检索结果-南通市图书馆

中国生物制品学杂志 2003年第3期16卷 192-194页

作者：严家新祝玉桃徐葛林黄仕和方志正武汉生物制品研究所武汉430060

在2000年版中,规定的狂犬病疫苗的多项检定均采用小鼠实验,如病毒滴定、病毒灭活确证试验以及疫苗效力测定等.

关键词：细胞培养法检定狂犬病疫苗实验方法

抗狂犬病毒核蛋白荧光标记抗体的制备和初步鉴定

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中国人兽共患病杂志 2000年第5期16卷 59-61,F003页

作者：严家新祝玉桃李承平徐葛林朱家鸿武汉生物制品研究所基因工程室武汉430060

目的　建立抗狂犬病毒 (RV)核蛋白 (NP)荧光标记抗体的制备方法并进行初步鉴定。方法　采用两种方法制备该试剂 :1 从RV感染的细胞中提纯RV核糖核蛋白 (RNP)作抗原 ,免疫动物然后制备荧光标记抗体 ;2 直接用本室原制备的 4株抗RV　NP... 详细信息

目的　建立抗狂犬病毒 (RV)核蛋白 (NP)荧光标记抗体的制备方法并进行初步鉴定。方法　采用两种方法制备该试剂 :1 从RV感染的细胞中提纯RV核糖核蛋白 (RNP)作抗原 ,免疫动物然后制备荧光标记抗体 ;2 直接用本室原制备的 4株抗RV　NP的单克隆抗体混合进行标记。结果　制备的试剂有较高的敏感性和特异性 ,经与法国巴斯德诊断用品公司的相应产品进行比较 ,所得结果的符合率为 10 0 %。特别是用后一种方法制备的试剂优点更多。结论　该制品可替代进口产品。

关键词：狂犬病毒核蛋白荧光标记抗体单克隆抗体

应用改良抗体结合试验(ABT)方法检测狂犬病疫苗效力

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中国生物制品学杂志 2001年第2期14卷 116-117页

作者：祝玉桃严家新方志正何春辉徐葛林武汉生物制品研究所武汉430060

目的应用改良抗体结合试验（ＡＢＴ）方法在体外快速测定狂大病疫苗效力。方法将定量的狂犬病毒中和抗体与疫苗样品进行结合，将剩余的中和抗体的滴度用快速荧光灶抑制试验（ＲＦＦＩＴ）进行测定，然后计算待测疫苗的效价，并与传... 详细信息

目的应用改良抗体结合试验（ＡＢＴ）方法在体外快速测定狂大病疫苗效力。方法将定量的狂犬病毒中和抗体与疫苗样品进行结合，将剩余的中和抗体的滴度用快速荧光灶抑制试验（ＲＦＦＩＴ）进行测定，然后计算待测疫苗的效价，并与传统的ＮＩＨ效力试验结果进行比较。结果ＡＢＴ与传统的ＮＩＨ效力试验的结果有良好的相关性，而且快速、经济，重复性高。结论该方法在大多数情况下可取代ＮＩＨ效力试验。

关键词：狂犬病疫苗快速荧光灶抑制试验抗体结合试验效价检测

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人用冻干无佐剂狂犬病疫苗的临床观察

中国生物制品学杂志 2007年第4期20卷 276-277页

作者：郑新雄祝玉桃陈伟孙文邓化方黄仕和黄佐林曾令冰徐葛林武汉生物制品研究所基因工程室武汉430060

目的观察人用冻干无佐剂狂犬病疫苗(武生欣宁)接种人体后的临床反应和免疫效果。方法40名健康者分别于0、3、7、14和28d接种疫苗,观察接种者副反应,并于接种后采血,用快速荧光灶抑制试验检测血清中和抗体水平。结果第1针和第2针接种后... 详细信息

目的观察人用冻干无佐剂狂犬病疫苗(武生欣宁)接种人体后的临床反应和免疫效果。方法40名健康者分别于0、3、7、14和28d接种疫苗,观察接种者副反应,并于接种后采血,用快速荧光灶抑制试验检测血清中和抗体水平。结果第1针和第2针接种后副反应率分别为2.5%和7.9%,后3针副反应率为0。免疫前抗体均为阴性,接种后第7天抗体阳转率为76%,第14天抗体水平GMT为9.42IU/ml,阳转率100%,第28天抗体水平GMT为9.83IU/ml,阳转率100%。结论人用冻干无佐剂狂犬病疫苗反应轻微,效果良好。

关键词：狂犬病无佐剂疫苗安全性免疫效果

中国狂犬病毒疫苗株（5aG）糖蛋白基因在痘苗病毒中的表达及免疫效果观察

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中华实验和临床病毒学杂志 1995年第3期9卷 195-197页

作者：朱家鸿温冷沙健祝玉桃曹瑞瑶薛红刚卫生部武汉生物制品研究所

将克隆到的中国狂犬病毒疫苗株（５ａＧ）的糖蛋白基因重组到痘苗病毒ＴＫ区，并在痘苗病毒Ｐ１１启动子的控制下，构建了狂犬－痘苗重组病毒（ＶＶａＧ）。经间接免疫荧光和Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫印染证明，重组病毒ＶＶａＧ能良好地表达... 详细信息

将克隆到的中国狂犬病毒疫苗株（５ａＧ）的糖蛋白基因重组到痘苗病毒ＴＫ区，并在痘苗病毒Ｐ１１启动子的控制下，构建了狂犬－痘苗重组病毒（ＶＶａＧ）。经间接免疫荧光和Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫印染证明，重组病毒ＶＶａＧ能良好地表达狂犬病毒糖蛋白，其分子量约为６６００。用ＶＶａＧ免疫小鼠，７ｄ便可诱生较高的狂犬病毒中和抗体，２１ｄ达４１６９，并能１００％保护狂犬病毒本毒株和国际标准攻击毒（ＣＶＳ）的致死量攻击。

关键词：狂犬病毒痘苗病毒基因表达狂犬病疫苗糖蛋白

双表达狂犬病毒基因的非复制型痘苗病毒改建及免疫效果

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中国病毒学 2004年第4期19卷 376-379页

作者：黄薇徐葛林胡巧玲李萍王继鳞严家新吴杰祝玉桃阮力朱家鸿武汉生物制品研究所湖北武汉430070 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京100050

为减少重组病毒非必需外源基因,进一步提高非复制重组痘苗病毒狂犬病疫苗的安全性,本研究改建不含报道基因LacZ的双表达狂犬病毒aG株G、N的非复制重组痘苗病毒VTKRGΔCKRN。采用G418-neo富集、蓝白斑及免疫蚀斑筛选等方法,以表达狂犬病... 详细信息

为减少重组病毒非必需外源基因,进一步提高非复制重组痘苗病毒狂犬病疫苗的安全性,本研究改建不含报道基因LacZ的双表达狂犬病毒aG株G、N的非复制重组痘苗病毒VTKRGΔCKRN。采用G418-neo富集、蓝白斑及免疫蚀斑筛选等方法,以表达狂犬病毒糖蛋白(RG)基因的非复制重组痘苗病毒VTKRG△CKlacZ作为亲本株,利用同源重组原理,删除C与K片断间lacZ,并将狂犬病毒核蛋白(RN)基因插入C-K片段间。经核酸及蛋白水平检测表明VTKRGΔCKRN能同时稳定有效地表达狂犬病毒G和N,并具有非复制病毒生长特性。重组病毒裸鼠毒力实验表明VTKRG△CKRN较复制型重组痘苗病毒VTKRG病毒毒力显著减弱。VTKRGΔCKRN免疫小鼠可诱生较高有效中和抗体,并能保护小鼠免于致死剂量狂犬病毒攻击。以1.6×106PFU较低免疫剂量、仅一次免疫狗可保护狗经致死量中国狂犬病毒街毒株SBD株攻击后存活,诱生具有保护性中和抗体。非复制狂犬-痘苗重组病毒VTKRGΔCKRN免疫效果好、更具安全性。

关键词：非复制型痘苗病毒载体狂犬病毒糖蛋白核蛋白重组疫苗

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人源抗狂犬病毒G蛋白单链抗体的表达和鉴定

中国生物制品学杂志 2005年第6期18卷 445-447页

作者：闭兰张爱华孙可芳胡巧玲祝玉桃王志友余模松武汉生物制品研究所武汉430060

目的对人源抗狂犬病毒G蛋白单链抗体A12进行可溶性表达及特异性和中和活性检测。方法表达人源单链抗体A12的菌株,经诱导后进行SDS-PAGE及Western blot检测,用流式细胞仪(FACS)检测表达狂犬病毒G蛋白的重组痘苗病毒感染Vero细胞的能力,... 详细信息

目的对人源抗狂犬病毒G蛋白单链抗体A12进行可溶性表达及特异性和中和活性检测。方法表达人源单链抗体A12的菌株,经诱导后进行SDS-PAGE及Western blot检测,用流式细胞仪(FACS)检测表达狂犬病毒G蛋白的重组痘苗病毒感染Vero细胞的能力,用快速荧光灶抑制实验(RFFIT)检测表达产物的中和活性。结果Western blot显示表达产物与抗C-myc抗体在相对分子质量约30 000处出现强阳性表达带。FACS表明A12与表达狂犬病毒G蛋白的重组痘苗病毒感染的Vero细胞出现特异性反应。RFFIT表明,A12 ScFv在1∶27倍稀释时能完全中和病毒。结论已获得了A12可溶性表达,表达产物能与狂犬病毒G蛋白特异性结合,并对狂犬病毒具有一定的中和活性。

关键词：人源抗狂犬病毒G蛋白单链抗体基因表达鉴定方法可溶性表达

抗狂犬病毒核蛋白单克隆抗体在狂犬病街毒检测中的应用

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中华流行病学杂志 2005年第2期26卷 113-115页

作者：徐葛林严家新 Larrous F 祝玉桃 Cozette P 薛红刚胡巧玲 Bourhy H 卫生部武汉生物制品研究所武汉430060 Pasteur Institute France

目的　测试抗狂犬病毒核蛋白单克隆抗体用于间接免疫荧光法检测已确认的狂犬病阳性及狂犬病阴性的动物脑组织标本的灵敏度和特异性。方法　将巴斯德研究所狂犬病参考中心保存的来自不同国家的 6 2份狂犬病街毒动物脑组织标本以及 2 71... 详细信息

目的　测试抗狂犬病毒核蛋白单克隆抗体用于间接免疫荧光法检测已确认的狂犬病阳性及狂犬病阴性的动物脑组织标本的灵敏度和特异性。方法　将巴斯德研究所狂犬病参考中心保存的来自不同国家的 6 2份狂犬病街毒动物脑组织标本以及 2 71份法国境内收集的正常动物脑组织标本 ,用上述间接免疫荧光检测 ,并以巴斯德研究所狂犬病参考中心提供的狂犬病毒酶联免疫吸附法、组织细胞分离法及直接免疫荧光法等三个试验作确认试验 ,进行比较。结果　间接免疫荧光法可检测涵盖狂犬病毒 7个基因型在内的所有 6 2份街毒标本 ,对确认为狂犬病阴性的动物脑组织标本检测均为阴性 ,其特异性和灵敏度均达到 10 0 %。结论　抗狂犬病毒核蛋白单抗作为间接免疫荧光法检测狂犬病毒具有良好的应用前景。

关键词：狂犬病毒间接免疫荧光法脑组织核蛋白单克隆抗体标本阴性动物基因型保存

构建以痘苗病毒为载体的人用狂犬病基因工程疫苗株的研究

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中华实验和临床病毒学杂志 1994年第2期8卷 105-108页

作者：蔡兵朱家鸿胡巧玲赵卫国应保龄王继麟祝玉桃卫生部武汉生物制品研究所

构建了一个可以适于人用的表达狂犬病病毒糖蛋白的重组痘菌病毒疫苗株。构建的方法是：先构建一个表达β－半乳糖苷酶基因（简称ｌａｃ基因）的不经传代细胞的重组痘苗病毒，以此为亲本株，再与载体ＰＴｋ１１ｋＲＧ（狂犬病病毒糖蛋白... 详细信息

构建了一个可以适于人用的表达狂犬病病毒糖蛋白的重组痘菌病毒疫苗株。构建的方法是：先构建一个表达β－半乳糖苷酶基因（简称ｌａｃ基因）的不经传代细胞的重组痘苗病毒，以此为亲本株，再与载体ＰＴｋ１１ｋＲＧ（狂犬病病毒糖蛋白基因插在胸苷激酶Ｔｋ区，并置于痘苗病毒１１ｋ启动子下游，Ｔｋ侧冀序列和启动子均来自痘苗病毒天坛株），在鸡胚细胞中同源重组，以蓝色空斑中挑白斑的方法筛选阳性重组病毒，用免疫荧光方法和ＡＰＡＡＰ免疫酶法证明，该病毒能较好地表达狂犬病病毒糖蛋白。动物实验表明，该病毒能较好地诱导小鼠和狗的抗狂犬病毒的中和抗体，并对狂犬病病毒ＣＶＳ株和ＳＲＶ（街毒）的攻击有保护作用。

关键词：狂犬病基因工程疫苗痘苗病毒

国产和进口人用无佐剂狂犬病疫苗的免疫效果研究

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国产和进口人用无佐剂狂犬病疫苗的免疫效果研究