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清心益智助眠药枕基础方对失眠小鼠心脏、肝脏及脑组织的影响

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南京农业大学学报 2024年

作者：曹亿诺李烁孙莉琼杨桂芹王红柳吴健唐晓清窦道龙南京农业大学园艺学院南京农业大学校医院南京农业大学前沿交叉研究院

[目的]本文旨在阐明清心益智助眠药枕基础方（交泰丸、二至丸、聪明汤）对失眠小鼠的药效作用。[方法]以对氯苯丙氨酸（DL-4-chlorophenylalanine，PCPA）为诱导剂，建立小鼠失眠模型，试验期间观察小鼠行为学变化，通过观察大鼠肝、心... 详细信息

[目的]本文旨在阐明清心益智助眠药枕基础方（交泰丸、二至丸、聪明汤）对失眠小鼠的药效作用。[方法]以对氯苯丙氨酸（DL-4-chlorophenylalanine，PCPA）为诱导剂，建立小鼠失眠模型，试验期间观察小鼠行为学变化，通过观察大鼠肝、心、脑组织的病理变化，测定肝组织的丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性、心组织的去甲肾上腺素（NE）含量、脑组织的乙酰胆碱（Ach）含量等病理生化指标，初步评价药枕基础方对PCPA致失眠模型小鼠的影响。[结果]药枕基础方可改善PCPA致失眠小鼠的肝组织、心组织和脑组织病理变化，模型组小鼠肝组织SOD水平、脑组织Ach含量较空白组显著降低（P<0.05），模型组小鼠肝组织MDA水平、心组织NE较空白组显著升高，说明造模成功；药枕基础方组与阳性对照组小鼠肝组织SOD水平和脑组织Ach含量均显著高于模型组；药枕基础方组与阳性对照组小鼠肝组织MDA水平和心组织NE含量均显著低于模型组。[结论]药枕基础方可有效改善PCPA致失眠小鼠的睡眠质量，能显著升高肝组织SOD水平、脑组织的Ach含量，降低肝组织MDA水平以及心组织的NE含量。

关键词：清心益智助眠药枕基础方失眠小鼠心脏肝脏脑

含有丙硫菌唑的纳米化制剂防治小麦赤霉病效果调查

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中国植保导刊 2024年第1期44卷 83-86页

作者：秦萌梁冰窦道龙丁克坚袁蓉刘墨瑶张秀莉王静胡珍娣全国农业技术推广服务中心北京100125 南京善思生态科技有限公司江苏南京210012 南京农业大学植物保护学院江苏南京210095 安徽农业大学植物保护学院安徽合肥230031 江苏省南京市雨花台区农业综合服务中心江苏南京210012

为探究含有丙硫菌唑的纳米化制剂防治小麦赤霉病的效果,在安徽省合肥市开展了施药试验。结果表明,在小麦田单次喷施纳米化的8%丙硫菌唑微乳剂150~180 g(每公顷有效成分用量)后,对赤霉病病穗防效为68.27%~72.76%、病指防效为70.73%~74.6... 详细信息

为探究含有丙硫菌唑的纳米化制剂防治小麦赤霉病的效果,在安徽省合肥市开展了施药试验。结果表明,在小麦田单次喷施纳米化的8%丙硫菌唑微乳剂150~180 g(每公顷有效成分用量)后,对赤霉病病穗防效为68.27%~72.76%、病指防效为70.73%~74.64%,与常规剂型对照30%丙硫菌唑可分散油悬浮剂225 g处理的病穗防效63.14%、病指防效71.2%相比,并无显著差异,但前者有效成分用量较对照药剂减少了20%~33%;单次喷施纳米化的12%丙硫菌唑·戊唑醇微乳剂180~240 g后,病穗防效和病指防效均高于对照药剂。试验设计的各施药处理均可有效控制真菌毒素分泌、提高旗叶叶绿素含量、提升小麦籽粒和面粉的品质,在这些方面,丙硫菌唑纳米化制剂处理的综合表现也优于常规制剂。

关键词：赤霉病丙硫菌唑纳米化制剂防治效果

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点蜂缘蝽效应子新型筛选体系的建立及应用

应用昆虫学报 2024年第1期61卷 49-61页

作者：鲁王善李继芬董玉妹沈丹宇窦道龙夏爱南京农业大学植物保护学院南京210095

【目的】建立以荧光素酶为报告基因且调控不同植物抗性相关通路的点蜂缘蝽效应子筛选新体系,并应用于点蜂缘蝽效应子的研究。【方法】通过对点蜂缘蝽Riptortuspedestris取食前后的大豆叶片转录组比较分析,挑选出了4个点蜂缘蝽取食后高... 详细信息

【目的】建立以荧光素酶为报告基因且调控不同植物抗性相关通路的点蜂缘蝽效应子筛选新体系,并应用于点蜂缘蝽效应子的研究。【方法】通过对点蜂缘蝽Riptortuspedestris取食前后的大豆叶片转录组比较分析,挑选出了4个点蜂缘蝽取食后高度上调表达且影响不同信号通路的大豆抗性相关基因。其中Gm^(2)参与异黄酮代谢、Gm3参与生长素和硫苷代谢、Gm6参与免疫信号识别和Gm8参与茉莉酸生物合成。利用PCR扩增4个基因的启动子序列并构建到pGreen-LUC载体上。构建成功的载体转化到大肠杆菌中,再利用根癌农杆菌注射在本氏烟中瞬时过表达建立报告系统。其次,在烟草叶片上表达点蜂缘蝽候选效应子12h后再分别表达报告系统。通过观察效应子对荧光素酶表达活性的影响来研究效应子的功能。【结果】琼脂糖凝胶电泳和测序证明了PCR成功扩增了4个抗性相关基因的启动子。荧光素酶报告基因检测、酶标仪酶活检测以及Western Blot验证了4个基因启动子在烟草叶片上成功表达。昆虫取食、机械处理和MeJA处理验证了该报告系统的可行性。最后利用该筛选体系对9个点蜂缘蝽效应子进行了筛选,结果显示9个点蜂缘蝽效应子对4个报告基因的表达有不同的调控作用。【结论】成功建立了以荧光素酶为报告基因的点蜂缘蝽效应子筛选新体系,该体系可应用于点蜂缘蝽效应子的大量筛选,且具有高效、快速和操作简易等特点,为其他昆虫效应子的研究提供了新思路。

关键词：点蜂缘蝽荧光素酶大豆基因启动子昆虫效应子信号通路烟草瞬时表达

植物挥发性有机化合物在农业病害防控中的潜能与应用

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农药学学报 2022年第4期24卷 682-691页

作者：马迪成窦道龙刘峰中国农业大学植物保护学院北京100193 山东农业大学植物保护学院山东泰安271018

植物病害对全球粮食安全造成严重威胁,而病原物对杀菌剂日益严重的抗药性问题和杀菌剂施用导致的环境暴露风险极大限制了传统杀菌剂的开发。植物释放大量挥发性有机化合物(volatile organic compounds,VOCs)到大气中作为植物与周围环境... 详细信息

植物病害对全球粮食安全造成严重威胁,而病原物对杀菌剂日益严重的抗药性问题和杀菌剂施用导致的环境暴露风险极大限制了传统杀菌剂的开发。植物释放大量挥发性有机化合物(volatile organic compounds,VOCs)到大气中作为植物与周围环境交流互动的信号分子。植物VOCs可以保护自身免受食草动物的侵害,或吸引传粉者和种子传播者,它们还能够直接抑制病原菌的生长或者激活植物的防御系统。本文综述了植物VOCs在生物合成、收集分析、诱导释放、对病原微生物的活性和诱导植物免疫反应等方面的研究进展;总结了典型绿叶挥发物反-2-己烯醛的抑菌和抗性诱导机理;归纳和展望了植物VOCs在田间应用的局限性和今后的研究方向,可为该类化合物在可持续病害防控中的应用提供帮助。

关键词：植物挥发性有机化合物生物合成分析方法诱导释放抑菌活性和机理植物免疫应用潜力

适用于大豆实时荧光定量PCR分析的内参基因的筛选和验证

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南京农业大学学报 2015年第5期38卷 787-795页

作者：曾文韬柴春月窦道龙南京农业大学植物保护学院江苏南京210095 南阳师范学院生命科学与技术学院河南南阳473061

[目的]选择合适的内参基因是实时荧光定量PCR(qRT-PCR)研究的关键。大豆由于基因组复杂等原因,内参基因的选择尤为重要。[方法]结合实验室先前试验结果及相关文献,选择了10个持家基因(Cons4、ACT11、TUA、Cons15、ACT20、Cons7、CYP2、C... 详细信息

[目的]选择合适的内参基因是实时荧光定量PCR(qRT-PCR)研究的关键。大豆由于基因组复杂等原因,内参基因的选择尤为重要。[方法]结合实验室先前试验结果及相关文献,选择了10个持家基因(Cons4、ACT11、TUA、Cons15、ACT20、Cons7、CYP2、Cons6、Tubulin and ELF1B),依次用3个统计学软件Ge Norm、Norm Finder和Best Keeper进行综合分析,研究其在大豆不同组织和大豆疫霉侵染不同时间点根中的表达稳定性。[结果]Cons4、ACT11和TUA在大豆疫霉侵染过程中的大豆根中表达稳定性最好,而Tubulin和ELF1B在大豆的所有样品中表达稳定性都较差。[结论]Cons4、ACT11、TUA可以推荐为大豆疫霉侵染病程中大豆基因表达qRT-PCR分析的首选内参基因;Cons15、CYP2、Cons4可以推荐为研究苗期大豆不同组织中基因表达qRT-PCR分析的内参基因。

关键词：大豆实时荧光定量PCR 内参基因大豆疫霉诱导表达

转棉花Gbve1基因拟南芥抗黄萎菌的细胞学机制分析

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南京农业大学学报 2014年第2期37卷 53-58页

作者：李红娟刘廷利刘莉张保龙窦道龙南京农业大学植物保护学院/农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室江苏南京210095 江苏省农业科学院农业生物技术研究所江苏南京210014

Gbve1是海岛棉中的1个抗棉花黄萎菌基因,前期研究表明它能介导棉花与拟南芥对落叶型与非落叶型黄萎菌的抗性。为了揭示该基因的作用机制,对其细胞定位进行了研究。结果表明:该基因定位在植物细胞膜上;并检测了胼胝质沉积和活性氧积累情... 详细信息

Gbve1是海岛棉中的1个抗棉花黄萎菌基因,前期研究表明它能介导棉花与拟南芥对落叶型与非落叶型黄萎菌的抗性。为了揭示该基因的作用机制,对其细胞定位进行了研究。结果表明:该基因定位在植物细胞膜上;并检测了胼胝质沉积和活性氧积累情况,发现转基因拟南芥在黄萎菌侵染后胼胝质沉积,过氧化氢含量明显高于对照植株。推测:Gbve1是1个膜定位蛋白基因,它能响应黄萎菌的侵染,诱导拟南芥产生抗病性。

关键词：大丽轮枝菌 Gbve1基因拟南芥亚细胞定位抗病机制

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杨树溃疡病测报技术的研究

西北林学院学报 1997年第3期12卷 45-51页

作者：赵仕光景耀王颖窦道龙杨陵西北林学院森林资源保护系深圳蛇口动植物检疫局

通过在西北林学院苗圃的北京杨上进行孢子捕捉和病情调查，利用气象因子中的温度（Ｘ１）、湿度（Ｘ２）、降雨量（Ｘ３）、温湿比（Ｘ６）、雨温比（Ｘ７）、雨湿比（Ｘ８）以及树皮相对膨胀度ＲＴ％（Ｘ４）和孢子数（Ｘ５）来分别预... 详细信息

通过在西北林学院苗圃的北京杨上进行孢子捕捉和病情调查，利用气象因子中的温度（Ｘ１）、湿度（Ｘ２）、降雨量（Ｘ３）、温湿比（Ｘ６）、雨温比（Ｘ７）、雨湿比（Ｘ８）以及树皮相对膨胀度ＲＴ％（Ｘ４）和孢子数（Ｘ５）来分别预测４０ｄ后的病情指数（ｙ）以及第四个１０天内新出现病斑数量（ｙ′）和病情指数增长值（ｙ″）。利用ＳＹＳＴＡＴ软件分别做多元线性回归、逐步回归和非线性回归，得到三个模型，经过实际病情验证。

关键词：杨树溃疡病测报技术回归模型

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芥菜生物熏蒸对烟草疫霉菌的抑制作用

中国生态农业学报（中英文） 2023年第4期31卷 567-576页

作者：孙迪贺依琳沈丹宇窦道龙田月娥河南科技大学园艺与植物保护学院洛阳471000 南京农业大学植物保护学院南京210095

为了探究安全和环境友好的烟草黑胫病的绿色防控方式,本研究用‘地隆1号’芥菜采用培养皿培养方法进行生物熏蒸,研究了其对烟草疫霉菌(Phytophthora nicotianae)的抑制作用。采用菌丝生长速率法测定了其对烟草疫霉菌(A2交配型)Pp025菌... 详细信息

为了探究安全和环境友好的烟草黑胫病的绿色防控方式,本研究用‘地隆1号’芥菜采用培养皿培养方法进行生物熏蒸,研究了其对烟草疫霉菌(Phytophthora nicotianae)的抑制作用。采用菌丝生长速率法测定了其对烟草疫霉菌(A2交配型)Pp025菌丝生长的抑制情况,对烟草疫霉菌孢子囊形成及游动孢子释放、孢子萌发及芽管伸长和卵孢子形成的影响,通过电导率和丙二醛含量变化测定了其对烟草疫霉菌细胞膜透性的影响;采用离体叶片法测定了芥菜熏蒸处理后烟草疫霉菌致病力的变化。结果显示:利用‘地隆1号’芥菜进行生物熏蒸可显著抑制烟草疫霉菌的菌丝生长,其半最大效应浓度(EC50)值为0.362 g,75%最大效应浓度(EC75)值为0.499 g,最小抑菌量(MIC)为0.5 g,抑制效果与‘地隆1号’芥菜鲜物质的量呈剂量效应。0.3 g芥菜鲜物质即可显著抑制孢子囊的形成及游动孢子的释放,0.5 g芥菜鲜物质熏蒸处理对Pp025孢子囊形成和游动孢子释放的抑制率分别达72.8%和86.6%;当芥菜鲜物质的量增加为0.7 g时,可完全抑制Pp025孢子囊的形成;0.3 g和0.4 g鲜物质即可分别完全抑制游动孢子萌发及芽管伸长。‘地隆1号’芥菜鲜物质熏蒸处理可减少Pp025卵孢子的形成,且减少幅度与芥菜鲜物质的量呈剂量效应,0.7 g鲜物质熏蒸处理可完全抑制卵孢子的形成。同时,熏蒸处理后增大了菌丝体细胞膜透性并导致膜脂质过氧化,经熏蒸处理150 min后,Pp025的电导率为对照组的2.2倍,丙二醛含量是对照的8.0倍;熏蒸处理减弱了病菌的致病力,与对照相比,病斑减小面积达88.9%。本研究结果表明:‘地隆1号’芥菜鲜物质熏蒸处理对烟草疫霉菌具有很好的抑制和杀灭作用,且熏蒸效果与‘地隆1号’芥菜鲜物质的量呈剂量效应。研究结果对生产上利用‘地隆1号’芥菜防控烟草黑胫病提供了理论依据。

关键词：烟草疫霉菌芥菜生物熏蒸生长发育致病力

本氏烟NbWRKY40亚家族转录因子抗病相关功能研究

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植物病理学报 2016年第6期46卷 791-802页

作者：马丽娜张雄窦道龙柴春月南京农业大学植物保护学院南京210095 南阳师范学院生命科学与技术学院南阳473061

植物WRKY类转录因子的IIa亚类广泛参与调控植物的生物胁迫和非生物胁迫过程。本研究根据拟南芥和普通烟中具有抗病和抗胁迫功能的IIa亚类WRKY40转录因子的序列,利用基因同源克隆法,获得本氏烟中Nb WRKY40基因。序列分析表明在本氏烟中有... 详细信息

植物WRKY类转录因子的IIa亚类广泛参与调控植物的生物胁迫和非生物胁迫过程。本研究根据拟南芥和普通烟中具有抗病和抗胁迫功能的IIa亚类WRKY40转录因子的序列,利用基因同源克隆法,获得本氏烟中Nb WRKY40基因。序列分析表明在本氏烟中有5个属于IIa亚类的基因,其序列之间具有高度相似性。qRT-PCR检测发现Nb WRKY40基因是受寄生疫霉侵染诱导上调表达的基因,通过VIGS技术研究该类基因在本氏烟中的抗病相关功能,用半活体营养型寄生疫霉进行抗病性试验,结果表明Nb WRKY40基因的沉默降低了本氏烟对寄生疫霉的抗性,且在侵染点的细胞坏死程度增强,过氧化氢积累和胼胝质沉积都明显减少。Nb WRKY40基因沉默同样降低了本氏烟对死体营养型灰霉菌的抗性。检测Nb WRKY40基因沉默后4个不同抗病信号通路下游基因的表达,发现基因沉默导致参与抗病和SA途径的PR1b、PR2b基因受疫霉侵染诱导表达的水平明显下降。综上,推测Nb WRKY40基因可能依靠SA介导的信号通路参与调控本氏烟抗病性。

关键词：本氏烟 VIGS 转录因子 NbWRKY40 抗病性