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一贯煎抗辐射代谢组学研究

中国中药杂志 2024年

作者：徐瑞平董明浩肖炳坤李志恒黄荣清广东药科大学中药学院军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所

应用气相色谱-质谱联用（gas chromatography-mass spectrometer，GC-MS）代谢组学方法考察一贯煎水提物对小鼠抗辐射作用并探索其相关作用通路及作用机制。将健康SPF级雄性昆明小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组以及一贯煎高、中... 详细信息

应用气相色谱-质谱联用（gas chromatography-mass spectrometer，GC-MS）代谢组学方法考察一贯煎水提物对小鼠抗辐射作用并探索其相关作用通路及作用机制。将健康SPF级雄性昆明小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组以及一贯煎高、中、低剂量组，每组10只。小鼠预防性给药6 d后，采用5 Gy的60Co γ射线照射建立辐射小鼠模型。辐射损伤后观测14 d内小鼠体质量以及外周血变化，于辐射损伤后第3天采集小鼠呼出气，于辐射损伤后第14天采集小鼠血清，应用GC-MS技术分析各组小鼠呼出气和血清，寻找并分析一贯煎抗辐射作用后小鼠的呼出气和血清中差异性代谢物及含量变化。结果显示，呼出气代谢组学分析结果提示小鼠呼出气中有15种差异性代谢物与辐射损伤有关，其中己烷、乙酸乙酯、己醛、乙酸、1-己醇、癸烷、均三甲苯、D-柠檬烯、苯乙酮和萘水平上升，邻二甲苯、乙苯、壬醛水平下降；血清代谢组学分析结果显示，小鼠血清中有26种差异性代谢物与辐射损伤有关，其中包括乙二醇、乳酸、L-丙氨酸、3-羟基丁酸、L-缬氨酸、甘油、丝氨酸、L-苏氨酸等，通过构建一贯煎抗辐射作用的相关代谢网络通路，显示有3条代谢通路与一贯煎抗辐射作用相关，其中包括亚油酸代谢；苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成；以及苯丙氨酸代谢。提示一贯煎对辐射损伤小鼠有一定防治作用，对辐射损伤的机制进行了初步探索，为一贯煎防治辐射的作用机制研究奠定了基础。

关键词：一贯煎抗辐射气相色谱-质谱联用(GC-MS) 代谢组学

基于HK-2细胞评价药物肾毒性生物标志物的研究

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医药导报 2024年第8期43卷 1187-1191页

作者：徐瑞平肖炳坤缪潇瑶李志恒黄荣清广东药科大学中药学院广州511436 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所北京100850

目的筛选对药物引起的肾毒性较为灵敏的标志物进行预测与分析,加速药物早期研发。方法以人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2)为研究对象,利用3种肾毒性药物(顺铂、庆大霉素和马兜铃酸I),筛选高灵敏度的生物标志物。结果生物标志物在细胞内... 详细信息

目的筛选对药物引起的肾毒性较为灵敏的标志物进行预测与分析,加速药物早期研发。方法以人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2)为研究对象,利用3种肾毒性药物(顺铂、庆大霉素和马兜铃酸I),筛选高灵敏度的生物标志物。结果生物标志物在细胞内液的灵敏度高于细胞外液;与检测单一的生物标志物相比,细胞内液中β2-微球蛋白(β2-MG)和中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)的联合检测提高肾毒性评价的准确性。结论基于HK-2细胞模型,联合检测细胞内液中β2-MG和NGAL的含量可用于药物早期开发阶段预测肾毒性。

关键词：肾毒性评价方法生物标志物 β2-微球蛋白

基于气质联用技术的猴头菇多糖抗疲劳代谢组学

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科学技术与工程 2024年第9期24卷 3623-3631页

作者：任卓妍肖炳坤缪潇瑶李志恒黄荣清广东药科大学中药学院广州511436 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所北京100850

猴头菇为珍贵的药食两用大型真菌,有抗炎、抗肿瘤、增加免疫力等功效。应用气相色谱-质谱联用(gas chromatography-mass spectrometer,GC-MS)代谢组学方法考察猴头菇多糖对大鼠负重力竭游泳模型的抗疲劳作用及作用机制。将大鼠随机分为6... 详细信息

猴头菇为珍贵的药食两用大型真菌,有抗炎、抗肿瘤、增加免疫力等功效。应用气相色谱-质谱联用(gas chromatography-mass spectrometer,GC-MS)代谢组学方法考察猴头菇多糖对大鼠负重力竭游泳模型的抗疲劳作用及作用机制。将大鼠随机分为6组(空白组、模型组、猴头菇多糖低、中、高3个剂量实验组、阳性对照组),每组6只,连续灌胃21 d;通过测量各组大鼠体重、比较大鼠力竭游泳时间、分析大鼠血清5-HT含量、比较大鼠外周血血象及胸脾指数等实验指标来评估猴头菇多糖对大鼠疲劳的缓解程度;采用GC-MS技术分析各组大鼠血清中代谢物,并进行多元统计分析获取差异性代谢物信息,构建代谢通路并阐述抗疲劳作用机制。结果表明:猴头菇多糖高剂量组的大鼠负重力竭游泳时间显著长于模型组;猴头菇多糖低、中、高剂量组大鼠代谢轮廓趋近于空白组,表现出一定抗疲劳作用。获得了24个差异性代谢物与负重力竭游泳模型有关,涉及的3条主要代谢通路为:亚油酸代谢、甘油代谢及苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸合成。推测猴头菇多糖可能通过调节脂质代谢以及氨基酸代谢对负重力竭游泳模型大鼠发挥抗疲劳作用。

关键词：猴头菇多糖抗疲劳气相色谱-质谱联用(GC-MS) 代谢组学

辐射损伤大鼠呼出气中挥发性有机化合物成分的气相色谱-质谱研究

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中国呼吸与危重监护杂志 2024年第5期23卷 340-345页

作者：谢晓云汤健肖炳坤缪潇瑶李志恒黄荣清广东药科大学中药学院广东广州510006 军事医学研究院辐射医学研究所北京100850

目的应用热脱附气相色谱-质谱联用(thermal desorption-gas chromatography-mass spectrometry,TD-GC-MS)技术对低剂量辐射损伤SD大鼠呼出气中挥发性有机化合物(volatile organic compounds,VOCs)成分进行探索,寻找大鼠辐射损伤后系列VOCs差异性代谢物,并为建立无创、非侵入性辐射损伤检测方法奠定基础。方法将SD大鼠随机分为5组(空白组、0.5 Gy组、1 Gy组、2 Gy组、3 Gy组),每组8只,建立大鼠低剂量辐射损伤模型。进行钴源辐射损伤后,记录大鼠体重,分析外周血血象,采集第1、5、9、13天大鼠呼出气,运用TD30-GC-MS技术分析呼出气中的VOCs成分,进行多元统计分析,探索并获得辐射损伤后的差异性代谢物。结果辐射损伤后大鼠与空白组相比,体重短期内下降、外周血象和肺组织切片具有差异性,大鼠呼出气中的VOCs成分含量与空白组大鼠具有明显差异,其中苯乙酮、壬醛、癸醛和十四烷4种VOCs增加,庚烷、氯苯、对二甲苯和间二氯苯4种VOCs减少。结论通过对大鼠呼出气的GC-MS分析,8种大鼠呼出气的VOCs成分可作为辐射损伤的差异性代谢物。此研究为建立大鼠呼出气VOCs成分的GC-MS分析方法,以及开展生物辐射损伤的无损伤性分析检测奠定了基础。

关键词：辐射损伤呼出气挥发性有机化合物差异性代谢物

辐射损伤早期小鼠呼出气特征性挥发性有机化合物分析及诊断价值

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军事医学 2024年第2期48卷 88-94页

作者：肖炳坤缪潇瑶李志恒郑晓飞黄荣清军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所北京100850

目的探索辐射损伤早期小鼠呼出气特征性挥发性有机化合物(VOC)成分变化及诊断价值。方法应用热脱附-气相色谱-质谱(TD-GC/MS)技术分析受800 cGy 60Coγ射线照射小鼠呼出气中的VOC,筛查辐射损伤早期特征性VOC,建立诊断模型。结果小鼠30 ... 详细信息

目的探索辐射损伤早期小鼠呼出气特征性挥发性有机化合物(VOC)成分变化及诊断价值。方法应用热脱附-气相色谱-质谱(TD-GC/MS)技术分析受800 cGy 60Coγ射线照射小鼠呼出气中的VOC,筛查辐射损伤早期特征性VOC,建立诊断模型。结果小鼠30 d存活率为4.2%,辐射损伤后7 h特征性VOC差异显著,共筛选出30个辐射损伤早期相关的差异性代谢物。通过受试者工作特征曲线(ROC)评价小鼠辐照后呼出气差异性代谢物的诊断价值,单个化合物的曲线下面积(AUC)>0.8,经Fisher判别分析筛选呼出气9种潜在生物标志物构建诊断模型,其敏感度和特异性均接近100%。结论呼出气VOC分析有望为辐射损伤早期筛查和治疗提供一种非侵入性的诊断手段。

关键词：挥发性有机化合物辐射损伤呼出气热脱附-气质联用诊断模型

基于GC-MS技术探究辐射肺损伤大鼠呼吸组学

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科学技术与工程 2024年第17期24卷 7052-7058页

作者：汤健谢晓云肖炳坤缪潇瑶李志恒黄荣清广东药科大学中药学院广州511436 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所北京100850

基于气相色谱-质谱联用(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)检测辐射肺损伤大鼠呼吸气中的挥发性有机化合物(volatile organic compounds,VOCs)变化,探究辐射损伤对大鼠代谢的影响,建立无创性、方便快捷的辐射损伤诊断方法。... 详细信息

基于气相色谱-质谱联用(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)检测辐射肺损伤大鼠呼吸气中的挥发性有机化合物(volatile organic compounds,VOCs)变化,探究辐射损伤对大鼠代谢的影响,建立无创性、方便快捷的辐射损伤诊断方法。针对辐射损伤模型特征,利用钴源梯度剂量照射制备大鼠辐射肺损伤模型,模型大鼠随机分为4组,空白组(0 Gy)1组,照射组2、4、6 Gy各1组。采集照射后1、3、5、7 d各组的呼吸气样本,经气相色谱质谱联用检测分析。样本数据经主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)等多元统计分析,寻找相关VIP>1的差异性代谢产物,进一步探究辐射肺损伤的潜在标志物。检测结果表明,空白组与照射组血相指标、肺组织HE染色切片和呼吸气中VOCs均存在明显差异,初筛出25种差异性代谢产物,其中壬醛等5种可能作为组合性潜在标志物。构建本判别模型为辐射损伤的呼吸组学提供理论基础,也为建立一种无创检测辐射损伤的诊断方法提供实验参考。

关键词：辐射损伤呼吸组学挥发性有机化合物 GC-MS

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一贯煎肾毒性的气质联用代谢组学研究

科学技术与工程 2024年第24期24卷 10199-10205页

作者：徐瑞平缪潇瑶肖炳坤杨建云李志恒黄荣清广东药科大学中药学院广州511436 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所北京100850

应用气相色谱-质谱联用(gas chromatography-mass spectrometer, GC-MS)代谢组学方法考察一贯煎对大鼠肾毒性作用并探索其相关作用通路及作用机制。设置空白组、模型组、以及一贯煎高、中、低剂量的给药组,大鼠连续灌胃21 d。采用GC-MS... 详细信息

应用气相色谱-质谱联用(gas chromatography-mass spectrometer, GC-MS)代谢组学方法考察一贯煎对大鼠肾毒性作用并探索其相关作用通路及作用机制。设置空白组、模型组、以及一贯煎高、中、低剂量的给药组,大鼠连续灌胃21 d。采用GC-MS技术分析各组大鼠血清,获取差异性代谢物信息;采用主成分分析(principal component analysis, PCA)对空白组和模型组代谢物分类,寻找并分析一贯煎干预大鼠后血清中差异性代谢物及含量变化。结果表明:一贯煎高、中、低剂量组的大鼠肾脏病理切片均见不同程度损伤;高剂量组大鼠代谢轮廓趋近于模型组;应用GC-MS确定血清中16种差异代谢物。一贯煎涉及的3条主要代谢通路为:苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成,硫代谢,甘油酯代谢。

关键词：一贯煎肾毒性气相色谱-质谱联用(GC-MS) 代谢组学

白血病细胞的31P核磁共振分析及用于无损伤游离镁离子测定

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分析化学 2004年第2期32卷 129-133页

作者：黄荣清骆传环杜泽涵肖炳坤军事医学科学院放射医学研究所军事医学科学院放射医学研究所北京100850 军事医学科学院国家生物医学分析中心

建立了无损伤性3 1P NMR研究细胞内代谢物的实验方法 ,并对人早幼粒白血病细胞HL 6 0的3 1P NMR谱中含磷小分子代谢物的谱峰进行了分析 ;通过测量HL 6 0的3 1P NMR谱中ATP的α磷和 β磷的化学位移差值 ,得出HL 6 0细胞内Mg2 + 与ATP结... 详细信息

建立了无损伤性3 1P NMR研究细胞内代谢物的实验方法 ,并对人早幼粒白血病细胞HL 6 0的3 1P NMR谱中含磷小分子代谢物的谱峰进行了分析 ;通过测量HL 6 0的3 1P NMR谱中ATP的α磷和 β磷的化学位移差值 ,得出HL 6 0细胞内Mg2 + 与ATP结合的复合物MgATP和整个ATP量的比值 ,计算得到HL 6 0细胞内游离Mg2 + 浓度为 0 .2 6 4mmol/L。与其它分析方法相比 ,3 1P NMR测定细胞内游离Mg2 + 浓度具有对细胞样品无损伤的优点

关键词： 31P核磁共振白血病细胞镁离子

3-烟酰胺基-1,2,4-苯并三嗪-1,4-二氮氧化物的合成及体外抗肿瘤活性的测定

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中国药学杂志 2012年第8期47卷 639-641页

作者：丁锐黄荣清杨建云肖炳坤安徽医科大学研究生学院合肥230032 军事医学科学院放射与辐射研究所北京100850

目的合成3-烟酰胺基-1,2,4-苯并三嗪-1,4-二氮氧化物;测定3-烟酰胺基-1,2,4-苯并三嗪-1,4-二氮氧化物体外抗肿瘤活性。方法以苯并呋咱氮氧化物(BFO)和氨基氰为起始原料合成中间体3-氨基-1,2,4-苯并三嗪-1,4-二氮氧化物,所得的中间体和... 详细信息

目的合成3-烟酰胺基-1,2,4-苯并三嗪-1,4-二氮氧化物;测定3-烟酰胺基-1,2,4-苯并三嗪-1,4-二氮氧化物体外抗肿瘤活性。方法以苯并呋咱氮氧化物(BFO)和氨基氰为起始原料合成中间体3-氨基-1,2,4-苯并三嗪-1,4-二氮氧化物,所得的中间体和烟酰氯反应得目标化合物。以人乳腺癌MCF-7细胞、人肝癌HepG2细胞为模型,采用MTT分析法,测定3-烟酰胺基-1,2,4-苯并三嗪-1,4-二氮氧化物体外抗肿瘤活性。结果所合成的目标化合物经氢谱(1H-NMR)、质谱(MS)和红外光谱(IR)确证,纯度经HPLC检测达99.24%。结论合成了3-烟酰胺基-1,2,4-苯并三嗪-1,4-二氮氧化物;3-烟酰胺基-1,2,4-苯并三嗪-1,4-二氮氧化物对人乳腺癌MCF-7细胞、人肝癌HepG2细胞的活性大于替拉扎明。

关键词：替拉扎明 3-烟酰胺基-1,2,4-苯并三嗪-1,4-二氮氧化物抗肿瘤活性