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香蕉枯萎镰刀菌致病性快速测定方法的建立

基因组学与应用生物学 2015年第2期34卷 408-416页

作者：符冬妹陈汉清郭素霞王婷婷曾会才海南大学环境与植物保护学院海口570288 中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南省微生物重点实验室海口571101 中国热带农业科学院海口实验站海口570102

建立致病性变异突变体库是研究香蕉枯萎镰刀菌致病机理的有效方法,此方法需要对大量突变体进行致病性测定,经典的根部接种测定方法耗时长达40 d,工作量十分巨大。因此,建立一种简便快速的致病性测定方法是高效建立香蕉枯萎病菌致病性变... 详细信息

建立致病性变异突变体库是研究香蕉枯萎镰刀菌致病机理的有效方法,此方法需要对大量突变体进行致病性测定,经典的根部接种测定方法耗时长达40 d,工作量十分巨大。因此,建立一种简便快速的致病性测定方法是高效建立香蕉枯萎病菌致病性变异突变体库的关键。本研究以香蕉巴西蕉和粉蕉叶片为材料,采用香蕉离体叶片分别接种香蕉枯萎病菌1号小种、4号小种、致病性丧失突变体、致病性严重减弱突变体,分别置于20℃、25℃、30℃、35℃、37℃条件下进行保湿培养3 d、5 d、7 d,观察发病情况,测定病斑大小。并通过根部接种法对离体叶片接种法的结果进行验证。结果表明,离体叶片测定法和根部接种法测定的结果一致,最佳致病温度30℃。从而建立了一种简便快速的香蕉枯萎病突变体致病性测定方法(离体叶片接种法)。运用该法在适宜的条件下可以准确、可靠、快速和简便测出香蕉枯萎病菌致病性,大大提高了突变体致病性测定筛选的效率。

关键词：香蕉枯萎镰刀菌离体叶片致病性测定

模式植物狗尾草响应不同干旱及盐胁迫表达的内参基因actin及其应用

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热带作物学报 2019年第12期40卷 2418-2425页

作者：张丽丽赵辉郭静远夏启玉贺萍萍霍姗姗屈静符冬妹郭安平中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业农村部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室/海南省南繁生物安全与分子育种重点实验室

为了研究应用于狗尾草响应不同干旱及盐胁迫基因表达的内参基因,本研究从网站https://***/pz/***上获得狗尾草A10品系8个actin基因的cDNA序列,设计荧光定量PCR引物,以不同程度的干旱及不同浓度盐胁迫处理的狗尾草幼苗cDNA做模板,进行荧... 详细信息

为了研究应用于狗尾草响应不同干旱及盐胁迫基因表达的内参基因,本研究从网站https://***/pz/***上获得狗尾草A10品系8个actin基因的cDNA序列,设计荧光定量PCR引物,以不同程度的干旱及不同浓度盐胁迫处理的狗尾草幼苗cDNA做模板,进行荧光定量PCR试验,通过实时荧光定量PCR扩增片段电泳分析,扩增曲线及溶解曲线综合分析,结果表明登录号Sevir.9G114100对应的actin基因是8个actin基因中最合适的内标基因。并对所选内标的实用性进行了验证,验证的结果与转录组数据的结果保持一致,证明所选内标基因可用于后续狗尾草响应不同干旱及盐胁迫狗尾草转录组基因表达的验证工作,为深入研究狗尾草功能基因奠定分子基础。

关键词：狗尾草 actin基因干旱胁迫盐胁迫荧光定量PCR

氯化钠胁迫下模式植物狗尾草种子萌发期抗盐性鉴定与评价指标研究

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热带作物学报 2017年第12期38卷 2273-2279页

作者：赵辉张丽丽郭静远贺萍萍霍姗姗符冬妹郭安平中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南海口571101

狗尾草是比拟南芥更贴近主要农作物的模式植物,本研究在狗尾草高效遗传转化技术的基础上,以适宜转化的狗尾草ME34品系成熟种子为外植体,根据氯化钠高渗培养基培养法,选择1/2 MS和MS两种基本培养基,分别设计了0、100、200、300、400、500... 详细信息

狗尾草是比拟南芥更贴近主要农作物的模式植物,本研究在狗尾草高效遗传转化技术的基础上,以适宜转化的狗尾草ME34品系成熟种子为外植体,根据氯化钠高渗培养基培养法,选择1/2 MS和MS两种基本培养基,分别设计了0、100、200、300、400、500 mmol/L 6个梯度,对狗尾草ME34品系种子萌发期的抗盐性进行了鉴定。实验对各梯度种子萌发率、芽长、根长、鲜重等生长指标进行了测定和统计分析。结果表明:在同一氯化钠梯度下MS基本培养基比1/2 MS基本培养基对狗尾草生长的盐害程度有加重趋势,1/2 MS的基本培养基更能反应狗尾草种子本身对氯化钠的耐盐反应;氯化钠100~200 mmol/L梯度是鉴定狗尾草ME34品系抗盐性的关键梯度,种子萌发期发芽率、鲜重、根长、芽长各项生长指标都受到显著或极显著的影响,4个参数间都极显著正相关;其中鲜重和芽长对氯化钠的胁迫最敏感和直接,可作为该品系种子萌发期抗盐性鉴定的一级指标;种子发芽率对氯化钠胁迫的敏感性仅次于鲜重和芽长,可作为该品系种子萌发期抗盐性鉴定的二级指标;根长对氯化钠胁迫的敏感性稍弱,可作为该品系种子萌发期抗盐性鉴定的三级指标。实验为狗尾草作为抗盐模式植物的研究准备了抗盐性评价指标基础,无论是外源抗盐基因在狗尾草内的过表达,还是内源抗盐基因的敲除,都需要这些具体评价指标的支持。

关键词：狗尾草萌发期抗盐性鉴定氯化钠

甘露醇胁迫下模式植物狗尾草种子萌发期抗旱性鉴定与评价指标研究

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热带作物学报 2017年第11期38卷 2060-2065页

作者：赵辉张丽丽郭静远霍姗姗贺萍萍夏启玉符冬妹郭安平中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南海口571101

狗尾草是一种新型的模式植物,符合作为模式植物的所有要求,是C4光合作用的优秀模型,也是研究非生物胁迫耐受性很好的模型。在狗尾草高效遗传转化技术的基础上,以适宜转化的狗尾草ME34品系非转基因成熟种子为外植体,根据甘露醇高渗培养... 详细信息

狗尾草是一种新型的模式植物,符合作为模式植物的所有要求,是C4光合作用的优秀模型,也是研究非生物胁迫耐受性很好的模型。在狗尾草高效遗传转化技术的基础上,以适宜转化的狗尾草ME34品系非转基因成熟种子为外植体,根据甘露醇高渗培养基培养法,设计了0、200、300、400、500、600 mmol/L 6个梯度,对狗尾草ME34品系种子萌发期的抗旱性进行了鉴定。结果表明:甘露醇200~300 mmol/L的梯度是鉴定狗尾草ME34品系抗旱性的关键梯度,种子萌发期发芽率、鲜重、根长、芽长等各项生长指标都受到显著或极显著的影响,各生长指标对甘露醇干旱胁迫的敏感性依次为鲜重>根长>芽长>发芽率,参数间两两显著或极显著正相关;鲜重对甘露醇的胁迫的反应最敏感和直接,在200 mmol/L梯度下已表现为极显著降低,可作为该品系种子萌发期抗旱性鉴定的一级指标;根长对甘露醇梯度的反应是低浓度促进根的生长,高浓度抑制根的生长,极显著促进生长的梯度(200 mmol/L)适合用作鉴定依据,此外,芽长对甘露醇也敏感,200、300 mmol/L分别显著和极显著抑制芽长,根长和芽长可作为该品系种子萌发期抗旱性鉴定的二级指标;种子发芽率对甘露醇的敏感性稍弱,200 mmol/L条件下发芽率变化不明显,在300 mmol/L条件下才表现为极显著下降,可作为该品系种子萌发期抗旱性鉴定的三级指标。实验为狗尾草作为抗旱模式植物的研究准备了抗旱性评价指标基础,无论是外源抗旱基因在狗尾草内的过表达,还是内源抗旱基因的敲除,都需要这些具体评价指标的支撑。

关键词：狗尾草萌发期抗旱性鉴定甘露醇

MAVS全长及其截短体真核表达载体的构建和鉴定

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浙江农业学报 2025年第1期37卷 49-60页

作者：玉妹毕冬琳郑天倚李琼毅西北民族大学生命科学与工程学院甘肃兰州730030

建立线粒体抗病毒蛋白(mitochondrial antiviral-signaling protein,MAVS)全长及截短体的真核表达载体,并检测其在HEK293细胞中的表达,为后续探索MAVS在病毒逃逸机制研究中的作用提供重要的实验材料。首先,根据NCBI数据库中人源MAVS的... 详细信息

建立线粒体抗病毒蛋白(mitochondrial antiviral-signaling protein,MAVS)全长及截短体的真核表达载体,并检测其在HEK293细胞中的表达,为后续探索MAVS在病毒逃逸机制研究中的作用提供重要的实验材料。首先,根据NCBI数据库中人源MAVS的全长序列,设计截短体引物,通过PCR从cDNA模板中扩增出MAVS全长及不同截短体的基因片段,并将其克隆到pcDNA3.1-3xflag载体中。随后,将构建好的载体转染到HEK-293细胞中,利用RT-PCR技术检测扩增产物大小,与目的大小进行对比,用Western blot技术检测MAVS蛋白在293细胞中的表达情况。结果表明,成功构建了全长MAVS(MAVS-FL)及其截短体MAVS-△C、MAVS-△CP、MAVS-PBD、MAVS-△Tm的真核表达载体,Western blot结果表明,构建的载体蛋白在HEK-293中能够有效表达。本研究成功构建了MAVS全长及其截短体的真核表达载体,并在HEK-293细胞中表达了这些蛋白,为后续研究MAVS蛋白的功能和抗病毒机制提供了实验材料。

关键词：线粒体抗病毒蛋白真核表达载体截短体构建蛋白表达

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科学理解是事实性的还是非-事实性的?

科学技术哲学研究 2025年第1期42卷 79-84页

作者：赵聪妹哈尔滨工业大学马克思主义学院山东威海264209

科学理解是事实性还是非-事实性的问题已经成为制约其哲学研究进一步发展的重要问题。依据科学理解的两条研究路径为分析线索,以科学理解与“真”的关系为切入点,对科学理解是事实性还是非-事实性的问题进行分析。总结科学理解是非-事... 详细信息

科学理解是事实性还是非-事实性的问题已经成为制约其哲学研究进一步发展的重要问题。依据科学理解的两条研究路径为分析线索,以科学理解与“真”的关系为切入点,对科学理解是事实性还是非-事实性的问题进行分析。总结科学理解是非-事实性的优势,并以此为基础进一步探讨科学理解是非-事实性的认知价值,体现其认识论方面的张力。分析使用“有效性”取代“真”的方法并不会导致不可知论。尝试构建一个相对完整的科学理解是非-事实性的分析论证。

关键词：事实性非-事实性真有效性

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总结与新变:《汉文典·文章典》的文体思想

四川师范大学学报(社会科学版) 2025年第1期52卷 177-187,208页

作者：李凯王领妹西南民族大学中国语言文学学院西昌学院少数民族预科教育学院

来裕恂《汉文典·文章典》蕴含着比较系统而丰富的文体思想。来裕恂文体概念涵括体裁、体类、语体与风格等多层含义;其文体体类观分类标准多元、分类层次清晰;其文体类型观兼顾书体与篇体;其文体价值观推崇正体、重视载道经世、追求语... 详细信息

来裕恂《汉文典·文章典》蕴含着比较系统而丰富的文体思想。来裕恂文体概念涵括体裁、体类、语体与风格等多层含义;其文体体类观分类标准多元、分类层次清晰;其文体类型观兼顾书体与篇体;其文体价值观推崇正体、重视载道经世、追求语体的雅正及风格的刚健高远等。《文章典》的文体思想基于古代文体学而又有所推进,体现出向现代文体学演进的兆端,具有总结与新变的双重特征。

关键词：来裕恂《汉文典·文章典》文体思想

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高效阴离子交换色谱-脉冲安培法检测食品中15种功能糖及糖醇

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化学研究与应用 2025年第3期37卷 549-556页

作者：李燕妹福建省产品质量检验研究院国家加工食品质量检验检测中心(福州)福建福州350000

建立了高效阴离子交换色谱-脉冲安培法测定食品中15种功能糖及糖醇的分析方法。样品经超声提取、沉淀蛋白后,采用CarboPac PA10(4×250mm)色谱柱分离,在流速为0.90 mL·min^(-1),柱温为25℃的梯度洗脱条件下进行分析,外标法定量。15种... 详细信息

建立了高效阴离子交换色谱-脉冲安培法测定食品中15种功能糖及糖醇的分析方法。样品经超声提取、沉淀蛋白后,采用CarboPac PA10(4×250mm)色谱柱分离,在流速为0.90 mL·min^(-1),柱温为25℃的梯度洗脱条件下进行分析,外标法定量。15种功能糖及糖醇在0.25 mg·L^(-1)~50.0 mg·L^(-1)浓度范围内线性相关系数良好(r≥0.999),方法的定量限为0.08 mg/100g~1.74 mg/100g。以饮料、饼干、巧克力和奶粉为样品基质,在3个不同加标水平下,15种功能糖及糖醇的回收率为90.1%~109.3%,相对标准偏差为0.27%~3.80%。该方法在20 min内即可实现15种功能糖及糖醇的定量分析,操作简便、分析速度快,灵敏度高,可以应用于食品中多种功能糖及糖醇含量的测定。

关键词：功能糖糖醇高效阴离子交换色谱脉冲安培检测器

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旅游百强县时空分布及其影响机制

浙江大学学报(理学版) 2025年第2期52卷 189-201页

作者：魏健欣华晨戴智妹浙江大学城市规划与设计研究所浙江杭州310030 浙江大学建筑设计研究院有限公司浙江杭州310028 浙江大学平衡建筑研究中心浙江杭州310028 浙江工业大学设计与建筑学院浙江杭州310014

旅游业承载着人民对美好生活的向往,发展县域旅游逐渐成为推进城乡融合、助力美丽中国建设和促进共同富裕的重要抓手和有效路径。综合运用最邻近指数、核密度估计、重心模型、双变量空间自相关性和二元逻辑回归等方法,基于2019—2023年... 详细信息

旅游业承载着人民对美好生活的向往,发展县域旅游逐渐成为推进城乡融合、助力美丽中国建设和促进共同富裕的重要抓手和有效路径。综合运用最邻近指数、核密度估计、重心模型、双变量空间自相关性和二元逻辑回归等方法,基于2019—2023年中国旅游百强县数据,分析了中国旅游百强县的时空分布和影响因素,探究了影响其进退的因素。研究表明:(1)旅游百强县总体呈“东多西少”的空间分布特征,并逐渐形成“一主(长三角)一副(川黔)”双核集聚格局;(2)自然环境因素、社会经济因素和政策规划因素等共同影响旅游百强县分布;(3)在形成机制上,旅游资源、地理集聚、经济规模和产业结构对旅游百强县进退的影响较显著。

关键词：旅游百强县县域旅游逻辑回归双变量空间自相关影响因素空间分布