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大豆疫霉菌功能基因组研究

大豆疫霉菌功能基因组研究

双功能物质:多聚体科学开辟细胞治疗研究新领域

中国菌物学会2009学术年会

作者：王永林李爱宁赵伟董莎萌窦道龙张正光华辰雷郑小波王源超南京农业大学植物保护学院

大豆疫霉（Phytophthora sojae）侵染大豆引起的疫霉根腐病是大豆生产的毁灭性病害之一。大豆疫霉全基因组和大量的EST数据已公布,为开展该病原菌的功能基因组研究提供了便利,但是由于疫霉基因组大且结构复杂,疫霉遗传转化体系建立困难... 详细信息

大豆疫霉（Phytophthora sojae）侵染大豆引起的疫霉根腐病是大豆生产的毁灭性病害之一。大豆疫霉全基因组和大量的EST数据已公布,为开展该病原菌的功能基因组研究提供了便利,但是由于疫霉基因组大且结构复杂,疫霉遗传转化体系建立困难重重,疫霉功能基因组研究进展十分缓慢。本研究组通过多年的探索,建立了大豆疫霉菌的稳定和瞬时基因沉默体系,建立了基于新一代RNA测序技术的高通量基因表达分析平台（Solexa）,并综合利用这些技术,就大豆疫霉对环境信号的感知、发育与致病过程的功能基因组开展了系统的研究。1、瞬时基因沉默体系的建立:本研究组在国际上首次运用dsRNA介导的瞬时基因沉默技术对大豆疫霉菌的目标基因进行沉默研究。选用了大豆疫霉的一个无毒基因Avr3a和细胞周期调控子CDC14作为研究对象,将外源合成的特定dsRNA转化到PEG/CaC12介导的原生质体中来诱导特定基因的沉默并建立了大豆疫霉的瞬时转化体系。dsRNA介导的瞬时转化所得到的转化子在第8天开始诱导特异基因的沉默,12天左右沉默效率最高,第17天开始恢复,沉默效率在50%以上的转化子约占75%以上,基因沉默效率最高可以达到95%以上。表型分析证明Avr3a沉默的转化子接种含有对应Rps3a的植株,其致病力明显强于受体菌株;CDC14的沉化子不能形成游动孢子囊。分析证明Avr3a沉默的转化子中CDC14表达没有显默转著变化,表明dsRNA介导的基因沉默具有序列特异性。本研究表明dsRNA介导的大豆疫霉瞬时基因沉默系统可以用来分析基因的功能,为大豆疫霉功能基因组研究提供了重要工具。2、大豆疫霉趋化性的分子机制:根据基因组、EST数据,Solexa以及Real-time PCR数据对编码大豆疫霉G蛋白和GPCR的基因进行分析,结果显示G蛋白α亚基PsGPA1和GPCR蛋白PsGPR11在游动孢子相关阶段特异表达。我们利用稳定遗传转化系统获得PsGPA1和PsGPR11基因的沉默突变体。发现PsGPA1基因沉默突变体游动孢子对大豆根部分泌的异黄酮类物质的趋向性明显被削弱,游动孢子的游动速度和游动距离大大降低,游动时将明显缩短,休止胞的萌发能力明显下降。此外突变体游动孢子的致病性较野生型明显下降,这种表型是由于突变体游动孢子的趋化性、游动能力和休止胞萌发能力的下降导致的。而PsGPR11的沉默突变体则出现游动孢子释放率显著下降,50%的孢子囊未能完全释放出游动孢子,休止孢萌发能力明显下降,突变体的游动孢子丧失了对大豆的致病性。这是国际上首次报道大豆疫霉菌G蛋白信号途径参与该菌独特的发育和致病过程。3、大豆疫霉侵染过程的信号传导:对采用Solexa技术建立的大豆疫霉转录组数据并结合生物信息分析方法找到了一系列在大豆疫霉侵染寄主过程中特异表达的基因,其中包括一个在大豆疫霉游动孢子及休止孢阶段特异表达的促有丝分裂原活化的蛋白激酶编码基因PsSAK1和几个重要的转录因子等。PsSAK1与芽殖酵母的Hogl,稻瘟菌Osm1同归属于胁迫诱导的MAPK,但是PsSAK1拥有一个独特的PH结构域。Real-time PCR结果表明PsSAK1受逆境盐胁迫及氧化压力胁迫诱导上调表达。对两个PsSAK1沉默转化子的表性分析发现,PsSAK1的沉默并没有影响大豆疫霉的菌丝生长速率,菌丝,菌落及游动孢子囊形态,游动孢子和卵孢子产量,但突变体对高渗透的抗性显著下降,此外该基因的突变严重影响了游动孢子的发育及侵染寄主的能力,游动孢子休止显著提前,休止孢萌发率下降,侵染时芽管相对于野生型显著延长,顶端附着胞产量减少且几乎不能侵入寄主,导致大豆疫霉致病性丧失。这是首次报道MAPK参与调控大豆疫霉发育及致病过程。目前本研究组正以PsGPA1等几个突变体为材料,利用酵母双杂交技术、Solexa RNA测序技术和蛋白质二维电泳等技术、进一步研究G蛋白和MAPK信号途径在大豆疫霉菌发育和致病过程中的作用。这些研究将助于在分子和基因组水平上解释疫霉菌病害的发生机制,并针对性地开发疫霉菌病害的控制措施。

关键词：大豆疫霉基因沉默趋化性 G蛋白蛋白激酶

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生物技术通报 2002年第6期18卷 43-43页

作者：彭昊窦道龙

ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＮＥＷＳ ,2 0 0 1年 2 1卷 2 8期第 6页报道 :虽然干细胞治疗的前景被大众媒体炒得沸沸扬扬 ,但是清楚干细胞生物学复杂性的研究者们仍保持着清醒的头脑。一个仍有待解决的问题是如何让细胞在体内按照指定... 详细信息

ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＮＥＷＳ ,2 0 0 1年 2 1卷 2 8期第 6页报道 :虽然干细胞治疗的前景被大众媒体炒得沸沸扬扬 ,但是清楚干细胞生物学复杂性的研究者们仍保持着清醒的头脑。一个仍有待解决的问题是如何让细胞在体内按照指定的方式发育。虽然向细胞培养皿中添加生长因子类物质很容易 ,但是要想对活体安全的实施上述操作则困难得多 ,因为毫无精确性可言。现在 ,多聚体设计中一项很小却很引人注目的进展将可能在某天实现研究者们的愿望。密执安大学 (ＡｎｎＡｒｂｏｒ ,密执安州 )ＤａｖｉｄＭｏｏｎｅｙ的实验室研制出一种称为ＰＬＧ的多聚体 ,它不仅可以同时携带一种以上的生长因子 ,而且能够分别

关键词：多聚体干细胞治疗无精体内生长因子活体细胞培养研究者大众媒体科学

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生物防御:可以从中获利吗

生物技术通报 2002年第6期18卷 45-45页

作者：彭昊窦道龙

ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＮＥＷＳ 2 0 0 1年 2 1卷 2 8期第 6页报道 :在 9月 11日以前 ,生物防御最多只是生物技术工业的一小部分而已。现在这种状况会发生大的变化吗 ,或者公司只会按部就班地去做客户要求他们干的事情 ?虽然市场... 详细信息

ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＮＥＷＳ 2 0 0 1年 2 1卷 2 8期第 6页报道 :在 9月 11日以前 ,生物防御最多只是生物技术工业的一小部分而已。现在这种状况会发生大的变化吗 ,或者公司只会按部就班地去做客户要求他们干的事情 ?虽然市场环境并不宽松 ,但是相对而言 ,生物技术工业的前景不算糟糕。今年以来 ,该行业增长了 6 6亿美元 ,再加上去年 32 0亿美元的增长量 ,生物技术看起来状况良好。从现在开始 ,投资者们的钱是否只会流向那些和政府签订了疫苗生产、抗病毒或其检测和诊断技术合同的公司 ?很可能不会 ,但是很多公司都将考虑他们的技术能否应用于生物防御。如同在疫苗领域一样 ,围

关键词：生物防御生物技术工业投资政府项目军用市场民用市场

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NIH新闻

生物技术通报 2002年第5期18卷 50-50页

作者：彭昊窦道龙

ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＮＥＷＳ 2 0 0 1年 2 1卷 2 8期第 5页报道 :上周从美国国立卫生研究院 (ＮＩＨ ,Ｂｅｔｈｅｓｄａ ,马里兰州 )传来了令干细胞和基因治疗研究者们兴奋的好消息 ,该院在其网站上公布了研究者们期待已久的人... 详细信息

ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＮＥＷＳ 2 0 0 1年 2 1卷 2 8期第 5页报道 :上周从美国国立卫生研究院 (ＮＩＨ ,Ｂｅｔｈｅｓｄａ ,马里兰州 )传来了令干细胞和基因治疗研究者们兴奋的好消息 ,该院在其网站上公布了研究者们期待已久的人类胚胎干细胞注册表和相关基金申请的信息 ,ＮＩＨ还将在基因载体实验室提供免费的毒理学研究项目 ,这使基因治疗研究者深受鼓舞。ＮＩＨ将受理的研究对象是注册表中所列干细胞系方面的基金申请 ,并将在接下来的几个月里发布申请要求 (ＲＦＡｓ)和程序通告 (ＰＡｓ)。在注册表中有 72个可用的干细胞系 ,包括原先已经注册的 6 4个 ,Ｇｅｒｏｎ公司 (Ｍｅｎｌ

关键词：美国国立卫生研究院 NIH 干细胞基因治疗研究项目科研基金申请

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Decode公司在基因研究方面获得新突破

生物技术通报 2002年第5期18卷 48-48页

作者：王旭静窦道龙

ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＮＥＷＳ 2 0 0 1年 2 1卷 2 8期第 1页报道 :目前 ,Ｄｅｃｏｄｅ公司 (雷克雅未克 ,冰岛 )的遗传学家们以主要药物的研发为目标共发现了 35 0个基因 ,公司计划将这些基因同该公司已有的药物开发项目结合起... 详细信息

ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＮＥＷＳ 2 0 0 1年 2 1卷 2 8期第 1页报道 :目前 ,Ｄｅｃｏｄｅ公司 (雷克雅未克 ,冰岛 )的遗传学家们以主要药物的研发为目标共发现了 35 0个基因 ,公司计划将这些基因同该公司已有的药物开发项目结合起来进行研究。这些基因编码Ｇ蛋白偶联受体、激酶、蛋白酶、离子通道蛋白、核受体和谷胺酰氨转移酶等多种蛋白 ,公司计划利用它们的临床遗传研究优势结合 4 0多种常见疾病的数据定位这些基因的功能。Ｄｅｃｏｄｅ公司最近另外一个重大突破是作图并定位了一个与后发性帕金森氏病 (帕金森氏病的最普遍的发病形式 )相关的基因 ,这是在后发性帕金森氏病中定位的第一个基因

关键词：药物遗传学疾病相关基因研究进展 Decode公司基因研究

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中药药枕的应用研究进展

中国民间疗法 2023年第23期31卷 101-105页

作者：李烁王红柳杨桂芹唐晓清孙莉琼王长泉窦道龙王康才南京农业大学江苏南京210095

该文利用中国知网、万方数据知识服务平台等,对2011—2022年关于中药药枕的研究类型、应用效果、药枕制法与质量控制等相关研究进行检索,并整理分析,发现药枕疗法多用于治疗失眠、颈椎病、中风、鼻炎等疾病,治疗手段多为药枕或药枕联合... 详细信息

该文利用中国知网、万方数据知识服务平台等,对2011—2022年关于中药药枕的研究类型、应用效果、药枕制法与质量控制等相关研究进行检索,并整理分析,发现药枕疗法多用于治疗失眠、颈椎病、中风、鼻炎等疾病,治疗手段多为药枕或药枕联合其他外治法。

关键词：中药药枕临床应用药枕制作作用机制

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Onyx公司倾其所有集中研发抗肿瘤产品

生物技术通报 2002年第5期18卷 49-49页

作者：王旭静窦道龙

ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＮＥＷＳ 2 0 0 1年 2 1卷 2 8期第 2页报道 :目前 ,ＯｎｙｘＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ(Ｒｉｃｈｍｏｎｄ ,ＣＡ)公司为了集中精力进行癌症治疗的研究 ,公布了两个已经商品化的新肿瘤病毒的资料 ,并出... 详细信息

ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＮＥＷＳ 2 0 0 1年 2 1卷 2 8期第 2页报道 :目前 ,ＯｎｙｘＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ(Ｒｉｃｈｍｏｎｄ ,ＣＡ)公司为了集中精力进行癌症治疗的研究 ,公布了两个已经商品化的新肿瘤病毒的资料 ,并出售了其小分子药物研发项目的部分资产 ,同时还终止了其它研究的资金供应。该公司的新产品是第二代肿瘤病毒。Ｏｎｙｘ -Ｏ15 (一种设计的腺病毒 )是该公司在头、颈部癌症第三阶段实验以及其他癌症第一、二阶段实验的第一代主流产品 ,它的第二代产品是靶标治疗病毒 (ＡＴＶ) ,它整合有胞嘧啶脱氨酶基因 ,胞嘧啶脱氨酶能将前体药物氟胞嘧啶转变成一种重要的化学治疗

关键词： Onyx公司腺病毒小分子药物研发抗肿瘤产品

课题2“重要入侵物种与寄主的适应性互作与进化”主要研究进展

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课题2“重要入侵物种与寄主的适应性互作与进化”主要研究进展

第三届全国生物入侵大会

作者：郑小波王源超冯洁彭德良强胜窦道龙洪晓月胡白石李保平刘太国周益林李世访董莎萌钱国良

以典型外来入侵生物大豆疫霉菌、小麦矮腥黑穗病菌、松材线虫、紫茎泽兰及潜在入侵生物梨火疫病菌等为研究对象,围绕"入侵物种与寄主的适应性互作与进化机制"科学问题,综合分子生物学、分子生态学、生物化学、遗传学和生物信息学等多学... 详细信息

以典型外来入侵生物大豆疫霉菌、小麦矮腥黑穗病菌、松材线虫、紫茎泽兰及潜在入侵生物梨火疫病菌等为研究对象,围绕"入侵物种与寄主的适应性互作与进化机制"科学问题,综合分子生物学、分子生态学、生物化学、遗传学和生物信息学等多学科手段,通过研究入侵病原菌的适应性进化及相关基因表达谱、入侵病原菌毒性效应分子抑制寄主防卫反应功能及其适应性进化机制以及入侵生物寄主谱扩张的生理机制和遗传基础,明确入侵病原生物对本地寄主的适应机制:阐明入侵生物定殖与扩张成灾的分子生态学机制

关键词：入侵物种适应性进化寄主

来源： cnki会议评论

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浆细胞性乳腺炎的中西医诊疗进展

临床医学进展 2024年第6期14卷 562-567页

作者：李静孙晓龙黑龙江中医药大学研究生院黑龙江哈尔滨黑龙江中医药大学附属第一医院外二科黑龙江哈尔滨

浆细胞性乳腺炎(plasmacellmastitis, PCM)是最为常见的非哺乳期乳腺炎之一,好发于中年女性,是一种慢性炎症性疾病。其原因及发病机制尚未明确,因此治疗单纯肿块型相对容易,但其他类型治疗不当易形成脓肿、瘘管或窦道等各种并发症,致病... 详细信息

浆细胞性乳腺炎(plasmacellmastitis, PCM)是最为常见的非哺乳期乳腺炎之一,好发于中年女性,是一种慢性炎症性疾病。其原因及发病机制尚未明确,因此治疗单纯肿块型相对容易,但其他类型治疗不当易形成脓肿、瘘管或窦道等各种并发症,致病情迁延难愈,复发率高,故成为了乳腺疾病治疗的难题之一,给广大女性的身心健康带来了极大困扰。本文通过搜集国内外文献,从临床表现、诊断和中西医治疗进行系统综述,以为临床中更好地诊断及治疗本病提供思路和方法。

关键词：浆细胞性乳腺炎诊断中西医治疗综述