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HPV E6通过Rap1信号通路影响宫颈癌细胞增殖、侵袭及迁移的研究

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昆明医科大学学报 2024年第9期45卷 9-16页

作者：秦祥川李金秋黄晓婧忽吐比丁·库尔班阿仙姑·哈斯木新疆医科大学基础医学院/新疆地方病分子生物学重点实验室新疆乌鲁木齐836001

目的探讨人乳头瘤病毒E6蛋白(human papillomavirus E6 protein,HPV E6)对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭和迁移的影响及潜在分子机制。方法基于Illumina Hiseq 4000转录组测序技术检测12例不同程度的宫颈病变组织之间的基因表达特征,筛选与... 详细信息

目的探讨人乳头瘤病毒E6蛋白(human papillomavirus E6 protein,HPV E6)对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭和迁移的影响及潜在分子机制。方法基于Illumina Hiseq 4000转录组测序技术检测12例不同程度的宫颈病变组织之间的基因表达特征,筛选与HPV相关的差异基因;利用GO、KEGG Pathway方法对差异基因进行生物学功能富集分析;Western blotting检测正常宫颈上皮细胞HCerEpic、宫颈癌细胞Hela中Rap、Rap1GAP蛋白表达水平;通过平板克隆实验、Transwell实验和划痕实验检测其增殖、侵袭及迁移能力;通过sh-E6慢病毒转染下调细胞内HPV E6表达,分为对照组(Hela细胞)、空载组(sh-NON)和sh-E6组(低表达HPV E6);下调HPV E6表达,采用平板克隆和CCK-8实验分别检测每组细胞增殖能力和细胞活力;Transwell和划痕实验检测细胞侵袭、迁移能力;Western blotting检测各组细胞中E6、Rap1、Rap1GAP、CyclinD1、E-cadherin、N-cadherin蛋白的表达水平。在sh-E6组基础上过表达Rap1,Western blot检测细胞中Rap1通路及相关蛋白的表达水平;平板克隆实验、Transwell实验和划痕实验分别检测细胞增殖、侵袭和迁移能力。结果测序结果显示,与正常宫颈HPV阴性比较,HPV阳性的正常宫颈、CIN、宫颈癌组织中差异上调表达的基因分别有340、864和1036个;3个数据集寻找共有差异基因共24个。GO|KEGG富集分析24个差异表达基因主要富集在Rap1相关信号通路。与HCerEpic细胞相比,Hela细胞内Rap1表达升高,Rap1GAP表达降低(P<0.01);其细胞的增殖、侵袭和迁移能力增强(P<0.01);下调HPV E6表达后,与Hela组比较,sh-E6组细胞的增殖、细胞集落形成、侵袭和迁移能力降低(P<0.001);Western blotting表明,与Hela组比较,sh-E6组细胞内Rap1、CyclinD1、N-cadherin蛋白表达降低,Rap1GAP和E-cadherin蛋白表达升高(P<0.001)。与sh-E6组相比,过表达Rap1组(sh-E6/OE Rap1)细胞内Rap1/Rap1GAP、CyclinD1、E-cadherin和N-cadherin蛋白表达被恢复(P<0.001),细胞增殖、侵袭迁移能力被恢复(P<0.01)。结论在宫颈癌发展过程中,HPV E6通过激活Rap1信号通路促进宫颈癌细胞增殖、侵袭及迁移。

关键词： HPV E6 宫颈癌 Rap1通路增殖侵袭迁移

Rap1GAP激酶通过AMPK信号通路影响宫颈癌细胞增殖、侵袭及迁移的研究

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解放军医学院学报 2023年第3期44卷 254-260页

作者：李金秋王玲秦祥川阿仙姑·哈斯木新疆医科大学基础医学院/新疆地方病分子生物学重点实验室新疆乌鲁木齐836001

背景肿瘤细胞快速增殖和难以控制的盆腔淋巴结转移是造成晚期宫颈癌患者死亡的主要原因。Rap1 GTP酶激活蛋白(Rap1 GTPase-activating protein,Rap1GAP)低表达与肿瘤细胞增殖、侵袭和患者不良预后相关。目的探讨Rap1GAP对宫颈癌细胞SiHa... 详细信息

背景肿瘤细胞快速增殖和难以控制的盆腔淋巴结转移是造成晚期宫颈癌患者死亡的主要原因。Rap1 GTP酶激活蛋白(Rap1 GTPase-activating protein,Rap1GAP)低表达与肿瘤细胞增殖、侵袭和患者不良预后相关。目的探讨Rap1GAP对宫颈癌细胞SiHa、C33a增殖、侵袭和迁移的影响及潜在的分子机制。方法从UCSC(https://***)数据库中下载经统一标准化的泛癌数据集:TCGA TARGET GTEx(PANCAN,N=19131,G=60499),从中提取ENSG00000076864(Rap1GAP)基因在宫颈癌样本中的表达数据,对每一表达值进行log2(x+0.001)变换,得到Rap1GAP基因的表达;采用Western blot检测RAP1GAP在宫颈癌细胞SiHa、C33a和正常宫颈内皮细胞H8中的表达水平,通过慢病毒转染SiHa、C33a细胞分别上调/下调Rap1GAP的表达,根据不同处理分为正常对照组(SiHa、C33a细胞)、空载组(NC-Rap1GAP)、OERap1GAP组(过表达Rap1GAP)和sh-Rap1GAP组(低表达Rap1GAP),并验证细胞转染效率;采用平板克隆实验和Transwell实验分别检测细胞增殖、侵袭和迁移能力;采用Western blot及qRT-PCR检测上调/下调Rap1GAP表达后各组细胞中Rap1GAP、E-cadherin、N-cadherin蛋白及mRNA的表达;采用Western blot检测磷酸化AMPK(p-AMPK)、AMPK蛋白表达水平。结果从数据库观察到Rap1GAP在宫颈癌组织中的表达显著高于其在正常宫颈组织中的表达(P<0.05)。Western blot结果显示,与H8细胞比较,C33a细胞中Rap1GAP蛋白表达增高,SiHa细胞中Rap1GAP蛋白表达降低(P<0.05)。与SiHa组比较,OE-Rap1GAP组细胞集落形成能力、侵袭和迁移能力降低。与C33a组比较,sh-Rap1GAP组细胞集落形成能力、侵袭和迁移能力增强。Western blot及qRT-PCR实验结果表明,与SiHa组比较,OE-Rap1GAP组细胞内Rap1GAP、E-cadherin蛋白及mRNA表达升高,而N-cadherin、p-AMPK蛋白及mRNA表达降低(P<0.01);与C33a组比较,sh-Rap1GAP组细胞内Rap1GAP、E-cadherin蛋白及mRNA表达降低,而N-cadherin、p-AMPK蛋白及mRNA表达升高(P<0.01)。结论Rap1GAP抑制宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移能力,可能与AMPK信号通路有关。

关键词：宫颈癌 Rap1酶激活蛋白增殖侵袭迁移

复合菌预处理玉米秸秆产热模型及热质耦合强化厌氧发酵特性研究

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复合菌预处理玉米秸秆产热模型及热质耦合强化厌氧发酵特性研究

作者：秦以祥河南农业大学

学位级别：硕士

厌氧发酵是秸秆类生物质资源化和能源化的利用方式之一。秸秆发酵存在着水解困难,启动慢、产甲烷效率低等问题。复合菌预处理能够有效解决上述问题,提高厌氧发酵的产甲烷效率。复合菌预处理使木质纤维素得到降解的同时也会伴有大量的生... 详细信息

厌氧发酵是秸秆类生物质资源化和能源化的利用方式之一。秸秆发酵存在着水解困难,启动慢、产甲烷效率低等问题。复合菌预处理能够有效解决上述问题,提高厌氧发酵的产甲烷效率。复合菌预处理使木质纤维素得到降解的同时也会伴有大量的生物热,这部分生物热量利用研究目前较少,将复合菌预处理生物热利用到厌氧发酵中将实现能源的更大化利用。本文采用课题组前期筛选出的复合菌系,以玉米秸秆为原料进行复合菌预处理试验,研究通风量以及添加的复合菌对预处理效果的影响,建立复合菌预处理过程的产热和木质纤维降解关联模型,最后开展复合菌预处理后厌氧发酵试验,研究复合菌预处理对厌氧发酵的影响以及复合菌预处理热质耦合双效叠加强化厌氧发酵特性。主要结论如下:（1）研究了不同通风量对复合菌预处理的影响,通风量为0.05 L/（min·kg）时,玉米秸秆复合菌预处理15天系统的累积产热量最高,为2260.66 k J/kg。同时该通风量条件下,预处理后秸秆中三素的降解率也最高,半纤维素、纤维素和木质素的降解率分别达到30.54%、20.89%和19.45%,比未通风的复合菌预处理组分别提高了15.88%、60.05%、52.93%和91.44%。为了研究添加的复合菌作用效果,在最佳通风量条件下开展了无复合菌添加的预处理试验,结果表明,复合菌预处理组相比无复合菌预处理组的单位干重秸秆累积产热量提高了168.10%,半纤维素、纤维素和木质素的降解率分别提高了79.12%、84.05%和135.47%。微生物群落分析表明,所添加复合菌中的Bacillus circulans、Pseudomonas aeruginosa、Streptomyces badius和Aspergillus niger在预处理过程中对促进木质纤维素的降解以及提升产热量起到主导作用。（2）通过Contois方程建立复合菌生长模型、可缓慢降解有机质模型,在此基础上建立可快速降解有机质模型、复合菌预处理产热模型。通过最佳通风量的试验数据（纤维素、半纤维素、木质素含量和温度）、fmincon和lsqnonlin优化函数对模型未知动力学参数进行确定和优化,得出纤维素、半纤维素和木质素的降解常数分别为0.0601 h-1、0.0678 h-1和0.0175h-1,复合菌的产热系数为25693.3874 k J/kg。经过两阶段的模型验证,模型验证指标R2和MSE的值显示模型的预测结果准确。（3）研究了复合菌预处理对玉米秸秆厌氧发酵的影响。复合菌预处理15天后进行中温厌氧发酵获得最高的累积产甲烷量193.82 m L/g VS,与无复合菌预处理组和未预处理组相比,累积甲烷产量分别提高了13.36%、27.92%。相对于无复合菌预处理组,复合菌预处理组厌氧发酵过程的最大乙酸浓度,TS和VS的去除率分别提高了9.93%、24.44%和11.15%。微生物群落分析表明,复合菌预处理过后秸秆厌氧发酵系统内微生物的群落结构发生显著改变,水解菌Actinobacteriota和产甲烷菌Methanosaeta被选择性富集,强化了厌氧发酵过程中的水解酸化过程和乙酸型产甲烷过程。（4）研究了复合菌预处理热质耦合双效叠加强化厌氧发酵的特性,以复合菌预处理后不同时间节点的玉米秸秆作为厌氧发酵底物,对应该时间点预处理系统的温度作为厌氧发酵的反应温度,开展了试验研究。试验结果表明,试验组P9d-40（复合菌预处理9天,厌氧发酵温度40℃）的累积产甲烷量最大为194.30 m L/g VS。发酵结束后,该组的TS和VS的去除率分别达到了26.72%和58.73%。乙酸最高浓度达到385.85 mg/L,还原糖最高含量为219.38mg/L。微生物群落分析表明,试验组P9d-40提高了水解菌（Caldatribacteriota、Chloroflexi）和产甲烷菌（Bathyarcaheia、Methanobacterium）的相对丰度。同时该组的古菌群落多样性最高,有利于甲烷的多途径产生。

关键词：玉米秸秆复合菌预处理产热模型厌氧发酵微生物群落结构

新型电力系统背景下基于自适应参数估计电力系统惯量快速估计方法

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电网与清洁能源 2024年第1期40卷 18-28页

作者：王浩祥秦小宇华北电力大学北京102206

随着“双碳”相关政策在我国的大力推行,新能源渗透率的提高造成了电力系统惯量降低,进而影响了电力系统的稳定性。基于自适应参数估计对高比例新能源系统的惯量进行估计,结合电力系统频率响应模型,构建了描述电力系统动态响应的回归方... 详细信息

随着“双碳”相关政策在我国的大力推行,新能源渗透率的提高造成了电力系统惯量降低,进而影响了电力系统的稳定性。基于自适应参数估计对高比例新能源系统的惯量进行估计,结合电力系统频率响应模型,构建了描述电力系统动态响应的回归方程。提出了一种基于预定义时间动态回归扩展和混合估计器的参数估计算法,实现对高比例新能源的惯量估计。在改进的某14机59节点中进行了仿真分析,结果表明,所提惯量估计算法能够较好地估计电力系统的惯性常数,并有效提升了电力系统频率的稳定性。

关键词：新能源电力系统惯量估计自适应参数估计

Ca^(2+)影响辛基异羟肟酸浮选独居石的FTIR、XPS研究

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光谱学与光谱分析 2024年第10期44卷 2959-2967页

作者：刘荣祥杨占峰李解曹钊李强李计川内蒙古科技大学矿业与煤炭学院内蒙古包头014010 包头稀土研究院内蒙古包头014060 内蒙古科技大学稀土产业学院内蒙古包头014010

独居石浮选体系中往往有方解石、萤石、白云石等大量的伴生矿,而这些伴生矿在独居石矿中会解离出大量的Ca^(2+),而Ca^(2+)往往会影响矿浆浮选环境。为此,通过Ca^(2+)的溶液化学计算、独居石浮选试验,以及浮选条件下作用的独居石表面红... 详细信息

独居石浮选体系中往往有方解石、萤石、白云石等大量的伴生矿,而这些伴生矿在独居石矿中会解离出大量的Ca^(2+),而Ca^(2+)往往会影响矿浆浮选环境。为此,通过Ca^(2+)的溶液化学计算、独居石浮选试验,以及浮选条件下作用的独居石表面红外光谱分析(FTIR)和X射线光电子能谱(XPS),分析研究Ca^(2+)的影响。Ca^(2+)的溶液化学计算显示,在水溶液中,随着pH值的升高,Ca^(2+)分别以离子态、羟基络合物和氢氧化合物的形式存在,当pH值在7~8之间,优势组分为Ca^(2+)和Ca(OH)^(+)。独居石浮选结果表明,不添加Ca^(2+)时,捕收剂OHA不能充分的浮选独居石,回收率为75.37%;而在pH为8±0.5,加入3×10^(-4)mol·L^(-1)的Ca^(2+)剂量,可显著的提高OHA对独居石的浮选性能,回收率达到96.48%。由溶液化学计算可知,Ca(OH)+是活化独居石的优势组分;Ca^(2+)剂量大于3×10^(-4)mol·L^(-1)时浮选回收率下降幅度较大,说明Ca^(2+)剂量的进一步增加,反而抑制独居石浮选,只有一定剂量的Ca^(2+)有效的促进独居石浮选,这可能归因于Ca^(2+)剂量消耗了OHA的浓度,进而影响独居石的浮选。红外光谱分析表明,在Ca^(2+)的作用下,光谱中出现两个关键性的新峰,其一为1454 cm^(-1)处的N—O—H弯曲振动峰,其二为880 cm^(-1)处的O—N拉伸振动峰,而在2974和2928 cm^(-1)的有机峰—CH_(3)和—CH_(2)—峰明显增强,这些基团的出现表明发生了化学吸附且吸附强度大于纯独居石吸附OHA的效果。XPS分析表明,仅使用OHA吸附独居石,独居石表面的N元素相对含量较低,为0.61%,而Ca^(2+)处理后的独居石,OHA吸附独居石时,独居石表面的N元素相对含量较高,达到2.36,由此可以得出,Ca^(2+)会促进OHA吸附到独居石表面。从分峰拟合中可以看出,添加Ca^(2+)在独居石的解理面上氧原子与Ca(OH)^(+)反应形成O—Ca—OH基团,可以作为吸附OHA的新吸附位点,同时独居石的铈原子与OHA上的两个氧原子形成五元螯合物也作吸附位点,得出独居石表面可以有两个吸附位点,独居石表面的Ca和Ce原子的活性位点都能吸附OHA,有利于OHA在独居石表面吸附,形成更均匀更致密的OHA疏水吸附层,这就是Ca^(2+)在OHA浮选独居石的性能得到改善的原因。这项研究有助于丰富矿浆中金属离子的活化理论,也证实了有效的矿物浮选分离不仅仅依赖于捕收剂-矿物相互作用的强度,而在很大程度上依赖于浮选溶液的化学性质。利用或者控制表面反应是开发一种更高效、更经济的浮选工艺的主要技术手段。

关键词：独居石浮选辛基异羟肟酸钙离子红外光谱分峰拟合

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云南樟科植物一新种——华樟

西北植物学报 2024年

作者：李园园武力吴涛李贵祥袁玉川柴勇云南省林业和草原科学院云南省高黎贡山生物多样性重点实验室高黎贡山森林生态系统云南省野外科学观测研究站云南无量山国家级自然保护区南涧管护局

【目的】研究确定及报道在中国云南省南涧县发现的樟科桂属植物一新种——华樟(Cinnamomum huae Y. Chai&Yuan Y. Li)。【方法】通过形态比较及与近缘种基于叶绿体基因组数据的分子系统学研究证实该种为新分类群。【结果】该种与同属的... 详细信息

【目的】研究确定及报道在中国云南省南涧县发现的樟科桂属植物一新种——华樟(Cinnamomum huae Y. Chai&Yuan Y. Li)。【方法】通过形态比较及与近缘种基于叶绿体基因组数据的分子系统学研究证实该种为新分类群。【结果】该种与同属的茶果樟(C. chago)形态相似,均为羽状脉,叶对生或近对生,具长尾尖,但该种小枝被微柔毛,顶芽密被毛,叶背灰白色,被微柔毛,边缘具波状起伏,果实厚扁球形,二者具明显区别。该种的叶绿体基因组大小为154 078 bp,比茶果樟长1 325 bp,比同属的刀把木(C. pittosporoides)长1 348 bp,在反向重复区比茶果樟及刀把木都多了1个678 bp的片段;在36种樟科植物构建的系统发育进化树中,该种与刀把木和其他物种形成3个独立的平行分支,且形态与茶果樟近似,表明该种可能是桂属新的进化单元。【结论】形态学特征及叶绿体基因组分析结果支持该种为独立的物种。

关键词：分类学桂属新分类群叶绿体基因组

平滑风电波动的飞轮协同电池混合储能系统经济性配置

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动力工程学报 2024年第7期44卷 1101-1108页

作者：滕伟许庆祥王亚军秦润武鑫柳亦兵华北电力大学先进飞轮储能技术研究中心北京102206 深能南京能源控股有限公司南京210000

针对风电场的有功功率波动,采用小波包分解的功率平抑算法,得到满足并网要求的低频信号分量和高频的混合储能系统参考功率,并使用低通滤波分频和信号平滑去噪方法获得飞轮储能和电池储能的参考信号,同时考虑放电深度和循环次数对电池储... 详细信息

针对风电场的有功功率波动,采用小波包分解的功率平抑算法,得到满足并网要求的低频信号分量和高频的混合储能系统参考功率,并使用低通滤波分频和信号平滑去噪方法获得飞轮储能和电池储能的参考信号,同时考虑放电深度和循环次数对电池储能系统寿命的影响,构建混合储能系统在计划年限内的全生命周期经济性模型,采用多跟踪器优化算法(MTOA)得到最优的混合储能容量配置。最后,结合风电场实际功率数据,仿真分析验证混合储能系统对功率平抑的有效性和经济性。结果表明:混合储能系统既能保证风电场的有功功率波动满足并网要求,又能充分发挥不同储能形式特性,降低系统运行成本。

关键词：有功功率波动混合储能容量配置全生命周期经济性

小孩不“小”与教师不“大”——支持儿童研究性学习的高质量小学语文课堂建构

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阅读 2024年第31期 17-20页

作者：秦祥涛江苏省南京市力学小学

儿童是发展中的人，教师要顺应教育规律，不断认识和深化儿童作为研究者的课堂教学优势。以儿童为主体，支持儿童在小学语文课堂中开展高质量的研究性学习，不断让学习在课堂真实发生，让儿童感受学习的快乐，进而提升自己的核心素养。

关键词：儿童研究高质量小学语文课堂

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碳毡厌氧折流板反应器处理农村黑水

中国环境科学 2024年第4期44卷 2054-2062页

作者：温仓祥戴喆秦查晓程方奎程鹤来蔡青秀吕锡武东南大学能源与环境学院江苏南京210096 东南大学无锡太湖水环境工程研究中心江苏无锡214135 江苏科技大学环境与化学工程学院江苏镇江212018 苏州科技大学环境科学与工程学院江苏苏州215009

评估了碳毡厌氧折流板反应器在室温下处理黑水(源分离的厕所污水)的能力,通过逐步缩短水力停留时间(HRT)以探索其最大性能.结果表明,在HRT为1.45d,有机负荷率为2.94kg COD/(m^(3)·d)的条件下实现了最大容积产气率(417±59)NL CH4/(m^(3... 详细信息

评估了碳毡厌氧折流板反应器在室温下处理黑水(源分离的厕所污水)的能力,通过逐步缩短水力停留时间(HRT)以探索其最大性能.结果表明,在HRT为1.45d,有机负荷率为2.94kg COD/(m^(3)·d)的条件下实现了最大容积产气率(417±59)NL CH4/(m^(3)·d),此时甲烷化率(40.5±5.02)%,总COD去除率(79.08±7.24)%.碳毡的加入富集了Methanospirillum属,通过氢营养型产甲烷途径实现高效厌氧消化性能.该反应器在室温下表现出优良的有机物处理效果,高甲烷产量与沼气纯度,尾水中富含可植物直接利用的氮磷营养盐,系统简单易维护,具有在农村地区实际应用的潜力.

关键词：产甲烷导电材料农村生活污水厌氧消化资源回收