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限制性酶切片段的TA法直接克隆与测序(英文)

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西北植物学报 2003年第6期23卷 875-878页

作者：胡银岗 MEREDITH Carter MICHAEL G K Jones 西北农林科技大学农学院陕西杨陵712100 澳大利亚默多克大学西澳洲农业生物技术中心

报道了一种粘性末端的限制性酶切片段的直接克隆和测序的方法.对限制性酶切片段的粘性末端先用T4DNA聚合酶处理,变为平末端,然后用TaqTMDNA聚合酶在其3′末端加上A腺苷,即可利用T/A克隆载体进行直接克隆测序.利用这种简单而快速的方法,... 详细信息

报道了一种粘性末端的限制性酶切片段的直接克隆和测序的方法.对限制性酶切片段的粘性末端先用T4DNA聚合酶处理,变为平末端,然后用TaqTMDNA聚合酶在其3′末端加上A腺苷,即可利用T/A克隆载体进行直接克隆测序.利用这种简单而快速的方法,对2个RFLP探针Psr680的限制性酶切片段 1.65kb和0.65kb 进行了测序,表明这种方法可以替代利用相应载体进行相应酶切等处理的粘性末端连接克隆测序的方法.

关键词：限制性片段克隆测序 TA法克隆

小麦碳同位素分辨率与叶片气孔相关指标的关系

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麦类作物学报 2010年第4期30卷 660-664页

作者：逯芳芳李昌澎胡银岗西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100 西北农林科技大学农学院陕西杨凌712100 国家小麦改良中心杨凌分中心陕西杨凌712100 陕西省农业分子生物学重点实验室陕西杨凌712100

为了探讨气孔相关指标替代碳同位素分辨率(Δ)作为评价指标的可行性,测定了56个小麦品种(系)的碳同位素分辨率(Δ),并分析了灌浆期不同阶段气孔相关指标与Δ值的相关性。结果表明,小麦旗叶和籽粒的Δ值均具有较好的遗传稳定性;灌浆中后... 详细信息

为了探讨气孔相关指标替代碳同位素分辨率(Δ)作为评价指标的可行性,测定了56个小麦品种(系)的碳同位素分辨率(Δ),并分析了灌浆期不同阶段气孔相关指标与Δ值的相关性。结果表明,小麦旗叶和籽粒的Δ值均具有较好的遗传稳定性;灌浆中后期小麦旗叶的气孔导度和叶面温度都与Δ值有较强的相关性。因此,在育种中,可以通过测定灌浆中后期小麦旗叶的气孔导度和叶温代替Δ值对材料的蒸腾速率进行初步选择。

关键词：小麦碳同位素分辨率替代指标气孔导度叶面温度

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野生大麦与栽培大麦醇溶蛋白遗传多样性比较

西北植物学报 2009年第1期29卷 61-68页

作者：佘奎军王士强胡银岗宋卫宁西北农林科技大学农学院国家小麦改良中心杨凌分中心陕西省农业分子生物学重点实验室陕西杨陵712100

利用A-PAGE(acid-polyacrylamide gel electrophoresis)法对采自以色列的野生大麦的一个野生自然群体的15个系和来自世界不同国家的14份栽培大麦品种醇溶蛋白的遗传多样性进行了分析。结果表明:在所有的29份供试材料中,共发现52条相对... 详细信息

利用A-PAGE(acid-polyacrylamide gel electrophoresis)法对采自以色列的野生大麦的一个野生自然群体的15个系和来自世界不同国家的14份栽培大麦品种醇溶蛋白的遗传多样性进行了分析。结果表明:在所有的29份供试材料中,共发现52条相对迁移率不同的谱带,52条谱带的出现频率为3.44%～93.1%,多样性指数为0.066～0.368;以中国春醇溶蛋白为标准,ω区大麦醇溶蛋白的谱带数最多,其次是β区;野生大麦Shannon多样性指数依次为β区>ω区>α区>γ区,而栽培大麦Shannon多样性指数依次为ω区>β区>γ区>α区;野生大麦自然群体和栽培大麦品种间的遗传相似系数变幅相当,且聚类分析结果显示,野生大麦自然群体和来自全球不同区域栽培大麦品种间的醇溶蛋白遗传多样性同样丰富。以上结果说明,野生大麦中保存了较栽培大麦更为丰富的基因资源,今后栽培大麦的品质改良应该重视野生大麦资源的合理利用。

关键词：栽培大麦野生大麦醇溶蛋白遗传多样性

温敏不育系A3314在中国不同生态地点的育性表现

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西北植物学报 2004年第7期24卷 1207-1210页

作者：宋喜悦何蓓如马翎健胡银岗余玲西北农林科技大学农学院陕西杨陵712100

利用作者参与发明的ZL00105488.0专利方法选育的小麦温度敏感不育系A3314在中国元谋、杨陵、石家庄、互助、依安、贵阳、武威7个不同纬度地点种植的自交结实率,结合各点光温条件的分析表明:A3314在黄淮冬麦区、云贵冬麦区、西北春麦区... 详细信息

利用作者参与发明的ZL00105488.0专利方法选育的小麦温度敏感不育系A3314在中国元谋、杨陵、石家庄、互助、依安、贵阳、武威7个不同纬度地点种植的自交结实率,结合各点光温条件的分析表明:A3314在黄淮冬麦区、云贵冬麦区、西北春麦区、东北春麦区各点,按当地小麦生产正季播种均表现稳定雄性不育;而在黄淮和云贵冬麦区春播(夏播)则自交结实,适宜条件下自交结实率可达60%以上。说明该温敏不育系的雄性育性受温度的制约,而与日长无明显相关。根据A3314的育性表现,推测它在中国大部分小麦产区均可安全用于杂交小麦制种。

关键词：小麦温敏不育系育性表现生态条件

模拟干旱胁迫下冬小麦胚芽鞘长度变化及与抗旱性的关系研究

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干旱地区农业研究 2009年第4期27卷 125-130页

作者：关周博王士强陈亮唐娜胡银岗西北农林科技大学农学院陕西杨凌712100 国家小麦改良中心杨凌分中心陕西杨凌712100 陕西省农业分子生物学重点实验室陕西杨凌712100

以6个抗旱性不同的冬小麦品种(系)为材料,通过不同浓度的PEG-6000渗透溶液模拟干旱胁迫处理,研究了小麦苗期的胚芽鞘长度、苗高、主胚根长等性状,并与其在大田及防雨棚控水条件下的产量构成和抗旱性的关系进行分析。结果表明,在不同浓度... 详细信息

以6个抗旱性不同的冬小麦品种(系)为材料,通过不同浓度的PEG-6000渗透溶液模拟干旱胁迫处理,研究了小麦苗期的胚芽鞘长度、苗高、主胚根长等性状,并与其在大田及防雨棚控水条件下的产量构成和抗旱性的关系进行分析。结果表明,在不同浓度的PEG-6000渗透溶液干旱胁迫处理下,小麦苗期胚芽鞘长度在品种间差异显著;产量的抗旱指数与苗期不同干旱胁迫处理下的胚芽鞘长度的相关性分析表明,小麦的胚芽鞘长度与其抗旱指数呈极显著正相关(相关系数为0.9600),抗旱性强的品种胚芽鞘较长,抗旱性弱的品种胚芽鞘较短。在不同程度的干旱胁迫处理下,各品种的胚芽鞘长度变化趋势大致相同,因此利用胚芽鞘长度可以在早期对小麦的抗旱性进行鉴选。

关键词：小麦干旱胁迫胚芽鞘长度抗旱指数抗旱性

苦荞和甜荞查尔酮合成酶基因的克隆及序列比较

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西北植物学报 2008年第3期28卷 447-451页

作者：张艳柴岩冯佰利胡银岗西北农林科技大学农学院陕西省农业分子生物学重点实验室陕西杨陵712100

以苦荞品种‘西农9920’和甜荞品种‘西农9976’为材料,根据其它植物查尔酮合成酶(chalcone synthase,CHS)基因DNA序列的保守区域设计的一对简并引物,进行PCR扩增,从2种荞麦基因组中克隆出了长度均为860 bp的CHS基因片段,对其进行回收... 详细信息

以苦荞品种‘西农9920’和甜荞品种‘西农9976’为材料,根据其它植物查尔酮合成酶(chalcone synthase,CHS)基因DNA序列的保守区域设计的一对简并引物,进行PCR扩增,从2种荞麦基因组中克隆出了长度均为860 bp的CHS基因片段,对其进行回收、克隆,挑选阳性克隆测序;序列分析表明这2个片段含有CHS基因的N端和C端的结构域,分别为苦荞和甜荞的CHS基因片段,命名为FtCHS和FeCHS。对获得的2种荞麦CHS基因的DNA序列进行比较分析,发现两者间存在多达43处单碱基多态性,这些单碱基多态性可能是苦荞和甜荞种子中类黄酮含量差异的重要原因之一。苦荞和甜荞CHS与其它植物CHS的氨基酸序列的进化分析表明,其与同为蓼科的掌叶大黄和石竹科的满天星的同源性较近。

关键词：苦荞甜荞查尔酮合成酶基因克隆序列比较

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甜荞品种内与品种间的遗传多样性研究

西北植物学报 2009年第7期29卷 1314-1319页

作者：王忠景冯佰利柴岩胡银岗西北农林科技大学农学院陕西杨陵712100 陕西省农业分子生物学实验室陕西杨陵712100

以9个甜荞品种为材料,1个苦荞品种为对照,每个品种随机取10粒种子发芽,提取基因组DNA,采用长随机引物和内含子切接点引物的PCR分子标记技术,对甜荞品种内和品种间的遗传多样性进行了分析。结果表明:(1)所使用的引物均能在9份甜荞品种和... 详细信息

以9个甜荞品种为材料,1个苦荞品种为对照,每个品种随机取10粒种子发芽,提取基因组DNA,采用长随机引物和内含子切接点引物的PCR分子标记技术,对甜荞品种内和品种间的遗传多样性进行了分析。结果表明:(1)所使用的引物均能在9份甜荞品种和1份苦荞品种中稳定扩增出条带,共获得了45条条带,其中多态性条带42条,占总数的93.3%;(2)甜荞同一品种内存在一定的遗传差异,但遗传距离较小,大部分不同甜荞品种间的遗传差异大于其品种内的遗传差异。因而,在甜荞品种鉴定和遗传多样性研究中,通过品种内适当混合取样可以较好地代表和反映甜荞品种特性。

关键词：甜荞亲缘关系品种内品种间

YS型小麦温敏雄性不育系A3017育性相关基因的SSH分析

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西北植物学报 2006年第7期26卷 1301-1308页

作者：宋国琦胡银岗林凡云董普辉何蓓如西北农林科技大学农学院国家小麦改良中心杨凌分中心陕西省农业分子生物学重点实验室陕西杨陵712100

以人工气候箱控温条件下YS型小麦温敏不育系A3017的不育幼穗和可育幼穗为材料,分别构建了不育和可育条件下基因特异表达的抑制消减杂交cDNA文库.在两个库中分别随机挑选100个阳性克隆进行测序,经BLAST序列比对分析,共获功能已知的EST 78... 详细信息

以人工气候箱控温条件下YS型小麦温敏不育系A3017的不育幼穗和可育幼穗为材料,分别构建了不育和可育条件下基因特异表达的抑制消减杂交cDNA文库.在两个库中分别随机挑选100个阳性克隆进行测序,经BLAST序列比对分析,共获功能已知的EST 78条.比较发现,不育条件下与细胞质相关的基因表达数量(63.4%)远高于可育条件下的基因数量(35.1%),参与蛋白质合成、蛋白质修饰/加工/储藏、转运和信号传递过程基因的比例也均高于可育条件下的,而参与能量代谢过程基因的比例则明显偏低.分析认为,在不育和可育条件下的基因表达差异可能是导致温敏雄性不育系育性变化的关键,这为进一步从分子基础上揭示YS型小麦温敏雄性不育系育性转换机制奠定了基础.

关键词：小麦温敏雄性不育系抑制消减杂交育性相关基因

春化及光周期基因的等位变异对小麦主要农艺性状及产量的影响

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麦类作物学报 2022年第10期42卷 1192-1199页

作者：乔朋放毕起李玹陈亮胡银岗西北农林科技大学农学院陕西杨凌712100 旱区作物逆境生物学国家重点实验室陕西杨凌712100 中国旱区节水农业研究院陕西杨凌712100

为了解春化及光周期基因对小麦生育期、农艺性状及产量的影响,以田间种植的253份国内外小麦品种(系)为材料,利用分子标记检测其春化基因(Vrn-1)和光周期基因( Ppd-D1)的等位变异,记录其抽穗期、开花期,在灌浆中期调查其株高、成穗数等... 详细信息

为了解春化及光周期基因对小麦生育期、农艺性状及产量的影响,以田间种植的253份国内外小麦品种(系)为材料,利用分子标记检测其春化基因(Vrn-1)和光周期基因( Ppd-D1)的等位变异,记录其抽穗期、开花期,在灌浆中期调查其株高、成穗数等农艺性状,收获后调查其产量性状。结果表明,供试材料中包含13种春化和光周期基因等位变异组合类型,其中含有 vrn-A1+vrn-B1+vrn-D1+Ppd-D1a组合的材料最多,占59.68%;Vrn-1+Ppd-D1a组合可显著缩短小麦播种至开花所需的时间。含有 Vrn-A1a或 Vrn-B1材料的成穗数显著多于含有 Vrn-D1或 vrn-1的材料,但含有 Vrn-1不同等位变异的材料间产量无显著差异;含有 Vrn-A1a材料的旗叶长而窄。与含有 Ppd-D1b的小麦材料相比,含有 Ppd-D1a的材料开花期显著提前,且株高降低,同时穗下茎长、旗叶长和倒二叶长均显著缩短。综上,春化及光周期基因在影响小麦抽穗开花期的同时,对农艺性状和产量也有重要影响;含有 Vrn-D1+ Ppd-D1a组合的小麦材料在生育期稳定性、产量等性状上均表现优异,在育种中可多加利用。

关键词：小麦春化基因光周期基因抽穗期开花期农艺性状产量