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假病毒中和试验对狂犬病毒中和抗体效价的检测效能分析

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中国药事 2024年第2期38卷 210-216页

作者：吴小红赵丹华丁如霞李玉华聂建辉中国食品药品检定研究院北京102629

目的:组织不同的实验室分析假病毒中和法(Pseudo Virus-based Neutralization Assay,PBNA)对不同样品的狂犬病病毒中和抗体水平的检测能力,并比较其与经典的快速免疫荧光灶抑制试验(Rapid Fluorescent Focus Inhibition Test,RFFIT)以... 详细信息

目的:组织不同的实验室分析假病毒中和法(Pseudo Virus-based Neutralization Assay,PBNA)对不同样品的狂犬病病毒中和抗体水平的检测能力,并比较其与经典的快速免疫荧光灶抑制试验(Rapid Fluorescent Focus Inhibition Test,RFFIT)以及小鼠中和试验法(Mouse Neutralization Test,MNT)的相关性。方法:共9家实验室,分别采用PBNA、RFFIT以及MNT法对6份样品进行狂犬病病毒中和抗体检测,每个实验室进行3~5次重复实验。采用配对t检验及Pearson相关系数对3种检测方法的结果进行统计学分析。结果:PBNA与RFFIT、PBNA与MNT、RFFIT与MNT Pearson相关系数分别为0.985、0.988和0.974,抗体几何平均滴度进行t检验,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:3种方法重复检测6份样品的定量结果具有高度的相关性,PBNA法可作为《中华人民共和国药典》方法RFFIT、MNT的一种替代或补充方法,用于人用狂犬病疫苗临床血清、狂犬病人免疫球蛋白及抗狂犬病血清的狂犬病病毒中和抗体效价检测。

关键词：假病毒中和试验免疫荧光灶抑制试验小鼠中和试验法狂犬病毒中和抗体协作研究

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利用立体视觉的线结构光参数标定

光电子．激光 2011年第12期22卷 1836-1841页

作者：聂建辉马孜胡英大连海事大学自动化研究中心辽宁大连116026

准确标定系统参数是利用线结构光进行高精度测量的前提,文中提出了一种基于双目立体视觉的线结构光参数标定算法,以期达到在工业现场进行高精度、强鲁棒性标定的目的。算法首先采用Tsai两步法标定摄像机内参数和双目相机坐标系间的刚体... 详细信息

准确标定系统参数是利用线结构光进行高精度测量的前提,文中提出了一种基于双目立体视觉的线结构光参数标定算法,以期达到在工业现场进行高精度、强鲁棒性标定的目的。算法首先采用Tsai两步法标定摄像机内参数和双目相机坐标系间的刚体变换,然后利用立体视觉极线约束条件匹配双目激光条纹点,并将其重构到三维空间以进行光平面标定。相对于传统方法,本文算法的优势在于标定光平面时不需要标靶的辅助,只需将线结构光以任意姿态投射到任意物体表面即可获取稠密的标定点进而得到光平面方程。在一种自定位双目结构光扫描系统中的应用表明本文方法切实可行,光平面标定均方根误差为0.034mm,系统扫描均方根误差为0.065mm。

关键词：测量线结构光立体视觉标定视觉检测

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双导程直线接触偏置蜗杆传动Ⅰ——原理分析

北京工业大学学报 2011年第2期37卷 161-166页

作者：张学成聂建辉吉林大学机械科学与工程学院长春130025

为了简化传统锥蜗杆传动的设计与制造,提出了一种新型偏置蜗杆传动方式.蜗轮蜗杆传动的啮入和啮出分别是基于具有渐开线齿形、齿面瞬时接触状态为直线接触的外啮合和内啮合空间相错轴螺旋齿轮传动的原理,论证了实现正确啮合传动的条件... 详细信息

为了简化传统锥蜗杆传动的设计与制造,提出了一种新型偏置蜗杆传动方式.蜗轮蜗杆传动的啮入和啮出分别是基于具有渐开线齿形、齿面瞬时接触状态为直线接触的外啮合和内啮合空间相错轴螺旋齿轮传动的原理,论证了实现正确啮合传动的条件、原理及实现方法,进行了双导程直线接触偏置蜗杆的运动仿真.结果表明:除了具有其他蜗杆传动的优点之外,这种偏置蜗杆副构形及传动原理简单,因而具有设计、制造简单的显著特点;且由于齿面瞬时接触状态为直线接触,所以具有更大的承载能力.

关键词：空间相错轴螺旋齿圆柱齿轮传动蜗杆传动偏置蜗杆传动

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散乱点云离群点的分类识别算法

计算机辅助设计与图形学学报 2011年第9期23卷 1526-1532页

作者：聂建辉胡英马孜大连海事大学自动化研究中心大连116026

散乱点云离群点识别和滤除是重建高质量曲面的前提,也是散乱点云预处理的重要步骤.提出一种散乱点云区域增长策略和一个基于曲面变化度的局部离群指标SVLOF,并将其应用到离群点识别中.通过分析离群点产生的原因,根据离群点到点云主体的... 详细信息

散乱点云离群点识别和滤除是重建高质量曲面的前提,也是散乱点云预处理的重要步骤.提出一种散乱点云区域增长策略和一个基于曲面变化度的局部离群指标SVLOF,并将其应用到离群点识别中.通过分析离群点产生的原因,根据离群点到点云主体的距离将离群点分为远离群点和近离群点2类;对远离群点采用基于三维区域增长的方法进行识别,而对于近离群点采用SVLOF系数进行识别.基于仿真数据和实测数据的实验均表明,采用文中算法能够快速、有效地检测出孤立离群点和小型聚类离群点.

关键词：散乱点云离群点区域增长局部离群系数

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一种基于非量测畸变校正的摄像机标定方法

控制与决策 2012年第2期27卷 243-246,251页

作者：陈天飞马孜李鹏聂建辉大连海事大学自动化研究中心辽宁大连116026

设计一种基于非量测畸变校正的摄像机标定方法.该方法利用单参数除式模型校正镜头畸变,根据直线透视投影保留同素性,通过拉凡格氏法(LM)优化标定出畸变模型系数和摄像机主点坐标,然后校正成像点,使其满足针孔模型映射关系.根据内参数的... 详细信息

设计一种基于非量测畸变校正的摄像机标定方法.该方法利用单参数除式模型校正镜头畸变,根据直线透视投影保留同素性,通过拉凡格氏法(LM)优化标定出畸变模型系数和摄像机主点坐标,然后校正成像点,使其满足针孔模型映射关系.根据内参数的两个基本方程,线性求解剩余参数.实验表明,该方法在非量测标定过程具有较好的鲁棒性,且对比张正友标定方法,可在单幅标靶图像下进行标定,避免了模型内外参数耦合在一起,提高了标定效率.

关键词：摄像机标定除式模型畸变校正非量测单应矩阵

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新型数字化牙模激光扫描系统

哈尔滨工业大学学报 2012年第11期44卷 139-143页

作者：陈新禹胡英马孜聂建辉大连海事大学自动化研究中心大连116026

为了快速获取牙齿模型的数字型面信息,提出一种基于三轴联动平台的数字化牙模激光扫描系统.该系统基于光机电一体化技术和三维数据处理技术实现了牙齿模型三维型面信息提取和牙齿模型的造型设计.系统由线结构光视觉传感器、三轴联动平... 详细信息

为了快速获取牙齿模型的数字型面信息,提出一种基于三轴联动平台的数字化牙模激光扫描系统.该系统基于光机电一体化技术和三维数据处理技术实现了牙齿模型三维型面信息提取和牙齿模型的造型设计.系统由线结构光视觉传感器、三轴联动平台、电气控制系统、主控计算机及上位机软件组成.通过线结构光视觉传感器和三轴联动平台的协调控制实现牙齿模型的无缝数据获取.实验结果表明,该数字化牙模激光扫描系统的测量精度可达0.182mm,速度为8 000点/s.该系统扫描速度快、测量精度较高、操作灵活方便,可以满足牙模三维型面数据采集的要求.

关键词：逆向工程牙模扫描三轴联动平台转轴标定

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大规模散乱点云数据后处理技术研究

大规模散乱点云数据后处理技术研究

作者：聂建辉大连海事大学

学位级别：硕士

随着激光扫描技术的发展,快速、准且地获取物体三维信息已经变成现实。通过激光扫描所得的物体外形信息是大量的、冗余的,因此,人们形象的称其为“点云”。如何高效的处理这些点云,并最终生成可用于再制造的CAD模型是逆向工程的核心任... 详细信息

随着激光扫描技术的发展,快速、准且地获取物体三维信息已经变成现实。通过激光扫描所得的物体外形信息是大量的、冗余的,因此,人们形象的称其为“点云”。如何高效的处理这些点云,并最终生成可用于再制造的CAD模型是逆向工程的核心任务之一。本文以此为背景,研究了大规模散乱点云后处理中的若干关键技术。首先,为了密集杂乱无章型点云数据的简化,通过寻找点的临近点信息重建了散乱点云的空间拓扑关系,并基于这些拓扑关系计算出隐含在散乱点云中的曲面的法向量、曲率、曲面变化度等局部特征量,基于曲面特征量和八叉树方案实现了点云数据的简化。研究了传统工件中出现频率很高的二次曲面的非线性拟合问题。借助于“忠实距离”的概念,利用非线性最小二乘方法,实现了问题的求解。针对工程实际中扫描点云的特点,提出了一种二次曲面非线性拟合初值选择方法。新的方法仅依赖于点云的法向量,简单可行。提出了一种新的散乱点云三角化方法。该方法利用点云数据密度大的特点,通过逐层外扩的方法实现三维空间中散乱点云的直接三角化。最终生成的三角形网格的顶点均来自于原始点云数据,该方法具有可以多分辨率表示物体外形、精度可控等优点。最后,对自由曲面的B样条表示进行了研究。首先,将散乱点云通过ABOS(Approximation Based On Smoothing)方法梳理成规则的拓扑网格型数据,然后,对网格型数据进行B样条重构,并计算了重构误差。本文的各项研究,均有相应实例验证。

关键词：逆向工程点云点云简化二次曲面三角化 B样条

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HIV-1膜抗原改造及免疫原性评价

HIV-1膜抗原改造及免疫原性评价

作者：聂建辉中国药品生物制品检定所

学位级别：硕士

人类免疫缺陷病毒(HIV)的膜蛋白(Env)位于病毒的表面，是中和抗体作用的主要靶位，但野生型Env在机体免疫压力下易发生免疫逃逸，这可能与其复杂的构象和表面寡糖链有关。本课题试图通过删除寡糖链、复杂氨基酸侧链及高变区，来暴露目... 详细信息

人类免疫缺陷病毒(HIV)的膜蛋白(Env)位于病毒的表面，是中和抗体作用的主要靶位，但野生型Env在机体免疫压力下易发生免疫逃逸，这可能与其复杂的构象和表面寡糖链有关。本课题试图通过删除寡糖链、复杂氨基酸侧链及高变区，来暴露目前已知的及CD4i(CD4 induced)区潜在的中和抗体表位，以期诱导广谱有效的中和抗体，同时将体液免疫与细胞免疫结合起来，力图寻找一种能够诱导均衡、有效的体液和细胞免疫反应的免疫原。本课题根据HIV-1 Env三维结构中四种广谱中和单抗的结合表位及前人经验，设计四组突变，通过四组之间不同搭配设计五种突变组合：M2、M5-1、M5-2、M4和M7。在原始株及各突变组合的基础上做V1V2区的删除，设计另六种突变组合：dWt、dM2、dM5-1、dM5-2、dM4和dM7。通过环形诱变，DpnI筛选的方式得到这11种突变体，酶切初步鉴定，测序确定突变结果。提取原始及突变质粒并转染293T细胞，经WesternBlot检测体外表达情况。原始及突变质粒免疫家兔，用五个不同厂家ELISA抗体检测试剂盒检测血清抗体水平，用假病毒单周期感染中和试验检测其中和抗体水平，将ELISA抗体检测结果与中和试验检测结果做相关性分析。原始及突变质粒免疫小鼠，取血分离血清，检测中和抗体水平;取脾分离脾白细胞，以SHIVchn19肽库和单肽Env34作为刺激物，用IFN—γELISPOT方法评价细胞免疫反应。将原始及改造后env基因克隆入pcDNA3.1 D／V5-His-TOPO(?)载体，WB检测体外表达情况，与pSG3共转染293T细胞，收集上清感染TZM-bl细胞，检测改造对功能性假病毒形成的影响。 WB结果显示D-GPEi的原始株及各突变克隆，以及克隆入pcDNA3.1 D／V5-His-TOPO(?)载体的原始及突变env在体外都能正常表达，且表达量没有明显区别，突变株的Env条带较原始株泳动速率提高，进一步佐证了改造结果。家兔血清ELISA检测结果表明，电穿孔介导DNA免疫家兔，与单纯DNA免疫相比，其所用质粒量少，免疫周期短，抗体水平高。不同厂家抗体检测试剂盒检测家兔四次免疫后血清中抗体水平，检测的结果数值上虽然存在差异，但总体的趋势相似。Wt、N2010、G2、M2、M5-1和dM5-1组抗体水平较高，但各组与Wt组比较没有明显优势。对于同一质粒免疫的两只家兔，其抗体水平不一致。中和试验结果显示，Wt、N2010、G2、M2和dM2中和抗体水平较高，但同一组两只家兔中和抗体水平不一致。将ELISA抗体检测结果与假病毒中和试验检测结果，做相关性分析，两者之间没有统计学意义上的相关性，但对于同一组两只家兔，其中和抗体水平高的总抗体水平也高。小鼠ELISPOT结果显示，与原始组相比，改造组细胞免疫反应大部分是降低的，包括M5-1、dM5-1、M5-2、dM5-2、M7、dM7、dWt、M4和dM4，其中与Wt组相比降低有统计学意义(p＜0.05)的包括dM5-1、M5-2、M7、dM7和dM4，其余各组与Wt组相比虽有降低但无统计学意义。改造组M2、dM2、G2与Wt组相比细胞免疫反应增高，其中M2组的增高有统计学意义(p＜0.05)。针对四个肽库的细胞免疫反应由强到弱：肽库1＞肽库3＞肽库2＞肽库4，肽库1在四肽库总反应中所占比例最高，＞75％。各肽库反应与总反应的相关性由高到低肽库1＞肽库3＞肽库2＞肽库4，针对Env34的细胞免疫反应与总反应有较高的相关性，相关系数为0.942(p＜0.01)。在Wt和74-2两假病毒中和试验中，dWt、M2、M5-2、M5-1、dM7、N201Q组与Wt组相比，其中和抗体水平有增高趋势，只有dWt组和M5-2组的增高在两假病毒试验中都有有统计学意义(p＜0.05)，此外，在Wt假病毒中和试验中，M5-1组的增高有统计学意义，在74-2假病毒中和试验中，M2和N2010组的增高有统计学意义。从两假病毒中和试验结果可以看出，dM2、dM5-2、M4、dM4和M7组中和抗体水平与Wt组相比有降低趋势，其中只有在Wt假病毒中和试验中，M4、dM4组的降低有统计学意义。单周期感染实验结果显示，除G2改造外，其它改造都使功能性假病毒形成能力大为下降。从动物实验结果可以得出：不同改造对Env免疫原性的影响不同，M2组改造使Env诱导细胞与体液免疫的能力都有一定的提高;dWt组改造，使诱导体液免疫的能力有一定幅度提高，同时诱导细胞免疫的能力没有明显变化;N2010、M5-1、M5-2和dM7虽然诱导细胞免疫能力有所下降，但诱导体液免疫能力有一定程度提高;dM2和G2诱导体液免疫能力降低，但诱导细胞免疫能力有小幅度提高或基本不变;dM5-2、M4、dM4和M7组改造使其诱导细胞及体液免疫的

关键词：人类免疫缺陷病毒包膜蛋白点突变去糖基化可变区删除酶联免疫斑点实验中和试验

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基于平面标靶的线结构光参数一体标定算法

光电子．激光 2013年第8期24卷 1557-1562页

作者：魏一刘彦呈张银东聂建辉大连海事大学轮机工程学院辽宁大连116026

准确地标定系统参数是利用线结构光进行高精度测量的前提,提出了一种基于平面标靶的线结构光参数标定算法,以期达到在工业现场进行高精度标定的目的。系统标定时,需要将激光线投射到平面标靶上,并在不同位置拍摄带有激光线的标靶图像。... 详细信息

准确地标定系统参数是利用线结构光进行高精度测量的前提,提出了一种基于平面标靶的线结构光参数标定算法,以期达到在工业现场进行高精度标定的目的。系统标定时,需要将激光线投射到平面标靶上,并在不同位置拍摄带有激光线的标靶图像。首先,计算相机内参数;然后,通过内参数确定标靶平面在相机坐标系下的方程,并由此计算出激光点在相机坐标系下的三维坐标;最后,通过线性最小二乘方法拟合得到光平面方程。相对于交比不变方法,本文算法可以获得更加稠密、准确的标定点。在一种结构光扫描系统中的应用结果表明,本文算法均实可行,光平面标定平均误差为0.024mm,系统扫描平均误差为0.035mm。

关键词：测量线结构光标定视觉检测