检索结果-南通市图书馆

PPM1A/TGF-β1/Smads轴对胰腺癌PANC-1细胞生物学行为的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

郑州大学学报（医学版） 2024年第4期59卷 463-469页

作者：张荣花崔笑妍周静王梅梅熊亚南于笑涵刘志勇章广玲华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病重点实验室河北唐山063210 华北理工大学临床医学院河北省医工融合精准医疗重点实验室河北唐山063000

目的:探讨镁依赖性蛋白磷酸酶1A(PPM1A)/TGF-β1/Smads轴对胰腺癌PANC-1细胞生物学行为的影响及其可能作用机制。方法:①通过组织芯片免疫组织化学染色检测88例胰腺癌组织和14例癌旁正常胰腺组织中PPM1A的表达情况。利用qRT-PCR、免疫... 详细信息

目的:探讨镁依赖性蛋白磷酸酶1A(PPM1A)/TGF-β1/Smads轴对胰腺癌PANC-1细胞生物学行为的影响及其可能作用机制。方法:①通过组织芯片免疫组织化学染色检测88例胰腺癌组织和14例癌旁正常胰腺组织中PPM1A的表达情况。利用qRT-PCR、免疫荧光实验检测胰腺癌细胞PANC-1、AsPC-1和BxPC-3与正常胰腺导管上皮细胞HPNE中PPM1A的表达情况。②取PANC-1细胞,采用脂质体转染法分4组,分别转染si-NC、si-PPM1A、pcDNA3.1、pcDNA3.1-PPM1A,通过CCK-8和Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力,Western blot法检测TGF-β1、p-Smad2/Smad2和p-Smad3/Smad3蛋白的表达情况。③取PANC-1细胞,转染si-PPM1A或pcDNA3.1-PPM1A后,再加入TGF-β1信号通路抑制剂SB431542或活化因子TGF-β1,通过CCK-8实验检测细胞增殖能力。结果:①与癌旁正常胰腺组织相比,胰腺癌组织中PPM1A蛋白表达减少(P<0.05)。②与正常胰腺导管上皮细胞HPNE相比,胰腺癌细胞PANC-1、AsPC-1和BxPC-3中PPM1A mRNA和蛋白表达减少(P<0.05)。③与si-NC组相比,si-PPM1A组细胞增殖、迁移和侵袭能力增加,TGF-β1/Smads信号通路中TGF-β1、p-Smad2/Smad2和p-Smad3/Smad3表达水平升高(P<0.05);与pcDNA3.1组相比,pcDNA3.1-PPM1A组细胞上述指标的变化相反(P<0.05)。④SB431542可逆转si-PPM1A对PANC-1细胞增殖的促进作用,TGF-β1可逆转pcDNA3.1-PPM1A对PANC-1细胞增殖的抑制作用(P<0.05)。结论:PPM1A可能通过抑制TGF-β1/Smads信号通路抑制胰腺癌PANC-1细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

关键词：胰腺癌 PPM1A TGF-β1 Smad 细胞增殖迁移侵袭

同方期刊数据库

胰腺癌细胞中CXXC4表达水平变化对其增殖、凋亡的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

重庆医学 2024年

作者：周静王璐瑶崔笑妍张亚楠张荣花王梅梅熊亚南刘志勇章广玲华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病重点实验室华北理工大学附属医院华北理工大学医学部华北理工大学临床医学院河北省医工融合精准医疗重点实验室

目的探讨CXXC指蛋白4（CXXC4）对胰腺癌PANC-1细胞增殖和凋亡的影响。方法在线数据库分析胰腺癌组织中CXXC4的表达水平及其与患者预后和临床病理分期的关系。qRT-PCR技术检测人正常胰腺导管上皮细胞HPNE细胞及胰腺癌细胞PANC-1、AsPC-... 详细信息

目的探讨CXXC指蛋白4（CXXC4）对胰腺癌PANC-1细胞增殖和凋亡的影响。方法在线数据库分析胰腺癌组织中CXXC4的表达水平及其与患者预后和临床病理分期的关系。qRT-PCR技术检测人正常胰腺导管上皮细胞HPNE细胞及胰腺癌细胞PANC-1、AsPC-1和BxPC-3中CXXC4的mRNA表达。si-NC、si-CXXC4、pcDNA3.1和pcDNA3.1-CXXC4分别转染PANC-1细胞，Westernbolt法检测CXXC4敲降和过表达的有效性。CCK-8、集落形成、EdU和免疫荧光实验分析敲降或过表达CXXC4对PANC-1细胞增殖和凋亡的影响。生物信息学网站预测CXXC4的上游miRNA。Starbase数据库分析miR-450b-5p与CXXC4在胰腺癌组织中表达相关性。结果 TCGA数据库结果显示，与癌旁胰腺组织相比，胰腺癌组织中CXXC4低表达（P<0.001），且与胰腺癌患者总体生存期和预后不良有关（P<0.05）。GEPIA数据库分析结果显示，与Ⅰ期胰腺癌相比，Ⅱ期胰腺癌中CXXC4表达降低（均P<0.05）。与HPNE细胞相比，在3种胰腺癌细胞中CXXC4表达降低（P<0.05）。与si-NC组相比，si-CXXC4组PANC-1细胞增殖和集落形成能力增强，增殖标志物Ki67、PCNA表达升高，凋亡标志物Bax、caspase-3及caspase-9表达降低；与pcDNA3.1组相比，pcDNA3.1-CXXC4组PANC-1细胞得到与上述相反的结果（均P<0.05）。生物信息学网站预测miR-450b-5p为CXXC4的上游miRNA，胰腺癌组织中CXXC4与miR-450b-5p的表达呈负相关（r=-0.227），miR-450b-5p在多种哺乳动物中物种保守较高。结论 CXXC4抑制胰腺癌PANC-1细胞的增殖并促进其凋亡。

关键词： CXXC4 胰腺癌 PANC-1细胞增殖凋亡

鳖甲煎丸含药血清抑制胰腺癌AsPC-1细胞恶性生物学行为及机制研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

海南医学院学报 2024年

作者：崔笑妍李尹凡丁焕然刘国荣张荣花于笑涵王梅梅章广玲华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病重点实验室华北理工大学临床医学院河北省医工融合精准医疗重点实验室华北理工大学医院

目的：探讨鳖甲煎丸（BJJP）含药血清对胰腺癌AsPC-1细胞恶性生物学行为的影响及其可能的分子机制。方法：采用健康SD大鼠制备正常大鼠血清以及低（0.55 g/kg）、中（1.1 g/kg）、高（2.2 g/kg）剂量的鳖甲煎丸含药血清。将对数生长期... 详细信息

目的：探讨鳖甲煎丸（BJJP）含药血清对胰腺癌AsPC-1细胞恶性生物学行为的影响及其可能的分子机制。方法：采用健康SD大鼠制备正常大鼠血清以及低（0.55 g/kg）、中（1.1 g/kg）、高（2.2 g/kg）剂量的鳖甲煎丸含药血清。将对数生长期的胰腺癌AsPC-1细胞分为空白对照组（BC）、正常大鼠血清处理组（NC）以及低、中、高剂量的鳖甲煎丸含药血清处理组（BJJP-L、BJJP-M和BJJP-H），各组用10%相应血清处理细胞48 h后进行后续实验。HE染色评估鳖甲煎丸对健康SD大鼠肝脏、肾脏和心脏组织学变化的影响。CCK-8检测AsPC-1细胞增殖；集落形成实验检测AsPC-1细胞集落形成；TUNEL实验检测AsPC-1细胞凋亡；划痕实验检测AsPC-1细胞迁移；Transwell实验检测AsPC-1细胞迁移和侵袭；western blotting实验检测AsPC-1细胞中增殖相关蛋白（Ki-67和PCNA）、凋亡相关蛋白（Caspase-3、Caspase-9、Bax、Bcl-xl和Bcl-2）、上皮-间充质转化（EMT）相关蛋白（E-cadherin、N-cadherin和Vimentin）以及PI3K/AKT信号通路相关蛋白（p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT）的表达水平；免疫荧光实验检测AsPC-1细胞中EMT相关蛋白（E-cadherin、N-cadherin和Vimentin）的荧光强度。超高效液相色谱-串联静电场轨道阱质谱联用（UHPLC-MS/MS）技术检测鳖甲煎丸含药血清的入血成分。结果：HE染色显示低、中、高剂量的鳖甲煎丸对健康SD大鼠的主要脏器无毒副作用。与NC组相比，低、中、高剂量的鳖甲煎丸含药血清组细胞的OD值、集落形成数量、划痕愈合率、迁移数量、侵袭数量、Ki-67、PCNA、Bcl-xl、Bcl-2、N-cadherin、Vimentin、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT蛋白表达水平以及N-cadherin和Vimentin荧光强度均显著降低；TUNEL凋亡率、Caspase 3、Caspase 9、Bax、E-cadherin蛋白表达水平以及E-cadherin荧光强度均显著升高（均P<0.05）。UHPLC-MS/MS检测结果显示鳖甲煎丸含药血清中共有67种入血原型成分，其中包括高熊果苷、槲皮素和苍术素等30种有效成分。结论：鳖甲煎丸含药血清可抑制胰腺癌AsPC-1细胞的恶性生物学行为，其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关。

关键词：鳖甲煎丸胰腺癌增殖上皮-间充质转化 PI3K/AKT信号通路

鳖甲煎丸抑制肝星状细胞激活减轻肝纤维化的作用机制

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国中西医结合外科杂志 2024年第4期30卷 557-561页

作者：左艳洁李鑫崔佳林张荣花李彩霞崔立华章广玲张淑坤兰涛天津市中西医结合医院天津市南开医院天津300100 河北省沧州市人民医院肝胆胰外科沧州061000 天津医科大学研究生院天津300700 华北理工大学临床医学院河北省医工融合精准医疗重点实验室唐山063000

目的:研究鳖甲煎丸调节AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)、抑制肝星状细胞(HSC)激活和肝纤维化的作用机制。方法:将24只健康雄性SPF级C57BL/6小鼠随机分为对照、肝纤维化模型和鳖甲煎丸治疗组,每组8只。采用高脂高糖饮食联合腹腔注射四氯化碳制... 详细信息

目的:研究鳖甲煎丸调节AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)、抑制肝星状细胞(HSC)激活和肝纤维化的作用机制。方法:将24只健康雄性SPF级C57BL/6小鼠随机分为对照、肝纤维化模型和鳖甲煎丸治疗组,每组8只。采用高脂高糖饮食联合腹腔注射四氯化碳制备小鼠肝纤维化模型。自第6周始,鳖甲煎丸治疗组给予鳖甲煎丸(1.365 g/kg)灌胃,1次/d,至第12周检测血清三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)水平,取肝组织行HE染色、天狼星红染色和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫组织化学染色,分别观察肝组织病理学改变、胶原纤维增生和HSC活化状态,并用Western blot检测AMPK蛋白表达和活性。结果:与对照组比较,肝纤维化模型组小鼠血清ALT、AST、ALP和LDL升高,TG、TC及HDL降低(P<0.05);与肝纤维化模型组比较,鳖甲煎丸治疗组小鼠血清ALT、AST和ALP降低(P<0.05),而TG、TC、HDL和LDL差异无统计学意义。肝纤维化模型组HE染色可见肝细胞排列紊乱、有严重脂肪变性和部分气球样变,并伴有炎症细胞浸润和点片状坏死灶;天狼星红染色可见明显的纤维组织增生,α-SMA表达阳性;总AMPK和p-AMPK蛋白表达较对照组升高;与肝纤维化模型组比较,鳖甲煎丸治疗组肝病理改变、纤维组织增生和α-SMA阳性表达程度降低,AMPK和p-AMPK蛋白表达均降低(P<0.05)。结论:鳖甲煎丸能抑制HSC激活、减缓肝纤维化进程,其作用机制与抑制AMPK蛋白表达和活性有关。

关键词： AMP依赖的蛋白激酶肝星状细胞肝纤维化鳖甲煎丸

同方期刊数据库博看期刊

MicroRNA-105-5p/PPM1A对胰腺癌PANC-1细胞增殖、迁移及侵袭的机制研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国现代医学杂志 2024年第15期34卷 41-51页

作者：赵丹黄金平张亚楠张荣花熊亚南王梅梅刘志勇章广玲华北理工大学基础医学院(河北省慢性疾病重点实验室) 河北唐山063210 华北理工大学附属医院医学部河北唐山063000 华北理工大学附属医院(河北省医工融合精准医疗重点实验室) 河北唐山063000

目的探讨microRNA-105-5p(miR-105-5p)/PPM1A对胰腺癌PANC-1细胞增殖、迁移、侵袭及上皮细胞向间质转化(EMT)进程的影响及其潜在作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-105-5p在人胰腺导管上皮细胞hTRET-HPNE和胰腺... 详细信息

目的探讨microRNA-105-5p(miR-105-5p)/PPM1A对胰腺癌PANC-1细胞增殖、迁移、侵袭及上皮细胞向间质转化(EMT)进程的影响及其潜在作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-105-5p在人胰腺导管上皮细胞hTRET-HPNE和胰腺癌细胞PANC-1、AsPC-1、Bxpc-3中的表达。利用Kaplan-Meier Plotter在线工具探讨miR-105-5p与胰腺癌患者预后的关系。在PANC-1细胞中分别转染mimic NC、miR-105-5p mimic、inhibitor NC、miR-105-5p inhibitor。CCK-8法、划痕实验、Transwell实验分别检测各组细胞的增殖、迁移及侵袭能力;qRT-PCR检测miR-105-5p对E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、ZEB1表达的影响。生物信息学方法预测miR-105-5p的候选靶基因,并对候选靶基因进行GO和KEGG富集分析。双萤光素酶实验检测miR-105-5p与PPM1A的靶向关系。qRT-PCR检测在PANC-1细胞中分别转染mimic NC、miR-105-5p mimic、inhibitor NC、miR-105-5p inhibitor后PPM1A的表达。免疫荧光实验检测PPM1A在人胰腺导管上皮细胞hTRET-HPNE和胰腺癌细胞PANC-1、AsPC-1、Bxpc-3中的表达。在PANC-1细胞中分别转染mimic NC+pcDNA3.1、mimic NC+pcDNA3.1-PPM1A、miR-105-5p mimic+pcDNA3.1-PPM1A后,通过挽救实验进一步研究miR-105-5p inhibitor与PPM1A在胰腺癌细胞中的相互作用关系。结果胰腺癌细胞PANC-1、AsPC-1、Bxpc-3中miR-105-5p mRNA相对表达量高于hTRET-HPNE细胞中miR-105-5p mRNA相对表达量(P<0.05),以PANC-1细胞中的相对表达量最高。miR-105-5p高表达与胰腺癌患者的不良预后有关(P<0.05)。miR-105-5p mimic组细胞增殖、迁移及侵袭能力均高于mimic NC组(P<0.05)。与mimic NC比较,miR-105-5p mimic下调E-cadherin mRNA表达,上调N-cadherin、Vimentin、ZEB1 mRNA表达(P<0.05)。转染miR-105-5p inhibitor后得到相反的结果。双萤光素酶实验证实miR-105-5p与PPM1A存在靶向关系。免疫荧光实验显示在胰腺癌细胞PANC-1、AsPC-1、Bxpc-3中PPM1A的荧光强度低于人胰腺导管上皮细胞hTRET-HPNE(P<0.05)。挽救实验表明miR-105-5p可部分挽救PPM1A对PANC-1细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用(P<0.05)。结论miR-105-5p靶向PPM1A促进胰腺癌PANC-1细胞的增殖、迁移及侵袭。

关键词：胰腺癌 microRNA-105-5p PANC-1细胞 PPM1A 迁移侵袭

泛素特异性蛋白酶7对乙肝细胞中凋亡因子的调控作用研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国临床药理学杂志 2022年第10期38卷 1078-1082页

作者：王雪马玉杨璐铭王林裴盛斐章广玲冯福民华北理工大学公共卫生学院河北唐山063210 华北理工大学临床医学院河北唐山063210 华北理工大学生命科学学院河北唐山063210

目的研究泛素特异性蛋白酶7(USP7)在肝细胞中对凋亡因子的调控作用。方法将HepG2.2.15细胞随机分为3组:对照组,转染组和阴性对照组。对照组为常规培养的细胞;转染组转染si-USP7,阴性对照组使用10%siRNA-mate转染试剂进行处理,各组均处理... 详细信息

目的研究泛素特异性蛋白酶7(USP7)在肝细胞中对凋亡因子的调控作用。方法将HepG2.2.15细胞随机分为3组:对照组,转染组和阴性对照组。对照组为常规培养的细胞;转染组转染si-USP7,阴性对照组使用10%siRNA-mate转染试剂进行处理,各组均处理72 h。实时荧光定量聚合酶链反应(Q-PCR)检测USP7、P53、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)的mRNA表达水平;蛋白质印迹法检测USP7、P53蛋白的表达情况;酶联免疫法检测谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、乙型肝炎病毒(HBV)DNA、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎核心e抗原(HBeAg)的表达量。结果对照组、转染组、阴性对照组USP7 mRNA表达水平分别为1.74±0.01,1.00±0.06和1.73±0.01;P53 mRNA表达水平分别为1.94±0.01,0.81±0.03和1.92±0.01;Bax mRNA表达水平分别为6.28±0.04,1.81±0.16,6.26±0.04;蛋白结果的趋势与基因一致。以上3组的HBV-DNA表达量分别为(1032.68±2.96),(541.92±6.78)和(1035.44±1.86)pg·mL^(-1);HBsAg表达量分别为(905.19±1.41),(246.23±7.04)和(902.56±4.74)U·mL^(-1);HBeAg表达量分别为(45.28±0.06),(10.09±0.68)和(45.82±0.36)U·mL^(-1)。以上指标,转染组与对照组比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论USP7的下调能减少P53的表达,使Bax表达下降,并降低乙型肝炎病毒的复制和细胞凋亡。

关键词：乙型病毒性肝炎泛素化泛素特异性蛋白酶7 凋亡去泛素化修饰

miR-192-5p通过靶向ZEB2调控胰腺癌PANC-1细胞的恶性生物学行为

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国肿瘤生物治疗杂志 2022年第10期29卷 879-888页

作者：韩向阳张荣花李玉凤苏静慧曹雨萌黄金平章广玲李景武华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病重点实验室河北唐山063210 华北理工大学临床医学院河北省医工融合精准医疗重点实验室河北唐山063210 唐山市人民医院肿瘤研究所河北省分子肿瘤学重点实验室河北唐山063001

目的:探讨miR-192-5p靶向E盒锌指结合同源框2(ZEB2)对胰腺癌PANC-1细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响及其作用机制。方法:利用TCGA数据库数据分析miR-192-5p和ZEB2在胰腺癌组织中的表达及两者的相关性。采用qPCR法和WB法... 详细信息

目的:探讨miR-192-5p靶向E盒锌指结合同源框2(ZEB2)对胰腺癌PANC-1细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响及其作用机制。方法:利用TCGA数据库数据分析miR-192-5p和ZEB2在胰腺癌组织中的表达及两者的相关性。采用qPCR法和WB法分别检测人正常胰腺上皮细胞HPNE和胰腺癌PANC-1细胞中miR-192-5p和ZEB2的表达水平。利用脂质体转染技术转染PANC-1细胞,实验分为miR-192-5p mimic组、Mimic NC组、miR-192-5p inhibitor组、Inhibitor NC组、Mimic NC+pcDNA3.1组、miR-192-5p mimic+pcDNA3.1组、miR-192-5p mimic+pcDNA3.1-ZEB2组。CCK-8法、克隆形成、划痕愈合、Transwell实验分别检测转染PANC-1细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力。qPCR法、WB法、双重免疫荧光实验检测PANC-1细胞中ZEB2、E-cadherin、vimentin的表达水平。通过生物信息学网站预测miR-192-5p的靶基因,并利用双荧光素酶报告基因实验验证miR-192-5p对靶基因的调控作用。结果:胰腺癌组织中ZEB2的表达显著高于正常胰腺组织(P<0.01),且胰腺癌组织中miR-192-5p和ZEB2表达呈负相关(r=-0.419,P<0.01)。与HPNE细胞比较,PANC-1细胞中miR-192-5p低表达、ZEB2蛋白高表达(均P<0.01)。miR-192-5p过表达后,PANC-1细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力均显著降低,E-cadherin的mRNA和蛋白表达均上调、vimentin和ZEB2 mRNA和蛋白表达均下调;而抑制miR-192-5p后得到了相反的结果(P<0.05或P<0.01)。miR-192-5p靶向调控ZEB2的表达,过表达ZEB2可部分逆转上调miR-192-5p对PANC-1细胞增殖、迁移、侵袭和EMT进程的抑制作用。结论:miR-192-5p通过靶向ZEB2调控胰腺癌PANC-1细胞的恶性生物学行为。

关键词：胰腺癌 miR-192-5p E盒锌指结合同源框2 PANC-1细胞增殖迁移侵袭上皮间质转化

miR-194-5p通过Wnt5a抑制肝星状细胞活化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

河北大学学报（自然科学版） 2023年第2期43卷 179-187页

作者：李亚琦张荣花刘雨潭曹雨萌熊亚南章广玲华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病重点实验室河北唐山063200 华北理工大学临床医学院河北省医工融合精准医疗重点实验室河北唐山063200

为研究miR-194-5p对肝星状细胞(HSCs)活化的影响及作用机制,采用CCK-8、β-半乳糖苷酶染色、Transwell、划痕、集落形成实验和RT-qPCR、Western blot分别检测miR-194-5p对LX-2细胞生物学特性、细胞活化标志物和靶基因表达的影响,并用生... 详细信息

为研究miR-194-5p对肝星状细胞(HSCs)活化的影响及作用机制,采用CCK-8、β-半乳糖苷酶染色、Transwell、划痕、集落形成实验和RT-qPCR、Western blot分别检测miR-194-5p对LX-2细胞生物学特性、细胞活化标志物和靶基因表达的影响,并用生物信息学和双荧光素酶报告实验确定miR-194-5p靶基因.结果显示:miR-194-5p抑制LX-2细胞增殖、细胞集落形成、迁移能力以及LX-2细胞中活化标志物的表达,促进LX-2细胞衰老;Wnt5a为miR-194-5p的直接靶基因.研究表明miR-194-5p通过靶定Wnt5a抑制LX-2细胞活化,miR-194-5p和Wnt5a可能是治疗肝纤维化新的靶点.

关键词： miR-194-5p 肝纤维化肝星状细胞活化增殖迁移

AKT3逆转miR-22-3p/29a-3p对LX-2细胞活化的协同抑制作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

安徽医科大学学报 2023年第7期58卷 1132-1139页

作者：张荣花张亚楠韩向阳崔笑妍田晓丽章广玲刘志勇华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病基础医学重点实验室唐山063210 唐山市截瘫疗养院唐山063000 华北理工大学临床医学院河北省医工融合精准医疗重点实验室唐山063000 华北理工大学医学部唐山063210

目的探讨丝氨酸/苏氨酸激酶3(AKT3)能否逆转miR-22-3p/29a-3p对人肝星状细胞LX-2活化的协同抑制作用。方法利用TargetScan、Starbase、miRDB和DIANA预测miR-22-3p和miR-29a-3p的共同靶基因,对筛选出的靶基因进行KEGG、GO和蛋白-蛋白互作(PPI)分析;RNAhybrid分析候选靶基因与两个miRNAs结合的自由能,并通过双萤光素酶报告实验确定它们的靶向关系;采用CCK-8、Transwell和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测LX-2细胞增殖、迁移以及纤维化标志物的表达。结果miR-22-3p和miR-29a-3p的共同靶基因有24个,且它们富集在与肝纤维化相关的信号通路和生物学过程;候选靶基因AKT3与miR-22-3p和miR-29a-3p的结合自由能分析结合双萤光素酶实验结果提示AKT3是miR-22-3p和miR-29a-3p的共同靶基因;miR-22-3p和miR-29a-3p mimics能够单独或协同抑制LX-2细胞的增殖、迁移以及纤维化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和I型胶原α1链(COL1A1)mRNA的表达(P<0.05),AKT3过表达后能够逆转miR-22-3p和miR-29a-3p mimics对LX-2细胞的上述协同抑制作用(P<0.05)。结论AKT3过表达可逆转miR-22-3p和miR-29a-3p对LX-2细胞活化的协同抑制作用。

关键词： LX-2 丝氨酸/苏氨酸激酶3 miR-22-3p miR-29a-3p 增殖迁移