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叶酸修饰的斑蝥素/黄芩苷共载脂质体处方工艺优化及其评价

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中草药 2024年第10期55卷 3267-3279页

作者：黄莉夏新华杨磊金凯肖望重戴冰蔡嘉洛湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 湖南中医药大学湖南长沙410208 湖南省教育科学研究院湖南长沙410005

目的筛选二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-叶酸(DSPE-PEG 2000 folate,DSPE-PEG2k-FA)修饰的斑蝥素/黄芩苷共载脂质体(DSPE-PEG2k-FA-cantharidin&baicalin-lipsomes,FA-Can&Bai-Lips)的处方工艺并对其进行表征及评价。方法由薄膜分散超声法制备FA-Can&Bai-Lips,以药脂比、胆脂比、水化温度及水化时间为考察因素,以两药包封率、粒径、多分散指数(polydispersity index,PDI)和ζ电位为评价指标,采用单因素考察和Box-Behnken设计-响应面法(BoxBehnken design-response surface methodology,BBD-RSM)优化其处方工艺。采用电位粒径仪和透射电子显微镜(TEM)分别测定其粒径、ζ电位及形态。通过溶血性实验、细胞摄取实验、CCK-8法实验及活体成像等方法进行安全性、靶向性评价。结果FA-Can&Bai-Lips的最佳制备工艺为药脂比1∶11、胆脂比1∶6、DSPE-PEG2k-FA用量为10%、溶剂为50 mL、旋转蒸发及水化温度为55℃、水化介质为pH 6.8 PBS缓冲液、水化体积为10 mL、水化时间为94 min,超声时间为8 min。经BBD-RSM优化制得的FA-Can&Bai-Lips形态规整,为类球形粒子,稳定性及安全性好,斑蝥素与黄芩苷的包封率分别为(90.19±0.67)%、(81.24±0.72)%,粒径为(172.47±4.83)nm,PDI为0.268±0.018,ζ电位为(−1.07±0.07)mV。体外评价结果表明,FA-Can&Bai-Lips能有效抑制HepG2细胞增殖,具良好的肝肿瘤靶向性。结论FA-Can&Bai-Lips具有增效减毒作用,能高效靶向肿瘤组织,是一种极具开发潜力的抗肝肿瘤纳米递送系统。

关键词：斑蝥素黄芩苷共载脂质体抗肝癌叶酸薄膜分散超声法 Box-Behnken设计-响应面法溶血细胞摄取活体成像靶向

禾肾丸通过调控ANGPTL3治疗阿霉素肾病大鼠蛋白尿及血脂代谢紊乱的实验研究

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蚌埠医学院学报 2024年第3期49卷 286-290页

作者：何怡然欧阳林旗徐文峰郭宇鸽肖望重黎旭湖南中医药大学第一附属医院药学部湖南长沙410013 湖南中医药大学第一附属医院肾内科湖南长沙410013

目的:探讨禾肾丸通过调控血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)治疗阿霉素肾病大鼠蛋白尿及血脂代谢紊乱的作用机制。方法:50只雄性SD大鼠随机分为5组,每组10只,空白组:不作特殊处理,仅予以每日清晨蒸馏水灌胃;模型组:造模成功后每日清晨蒸馏水灌... 详细信息

目的:探讨禾肾丸通过调控血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)治疗阿霉素肾病大鼠蛋白尿及血脂代谢紊乱的作用机制。方法:50只雄性SD大鼠随机分为5组,每组10只,空白组:不作特殊处理,仅予以每日清晨蒸馏水灌胃;模型组:造模成功后每日清晨蒸馏水灌胃;禾肾丸组:造模成功后每日清晨以禾肾丸灌胃;对照组:造模成功后每日清晨以泼尼松灌胃;联合用药组:造模成功后每日清晨以泼尼松、禾肾丸灌胃,各组均灌胃8周。密切观察各组大鼠造模及研究期间各种行为学改变,检测和比较各组大鼠造模前1 d及造模后第2、4、6、8周末24 h尿蛋白水平,同时检测和比较各组大鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等血脂指标及血清ANGPTL3表达水平。分析各组大鼠血清ANGPTL3表达水平与血脂指标及造模后第8周末24 h尿蛋白水平的相关性。结果:禾肾丸组、对照组及联合用药组大鼠造模后第8周各种行为学改变均优于模型组;各组大鼠造模前1 d 24 h尿蛋白水平比较差异无统计学意义(P>0.05),造模后第2、4周模型组、禾肾丸组、对照组及联合用药组大鼠24 h尿蛋白水平均明显高于空白组(P0.05),造模后第6、8周禾肾丸组、对照组大鼠24 h尿蛋白水平明显高于联合用药组和低于模型组(P0.05);模型组、禾肾丸组、对照组及联合用药组大鼠TC、TG、LDL-C等血脂指标及血清ANGPTL3表达水平均明显高于空白组(P0.05);各组大鼠血清ANGPTL3表达水平与TC、TG、LDL-C及24 h尿蛋白均呈正相关关系(P<0.05~P<0.01),而与HDL-C呈负相关关系(P<0.05~P<0.01)。结论:禾肾丸可能通过调控ANGPTL3而起到治疗阿霉素肾病大鼠蛋白尿及血脂代谢紊乱的作用。

关键词：肾病综合征血脂代谢紊乱蛋白尿禾肾丸血管生成素样蛋白3 阿霉素肾病大鼠

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百合炮制历史沿革考证及可视化分析

时珍国医国药 2021年第11期32卷 2668-2672页

作者：唐林李莉孙贤庆肖望重湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 湖南中医药大学药学院湖南长沙410208

百合炮制历史悠久。文章通过查阅相关本草书籍27部、历版《中国药典》、1988年版《全国中药炮制规范》和18部各地方中药饮片炮制规范,对百合有关的产地加工、炮制方法、功效主治进行整理归纳,并利用可视化方法分析百合炮制的历史沿革趋... 详细信息

百合炮制历史悠久。文章通过查阅相关本草书籍27部、历版《中国药典》、1988年版《全国中药炮制规范》和18部各地方中药饮片炮制规范,对百合有关的产地加工、炮制方法、功效主治进行整理归纳,并利用可视化方法分析百合炮制的历史沿革趋势。结果表明本草所载的百合炮制方法有擘、水洗、去心、去沫、去细皮、切、捣末、炙、熬、蒸、炒、蜜制、酒制等,古代的水洗法、擘法、蒸法,现已演变为产地加工,蜜制法一直沿用至今,但古代的蜜蒸法已演变成蜜炙法。百合的炮制工艺存在"各地各法"的现象,缺乏统一的质量标准,导致百合各地饮片质量相差较大,甚至会影响百合饮片临床用药的有效性。2020年版《中国药典》记载百合有养阴润肺、清心安神之功,与历代本草所载功效相一致。该研究结果为百合后续规范炮制工艺、各炮制品临床合理运用,及药材资源的进一步开发提供了历史依据。

关键词：百合炮制方法历史沿革可视化

基于活性成分探讨山茱萸酒制前后干预绝经后骨质疏松症大鼠的动态药效学变化及其机制

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中国现代应用药学 2023年第11期40卷 1461-1468页

作者：龙琼于慧谭佳颖黄莉肖望重戴冰湖南中医药大学第一附属医院长沙410007

目的比较研究山茱萸和酒茱萸中5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,5-HMF)、环烯醚萜苷(莫诺苷、马钱苷、獐牙菜苷)、没食子酸5种活性成分含量差异,并探讨酒制前后山茱萸干预绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)模... 详细信息

目的比较研究山茱萸和酒茱萸中5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,5-HMF)、环烯醚萜苷(莫诺苷、马钱苷、獐牙菜苷)、没食子酸5种活性成分含量差异,并探讨酒制前后山茱萸干预绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)模型大鼠术后30,60,90 d的动态药效变化及其机制。方法采用Hypersil C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈(A)-0.3%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.6 mL·min^(–1),柱温30℃,检测波长:240 nm(环烯醚萜苷),274 nm(5-HMF、没食子酸);将雌性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,山茱萸/酒茱萸高、低剂量组,阳性药物组,除假手术组外均采用去卵巢法造模,分别在术后30,60,90 d,检测大鼠骨密度(bone mineral density,BMD)值、血清中的雌二醇(E_2)、钙(Ca)、磷(P)含量及骨组织显微结构的动态变化。结果酒茱萸中5种活性成分总含量、5-HMF、没食子酸的含量均高于山茱萸;与模型组比较,酒茱萸高剂量组可升高模型大鼠术后30,60 d的E_2、Ca及P的含量(P<0.05),且术后60 d还可升高其BMD值(P<0.05);酒制前后山茱萸高剂量组均可升高模型大鼠术后90 d的BMD值和E_2、Ca及P含量(P<0.05),且酒茱萸高剂量组还可减少骨小梁的断裂及骨髓腔中脂肪细胞的含量。结论酒制前后山茱萸均可改善PMOP,并以高剂量为优;且酒茱萸可早期干预该症的发生发展。其机制可能与升高E_2水平,减缓骨中Ca、P的丢失,调节骨代谢,延缓BMD值下降有关。酒茱萸中活性成分5-HMF、没食子酸的含量高于山茱萸可能是其药效较优的主要因素之一。

关键词：山茱萸酒茱萸活性成分绝经后骨质疏松症动态变化

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头重昏蒙,妙用半夏天麻丸

中医健康养生 2021年第9期7卷 67-69页

作者：肖望重湖南中医药大学第一附属医院

开栏的话:青年医生在临床诊病问疾时也常有诸多体会与经验,值得与大家一同分享。本刊特设“青年中医汇”栏目,方便青年医生与大家交流疾病防治等方面的心得体会。

关键词：青年医生天麻丸心得体会疾病防治妙用青年中医诊病

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化肝煎对肝细胞和活化肝星状细胞功能的影响

时珍国医国药 2019年第12期30卷 2879-2881页

作者：高元峰肖望重肖岚欧阳荣湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 湖南中医药大学湖南长沙410208

目的探讨化肝煎含药血清对肝细胞和活化肝星状细胞HSC-T6的影响及机制方法体外构建肝细胞及CCl4肝细胞损伤模型,加入不同体积浓度的化肝煎含药血清,通过MTS法检测肝细胞存活率;采用MTS法检测化肝煎干预肝星状细胞HSC-T6后的细胞存活率,... 详细信息

目的探讨化肝煎含药血清对肝细胞和活化肝星状细胞HSC-T6的影响及机制方法体外构建肝细胞及CCl4肝细胞损伤模型,加入不同体积浓度的化肝煎含药血清,通过MTS法检测肝细胞存活率;采用MTS法检测化肝煎干预肝星状细胞HSC-T6后的细胞存活率,同时采用实时荧光定量核酸扩增检测系统(qPCR)和蛋白印迹法(Western blot)检测系统(eukaryotic initialion laclor 3)家族相关因子的表达结果在1~8%体积浓度范围内化肝煎含药血清对肝细胞无细胞毒性,并可改善CC14所致肝细胞存活率下降;当化肝煎含药血清体积浓度为10%、30%、50%和60%时显著抑制活化肝星状细胞的增殖,此外,化肝煎含药血清对elF3a mRNA及蛋白表达均显著抑制结论化肝煎含药血清能保护肝细胞,并抑制活化肝星状细胞HSC-T6的增殖,可能跟抑制elF3a而抗肝纤维化有关。

关键词：化肝煎肝纤维化活化肝星状细胞真核起始因子3a

不同山茱萸炮制品入方的六味地黄汤中六种有效成分含量比较研究

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时珍国医国药 2022年第3期33卷 608-610页

作者：于慧杨磊黄莉肖望重龙琼雷欣东戴冰湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007

目的比较研究生品山茱萸(生茱萸)、酒制山茱萸(酒茱萸)、盐制山茱萸(盐茱萸)、清蒸山茱萸(清茱萸)入方的六味地黄汤中没食子酸、5-羟甲基糠醛(5-HMF)、莫诺苷、马钱苷、獐芽菜苷、芍药苷六种有效成分的含量。方法采用HPLC法分别测定生... 详细信息

目的比较研究生品山茱萸(生茱萸)、酒制山茱萸(酒茱萸)、盐制山茱萸(盐茱萸)、清蒸山茱萸(清茱萸)入方的六味地黄汤中没食子酸、5-羟甲基糠醛(5-HMF)、莫诺苷、马钱苷、獐芽菜苷、芍药苷六种有效成分的含量。方法采用HPLC法分别测定生茱萸入方的六味地黄汤(生茱萸组)、酒茱萸入方的六味地黄汤(酒茱萸组)、盐茱萸入方的六味地黄汤(盐茱萸组)、清茱萸入方的六味地黄汤(清茱萸组)中六种有效成分的含量含量。色谱条件:Hypersil C_(18)色谱(4.6mm×250mm,5μm),流动相乙腈-水(0.3%磷酸)梯度洗脱(0~7 min,7~15%乙腈;7~16min,15~17.5%;16~25 min,17.5%~20%),流速0.6 mL/min,检测波长250nm,柱温35℃,进样量10μl。结果酒茱萸组,盐茱萸组,清茱萸组六味地黄汤中没食子酸,5-HMF以及六种有效成分总量均明显高于生茱萸组(P酒茱萸组(P<0.05)。结论不同山茱萸炮制品入方的六味地黄汤中六种有效成分含量存在明显差异,故临床使用时应根据不同用药需求选择合适的山茱萸炮制品入方,可为山茱萸炮制品入方六味地黄汤提供合理依据,为提升六味地黄汤的临床疗效提供实验依据。

关键词：山茱萸六味地黄汤没食子酸 5-羟甲基糖醛苷类成分

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止痒润肤乳成型工艺的优化

中成药 2022年第11期44卷 3614-3618页

作者：唐林鹿爱娟王璐肖望重张水寒杨磊王相湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 湖南省中医药研究院湖南长沙410208

目的优化止痒润肤乳成型工艺。方法以液状石蜡、硬脂酸、白凡士林、甘油、三乙醇胺用量及提取液与水总量为影响因素,外观性状、涂展性、离心稳定性、耐热稳定性的综合评分为评价指标,层次分析法-熵权法确定权重系数,在单因素试验基础... 详细信息

目的优化止痒润肤乳成型工艺。方法以液状石蜡、硬脂酸、白凡士林、甘油、三乙醇胺用量及提取液与水总量为影响因素,外观性状、涂展性、离心稳定性、耐热稳定性的综合评分为评价指标,层次分析法-熵权法确定权重系数,在单因素试验基础上,D-最优混料设计优化成型工艺。结果最优条件为液状石蜡用量3 g,硬脂酸用量14 g,白凡士林用量5 g,三乙醇胺用量3 g,吐温-80用量2.5 g,甘油用量17 g,水与药液总量63 g,综合评分101.33。结论该方法合理可行,易涂布,稳定性好,可用于止痒润肤乳的成型工艺。

关键词：止痒润肤乳成型工艺层次分析法熵权法 D-最优混料设计

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一测多评法同时测定清解颗粒中3种成分

中成药 2019年第9期41卷 2052-2057页

作者：唐林肖望重黄莉雷昌夏新华湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007 中药粉体与创新药物省部共建国家重点实验室培育基地湖南长沙410208 湖南中医药大学药学院湖南长沙410208

目的建立一测多评法同时测定清解颗粒(苦杏仁、防风、石膏等)中3种成分的含有量。方法该药物甲醇提取液的分析采用依利特C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相甲醇-乙腈-0.1%冰醋酸,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;检测波长210、254 nm;柱... 详细信息

目的建立一测多评法同时测定清解颗粒(苦杏仁、防风、石膏等)中3种成分的含有量。方法该药物甲醇提取液的分析采用依利特C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相甲醇-乙腈-0.1%冰醋酸,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;检测波长210、254 nm;柱温30℃。以苦杏仁苷为内标,建立其他2种成分的相对校正因子,测定含有量。结果苦杏仁苷、升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷分别在37.08~1 236、22.4~748、11.88~396μg/mL范围内线性关系良好(R2≥0.999 9),平均加样回收率102.17%、101.12%、104.73%,RSD 1.85%、1.74%、2.12%。一测多评法所得结果与外标法接近。结论该方法准确可靠,可用于清解颗粒的质量控制。

关键词：清解颗粒苦杏仁苷升麻素苷 5-O-甲基维斯阿米醇苷一测多评