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Cell-specific expression of the diphtheria toxin A-chain coding sequence induces cancer cell suicide

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Chinese Medical Journal 2002年第6期115卷 869-873,152页

作者：芮红兵陈元仲福建省血液病研究所福建医科大学附属协和医院福州350001

OBJECTIVE: To test whether the diphtheria toxin A (DT-A) chain coding sequence linked to murine immunoglobulin Kappa light chain (IgKappa) promoter and enhancer have selective cytocidal effects on IgKappa producing cells. METHODS: The diphtheria toxin A gene or beta galactosidase (beta-gal) gene were linked to a murine IgKappa promoter and enhancer to construct pcDNA3IgKappaDTA or pcDNA3IgKappaLacZ plasmids. These plasmids were transfected into IgKappa producing or non-producing cells by the liposome coated DNA method. Expression of beta-gal activity and effects on cell growth of transfected cells were assessed. RESULTS: The beta-gal gene, under the control of cytomegalovirus (CMV) promoter, can express in all cell lines. Expression of beta-gal under the control of the IgKappa promoter was detected only in the IgKappa producing cell line, CA46. Expression of beta-gal was greatly suppressed when cotransfected with pcDNA3IgKappaDTA in CA46 *** growth of CA46 cells transfected with pcDNA3IgKappaDTA plasmid was significantly inhibited compared with CA46 cells transfected with pcDNA3IgKappaLacZ. CONCLUSION: Selective killing of IgKappa producing cells can be attained by introducing the diphtheria toxin A gene under the control of IgKappa promoter and enhancer.

关键词： Genes, Immunoglobulin Diphtheria Toxin Enhancer Elements (Genetics) Gene Therapy Humans Immunoglobulin kappa-Chains Neoplasms Peptide Fragments Promoter Regions (Genetics) Tumor Cells, Cultured

D114对K562细胞增殖的影响及Rb蛋白在Notch活化的K562细胞中的表达

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中国老年学杂志 2012年第9期32卷 1896-1897页

作者：马智勇芮红兵福建医科大学附属第一医院血液风湿科福建福州350005

目的本实验旨在探讨D114基因对白血病细胞株K562生长的影响及Rb蛋白在Notch活化的K562细胞中的表达。方法实验分正常对照组、阴性对照组(转染质粒pBudCE4.1)和实验组(转染质粒pBudCE4.1-D114)。转染48 h后,免疫印迹法检测各组蛋白D114... 详细信息

目的本实验旨在探讨D114基因对白血病细胞株K562生长的影响及Rb蛋白在Notch活化的K562细胞中的表达。方法实验分正常对照组、阴性对照组(转染质粒pBudCE4.1)和实验组(转染质粒pBudCE4.1-D114)。转染48 h后,免疫印迹法检测各组蛋白D114、Rb的表达水平;用细胞计数试剂盒-8法检测各组细胞的增殖;转染48 h后,比色法检测各组细胞的caspase-3、caspase-8的活性。结果在各组K562细胞中均检测到D114及Rb蛋白的表达,实验组的D114及Rb蛋白表达比两个对照组显著增多(P<0.05);实验组较对照组caspase-3、caspase-8的活性增高明显。结论 Notch活化的K562细胞中Rb蛋白高表达,通过提高caspase-3、caspase-8的活性,诱导增殖速度减慢。

关键词：白血病 Rb蛋白凋亡

miR-204通过靶向Sirt1/p53信号通路抑制霍奇金淋巴瘤细胞增殖

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中国病理生理杂志 2019年第9期35卷 1557-1564页

作者：郑晓强芮红兵张光辉福建医科大学附属第一医院血液风湿科

目的:探讨微小RNA-204(miR-204)对霍奇金淋巴瘤细胞增殖的作用,并研究其初步机制。方法:采用RT-qPCR检测霍奇金淋巴瘤组织中miR-204和Sirt1 mRNA的表达水平。在L428细胞中分别转染miR-204模拟物(miR-204 mimic)、 Sirt1 小干扰RNA( Sirt... 详细信息

目的:探讨微小RNA-204(miR-204)对霍奇金淋巴瘤细胞增殖的作用,并研究其初步机制。方法:采用RT-qPCR检测霍奇金淋巴瘤组织中miR-204和Sirt1 mRNA的表达水平。在L428细胞中分别转染miR-204模拟物(miR-204 mimic)、 Sirt1 小干扰RNA( Sirt1 siRNA)和miR-204 mimic+pcDNA3.1-Sirt1后,CCK-8法与BrdU实验分别检测细胞活力和BrdU掺入量;Western blot检测Sirt1和乙酰化p53(acetylated p53, ac-p53)的表达水平。双萤光素酶报告基因法验证miR-204与Sirt1的靶向关系。结果:霍奇金淋巴瘤组织中miR-204低表达,Sirt1 mRNA高表达。与对照组相比,L428细胞转染miR-204 mimic或 Sirt1 siRNA后,细胞活力、BrdU掺入量及Sirt1和ac-p53表达水平均显著降低( P <0.05)。与单纯miR-204 mimic转染组相比,miR-204 mimic+pcDNA3.1-Sirt1共转染组L428细胞活力、BrdU掺入量Sirt1和ac-p53蛋白表达水平均显著升高( P <0.05)。双萤光素酶报告基因实验结果表明,Sirt1 是miR-204的靶基因。结论: miR-204对L428细胞增殖的抑制作用可能是通过抑制Sirt1表达和促进ac-p53上调来实现的。

关键词：微小RNA-204 霍奇金淋巴瘤 Sirt1蛋白 p53蛋白细胞增殖

转染p16、p53对白血病细胞株K562及HL-60的抑制作用

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中国实验血液学杂志 2010年第2期18卷 305-310页

作者：陈琦沈杰芳芮红兵苏津自卓光生康日辉林珺芳福建医科大学附属第一医院血液内科福建福州350005 福建医科大学附属第一医院心内科福建福州350005

本研究构建p53,p16基因真核表达载体,用脂质体法转染入白血病细胞,观察其在白血病细胞中的表达和对白血病细胞的作用。设计并构建包含野生型p53cDNA与p16cDNA的真核双表达载体pBudCE4.1-53-16,用脂质体法转染白血病细胞,用间接免疫细胞... 详细信息

本研究构建p53,p16基因真核表达载体,用脂质体法转染入白血病细胞,观察其在白血病细胞中的表达和对白血病细胞的作用。设计并构建包含野生型p53cDNA与p16cDNA的真核双表达载体pBudCE4.1-53-16,用脂质体法转染白血病细胞,用间接免疫细胞化学法、Western blot法检测鉴定外源性p53及p16的表达情况。通过CCK-8,流式细胞仪检测细胞的生长曲线、细胞周期、细胞凋亡。结果发现:p53p16基因双表达真核载体构建成功,体外转染入白血病细胞后能检测到外源性P53、P16蛋白在白血病细胞中表达。转染48小时后,试验组与对照组比较,细胞周期阻滞(p<0.001);试验组和对照组比较,细胞增殖下降,细胞凋亡增加(p<0.001)。结论:重组质粒pBudCE4.1-53-16构建成功,经体外转染白细胞细胞后2个目的基因能够在细胞中同时表达,并引起细胞周期阻滞于G0期,细胞凋亡增加。

关键词： p53基因 p16基因 pBudCE4.1 基因转染凋亡

伴抗心磷脂抗体阳性的SLE患者外周血CD1c和CD1d表达增高

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基础医学与临床 2014年第11期34卷 1558-1559页

作者：芮红兵郑玲康日辉林珺芳郑晓强福建医科大学附属第一医院风湿科福建福州350005

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）患者机体能产生多种抗非肽类自身抗体,如抗双链DNA（antidsDNA autoantibody）抗体及抗心磷脂抗体（anti-cardiolipin antibody,ACA））.ACA在约60％的SLE患者中高表达,与动静脉栓塞、血小板减少及狼疮抗凝因子（lupus anticoagulant,LA））显著相关.作为抗原递呈分子,CD1c和CD1d分子在SLE自身非肽类抗体的发生发展中可能发挥着重要作用.本实验对伴ACA阳性的SLE患者外周血CD1c及CD1d的表达及相关细胞因子进行了研究.

关键词：抗心磷脂抗体阳性 CD1d分子 SLE患者 CD1c 外周血 erythematosus 系统性红斑狼疮狼疮抗凝因子

DLL4基因对白血病细胞株K562细胞中YY1和c-Myc蛋白表达及细胞增殖的影响

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中国实验血液学杂志 2011年第6期19卷 1399-1403页

作者：石丽芳芮红兵福建医科大学附属第一医院血液风湿科福建福州350005

本研究旨在探讨Notch的配体DLL4基因在白血病细胞株K562中对转录因子YY1和原癌基因c-Myc蛋白表达及细胞生长的影响。实验分正常对照组、阴性对照组(转染质粒pBudCE4.1)和实验组(转染质粒pBudCE4.1-DLL4)。转染后48小时,用免疫印迹法和... 详细信息

本研究旨在探讨Notch的配体DLL4基因在白血病细胞株K562中对转录因子YY1和原癌基因c-Myc蛋白表达及细胞生长的影响。实验分正常对照组、阴性对照组(转染质粒pBudCE4.1)和实验组(转染质粒pBudCE4.1-DLL4)。转染后48小时,用免疫印迹法和免疫细胞化学法检测外源性DLL4瞬时转染表达水平及YY1和c-Myc蛋白的表达水平;用细胞计数试剂盒-8法检测各组细胞的增殖;转染后48小时用流式细胞仪检测各组细胞的周期分布和凋亡。结果表明,在各组K562细胞中均检测到DLL4、YY1和c-Myc蛋白的表达,实验组的DLL4、YY1和c-Myc蛋白表达量比两个对照组显著增多(p<0.05);实验组K562细胞的生长速度明显低于对照组;实验组较对照组G0/G1期细胞增多(p<0.001),凋亡率增加(p<0.001)。结论:DLL4基因能增加细胞转录因子YY1和原癌基因c-Myc蛋白的表达,诱导细胞生长速度减慢、细胞周期停滞于G0/G1期,并能增高凋亡率增加。

关键词： DLL4基因 K562细胞 YY1蛋白 -Myc蛋白白血病

基因治疗原发性高血压的新途径:内皮型一氧化氮合成酶CDNA腺病毒载体在人胎肾293细胞的表达

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中国临床康复 2003年第30期7卷 4062-4063页

作者：江德文吴可贵高丽真芮红兵福建医科大学附属第一医院肾内科福建省高血压研究所福建省福州市350005 福建医科大学附属第一医院血液科

研究内皮型一氧化氮合成酶（endothelialnitric oxide synthase,eNOS)CDNA 腺病毒载体 PadRSVeNOSCDNA 导入在人胎肾 293细胞 ( )中的表达。方法:大量制备及纯化质粒 eNOSCDNA ,将纯化eNOSCDNA ... 详细信息

研究内皮型一氧化氮合成酶（endothelialnitric oxide synthase,eNOS)CDNA 腺病毒载体 PadRSVeNOSCDNA 导入在人胎肾 293细胞 ( )中的表达。方法:大量制备及纯化质粒 eNOSCDNA ,将纯化eNOSCDNA 载体通过脂质体转染 293细胞48h 后,应用化学比色法测定293细胞提取物NOS 活性。结果:被转染 293细胞 NOS活性显著提高于未转染293细胞 NOS 活性犤( 0.62±0.03),(0.093±0.01)kU /L,P <0.001犦。结论:PA dRSVeNOSCDNA 导入人胎肾 293细胞是一种能使 NOS 活性显著升高的方法,为基因治疗原发性高血压及肾脏血管性疾病研究提供一条新的途径。

关键词：基因治疗原发性高血压内皮型一氧化氮合成酶 CDNA腺病毒载体肾 293细胞胚胎

类风湿性关节炎和血清阴性脊柱关节病患者血清急性时相反应蛋白的测定及其临床意义

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中国综合临床 2001年第3期17卷 193-194页

作者：康日辉叶德富薛原郑铃朱月永芮红兵福建医科大学附属第一医院风湿血液科福州350005

目的观察活动期类风湿性关节炎 (RA)和血清阴性脊柱关节病患者血清 4种急性时相反应蛋白α1 -酸性糖蛋白 (AAG)、α1 -抗胰蛋白酶 (AAT)、触珠蛋白 (HPT)和铜蓝蛋白 (CER)浓度的变化及其临床意义。方法采用 ARRAY36 0蛋白质测定系统测定... 详细信息

目的观察活动期类风湿性关节炎 (RA)和血清阴性脊柱关节病患者血清 4种急性时相反应蛋白α1 -酸性糖蛋白 (AAG)、α1 -抗胰蛋白酶 (AAT)、触珠蛋白 (HPT)和铜蓝蛋白 (CER)浓度的变化及其临床意义。方法采用 ARRAY36 0蛋白质测定系统测定 6 1例 RA和血清阴性脊柱关节病患者及 31例正常对照组血清 AAG、AAT、HPT、CER浓度并进行比较。结果 RA、血清阴性脊柱关节病及关节炎综合组患者该 4项指标浓度均显著高于正常对照组 (P<0 .0 0 1)。并与血沉、C-反应蛋白呈正相关。结论动态观察血清

关键词：类风湿性关节血清阴性脊柱关节病急性时相反应蛋白测定

培哚普利、普萘洛尔与双氢氯噻嗪对自发性高血压大鼠心血管结构重塑的影响(英文)

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中国药理学报 1999年第10期20卷 923-928页

作者：苏津自陈松苍吴可贵陈达光芮红兵王向宇王华军福建医科大学附属第一医院心血管内科

目的:探讨培哚普利,普萘洛尔与双氢氯噻嗪对SHR大鼠心血管重塑的影响。方法:16周龄的雄性SHR分别接受培哚普利(5mg·kg^(-1)·d^(-1)),普萘洛尔(40mg·kg^(-1)·d^(-1)),与双氢氯噻嗪(100mg·kg^(-1)·d^(-1))治疗12周,治疗结束后测收缩... 详细信息

目的:探讨培哚普利,普萘洛尔与双氢氯噻嗪对SHR大鼠心血管重塑的影响。方法:16周龄的雄性SHR分别接受培哚普利(5mg·kg^(-1)·d^(-1)),普萘洛尔(40mg·kg^(-1)·d^(-1)),与双氢氯噻嗪(100mg·kg^(-1)·d^(-1))治疗12周,治疗结束后测收缩压,左心室重与体重比。天狼星红染色分析心肌胶原形态与含量;形态计量法分析血管肥厚程度。结果:各治疗组动物的血压治疗后均接近正常水平,3种降压药均可逆转左心室和动脉壁肥厚,培哚普利和普萘洛尔能防止心肌纤维化,双氢氯噻嗪则促进心肌纤维化的进展。结论:培哚普利,普萘洛尔能有效逆转心肌纤维化,双氢氯噻嗪对心肌纤维化有不良影响。

关键词：高血压普萘洛尔噻嗪利尿药药理治疗