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耐亚胺培南铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶类型的研究

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中国抗生素杂志 2006年第3期31卷 154-156页

作者：简翠孙自镛华中科技大学同济医学院附属同济医院武汉430030

目的了解耐亚胺培南铜绿假单胞菌对其它抗菌药物的耐药性及其产金属β-内酰胺酶的类型。方法收集同济医院2004年1月～9月耐亚胺培南铜绿假单胞菌29株,琼脂稀释法测定最低抑菌浓度(MIC);通过改良Hodge试验、双纸片协同试验(DDST)、聚合... 详细信息

目的了解耐亚胺培南铜绿假单胞菌对其它抗菌药物的耐药性及其产金属β-内酰胺酶的类型。方法收集同济医院2004年1月～9月耐亚胺培南铜绿假单胞菌29株,琼脂稀释法测定最低抑菌浓度(MIC);通过改良Hodge试验、双纸片协同试验(DDST)、聚合酶链反应(PCR)、序列分析等方法分析金属β-内酰胺酶类型,紫外分光光度法测定金属β-内酰胺酶的活性。结果29株细菌均为多重耐药株,11种常用抗菌药物中,仅对哌拉西林/三唑巴坦和阿米卡星敏感率较高,分别为69.7%和60.6%。29株菌中有2株产VIM-2金属β内酰胺酶(6.9%)。结论本院耐亚胺培南铜绿假单胞菌流行主要为医院感染所致,且呈多重耐药,有2株发现产VIM-2型金属β-内酰胺酶。

关键词：铜绿假单胞菌亚胺培南多重耐药

亚胺培南耐药铜绿假单胞菌及金属β-内酰胺酶的分子流行病学研究

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亚胺培南耐药铜绿假单胞菌及金属β-内酰胺酶的分子流行病学研究

作者：简翠华中科技大学

学位级别：硕士

目的和意义铜绿假单胞菌是引起医院感染的重要病原体,多重耐药的铜绿假单胞菌感染可导致临床治疗困难,病死率增加。而亚胺培南是治疗多重耐药铜绿假单胞菌的有效药物,随着它的广泛使用,对其耐药的铜绿假单胞菌日益增多。本文分析亚胺... 详细信息

目的和意义铜绿假单胞菌是引起医院感染的重要病原体,多重耐药的铜绿假单胞菌感染可导致临床治疗困难,病死率增加。而亚胺培南是治疗多重耐药铜绿假单胞菌的有效药物,随着它的广泛使用,对其耐药的铜绿假单胞菌日益增多。本文分析亚胺培南耐药铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药性,研究对亚胺培南的耐药机制及所产金属β-内酰胺酶的类型,阐明同济医院铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药性及同源性,为指导临床合理使用抗菌药物特别是碳青霉烯类,新药研究及开发,加强感染控制措施,及时切断多重耐药株的克隆传播和水平传播,密切监测耐药株的变迁及其发展提供科学依据。方法收集同济医院2004年1月～9月亚胺培南耐药铜绿假单胞菌存活株29株,琼脂稀释法测定29株铜绿假单胞菌存活株对常用的10种抗菌药物的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentrations,MIC)。通过双纸片协同试验(double-disk synergy testing,DDST)、聚合酶链反应(polymerase chain reaction ,PCR)、序列分析(sequencing)等方法检测金属β-内酰胺酶并分析其类型。紫外分光光度法测定金属β-内酰胺酶的活性。脉冲场凝胶电泳(pulsed field gelelectrophoresis,PFGE)分析耐药菌株的同源性。结果经过WHONET5.3软件分析,同济医院1998年至2004年铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药性呈逐年上升趋势,由1998年7.3%上升至2004年14.3%。同济医院2004年1～9月共分离铜绿假单胞菌193株,对头孢噻肟、庆大霉素和四环素的耐药率分别为38.5%、42%和93.7%,其余抗菌药物的耐药率均低于20%。对亚胺培南和美罗培南或头孢他啶交叉耐药的铜绿假单胞菌分别为15株(11.0%)和14株(7.3%)。 193株铜绿假单胞菌中,亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌(IMP-R-Pae)共39株。IMP-R-Pae和亚胺培南敏感的铜绿假单胞菌(IMP-S-Pae)对四环素的耐药率均在90%以上;对哌拉西林/他唑巴坦的耐药率分别为28.6%和17.9%,差异无显著性;对于其他抗菌药物的耐药率,IMP-R-Pae组明显高于IMP-S-Pae组,且差异呈极显著性。药物敏感性试验结果显示,存活的29株亚胺培南耐药铜绿假单胞菌均为多重耐药株。头孢噻肟和头孢他啶的耐药率分别为69%和27.6%。氨曲南和阿米卡星的耐药率均为44.8%,其MIC50和MIC90均为16μg/ml和256μg/ml。亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为93.1%和69%, MIC50和MIC90均为32μg/ml和256μg/ml。29株铜绿假单胞菌中有34.5%(10/29)的菌株对亚胺培南的MIC>32μg/ml,属于高水平耐药[11][12]。庆大霉素和阿米卡星的耐药率分别为82.8%和44.8%,MIC50分别是256μg/ml和16μg/ml, MIC90均为256μg/ml。环丙沙星、哌拉西林/他唑巴坦和四环素的耐药率分别为41.4%、48.3%和100%。双纸片协同试验检测29株铜绿假单胞菌中有11株金属β-内酰胺酶阳性,阳性率为37.9%。金属β-内酰胺酶基因检测显示有2株细菌产VIM-2型金属β-内酰胺酶(6.9%)。紫外分光光度法检测两株产酶株的酶活性分别为27.35±3.25U,26.58±3.18U。采用脉冲场凝胶电泳技术对29株铜绿假单胞菌进行分子分型,PFGE图谱共分为16个基因型,A、B、C、D、E、F、G型各有两株以上,其中D型3株,分别来自器官移植病房(2株)和神经内科病房(1株)的不同患者,标本采集时间相近,且均使用过呼吸机辅助呼吸,其余类型各1株,两株产金属β-内酰胺酶菌株不属于同一基因型,。结论同济医院2004年1～9月分离的铜绿假单胞菌,除对头孢噻肟、庆大霉素和四环素耐药率较高,分别为38.5%、42%和93.7%,对其他抗菌药物的耐药率均低于20%。亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌对于抗菌药物的耐药率均高于亚胺培南敏感组,除四环素和哌拉西林/他唑巴坦外,差异均呈极显著性(P<0.01),且亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌通常表现为多重耐药。 29株亚胺培南耐药铜绿假单胞菌,对头孢噻肟、庆大霉素、美罗培南和四环素的耐药率大于60%;对环丙沙星、氨曲南、阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦耐药率相近,为41%～48%;对头孢他啶耐药率最低,为27.6%。双纸片协同试验产金属β-内酰胺酶菌株阳性率为37.9%。基因检测只发现2株产VIM-2型金属β-内酰胺酶。 PFGE分型结果提示同济医院亚胺培南耐药铜绿假单胞菌可能存在小范围的流行,即可能有耐药菌株的克隆传播。同济医院亚胺培南耐药铜绿假单胞菌

关键词：铜绿假单胞菌耐药性亚胺培南金属β-内酰胺酶脉冲场凝胶电泳流行

抗癌肽R-lycosin-I和Lycosin-I的脂肪酸修饰及抗癌活性研究

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抗癌肽R-lycosin-I和Lycosin-I的脂肪酸修饰及抗癌活性研究

作者：简翠湖南师范大学

学位级别：硕士

R-lycosin-I是一种线形、α-螺旋构型的阳离子多肽,由Lycosin-I进行氨基酸替换得到的。而Lycosin-I是从穴居狼蛛毒液中提取分离得到的多肽。R-lycosin-I和Lycosin-I均具有抗癌活性,但其易被蛋白酶水解、稳定性差等不足之处,制约了其进... 详细信息

R-lycosin-I是一种线形、α-螺旋构型的阳离子多肽,由Lycosin-I进行氨基酸替换得到的。而Lycosin-I是从穴居狼蛛毒液中提取分离得到的多肽。R-lycosin-I和Lycosin-I均具有抗癌活性,但其易被蛋白酶水解、稳定性差等不足之处,制约了其进一步的应用。而采用化学修饰方法能有效弥补不足,相对于改变自身结构、PEG修饰、糖基化等方法,脂肪酸修饰不仅可以增加稳定性、提升生物活性,还可以提高多肽药物的脂溶性、膜渗透性。因此,本研究拟通过饱和脂肪酸修饰策略,获得稳定性高、活性强及药效长的抗癌活性肽R-lycosin-I和Lycosin-I的类似物。为提高R-lycosin-I的抗癌活性,采用不同碳链长度的饱和脂肪酸C-C,对R-lycosin-I的N-端进行化学修饰,得到五种脂肽(R-C,R-C,R-C,R-C,R-C)。采用DLS、TEM及CD分别表征五种脂肽的平均粒径、Zeta电势、形貌、二级结构,并研究其抗癌活性、溶血活性及血清稳定性。DLS结果显示,相对于R-lycosin-I,大部分脂肽的粒径减小,带正电荷。TEM结果显示,五种脂肽呈球形分散,均一性良好。CD结果表明,五种脂肽在PBS缓冲溶液中呈现无规则卷曲结构,而在50%TFE中五种脂肽均为α-螺旋构型,并且R-lycosin-I的螺旋度(35.5%)明显低于常规脂肽的螺旋度(62.99%-100.00%)。细胞毒活性结果表明,在有/无血清条件下,脂肽的抗癌活性均增加。与R-lycosin-I相比,在有血清条件下,R-C的抗癌活性大约增加四倍,是五种脂肽中细胞毒活性最强的脂肽。溶血活性实验结果表明,R-lycosin-I和五种脂肽的溶血活性随浓度的增加而增强,均显示出剂量依赖性溶血作用。血清稳定性实验结果表明,10%FBS条件下预先处理药物48 h后,脂肽对癌细胞有70%的抑制率,而R-lycosin-I仅有10%的抑制率。SEM和LDH释放实验结果表明,R-C能够通过轻微裂解细胞膜、诱导凋亡的方式抑制细胞生长。以抗癌活性肽Lycosin-I为研究对象,将十二酸与不同位点的赖氨酸的侧链氨基共价偶联,得到八种脂肽。采用DLS、CD表征八种脂肽的平均粒径、Zeta电势、二级结构。并研究脂肽的抗癌活性、溶血活性及血清稳定性。DLS结果显示,相对Lycosin-I,经十二酸修饰后的八种脂肽的电势增加,粒径减小。CD结果表明,八种脂肽在PBS缓冲溶液中呈无规则卷曲,在50%TFE中为α-螺旋结构。CCK-8活性实验结果表明,八种脂肽的抗癌活性均增加。细胞集落实验结果表明,与Lycosin-I相比,L-C能有效抑制癌细胞增殖。血清稳定性实验结果表明,10%FBS条件下预处理药物48 h后,L-C的抗癌活性几乎没有改变,而相同浓度下的Lycosin-I抗癌活性减弱。SEM及LDH释放实验结果表明,L-C通过与细胞膜相互作用发挥其抗癌活性。总之,采用脂肪酸修饰R-lycosin-I的N-端和Lycosin-I的侧链,能够有效的提高多肽的抗癌活性、血清稳定性等生物活性,为抗癌活性肽的化学修饰研究奠定了基础。

关键词： R-lycosin-I Lycosin-I 脂肪酸修饰抗癌活性

食物蛋白诱导的直肠结肠炎与沙门菌肠炎临床对比分析

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临床儿科杂志 2022年第11期40卷 824-830页

作者：陈凡简翠舒赛男华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科湖北武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院检验医学中心湖北武汉430030

目的比较食物蛋白诱导的直肠结肠炎(FPIP)和沙门菌肠炎的临床特征差异,为早期鉴别诊断提供依据。方法回顾性分析2013年1月至2019年12月收治的FPIP和沙门菌肠炎患儿的临床资料。结果FPIP组191例,男106例、女85例,中位发病年龄3.8(1.5~7.4... 详细信息

目的比较食物蛋白诱导的直肠结肠炎(FPIP)和沙门菌肠炎的临床特征差异,为早期鉴别诊断提供依据。方法回顾性分析2013年1月至2019年12月收治的FPIP和沙门菌肠炎患儿的临床资料。结果FPIP组191例,男106例、女85例,中位发病年龄3.8(1.5~7.4)月;沙门菌肠炎组120例,男75例、女45例,中位发病年龄14.7(9.9~20.0)月。与沙门菌肠炎组相比,FPIP组发病年龄较小,病程较长,湿疹史比例较高,差异有统计学意义(P10 mg/L和贫血比例较低,嗜酸性粒细胞和血小板计数较高,中性粒细胞计数和25羟维生素D水平以及食物过敏原sIgE阳性率较低,差异有统计学意义(P<0.05)。沙门菌肠炎组抗生素使用率高于FPIP组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论FPIP多见于无发热、有血丝便的6月龄以内患儿,可伴有湿疹,嗜酸性粒细胞增多常见;沙门菌肠炎多见于6~24月龄儿童,好发于夏秋季节,常伴有发热、C反应蛋白升高。

关键词：食物蛋白诱导的直肠结肠炎沙门菌肠炎儿童

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铜氧化电流法研究有机酸的光催化效应

化学通报 1990年第4期 33-35页

作者：蔡乃才董庆华简翠英武汉大学化学系 430072

用半导体粉末作光催化剂的悬浮体系具有反应面积大、光吸收效果好、使用方便等独特优点,它在化学能量转换、光电合成及废水处理等方面有广阔的应用前景。对于悬浮体系中光催化反应的效率和不同条件下的反应速度,主要是用物理或化学的方... 详细信息

用半导体粉末作光催化剂的悬浮体系具有反应面积大、光吸收效果好、使用方便等独特优点,它在化学能量转换、光电合成及废水处理等方面有广阔的应用前景。对于悬浮体系中光催化反应的效率和不同条件下的反应速度,主要是用物理或化学的方法,分析反应前后体系中反应物的减少或产物的增加来确定。

关键词：有机酸光催化效应铜氧化电流法

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悬浮液中制备电解MnO_2

应用化学 1992年第6期9卷 64-66页

作者：蔡乃才简翠英董庆华武汉大学化学系武汉430072

电解MnO_2(EMD)是制造锌锰干电池的基本原料,它的放电性能比较好。在使用金属钛作电解阳极时,为获得性能良好的MnO_2和防止金属钛表面钝化,电解电流密度一般在0.6A/dm^2以下。为提高电流密度,Misawa等进行了新的溶液体系研究。

关键词：电解二氧化锰制备悬浮液

TiO_2/Pt半导体隔片光电化学电池性能影响因素的研究

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太阳能学报 1991年第2期12卷 155-161页

作者：蔡乃才江敏董庆华简翠英武汉大学化学系

对TiO_2/Pt半导体隔片光电化学电池(SC-SEP)所做的实验表明:光池溶液的pH、暗池溶液中的氧化还原电对以及两池中的暗电极,对电池的开路电压、光生电压、短路光电流和光伏安特性有影响;电池的稳定性依赖于半导体隔片的耐腐性和两池中界... 详细信息

对TiO_2/Pt半导体隔片光电化学电池(SC-SEP)所做的实验表明:光池溶液的pH、暗池溶液中的氧化还原电对以及两池中的暗电极,对电池的开路电压、光生电压、短路光电流和光伏安特性有影响;电池的稳定性依赖于半导体隔片的耐腐性和两池中界面反应的性质;通过选择合理的电池体系,SC-SEP的光电性能比单隔室光电化学电池(PEG)优越。

关键词：电池光电化学半导体隔片影响

亚胺培南耐药铜绿假单胞菌金属β内酰胺酶的检测和同源性分析

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中国感染与化疗杂志 2008年第2期8卷 107-111页

作者：简翠孙自镛华中科技大学同济医学院附属同济医院检验科武汉430030

目的了解亚胺培南耐药铜绿假单胞菌的耐药性、同源性及金属β内酰胺酶类型。方法收集我院2006年1—9月临床分离的亚胺培南耐药铜绿假单胞菌29株,用琼脂稀释法测定10种抗菌药物的MIC;通过改良Hodge试验、双纸片协同试验、PCR、序列分析... 详细信息

目的了解亚胺培南耐药铜绿假单胞菌的耐药性、同源性及金属β内酰胺酶类型。方法收集我院2006年1—9月临床分离的亚胺培南耐药铜绿假单胞菌29株,用琼脂稀释法测定10种抗菌药物的MIC;通过改良Hodge试验、双纸片协同试验、PCR、序列分析等方法分析金属β内酰胺酶类型,紫外分光光度法测定金属β内酰胺酶的活性;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株同源性。结果29株细菌均为多重耐药株,仅对哌拉西林-他唑巴坦和阿米卡星敏感率较高,分别为69.7%和60.6%。29株细菌PFGE图谱分为16个基因型,A型主要集中在呼吸内科病房,B、C型来自神经外科ICU,D、E型来自器官移植病房,F型来自创伤外科病房,G型来自神经内科病房,其余为散在分布。29株菌中有2株产VIM-2金属β内酰胺酶(6.9%)。结论本院亚胺培南耐药铜绿假单胞菌主要为医院感染流行株,且呈多重耐药,有2株菌产VIM-2型金属β内酰胺酶。

关键词：铜绿假单胞菌耐药性多重耐药脉冲场凝胶电泳

2012年湖北省成人患者血培养分离菌耐药性分析

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中国感染与化疗杂志 2015年第6期15卷 509-516页

作者：田磊陈中举李丽张蓓朱旭慧简翠闫少珍孙自镛华中科技大学同济医学院附属同济医院检验科武汉430030

目的了解湖北省成人患者血培养常见病原菌分布及耐药性情况。方法对湖北省细菌耐药性监测网2012年1—12月所有成人患者血液标本按常规方法进行细菌分离培养和鉴定。按统一方案用纸片扩散法进行抗菌药物敏感性试验。结果成人患者血培养... 详细信息

目的了解湖北省成人患者血培养常见病原菌分布及耐药性情况。方法对湖北省细菌耐药性监测网2012年1—12月所有成人患者血液标本按常规方法进行细菌分离培养和鉴定。按统一方案用纸片扩散法进行抗菌药物敏感性试验。结果成人患者血培养共分离病原菌3 833株,其中最常见的病原菌依次为大肠埃希菌（25.9%）、凝固酶阴性葡萄球菌（24.0%）、金黄色葡萄球菌（金葡菌）（11.8%）、克雷伯菌属（8.1%）和肠球菌属（5.4%）。大肠埃希菌和克雷伯菌属产超广谱β内酰胺酶（ESBL）菌株的检出率分别为67.1%和85.9%。药敏结果显示：大肠埃希菌对哌拉西林-他唑巴坦、头孢西丁、亚胺培南、美罗培南和阿米卡星敏感率高（〉80.0%）,克雷伯菌属对头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦、头孢西丁、亚胺培南、美罗培南、阿米卡星和左氧氟沙星敏感率高（〉80.0%）。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类药物的耐药率在0-25.0%。耐甲氧西林金葡菌（MRSA）和凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）检出率分别为41.8%和55.7%。未发现对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺不敏感株。MRSA对氯霉素耐药率低（〈30.0%）,MRCNS对利福平耐药率低（〈15.0%）,甲氧西林敏感葡萄球菌对青霉素和红霉素耐药率较高（〉50.0%）,对其他常用抗菌药物耐药率均较低。屎肠球菌耐万古霉素的检出率为3.4%。肺炎链球菌中青霉素敏感、中介和耐药菌株的检出率分别为57.6%、28.8%和13.6%。肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌中有少量菌株为广泛耐药菌株（除替加环素和多黏菌素外对所有常用抗菌药物均耐药）。结论大肠埃希菌和金葡菌是成人血培养最常见的病原菌,其对不同种类抗菌药物耐药性不同,临床医师应该根据药敏结果合理选用抗菌药物,防止耐药菌株的传播。

关键词：血培养病原菌耐药性