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线粒体自噬调控的新因子筛选及其功能研究

线粒体自噬调控的新因子筛选及其功能研究

作者：及泽祥河北大学

学位级别：硕士

线粒体(mitochondrion)是细胞进行有氧呼吸的重要场所,其不仅通过氧化磷酸化产生细胞生存必须的ATP,还是细胞内各种信号转导中心,参与细胞代谢、凋亡、坏死、先天免疫和钙离子存储等的调控。因此,线粒体功能的正常对于维持细胞功能至关... 详细信息

线粒体(mitochondrion)是细胞进行有氧呼吸的重要场所,其不仅通过氧化磷酸化产生细胞生存必须的ATP,还是细胞内各种信号转导中心,参与细胞代谢、凋亡、坏死、先天免疫和钙离子存储等的调控。因此,线粒体功能的正常对于维持细胞功能至关重要,而损伤的线粒体通过释放的氧化磷酸化的副产物活性氧(reactive oxygen species,ROS)和电子传递链蛋白复合体亚基细胞色素c(cytochrome c,Cyto c)等物质会引起细胞凋亡。线粒体质量控制失衡与许多疾病的发生密切相关,如神经退行性疾病、癌症和代谢综合征等。为避免因线粒体功能障碍导致产生多种疾病,细胞需及时通过自噬途径清理功能受损或多余的线粒体,这个过程就是线粒体自噬(mitophagy)。线粒体自噬是选择性自噬的一种,分为PINK1/Parkin依赖的泛素化介导的线粒体自噬和线粒体自噬受体介导的线粒体自噬两种。FUNDC1(FUN14 Domain-Containing Protein 1)定位于线粒体外膜,具有三个跨膜结构域,作为线粒体自噬受体,其通过LIR(LC3 interacting region)与自噬关键蛋白LC3互作,介导缺氧诱导的线粒体自噬。为了研究FUNDC1调控线粒体自噬的具体分子细节,本研究旨在通过质谱分析筛选与FUNDC1存在互作的新的分子,并进一步研究其参与调控线粒体自噬的机制。主要方法是通过Bio-ID(proximity-dependent biotin identification)蛋白分子临近标记技术富集与FUNDC1发生相互作用的蛋白,然后通过质谱分析得到可信度较高的分子,并进行验证以及具体机制的研究。首先,构建生物素连接酶2(Bir A2)与FUNDC1融合表达的重组载体。在He La细胞系中过表达该载体,同时加入生物素(biotin),利用链霉亲和素柱料富集被标记上生物素分子的蛋白,然后将蛋白样品进行质谱分析。将三次有效重复实验所得结果进行GO/KEGG分析,鉴定了细胞内能够与FUNDC1发生特异性结合的一些蛋白,这些蛋白主要参与细胞组分组装、线粒体生物发生、细胞应激反应、细胞器分裂和自噬等生物过程中。在FUNDC1互作的这些蛋白中,我们关注到与自噬体膜组装相关的自噬蛋白ATG2A(autophagy related protein 2A)。已有研究表明ATG2A主要定位于内质网与自噬体的接触位点或脂滴膜上,主要功能是为自噬体形成过程中输送磷脂以促进自噬体膜的延伸、弯曲和闭合。FUNDC1与自噬通路下游蛋白LC3有直接互作,但是FUNDC1如何激活自噬起始的机制仍不清楚,我们猜测ATG2可能在其中发挥关键作用。我们首先通过实验证明了FUNDC1与ATG2的互作;为验证ATG2是否参与FUNDC1介导的线粒体自噬过程,我们利用He La细胞系构建了ATG2A/ATG2B双敲除(double knockout,DKO)的细胞株。通过Western Blotting、免疫荧光(immunofluorescence,IF)以及流式分析等实验技术表明在FUNDC1所介导的线粒体自噬中,ATG2敲除会影响自噬通量。通过对FUNDC1胞浆一侧的氨基酸序列进行不同长度的截短,发现106-110和111-115两段氨基酸序列是FUNDC1与ATG2A相互作用的位点所在,且该截短体相比于野生型(wide type,WT)所介导的线粒体自噬程度减弱。综上所述,本研究通过Bio-ID以及质谱分析发现与FUNDC1互作的蛋白,这些蛋白可能参与FUNDC1所介导的线粒体自噬过程。FUNDC1可能会直接招募输送脂质的ATG2A到自噬体膜起始位点,引起线粒体自噬的发生,ATG2A在FUNDC1所介导的线粒体自噬过程中发挥重要作用。

关键词：线粒体线粒体质量控制线粒体自噬 FUNDC1 ATG2A Bio-ID

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民事侵权中公平责任原则的法律适用研究

法制博览 2024年第18期 61-63页

作者：祁泽青岛科技大学

近年来，民法中公平责任的相关问题又重新回到大众视野中，由于公平责任的相关法律规定不成熟，使法官不能准确适用公平责任，反而使滥用公平责任的现象频繁发生，也因此引起了理论界和实务界的热议。我国现行《民法典》第一千一百八十... 详细信息

近年来，民法中公平责任的相关问题又重新回到大众视野中，由于公平责任的相关法律规定不成熟，使法官不能准确适用公平责任，反而使滥用公平责任的现象频繁发生，也因此引起了理论界和实务界的热议。我国现行《民法典》第一千一百八十六条对公平责任原则进行了完善规定，大大限缩了公平责任原则的适用范围，但是《民法典》中有关公平责任具体适用的条款仍存在着规定过于模糊的问题，不利于法官准确适用该条款。本文试阐释公平责任的相关概念，以及结合司法实践进行分析，指出公平责任条款可能存在的问题并就其具体适用范围、适用条件以及适用的结果几个方面提出建议，旨在进一步维护司法权威和司法公正。

关键词：公平责任责任承担适用范围

夏闲期耕作下旱地土壤有机碳库与温度和含水量季节变化及关系研究

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核农学报 2024年第1期38卷 190-199页

作者：薛建福濮超祁泽伟高志强山西农业大学农学院山西太谷030801 河西学院农业与生态工程学院甘肃张掖734000

为明确夏闲期耕作下土壤有机碳(SOC)库与温度和含水量的季节变化及其相互关系,设置夏闲期免耕、翻耕和深松3种耕作处理,分析了黄土高原旱地麦田SOC和易氧化有机碳(POxC)含量的季节变化、土壤含水量和温度的季节变化、以及碳库与温度和... 详细信息

为明确夏闲期耕作下土壤有机碳(SOC)库与温度和含水量的季节变化及其相互关系,设置夏闲期免耕、翻耕和深松3种耕作处理,分析了黄土高原旱地麦田SOC和易氧化有机碳(POxC)含量的季节变化、土壤含水量和温度的季节变化、以及碳库与温度和含水量变化的关系。结果表明,在冬小麦生育期内,随着生育进程的推进,翻耕和深松处理0~5和5~10 cm土层SOC含量呈先升高后降低的变化趋势,而POxC含量呈“降低—升高—再降低”的变化趋势;土壤质量含水量变化均呈“增加—降低—再增加”的变化趋势,而土壤温度呈先降低后升高的变化趋势。回归分析发现,5~10 cm土层土壤质量含水量与SOC含量呈线性关系(P<0.05),与POxC含量呈二次多项式关系(P<0.05),尤其与免耕和深松处理相比,翻耕处理拟合效果更佳。此外,0~5和5~10 cm土层土壤温度变化与SOC含量无显著相关性,而日最高温度、日平均温度和日最低温度与POxC含量呈显著负相关。综上所述,不同夏闲期耕作下旱地麦田0~10 cm土层POxC含量季节变化与土壤质量含水量和温度变化密切相关,而SOC含量变化对土壤温度变化的敏感性较弱。本研究结果为旱地麦田碳库管理提供了理论依据。

关键词：夏闲期耕作旱地小麦土壤有机碳库土壤温度土壤含水量

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由一道题谈解答双变量最值问题的几种路径

语数外学习(高中版上旬) 2024年第8期 54-55页

作者：祁永祥甘肃省东乡族自治县第三中学

相较于单变量最值问题,双变量最值问题的难度一般较大.解答这类问题有多种方法,如基本不等式法、换元法、导数法、数形结合法等.本文结合一道典型题目,谈一谈解答双变量最值问题的几种途径.例题:若实数x,y满足x2+y2-xy=1,则（）.A.x+y≤...

相较于单变量最值问题,双变量最值问题的难度一般较大.解答这类问题有多种方法,如基本不等式法、换元法、导数法、数形结合法等.本文结合一道典型题目,谈一谈解答双变量最值问题的几种途径.例题:若实数x,y满足x2+y2-xy=1,则（）.A.x+y≤1 B.x+y≥-2C.x2+y2≤2 D.x2+y2≥1已知关系式中涉及了两个变量x、y,题目的要求是根据已知关系式x2+y2-xy=1求x+y、x2+y2的最值,解答本题主要有如下几种方法.

关键词：

火干扰对大兴安岭同域分布鹿科动物种群密度与生境利用的影响

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生态学报 2024年

作者：祁远轴黄保祥翟鹏辉李洋包衡姜广顺东北林业大学野生动物与自然保护地学院国家林业和草原局猫科动物研究中心内蒙古大兴安岭汗马国家级自然保护区管理局东北亚生物多样性研究中心

火对森林生态系统中大型食草动物的生境利用和种间相互作用的驱动，可能受到时空尺度变化和火干扰后植被群落演替的影响。为了揭示火干扰对同域鹿科动物的生境利用与种间互作的影响，于2018—2022年在大兴安岭汗马国家级自然保护区火干... 详细信息

火对森林生态系统中大型食草动物的生境利用和种间相互作用的驱动，可能受到时空尺度变化和火干扰后植被群落演替的影响。为了揭示火干扰对同域鹿科动物的生境利用与种间互作的影响，于2018—2022年在大兴安岭汗马国家级自然保护区火干扰区与非火干扰区域，通过网格化布设的红外相机收集狍和驼鹿活动情况，通过随机相遇停留时间模型（Random Encounter and Staying Time REST）分析火干扰与非火干扰区狍和驼鹿的种群密度的差异；基于单变量最优尺度选择与线性混合效应模型（Linear Mixed Effects Model LMM）分析狍和驼鹿生境选择策略，并运用Levins生态位重叠指数评估火干扰在时间尺度上对狍和驼鹿种间的生态位的影响。结果表明，狍与驼鹿的生境利用存在一定的差异，狍主要利用低海拔、缓坡的白桦林区域，而驼鹿主要利用靠近河流区域，但距火干扰区的距离是狍与驼鹿生境利用差异的重要因素；在火干扰区内，演替时间对狍没有明显影响，而驼鹿则偏爱火干扰后的区域，但随着距火干扰时间间隔的延长，植被演替的进行，狍和驼鹿的种间生态位重叠逐渐降低，生态位重叠指数趋于稳定，在火干扰区域中，驼鹿的空间生态位宽度显著低于狍，物种间的生态位分化更明显。因此，火干扰会在一定程度上影响狍与驼鹿的种间竞争，进而保证它们的稳定共存，该结果将为未来开展野生有蹄类生境的林火管理与保护工作提供依据。

关键词：火烧驼鹿狍生境利用大兴安岭

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机械工业应对“双碳”的机遇与挑战

科学通报 2024年第8期69卷 997-1004页

作者：侯睿祁卓娅王婧机械工业技术发展基金会北京100045 机械工业节能与资源利用中心北京100045

为应对全球气候变化,我国积极行动,逐步构建了碳达峰碳中和(简称“双碳”)的政策体系,对我国工业绿色低碳发展提出了更高要求^([1~6]).机械工业是我国国民经济发展的基础性产业,为国民经济各行业提供技术装备,所提供技术装备的节能低碳... 详细信息

为应对全球气候变化,我国积极行动,逐步构建了碳达峰碳中和(简称“双碳”)的政策体系,对我国工业绿色低碳发展提出了更高要求^([1~6]).机械工业是我国国民经济发展的基础性产业,为国民经济各行业提供技术装备,所提供技术装备的节能低碳化是各行业实现节能降碳目标的重要保障^([7,8]).在“双碳”目标约束下,机械工业面临诸多机遇与挑战.

关键词：机械工业基础性产业节能低碳碳中和目标约束绿色低碳发展机遇与挑战技术装备

有关主流媒体促进电子竞技体育发展的若干思考

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文体用品与科技 2024年第3期 97-99页

作者：祁旋张宇泽山西大学体育学院山西太原030006

现如今,国内在电子竞技体育领域的发展形势迅猛,存在极好的前景和巨大上升空间,在此过程中,主流媒体体现着不可替代的重要作用。对国内电子竞技体育产业发展过程中呈现出的问题及其在媒体发展中的地位进行分析,探讨媒体对于电子竞技发... 详细信息

现如今,国内在电子竞技体育领域的发展形势迅猛,存在极好的前景和巨大上升空间,在此过程中,主流媒体体现着不可替代的重要作用。对国内电子竞技体育产业发展过程中呈现出的问题及其在媒体发展中的地位进行分析,探讨媒体对于电子竞技发展起到的促进作用,为主流媒体应用于电子竞技体育领域的发展制定可行性实施策略,主要包括利用传媒提升社会接受度、促进职业化发展、借鉴国外成功的开发经验、政府出台正向推广政策、推动电子竞技体育市场更加规范、带动不同行业的协调发展、寻求产业化电子竞技市场发展模式等七个方面。

关键词：主流媒体电子竞技体育体育产业电子竞技

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清代官学视域下的明代选本批评——以《四库全书总目》明总集提要为考察中心

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文艺理论研究 2024年第2期44卷 179-186页

作者：祁雁蓉山西大学文学院山西省太原市030006

《四库全书总目》明总集提要集中阐发了四库馆臣的明代选本批评观,其作为官修书目很大程度上可以代表清代官方的学术立场和政治态度。在清代统治者“明以门户亡国”的历史反思之下,《总目》明总集提要指斥明人喜结社、倡流派、立门户的... 详细信息

《四库全书总目》明总集提要集中阐发了四库馆臣的明代选本批评观,其作为官修书目很大程度上可以代表清代官方的学术立场和政治态度。在清代统治者“明以门户亡国”的历史反思之下,《总目》明总集提要指斥明人喜结社、倡流派、立门户的习气,并认为是流派纷争和门户之见导致了明代选本批评的整体滑坡和倒退。参与编修《四库全书》的各级官员秉承上意,对涉及流派、门户、党争等敏感内容的明代选本采取了批评斥责、抽删改动、令行禁毁三种手段进行打压和肃清,很大程度上导致了明代选本批评在清代官学评价体系中的缺席和失语。总之,《总目》明总集提要作为政治偏见在文学批评上的具象表征,反衬出清代官方学术研究与现实焦虑并行交织的矛盾所在。

关键词：清代官学《四库全书总目》明代选本批评流派批评门户批评

高光谱结合哈里斯鹰优化核极限学习机鉴别化橘红胎切片年份

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光谱学与光谱分析 2024年第5期44卷 1494-1500页

作者：谢百亨马晋芳周泳欣韩雪勤陈嘉泽朱思祁杨懋勋黄富荣暨南大学光电工程系广东广州510632 广东医科大学药学院广东天然药物研究与开发重点实验室广东东莞523808 国家中药现代化工程技术研究中心海洋中药分中心广东湛江524023

化橘红胎是药用历史悠久的广东省道地中药材,由于其制品收藏年份越久远价格越高,市面上常有以次充好的现象。为此,采用高光谱成像技术,结合哈里斯鹰优化核极限学习机对四组不同年份的化橘红胎切片样品进行鉴别。采集四个年份共193个化... 详细信息

化橘红胎是药用历史悠久的广东省道地中药材,由于其制品收藏年份越久远价格越高,市面上常有以次充好的现象。为此,采用高光谱成像技术,结合哈里斯鹰优化核极限学习机对四组不同年份的化橘红胎切片样品进行鉴别。采集四个年份共193个化橘红胎切片样本400~1000 nm的高光谱图像。首先采用主成分分析法(PCA)分析化橘红胎切片的原始反射光谱,然后分别采用Savitzky-Golay平滑(S-G平滑)、多元散射校正(MSC)、标准正态变量交换(SNV)对样本光谱进行预处理并建立核极限学习机(KELM)模型;发现经SNV处理的样本光谱的判别准确率最高,训练集达到99.24%,测试集95.56%;进一步用竞争性自适应重加权算法(CARS)、蒙特卡洛无信息变量消除法(MCUVE)对样本光谱进行特征波长的选择;最后,采用KELM建立判别模型,同时使用哈里斯鹰算法(HHO)优化KELM参数选择并比较建模效果。结果表明:基于HHO-KELM的判别效果相较KELM有0.76%~4.44%的提升,通过MCUVE筛选所得特征波段信息冗余明显减少且精度提升,训练集和测试集最佳准确率均可达100%,故采用高光谱成像技术可以实现对不同年份的化橘红胎切片进行无损鉴别。

关键词：化橘红胎高光谱成像特征波长核极限学习机