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银杏内酯B对HIBD新生大鼠脑细胞凋亡的影响及其机制研究

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银杏内酯B对HIBD新生大鼠脑细胞凋亡的影响及其机制研究

作者：程萍萍郑州大学

学位级别：硕士

目的通过制备新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(Hypoxic ischemic brain damage,HIBD)实验动物模型,同时给予中药银杏内酯B(Ginkgolide B,GB)、PI3K-AKT信号通路抑制剂(LY294002)、MEK-ERK信号通路抑制剂(U0126)进行干预,观察HIBD后各组大鼠脑源性神经生长因子(Brain-derived neutrophic factor,BDNF)、磷酸化-AKT(ser473)[P-AKT(ser473)]、磷酸化-ERK1/2(P-ERK1/2)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved caspase-3,CC3)的表达水平及神经细胞凋亡情况,探讨银杏内酯B对HIBD后新生大鼠脑BDNF表达的影响,以及PI3K-AKT/MEK-ERK信号传导通路在银杏内酯B抗HIBD新生大鼠神经细胞凋亡中的作用,以期为缺氧缺血性脑损伤治疗开辟新途径和新思路,减少HIBD后遗症的发生。方法首先将160只SPF级新生7日龄SD大鼠按随机数字表法分4组:假手术组(Sham组)、缺氧缺血组(HI组)、GB(10mg/Kg)和GB(20mg/Kg),其中,GB治疗组于缺氧缺血后0h、24h经腹腔给药,且各组分别于术后不同时间点(6h、12h、24h、48h)随机处死大鼠各10只,断头取脑,采用聚合酶链反应法检测BDNFmRNA及Caspase-3mRNA的表达水平,筛选出效应强度最佳时间点,即为缺氧缺血后24h,且GB效果优于GB。然后将另外140只SD大鼠按随机数字表法分为7组:假手术组(Sham组)、缺氧缺血组(HI组)、GB组(20mg/Kg),LY294002组、GB+LY294002组、U0126组、GB+U0126组,每组各20只。其中,LY294002组和GB+LY294002组均于造模前30min给予LY294002(1.8mg/Kg),U0126组和GB+U0126组均于造模前30min给予U0126(0.2mg/Kg);参照经典Rice法制备HIBD实验动物模型,GB组、GB+LY294002组和GB+U0126组均于造模后即刻经腹腔注射银杏内酯B(20mg/Kg),然后各组于缺氧缺血后24h断头取脑。苏木精-伊红染色法(HE染色)观察脑白质病理改变,原位切口末端标记法法(TUNEL)检测脑神经细胞凋亡情况,同时分别采用免疫组化和Western blotting对脑组织中BDNF、P-AKT(ser473)、P-ERK1/2及CC3蛋白进行定位和定量。数据以sx±表示,采用SPSS17.0软件包进行统计分析,定量资料多组间比较采用方差分析,两两比较采用LSD-t法,以α=0.05为检验水准。结果1聚合酶链反应(PCR)结果银杏内酯B可抑制缺氧缺血后不同时间点大鼠脑组织Caspase-3mRNA上调,同时促进缺氧缺血后BDNFmRNA表达,发挥神经保护功能。具体结果如下:与Sham组比较,缺氧缺血后6 h HI组和两治疗组大鼠脑Caspase-3mRNA开始出现升高,BDNFmRNA开始下降;12h Caspase-3mRNA进一步上升,BDNFmRNA进一步下调,至24 h分别达到峰值和谷值,随后Caspase-3mRNA呈下调趋势,BDNFmRNA也有所回升。但各时间点两治疗组Caspase-3mRNA水平均低于HI组,BDNFmRNA水平均高于HI组,且HIBD后24h差距最明显,GB效果优于GB。2苏木精-伊红染色(HE)结果银杏内酯B可减轻HIBD新生大鼠神经细胞水肿。具体结果如下:Sham组神经细胞形态结构基本正常,胞浆、胞核分别被染成粉红色与深蓝色;缺氧缺血后24 h,HI组神经细胞水肿较为明显,呈空泡样或气球样改变,同时可见炎性细胞浸润,血管内皮细胞明显肿胀;GB治疗组(20mg/kg)细胞水肿有所减轻,仅少部分细胞出现水泡样改变。3原位切口末端标记法(TUNEL)结果银杏内酯B可减轻HIBD新生大鼠神经细胞凋亡。具体结果如下:Sham组仅可见个别凋亡细胞;与Sham组比较,HI组和GB组(20mg/kg)凋亡细胞计数增加,差异有统计学意义(P<0.01);与HI组比较,GB组凋亡细胞计数有所降低,差异亦有统计学意义(P<0.01)。4免疫组织化学结果银杏内酯B可抑制缺氧缺血诱导的CC3阳性细胞计数增加,同时上调BDNF和P-AKT(ser473)阳性细胞计数,减少缺氧缺血性脑损伤后神经细胞凋亡水平,且这一作用可被LY294002抑制剂所抑制。具体结果如下:与Sham组比较,HI组大鼠脑BDNF和P-AKT(ser473)阳性表达细胞减少,而凋亡因子CC3阳性表达细胞增多,差异均有统计学意义(P<0.05);此外,与HI组比较,GB组(20mg/Kg)BD

关键词：银杏内酯B 缺氧缺血性脑损伤 PI3K ERK 细胞凋亡

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高锰酸钾对几类药物的降解效果和机理研究

高锰酸钾对几类药物的降解效果和机理研究

作者：程萍萍合肥工业大学

学位级别：硕士

随着人们对药物使用量的急剧增加,以及药品滥用形势日益严重,环境中的药物残留已成为严峻的环境污染问题。本文针对其中几类典型药物作为研究对象,分别是抗癌类药物5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)和阿糖胞苷(cytarabine,Ara-C)、磺胺... 详细信息

随着人们对药物使用量的急剧增加,以及药品滥用形势日益严重,环境中的药物残留已成为严峻的环境污染问题。本文针对其中几类典型药物作为研究对象,分别是抗癌类药物5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)和阿糖胞苷(cytarabine,Ara-C)、磺胺类抗生素磺胺噻唑(sulfathiazole,STZ)、糖皮质激素类药物泼尼松龙(Prednisolone,PRED),研究了高锰酸钾对这几类药物的降解动力学、影响因素和降解机理。首先,研究了高锰酸钾对抗癌类药物5-FU和Ara-C的去除效果及机理。高锰酸钾和5-FU的反应包含多个基元反应,在本实验条件下,其总反应级数为1.63,动力学模型为:-d[5-FU]/dt=kapp[5-FU]t0.77[KMnO4]t0.86。高锰酸钾与Ara-C的反应过程符合二级动力学模型,其二级动力学反应常数为1.17 M-1·s-1(p H=4.0±0.1,25℃)。溶液温度、pH及水质条件对两种目标物的降解过程存在显著影响。低浓度高锰酸钾(35μM)对水体中微量5-FU和Ara-C的去除效果较差。采用气相色谱与质谱联用仪(GC-MS)分析了高锰酸钾去除5-FU和Ara-C的过程中的部分降解产物,推测了两种抗癌药物可能的降解路径。然后,研究了高锰酸钾对磺胺类抗生素STZ的去除效果及机理。高锰酸钾对STZ的降解过程符合二级动力学模型,其反应常数为5.55 M-1·s-1(pH=7.0±0.1,25℃)。溶液温度、pH、水质等因素对STZ的降解过程存在影响。随着溶液温度的升高,STZ与高锰酸钾的反应速率不断增加;在pH=5-10范围内,随着pH升高,反应常数增加,在pH=8.0时达到最大值,随后又略微减小。低浓度高锰酸钾(20μM)对水体中低浓度STZ的去除率较差。采用气相色谱与质谱联用仪(GC-MS)和液相色谱-飞行时间质谱仪(LC-TOF)分析了高锰酸钾去除STZ的过程中的产物,提出了可能的降解途径。最后,研究了高锰酸钾对糖皮质激素类药物PRED的去除效果及机理。高锰酸钾与PRED的反应过程符合二级动力学模型,二级反应速率常数为4.17 M-1s-1(pH=7.0±0.1,25℃)。随着温度的增加,反应常数不断增加;而溶液pH、NH4+、HCO3-以及腐殖酸浓度均对反应影响较小。采用GC-MS和LC-TOF技术测定了高锰酸钾去除PRED过程中的降解产物,推测了一种可能的降解途径。

关键词：高锰酸钾抗癌类药物磺胺类药物糖皮质激素

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消费民事公益诉讼中惩罚性赔偿问题研究

消费民事公益诉讼中惩罚性赔偿问题研究

作者：程萍萍天津商业大学

学位级别：硕士

经济的飞速发展,消费需求和消费结构不断优化升级。在民事消费领域中关于消费侵权案件层出不穷,严重损害广大消费群体的权益。基于此种社会契机,消费民事公益诉讼制度破土而出。但是,我国目前对于惩罚性赔偿能否适用于消费民事公益诉讼... 详细信息

经济的飞速发展,消费需求和消费结构不断优化升级。在民事消费领域中关于消费侵权案件层出不穷,严重损害广大消费群体的权益。基于此种社会契机,消费民事公益诉讼制度破土而出。但是,我国目前对于惩罚性赔偿能否适用于消费民事公益诉讼仍没有明确的法律规定,在理论界和实务界也引起较大讨论风波。2017年广东“假盐”系列案中,惩罚性赔偿在消费民事公益诉讼第一次进行应用,这让消费民事公益诉讼的发展迈上新台阶。在消费民事公益诉讼中,惩罚性赔偿是否作为民事责任形式仍存有疑义,本文并就此问题进行讨论。在适用惩罚性赔偿之后,提出惩罚性赔偿的主体、适用条件、如何计算惩罚性赔偿金以及如何管理和归属等问题还需得到解决。本文首先理顺消费民事公益诉讼和惩罚性赔偿的概念和功能,进而阐述消费民事公益诉讼中域外与我国的责任形式类型。然后从实践中引发讨论的案例出发,采用三个较为典型的案例进行分析惩罚性赔偿在消费民事公益诉讼中存在的问题,主要是消费民事公益诉讼责任形式不明确、适用条件不恰当、请求惩罚性赔偿主体上有争议、法院判处惩罚性赔偿金后如何计算惩罚性赔偿金,以及后续的归属管理等问题进行讨论。最后确定惩罚性赔偿作为消费民事公益诉讼的责任形式,并分析消费民事公益诉讼适用惩罚性赔偿的必要性;从主观方面和客观方面进行分析消费民事公益诉讼中惩罚性赔偿的适用条件;明确惩罚性赔偿的主体范围,应当赋予检察院和消费者协会组织在消费民事公益诉讼中提出惩罚性赔偿的主体资格;优化惩罚性赔偿金的计算方式,分别从违法商家所涉利润为计算基数和优化惩罚性赔偿金倍数计算方式两个方面讨论;提出设立赔偿基金管理机构等方面进行全面完善。

关键词：消费民事公益诉讼惩罚性赔偿责任形式分配管理

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你是我的远方

作者：程萍萍

来源：南通市图书馆图书评论

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中日农村养老保险制度对比及对策研究

中日农村养老保险制度对比及对策研究

作者：程萍萍山西大学

学位级别：硕士

我国是一个人口大国,而且是一个农村人口占绝对多数的发展中国家,面对日趋严重的农村人口老龄化问题,必须在老龄化高峰到来之前建立起完善的农村社会养老保险制度,为此不断改革和完善农村养老保险制度显得尤为重要和突出。日本在东亚是... 详细信息

我国是一个人口大国,而且是一个农村人口占绝对多数的发展中国家,面对日趋严重的农村人口老龄化问题,必须在老龄化高峰到来之前建立起完善的农村社会养老保险制度,为此不断改革和完善农村养老保险制度显得尤为重要和突出。日本在东亚是较早建立起覆盖全体农村居民养老保险制度的国家,与我国有着一衣带水的关系,有着相似的文化生活背景,而且日本的老龄化程度也是领先于世界的,那么通过将中日两国在应对老龄化方面所采取的制度设计、整合措施及存在的问题进行对比分析,对于改革我国农村养老保险体制,解决我国农村现代化过程中出现的养老保险问题,完善我国的农村养老保险制度具有重要的理论意义和现实意义。本论文通过清楚明确社会保障、社会保险及养老保险的基本定义及之间的相互关系,进而说明农村社会养老保险的性质及研究的重要意义。从我国和日本农村各自养老保险制度的发展历程、发展现状、现阶段所取得的成就及依旧存在的问题方面进行系统阐述,并从养老保险的覆盖范围、基金的筹集、养老保险待遇的给付及基金的保值增值等方面进行了详细对比。通过研究日本农村范围内所实行的养老保险制度得出我国的农村养老保险制度所需要进行完善的方向与对策,做到以统筹城乡为导向、以农村合作社为载体、建立并完善我国农村社会多层次的养老保险机制,更加明确提出了政府所应当承担的责任及养老保险基金在管理监督、保值增值方面应改进的目标。希望通过对新形势下这一问题的研究,能够给予农民养老问题更多的关注与支持。

关键词：中日农村养老保险对比对策

空心螺钉内固定治疗Lisfranc损伤的安全性探讨

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中国矫形外科杂志 2014年第14期22卷 1332-1334页

作者：陈家蔡贤华刘曦明程萍萍魏世隽广州军区武汉总医院骨科中国人民解放军骨创伤救治中心湖北武汉430070

[目的]探讨4．0mm空心螺钉内固定治疗Lisfranc损伤的疗效及安全性。[方法]2010年2月～2012年8月收治Lisfranc损伤患者29例，男19例，女10例，年龄23～62岁，平均34．3岁。依据Meryson分型：A型2例，B1型6例，B2型11例，c1型9例，c2型1... 详细信息

[目的]探讨4．0mm空心螺钉内固定治疗Lisfranc损伤的疗效及安全性。[方法]2010年2月～2012年8月收治Lisfranc损伤患者29例，男19例，女10例，年龄23～62岁，平均34．3岁。依据Meryson分型：A型2例，B1型6例，B2型11例，c1型9例，c2型1例。切开复位后采用4．0mm空心螺钉固定内侧柱及中间柱，2mm克氏针经皮固定外侧柱，术后8周拔除克氏针，术后4—6个月取出空心螺钉。[结果]本组27例获得随访，2例失访，平均随访18个月（12～36个月），未观察到内固定断裂及复位丢失等并发症（其中6例患者未按要求于术后4～6个月内取出内固定螺钉）。依据美国骨科矫形足踝协会（AOFAS）评分标准评价术后患足的功能，平均得分为84分，其中优5例，良16例，一般5例，差1例。[结论]采用4．0mm空心螺钉内固定治疗Lisfranc损伤，操作简单，安全可靠，术后足弓垫保护下行走，可以获得较好的临床疗效。

关键词：脱位骨折内固定术 Lisfranc损伤

中文版上肢技巧质量量表在脑性瘫痪患儿上肢功能评定中的信度和效度

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中国康复医学杂志 2016年第1期31卷 41-44页

作者：王军陈静朱登纳袁俊英牛国辉孙二亮程萍萍郑州大学第三附属医院小儿脑瘫康复中心郑州450052

目的:评估中文版上肢技巧质量量表(quality of upper extremity skills test,QUEST)在痉挛型脑瘫患儿上肢功能评定中的信度和效度。方法:将英文版QUEST翻译并完善成中文版,研究对象为75例在我院就诊的痉挛型脑瘫儿童,检测其重测信度及... 详细信息

目的:评估中文版上肢技巧质量量表(quality of upper extremity skills test,QUEST)在痉挛型脑瘫患儿上肢功能评定中的信度和效度。方法:将英文版QUEST翻译并完善成中文版,研究对象为75例在我院就诊的痉挛型脑瘫儿童,检测其重测信度及评定者间信度。同时进行Peabody运动发育量表的精细运动部分(peabody developmental motor scale fine motor,PDMS-FM),精细运动能力(fine motor function measure scale,FMFM),分析PDMS-FM原始分、FMFM各区分数与中文版QUEST各分测试项原始分之间的相关性,评估量表的平行效度。结果:中文版QUEST分测试项得分及总分具有优良的重测信度及评估者间信度(ICC值均>0.890),中文版QUEST分测试项原始分与PDMS-FM、FMFM各区原始分间具有较好的平行效度(Pearson/Spearson秩相关系数分别为r1=0.563—0.816、r2=0.389—0.830)。结论:中文版QUEST量表具有良好的信度和效度,可以作为评估痉挛型脑瘫患儿上肢运动功能的首选方法。

关键词：上肢技巧质量评估量表上肢功能评定痉挛型脑性瘫痪信度效度

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基于随机Petri网的投诉流程优化研究

现代商业 2013年第2期 80-81页

作者：程萍萍张璐中国空空导弹研究院 471009

流程管理有助于企业运营效率的提高,也可以帮助企业实现快速响应客户,所以流程管理对企业管理水平的提高必不可少。流程优化作为流程管理的重要部分,企业为了提高流程管理能力,必须对流程进行持续不断的优化。中国的大多数企业多运用定... 详细信息

流程管理有助于企业运营效率的提高,也可以帮助企业实现快速响应客户,所以流程管理对企业管理水平的提高必不可少。流程优化作为流程管理的重要部分,企业为了提高流程管理能力,必须对流程进行持续不断的优化。中国的大多数企业多运用定性分析方法优化流程,但是单独这种方法已经越来越不能满足需要。为了改变这种现状,文章提出基于随机Petri网的流程优化方法。现实中大多数管理过程都是随机的,而随机Petri网恰好能够很好地分析离散事件,因此这种方法可以更好地解决现实问题。文章以投诉流程为例,运用随机Petri网的分析方法对投诉流程进行流程优化。

关键词：业务流程随机Petri网投诉流程马尔可夫链