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中华血液学杂志 2017年第8期38卷 728-731页

作者：管立勋高春记解放军总医院血液病科北京100853

异基因造血干细胞移植是治疗血液系统肿瘤有效的方法之一，但移植物抗宿主病（graft-versus—hostdisease，GVHD）和感染限制了其广泛应用。

关键词：移植物抗宿主病信号传导异基因造血干细胞移植血液系统肿瘤

成人初治急性非淋巴细胞白血病中IDH1基因突变规律及与其它肿瘤基因相关性

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成人初治急性非淋巴细胞白血病中IDH1基因突变规律及与其它肿瘤基...

作者：管立勋中国人民解放军医学院

学位级别：硕士

急性非淋巴细胞白血病（acute non-lymphoblastic leukemia，ANLL）是以分化缺陷的髓系细胞异常增生为特点的恶性血液系统疾病。根据细胞遗传学特点的不同可将ANLL进行分型并以此为基础进行分层治疗。虽然约半数的ANLL患者未检测到特征... 详细信息

急性非淋巴细胞白血病（acute non-lymphoblastic leukemia，ANLL）是以分化缺陷的髓系细胞异常增生为特点的恶性血液系统疾病。根据细胞遗传学特点的不同可将ANLL进行分型并以此为基础进行分层治疗。虽然约半数的ANLL患者未检测到特征性染色体异常，但仍可检测到多种影响细胞增殖、分化、凋亡相关的基因异常，包括基因突变。异柠檬酸脱氢酶1（isocitrate dehydrogenase1，IDH1）是三羧酸循环中的限速酶，可催化异柠檬酸生成α-酮戊二酸（α-ketoglutarate, α-KG）。国外有研究发现ANLL可携带有突变的IDH1基因，突变率为2%-14%。IDH1突变基因催化产生2-羟戊二酸（2-hydroxyglutarate，2-HG），后者可拮抗α-KG依赖性酶，进而使总DNA和组蛋白异常甲基化，最终影响细胞增殖分化使其转变为肿瘤细胞。目前在中国人群中，关于成人初治ANLL中IDH1基因突变系统性研究的报道较少。我们采用PCR技术结合DNA序列分析的方法检测了349例成人初治ANLL患者骨髓标本中IDH1基因突变状况，并进一步分析了其分布特点和临床意义。本研究结果显示（:1）349例患者中35例IDH1基因突变，突变率为10%;（2）首次在ANLL中发现可产生2-HG的IDH1c.299G>A，p.R100Q突变;（3）IDH1基因突变最常见于ANLL-M1（5/14;35.72%），与其他亚型比较有统计学意义（P<0.01）;（4）IDH1基因突变在正常核型ANLL发生率为9.9%，与异常核型患者的发生率比较，统计学差异无显著性。(5)携带IDH1基因突变的ANLL常伴有以下癌基因异常，Fms样酪氨酸激酶3内部串联重复（Fms like tyrosine kinase3intenal tandem duplication，FLT3-ITD）（20%vs2.2%;P<0.01），CCAAT增强结合因子α基因突变（CCAAT enhancer binding factor alpha，CEBPA）（8.6%vs0.6%;P<0.01），肾母细胞瘤1基因表达增高（Wilms’ Tumor1，WT1）（62.9%vs2.5%;P<0.01），脑膜瘤-1基因（meningioma-1，MN1）表达增高（22.9%vs1.2%;P<0.01），黑色素瘤优先表达抗原基因表达增高（Preferentially expressed antigenof melanoma，PRAME）（11.4%vs3.1%;P<0.05);（6）IDH1基因突变患者其OS（overall survival）与未突变患者相比其差异无统计学意义。综上，IDH1基因突变是成人初治ANLL中较为常见的基因突变，主要发生于ANLL-M1，常伴有其他癌基因表达增高或基因突变，且与FLT3-ITD，MN1、WT1、PRAME等基因表达增高有一定的相关性，但不影响OS。

关键词：异柠檬酸脱氢酶1 基因突变急性非淋巴细胞白血病

体外rhG-CSF刺激对健康人外周血CD4^＋T细胞黏附和极化的影响

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中国实验血液学杂志 2014年第6期22卷 1702-1706页

作者：赵莎莎谷振阳李猛赵小利罗澜管立勋王莉莉高春记解放军医学院解放军总医院血液科北京100853

T淋巴细胞黏附和极化过程的完成需要依赖细胞表面的淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)与其配体细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的结合。本研究旨在探讨体外重组人粒细胞集落刺激因子(rh G-CSF)对健康人外周血CD4+T细胞的黏附和极化的影响。采集1... 详细信息

T淋巴细胞黏附和极化过程的完成需要依赖细胞表面的淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)与其配体细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的结合。本研究旨在探讨体外重组人粒细胞集落刺激因子(rh G-CSF)对健康人外周血CD4+T细胞的黏附和极化的影响。采集12例健康志愿者的外周血,使用免疫磁珠分选法纯化CD4+T细胞,加入rh G-CSF体外培养24 h,检测CD4+T细胞接受基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)和ICAM-1信号刺激后细胞的黏附和极化的能力。结果显示,实验组(体外rh G-CSF作用后的健康志愿者)CD4+T细胞的黏附比例为(61.9±5.9)%,对照组(健康志愿者)为(68.3±7.3)%,差异有统计学意义(P<0.05);实验组(体外rh G-CSF作用后的健康志愿者)CD4+T细胞的极化比例为(24.3±4.3)%,对照组(健康志愿者)为(47.1±5.1)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:体外rh G-CSF能抑制健康者外周血CD4+T细胞黏附和极化的能力。

关键词： rhG-CSF CD4^+T细胞淋巴细胞相关抗原-1 细胞黏附细胞极化

rhG-CSF动员对供者外周血CD4＋T细胞极化和迁移的影响

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中国实验血液学杂志 2014年第2期22卷 470-474页

作者：谷振阳李猛赵莎莎蔡博赵小利管立勋王莉莉高春记解放军医学院、解放军总医院血液科北京100853

T淋巴细胞极化和迁移的过程需要依赖细胞表面的淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)与其配体细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的结合。本研究旨在探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员对异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)供者外周血CD4+T细胞... 详细信息

T淋巴细胞极化和迁移的过程需要依赖细胞表面的淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)与其配体细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的结合。本研究旨在探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员对异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)供者外周血CD4+T细胞的极化和迁移的影响。采集10例allo-HSCT供者于rhG-CSF动员后第5天和10例健康志愿者的外周血,使用免疫磁珠分选法纯化CD4+T细胞,使用激光扫描共聚焦显微镜检测CD4+T细胞接受基质细胞衍生因子1α(SDF-1α)和ICAM-1信号刺激后细胞的极化和迁移能力。结果显示,rhG-CSF动员后供者CD4+T细胞的极化比例为(32.42±4.91)%,健康人志愿者为(56.55±5.35)%,差异有统计学意义(P<0.01);rhG-CSF动员后供者CD4+T细胞的迁移速率为(7.06±1.44μm/min),健康志愿者CD4+T细胞的迁移速率为(9.05±1.91μm/min),差异有统计学意义(P<0.01)。结论:rhG-CSF动员能明显抑制供者CD4+T细胞的极化和迁移能力。

关键词：重组人粒细胞集落刺激因子 CD4+T细胞细胞极化细胞迁移

B细胞淋巴瘤-2抑制剂治疗血液系统恶性肿瘤的研究新进展

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国际输血及血液学杂志 2021年第2期44卷 101-107页

作者：程龙灿管立勋解放军总医院海南医院血液科三亚572000

B细胞淋巴瘤(BCL)-2是参与细胞凋亡信号通路的重要蛋白,可在体内发挥抑制细胞凋亡的重要作用,与肿瘤的发生、发展及耐药性的产生密切相关。高选择性的口服抗凋亡蛋白BCL-2抑制剂,venetoclax可以通过重启肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤作用。目... 详细信息

B细胞淋巴瘤(BCL)-2是参与细胞凋亡信号通路的重要蛋白,可在体内发挥抑制细胞凋亡的重要作用,与肿瘤的发生、发展及耐药性的产生密切相关。高选择性的口服抗凋亡蛋白BCL-2抑制剂,venetoclax可以通过重启肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤作用。目前,venetoclax单药或者联合其他药物治疗血液系统恶性肿瘤已经取得了重要进展。笔者现就venetoclax在慢性淋巴细胞白血病(CLL)、套细胞淋巴瘤(MCL)、弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、滤泡淋巴瘤(FL)、多发性骨髓瘤(MM)、急性髓细胞白血病(AML)等多种血液系统恶性肿瘤治疗中的临床研究新进展进行阐述。

关键词：基因 bcl-2,血液肿瘤细胞凋亡 BCL-2抑制剂 Venetoclax

正常核型急性髓细胞白血病的分子标志与临床意义

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军医进修学院学报 2012年第1期33卷 92-95页

作者：管立勋高春记解放军总医院血液科北京100853

细胞遗传学检测已作为常规方法用于急性髓系白血病的辅助诊断、指导治疗和预后判断。在急性髓系白血病患者40%-45%为正常核型,在该类患者中逐渐发现一些基因突变和基因表达异常,并发现此类基因的改变与预后存在着明显关系。本文就此方... 详细信息

细胞遗传学检测已作为常规方法用于急性髓系白血病的辅助诊断、指导治疗和预后判断。在急性髓系白血病患者40%-45%为正常核型,在该类患者中逐渐发现一些基因突变和基因表达异常,并发现此类基因的改变与预后存在着明显关系。本文就此方面的内容进行综述。

关键词：正常核型急性髓细胞白血病基因突变基因过表达

荧光素酶标记A20鼠B细胞淋巴瘤移植模型的建立

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中国实验血液学杂志 2018年第1期26卷 153-158页

作者：赵莎莎管立勋高哲王飞雁王莉莉高春记解放军总医院血液科北京100853 南开大学医学院天津300071

目的:建立荧光素酶标记A20鼠B细胞淋巴瘤移植模型,为后期异基因造血干细胞移植中移植物抗肿瘤作用的研究提供实验工具。方法:将萤火虫荧光素酶作为标记基因导入A20鼠B细胞淋巴瘤细胞株,建立稳定表达荧光素酶的A20细胞株;将其与C57BL/6... 详细信息

目的:建立荧光素酶标记A20鼠B细胞淋巴瘤移植模型,为后期异基因造血干细胞移植中移植物抗肿瘤作用的研究提供实验工具。方法:将萤火虫荧光素酶作为标记基因导入A20鼠B细胞淋巴瘤细胞株,建立稳定表达荧光素酶的A20细胞株;将其与C57BL/6小鼠骨髓经尾静脉共同接种于辐射后的BALB/c小鼠体内,建立移植肿瘤模型;用活体荧光成像系统检测肿瘤的发生发展,并观察小鼠的活存,体重变化以及成瘤部位;取肿瘤组织和动物脏器行石蜡包埋、病理切片、HE染色观察其组织学特点。结果:经慢病毒转染和嘌呤霉素筛选获得了稳定表达荧光素酶基因的A20细胞株。活体荧光成像观察发现,在A20细胞接种第8天,即可观察到肿瘤发光,随着观察天数的增加荧光强度增强。相比较于骨髓移植(BMT)组,BMT+A2 0-Luc^+组小鼠存活率下降,体重降低明显。大体解剖显示,成瘤部位主要波及肝脏和脾脏,成瘤组织特征类似人弥漫大B细胞淋巴瘤。结论:成功构建了荧光素酶标记A20鼠B细胞淋巴瘤移植模型,为探讨异基因造血干细胞移植中移植物抗肿瘤作用提供了研究平台。

关键词： A20细胞株 B细胞淋巴瘤荧光素酶骨髓移植活体荧光成像移植模型

rhG-CSF动员对异基因造血干细胞移植供者T淋巴细胞亚群S1P5表达的影响

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中国实验血液学杂志 2016年第4期24卷 1132-1136页

作者：李猛管立勋谷振阳赵莎莎王飞雁魏华萍王利李红华薄剑高春记解放军总医院海南分院血液科海南三亚572000 解放军总医院血液科北京100853

目的:研究重组人粒细胞集落刺激因子(rh G^-CSF)动员对异基因造血干细胞移植(allo^-HSCT)供者T淋巴细胞亚群1磷酸鞘氨醇受体(S1P5)表达变化的影响。方法:采集10例异基因造血干细胞移植供者在rh G^-CSF动员前及动员后静脉血,应用流式细... 详细信息

目的:研究重组人粒细胞集落刺激因子(rh G^-CSF)动员对异基因造血干细胞移植(allo^-HSCT)供者T淋巴细胞亚群1磷酸鞘氨醇受体(S1P5)表达变化的影响。方法:采集10例异基因造血干细胞移植供者在rh G^-CSF动员前及动员后静脉血,应用流式细胞术分析CD3^+、CD4^+和CD8^+T细胞及CD3^-/CD56^+NK细胞等细胞亚群的S1P5表达率变化。结果:rh G^-CSF动员前及动员后淋巴细胞胞均无S1P5表达。采用破膜剂对淋巴细胞进行破膜处理后,可检测到rh G^-CSF动员后淋巴细胞胞内S1P5表达较动员前明显上调,其中CD3^+T细胞(57.92±2.32)%vs(7.94±1.47)%(P<0.05),CD4^+T细胞(72.58±1.73)%vs(5.48±0.82)%(P<0.05),CD8^+T细胞(51.79±3.57)%vs(6.46±1.01)%(P<0.05),CD3^-/CD56^+NK细胞(40.00±1.47)%vs(4.97±0.74)%(P<0.05),其中CD4^+T细胞S1P5表达率上升幅度最大,与其他淋巴细胞亚群相比有统计学差异(P<0.05)。结论:rh G^-CSF动员可使allo^-HSCT供者T淋巴细胞亚群S1P5表达上调,其中CD4^+T细胞S1P5表达率上升幅度最大。

关键词：重组人粒细胞集落刺激因子动员异基因造血干细胞移植 1磷酸鞘氨醇

长链非编码RNA NONHSAT040475在健康人外周血白细胞中的表达分布

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中国实验血液学杂志 2016年第4期24卷 1196-1200页

作者：王飞雁罗澜赵莎莎魏华萍王利谷振阳管立勋杨楠高哲王莉莉高春记解放军医学院解放军总医院血液科北京100853

目的:探讨长链非编码RNA NONHSAT040475(long noncoding RNA,lncRNA NONHSAT040475)在健康人外周血白细胞亚群中的表达分布情况。方法:采集10例健康志愿者的新鲜外周血,利用流式细胞分选法纯化分选CD3^+T细胞、CD19^+B细胞、CD56^+NK细... 详细信息

目的:探讨长链非编码RNA NONHSAT040475(long noncoding RNA,lncRNA NONHSAT040475)在健康人外周血白细胞亚群中的表达分布情况。方法:采集10例健康志愿者的新鲜外周血,利用流式细胞分选法纯化分选CD3^+T细胞、CD19^+B细胞、CD56^+NK细胞及粒细胞,利用定量PCR方法检测lncRNA NONHSAT040475在健康人白细胞各亚群中的表达分布情况。结果:lncRNA NONHSAT040475在健康人白细胞各亚群中均有不同程度表达,其中在B淋巴细胞中表达相对较高,在T淋巴细胞和NK细胞及粒细胞中表达均相对较低(P<0.01)。结论:lncRNA NONHSAT040475在健康人外周血白细胞各细胞亚群中广泛表达,并且主要表达于B淋巴细胞。

关键词：长链非编码RNA B淋巴细胞 NK细胞 T淋巴细胞

葡萄糖酸洗必泰棉片在热带地区血液病患者经外周置入中心静脉导管外接无针接头消毒中的应用效果

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广西医学 2022年第12期44卷 1429-1431,1436页

作者：赵婷媛管立勋中国人民解放军总医院海南医院血液科海南省三亚市572000

目的探讨葡萄糖酸洗必泰棉片在热带地区血液病患者经外周置入中心静脉导管(PICC)外接无针接头消毒中的应用效果。方法纳入热带地区携带PICC的300例血液病患者,随机分为观察组和对照组,每组150例,再将各组分为5 s、10 s、15 s亚组,各亚组... 详细信息

目的探讨葡萄糖酸洗必泰棉片在热带地区血液病患者经外周置入中心静脉导管(PICC)外接无针接头消毒中的应用效果。方法纳入热带地区携带PICC的300例血液病患者,随机分为观察组和对照组,每组150例,再将各组分为5 s、10 s、15 s亚组,各亚组均50例。观察组、对照组分别采用葡萄糖酸洗必泰棉片、碘伏医用棉签消毒无针接头,各亚组按照相应的时间进行消毒。在置管后首次输液前采集无针接头处的无菌生理盐水拭子标本,采用琼脂平板培养法检测污染情况。结果在观察组和对照组内,15 s亚组的污染率均低于5 s亚组和10 s亚组(均P0.05)。观察组的5 s亚组、10 s亚组、15 s亚组的污染率分别低于对照组的5 s亚组、10 s亚组、15 s亚组(均P<0.05)。结论采用葡萄糖酸洗必泰棉片对热带地区血液病患者PICC外接无针接头进行消毒的效果优于碘伏棉签,且消毒时间为15 s时的效果更佳。

关键词：血液病经外周置入中心静脉导管无针接头葡萄糖酸洗必泰碘伏消毒时间消毒效果热带地区