列进行比对,其中单抗3A6、6F6、2G5及8株针对clade2.***.4.4免疫原的HA单抗与病毒反应结果指出,第205位(按H5计数)可能是引起抗原性改变的关键氨基酸位点;单抗6A5与病毒的反应谱筛选出了两组包含多位点的关键氨基酸突变,分别为第82、102、104、172、179、190、204位和第88、157、199位,并且两组位点在影响抗原性变异方面可能具有联合作用;单抗7G3和5H4又筛选出第156、200位;单抗3D9的不同反应性则表明第102和199位在影响抗原性变异方面也可能具有联合作用。3.H5亚型禽流感病毒NP蛋白单抗在广谱性检测中的应用鉴于NP蛋白是A型流感病毒中保守程度较高的蛋白,为了进一步评估第一章中制备的3株NP单抗在广谱性检测中的应用潜能,选取H1～H11不同HA亚型的AIV以及猪源、人源流感病毒及B型流感病毒感染MDCK细胞后进行间接免疫荧光试验。结果显示,3D4、4B9、5F10这3株NP单抗对不同HA亚型、不同宿主来源的A型流感病毒均具有良好的广谱性,而与B型流感病毒不反应,表明是A型流感病毒特异性。随后,对单抗腹水进行了 Protein G亲和层析柱纯化和辣根过氧化物酶(Horseradish Pe

关键词： H5亚型禽流感病毒单克隆抗体 HA蛋白 NP蛋白夹心ELISA

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分类模型的不匹配问题及其解决方法

分类模型的不匹配问题及其解决方法

作者：苏函晶哈尔滨工业大学

学位级别：硕士

随着计算机软硬件技术的不断发展,大量的数据得以收集。与此同时,原有的数据处理及分析技术面临着越来越多的挑战。分类是机器学习和数据挖掘的一项基本任务,如何构建泛化能力更强的分类器一直是计算机领域的热点问题。大多数分类... 详细信息

随着计算机软硬件技术的不断发展,大量的数据得以收集。与此同时,原有的数据处理及分析技术面临着越来越多的挑战。分类是机器学习和数据挖掘的一项基本任务,如何构建泛化能力更强的分类器一直是计算机领域的热点问题。大多数分类技术都是基于一定的假设建立模型的。当数据匹配模型时,分类效果会很好;而当不匹配时,分类的效果往往会很差。如何解决分类模型的不匹配问题是本文的核心议题。概括来讲,本文的主要工作包括以下几个方面: 1)介绍了一种新的解决复杂、高维数据的基于聚类的分类方法（Decision Cluster Classifier,DCC）,通过分析指出其在特征异构时会导致模型不匹配的问题,并提出了一种新的基于路径的分类策略PDCC以解决DCC的模型不匹配问题。 2)提出了一种新的决策树构建方法以用来集成随机森林。一般来讲,决策树容易产生过拟合现象,这也是一种比较特殊的模型不匹配问题。目前,用来解决这一问题的主要方法是通过集成多棵随机决策树的方式来构建集成分类器。但现有方法存在效率低下,差异性难以控制等问题。本文提出了一种新的基于专属随机决策树的随机森林算法,以有效解决多类数据中决策树的模型不匹配问题。 3)提出了一种新的半监督分类算法以解决聚类标记（Cluster-and-Label）的模型不匹配问题。半监督分类一般基于一定的假设运行,其中聚类假设是一个最常用的假设。聚类标记法可以简单看作直接基于聚类假设运行的一类半监督学习技术,但它的性能受到聚类质量的严重制约。本文则提出一种层次聚类树的技术以解决这一问题。

关键词：聚类分类模型不匹配半监督分类

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海水中溶解有机质对Fe的迁移转化的影响

海洋科学 2014年第6期38卷 94-101页

作者：李岩杨茹君张爱斌苏函中国海洋大学化学化工学院山东青岛266100 中国海洋大学海洋地球科学学院山东青岛266100

Fe是海洋浮游植物生长必需的重要元素,影响浮游植物新陈代谢过程中的各个步骤,对光合作用、呼吸作用过程中电子的传递,氮的还原,叶绿素的合成,以及一些活性氧化物质的降解起到非常重要作用[1]。尽管全球接近30%的大洋表层水中氮、磷、... 详细信息

Fe是海洋浮游植物生长必需的重要元素,影响浮游植物新陈代谢过程中的各个步骤,对光合作用、呼吸作用过程中电子的传递,氮的还原,叶绿素的合成,以及一些活性氧化物质的降解起到非常重要作用[1]。尽管全球接近30%的大洋表层水中氮、磷、硅营养盐含量丰富,但由于受到Fe限制,出现了高营养盐低生产力现象,这对全球碳循环和气候变化产生重大影响[2,3]。

关键词：溶解有机质迁移转化 Fe 浮游植物生长海水代谢过程光合作用呼吸作用

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大数据背景下管理会计的信息化发展分析

中文科技期刊数据库（全文版）经济管理 2023年第4期 177-179页

作者：苏函重庆大唐国际彭水水电开发有限公司重庆409699

当今时代下,信息技术、科学技术全面快速发展,企业获取财务信息更为便捷,财务会计的革新需求更加迫切,企业间的竞争逐步加剧。财务会计管理是企业经营发展的核心,同时也是影响企业发展的关键性因素。管理会计相对于财务会计而言,具有较... 详细信息

当今时代下,信息技术、科学技术全面快速发展,企业获取财务信息更为便捷,财务会计的革新需求更加迫切,企业间的竞争逐步加剧。财务会计管理是企业经营发展的核心,同时也是影响企业发展的关键性因素。管理会计相对于财务会计而言,具有较强的数据敏感性,实际工作也更加精准和灵活。将其运用到企业财务管理中,可以在创新手段的支持下,有效提升数据处理质量与效率,为企业创新发展提供强大助力。因此,在大数据背景下加大对管理会计的研究力度,推动企业财务会计转变为管理会计,对于财务管理有效性提升、决策的科学性以及企业可持续发展具有重要意义。

关键词：大数据管理会计信息化应用措施

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如画的岁月,有你在

快乐青春（简妙作文）（中学生适读） 2024年第1期 17-18页

作者：侯苏函辽宁沈阳市第七中学东部校区

开头简妙写法——扣题提示写什么:晚风轻拂,霞色如瀑。画船撑入花深处,香泛金卮。烟雨微微,一片笙歌醉里归。我愿是满山的杜鹃,只为一次无撼的春天;我愿是漫天的繁星,舍给一个夏天的夜晚;我愿是千万根稻穗,成长在丰实的金秋。那和风里... 详细信息

开头简妙写法——扣题提示写什么:晚风轻拂,霞色如瀑。画船撑入花深处,香泛金卮。烟雨微微,一片笙歌醉里归。我愿是满山的杜鹃,只为一次无撼的春天;我愿是漫天的繁星,舍给一个夏天的夜晚;我愿是千万根稻穗,成长在丰实的金秋。那和风里几多温情飘转,只因外公在,让这时光正好,岁月如画。

关键词：杜鹃繁星扣题

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强化企业集团财务控制研究

机械管理开发 2012年第1期27卷 130-131页

作者：苏楚函山西省晋纺贸易公司山西太原030002

企业集团是一种以大企业为核心,以经济技术或经营联系为基础、实行集权与分权相结合的领导体制,规模巨大、多角化经营的企业联合组织或企业群体组织。企业集团是市场经济和股份制不断发展的产物,其基本架构是母子公司的组合。为了应对... 详细信息

企业集团是一种以大企业为核心,以经济技术或经营联系为基础、实行集权与分权相结合的领导体制,规模巨大、多角化经营的企业联合组织或企业群体组织。企业集团是市场经济和股份制不断发展的产物,其基本架构是母子公司的组合。为了应对新的形势、促进自身发展,企业集团必须建立和完善其管理控制制度,而作为管理控制制度的核心内容,强化企业集团的财务控制具有重要意义,能够为集团的可持续发展提供有力的保障。论述了集团财务控制的基本内容及其重要性,指出了其现存问题并提出相应的政策建议。

关键词：企业集团财务控制研究

海洋中Fe(Ⅱ)的行为及微生物参与下的过程研究概述

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海洋科学 2017年第10期41卷 139-148页

作者：曲胜路杨茹君苏函刘媛耿倩倩中国海洋大学化学化工学院山东青岛266100 青岛海洋科学与技术国家实验室海洋地质过程与环境功能实验室山东青岛266071

Fe是海洋浮游植物生长所必需的营养元素,而Fe(Ⅱ)是可以被直接吸收利用的形态。由于Fe(Ⅱ)处于氧化还原的中间状态,且在产生和转化的过程中,与NO_3^-的还原和NH_4^+的氧化密切相关。因此,研究Fe(Ⅱ)的产生及消亡机制对于研究海区内的初... 详细信息

Fe是海洋浮游植物生长所必需的营养元素,而Fe(Ⅱ)是可以被直接吸收利用的形态。由于Fe(Ⅱ)处于氧化还原的中间状态,且在产生和转化的过程中,与NO_3^-的还原和NH_4^+的氧化密切相关。因此,研究Fe(Ⅱ)的产生及消亡机制对于研究海区内的初级生产力及海洋中的C、N元素循环具有重要意义。而目前对于海水中Fe(Ⅱ)的迁移转化机制报道尚少。本文详细论述了海洋中Fe(Ⅱ)的产生机制及Fe(Ⅱ)的化学行为,重点探讨了厌氧微生物催化下,异化还原和铁氨氧化还原对Fe(Ⅱ)产生、消亡等循环过程的作用,以及对周围环境中N移除的影响。

关键词： Fe(Ⅱ) 微生物活动 N移除

云南运营高速公路路产赔偿中的问题分析与研究

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云南水力发电 2022年第3期38卷 90-93页

作者：赵晓松马媛苏函中国水利水电第十四工程局有限公司云南昆明650041

随着国民经济的飞速发展和人民生活水平的提高,公路基础设施建设日新月异,通行高速公路的车辆不断增加,交通事故路产受损赔偿工作将是公路运营企业一项长期常态化的工作,随着公路财产法律体系的建立完善,公路运营企业依法保护公路财产,... 详细信息

随着国民经济的飞速发展和人民生活水平的提高,公路基础设施建设日新月异,通行高速公路的车辆不断增加,交通事故路产受损赔偿工作将是公路运营企业一项长期常态化的工作,随着公路财产法律体系的建立完善,公路运营企业依法保护公路财产,使交通事故造成的公路财产损害及时得到赔偿。晋红、江通高速公路运营企业作为民事主体行使路产管理和路权维护的法律权利,对在交通事故路产受损赔偿工作开展过程存在的问题、难点进行分析与研究。

关键词：运营高速公路企业路产损失赔偿

铺就信息路,全面奔小康——北京市顺义区吴雄寺村信息化建设经验

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中国.城乡桥 2005年第8期 44-46页

作者：杨宝祝陈文泽秦向阳苏继函

农村信息化是改造我国传统农业和农村的重要内容,为了适应北京农村信息化发展的需要,解决信息服务的“最后一公里”,繁荣农村经济和村民生活,探索一条如何利用信息和信息技术解决“三农”问题的道路,在科技部、市科委、市计委和市农委... 详细信息

农村信息化是改造我国传统农业和农村的重要内容,为了适应北京农村信息化发展的需要,解决信息服务的“最后一公里”,繁荣农村经济和村民生活,探索一条如何利用信息和信息技术解决“三农”问题的道路,在科技部、市科委、市计委和市农委等的大力支持下,2003年起,国家农业信息化工程技术研究中心(北京农业信息技术研究中心,以下简称中心),在顺义区吴雄寺村建立了农村信息化示范村,期间得到了顺义区农科所、顺义区大孙各庄镇政府、吴雄寺村的大力协助。

关键词：吴雄寺村北京农村孙各庄农业信息技术农村经济最后一公里信息终端村域经济研究中心