检索结果-南通市图书馆

作者：王玉风青岛大学

学位级别：硕士

目的 1.观察高糖培养的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells, HUVEC）中玻连蛋白（vitronectin, VN）表达水平的改变,细胞微丝骨架结构的变化,以及细胞迁移能力、成管能力的变化;2.检测VN表达水平改变对高糖培... 详细信息

目的 1.观察高糖培养的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells, HUVEC）中玻连蛋白（vitronectin, VN）表达水平的改变,细胞微丝骨架结构的变化,以及细胞迁移能力、成管能力的变化;2.检测VN表达水平改变对高糖培养下HUVEC中骨架结构、细胞迁移、细胞成管能力的影响。方法第一部分：建立高糖培养的HUVEC体外模型,并常规培养HUVEC作为正常对照,实验分为组1（正常组：用含葡萄糖浓度为25mmol/L的DMEM培养液培养HUVEC）和组2（高糖组：用含葡萄糖浓度为50mmol/L的DMEM培养液培养HUVEC）)。分别使用Western Blot检测两组中VN的蛋白表达情况,利用免疫荧光细胞化学染色结合荧光显微镜观察两组中细胞微丝骨架的变化,用划痕法检测细胞迁移能力的改变,Matrigel方法观察细胞成管情况。利用独立样本t检验对组1和组2的数据进行分析。第二部分：高糖培养HUVEC,利用干扰RNA技术干扰VN的表达,实验分为组2（高糖组：用含葡萄糖浓度为50mmol/L的DMEM培养液培养HUVEC）)、组3（阴性干扰组：用control SiRNA预干扰HUVEC,再用含葡萄糖浓度为50mmol/L的DMEM培养液培养）和组4（阳性干扰组：用VN SiRNA预干扰HUVEC,再用含葡萄糖浓度为50mmol/L的DMEM培养液培养）。重复Western Blot实验、免疫荧光实验、划痕实验、Matrigel实验。利用单因素方差分析中的LSD检验对组2、组3、组4的数据进行分析。结果第一部分： 1. Western Blot结果显示,在分组培养的Oh时,组1和组2中的VN蛋白表达量分别是（1.098±0.085）、（1.091±0.068）,两组之间的差异无统计学意义（t1，2=0.111,P，2，＞0.05）;在分组培养的24h时,组1和组2中VN的蛋白表达量分别为（0.893±0.119）（1.295±0.080），两组之间的差异有统计学意义（t1，2=-4.857,P1，2＜0.05）;48h时组1和组2中VN的蛋白表达量分别为（0.874±0.115）（1.724±0.098）,两组之间的差异也有统计学意义（t，1，2=-9.710,P1，2＜0.05）。 2.免疫荧光结果显示,在24h和48h时,组2中都伴有更加明显的细胞微丝骨架结构的改变。 3.划痕法表明,24h时组1和组2中迁移入划痕的细胞数分别为（198.000±15.880）（242.000±11.130）个,两组之间的差异有统计学意义（t1，2=-5.495,P1，2＜0.05）;48h时组1和组2中迁移入划痕的细胞数分别为（293.000±8.681）（334.000±10.863）个,两组之间的差异也有统计学意义（t1，2=-7.193,P1，2＜0.05）。 4. Matrigel法证实,6h时组2中形成的闭合管腔数目（120.000±9.813）多于组1（91.000±9.867）,两组之间的差异有统计学意义（t1，2=-5.163,P1，2＜0.05）;12h时组2中形成的闭合管腔数目（19.000±3.209）也多于组1（8.000±3.011）,两组之间的差异也有统计学意义（t1，2=-5.659,P1，2＜0.05）。第二部分： 1. Western Blot结果显示,高糖培养Oh时组2、组3、组4中的VN蛋白表达量分别为（1.091±0.068）（1.002±0.029）（1.104±0.144）,三组之间的差异无统计学意义（F=1.064,P＞0.05）;高糖培养24h时组2、组3、组4中的VN蛋白表达量分别为（1.295±0.080）（1.078±0.090）（0.859±0.1150）,三组之间的差异均有统计学意义（LSD2,3=0.217,P2，3＜0.05;LSD2,4=0.435,P2，4＜0.05;LSD3,4=0.219,P3，4＜0.05）;48h时组2、组3、组4中的VN蛋白表达量也依次降低（1.724±0.098）（1.148±0.163）（0.693±0.167）,三组之间的差异亦有统计学意义（LSD2,3=0.576,P2，3＜0.05;LSD2,4=1.031,P2,4＜0.05;LSD3,4=0.455,P3，4＜0.05）。 2.免疫荧光结果显示,24h时组2中的细胞微丝骨架结构最为明显,组3次之,组4最不显著;48h时细胞微丝骨架分布亦然。 3.划痕实验表明,高糖培养24h时组2、组3、组4中迁移入划痕的细胞数量依次减少（242.000±11.130）（1

关键词：玻连蛋白高糖细胞骨架迁移成管

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铁路站房改造工程施工的安全管理

铁路站房改造工程施工的安全管理

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作者：王玉风石家庄铁道大学

学位级别：硕士

火车站站房装修改造工程是建站项目中经常遇到的一种施工作业形式。本文的研究重点在于站房改造工程在施工中的安全注意事项,结合工程实际制定各项具体的可行性措施,以适应站房改造工程施工的特点。研究内容主要包含以下几个方面:(1)介... 详细信息

火车站站房装修改造工程是建站项目中经常遇到的一种施工作业形式。本文的研究重点在于站房改造工程在施工中的安全注意事项,结合工程实际制定各项具体的可行性措施,以适应站房改造工程施工的特点。研究内容主要包含以下几个方面:(1)介绍了国内外建筑施工安全的现状,通过查阅大量的相关资料与文献,总结分析了国内外对建筑施工安全事故的研究进展,掌握建筑施工安全事故发生的基本特点,了解其研究发展历史。(2)以沈阳北站火车站装修改造为工程背景,针对站房装修改造、高寒地区作业、雨季降水、施工条件恶劣、冬季雨雪室内外温差悬殊等不利因素,深入分析了火车站站房装修改造工程施工中的安全管理要点和方法,研究了站房改造施工的安全质量控制,依据站房改造工程的特殊性进行了扣件式脚手架的荷载试验,计算了扣件式脚手架的抗滑力等。(3)考虑到沈阳北站装修改造项目为既有线施工的相关特点,如行车线设备及地下管线防护、天窗施工、超高吊顶层施工作业,我们针对性的进行了安全系统分析,研究制定了与之相对应的安全措施,包括站房设备及地下管线防护安全措施,作业安全控制措施,以及施工防护、用电消防安全防护等相关安全控制措施。(4)遵循站房改造项目的施工特点,工程地点一般位于城市成熟区域的中心地段,因此对施工现场的安全行为及形象宣传方面的控制工作就要下大力气,包括对进入施工现场的管理人员及施工作业人员的培训,对文明工地的设计规划以及对现场安全标示标牌摆放的标准化要求等。(5)通过分析以往站房改造工程施工中发生安全事故,对站房改造施工阶段可能发生的安全事故进行预估,针对这些事故制定相应的应急预案,能迅速有效地开展抢救工作,最大限度地降低施工安全风险,减少事故带来的负面作用。

关键词：站房改造安全管理脚手架管理措施应急预案

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无线局域网的安全机制、漏洞破解以及解决方案

无线局域网的安全机制、漏洞破解以及解决方案

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作者：颜炳风上海交通大学

学位级别：硕士

无线局域网(WLAN)在很多个重要的领域中,一直被认为是一种非常重要的网络连接方式,其发展前景极其广阔,是未来网络发展的一个重要方向。但是在无线局域网中,窃取数据会变得很容易,因为入侵者不需要接入物理网络,而只需要把具有无线网... 详细信息

无线局域网(WLAN)在很多个重要的领域中,一直被认为是一种非常重要的网络连接方式,其发展前景极其广阔,是未来网络发展的一个重要方向。但是在无线局域网中,窃取数据会变得很容易,因为入侵者不需要接入物理网络,而只需要把具有无线网络功能的装置放在无线局域网信号范围内即可。这就变得像是通过“空气”进行“网络入侵”、“数据窃取”。正因为如此,无线局域网的安全问题已经变得刻不容缓,亟需解决。正如上面所述,无线局域网的发展前景极其广阔。但是它的安全问题,成为限制了无线局域网的蓬勃发展的重要因素。了解、研究、以及解决无线局域网的安全性问题,成为当今一个非常重要的研究课题。本课题就是从无线局域网的安全这一个研究角度入手,深入分析当前无线局域网所以用到的几种主要安全协议。其中涉及到的主要有三种安全认证机制,分别是: 1、Wired Equivalent Privacy(WEP) 2、Wi-Fi Protected Access(WPA) 3、WPA Security Protocol(WPA2) 对这几种协议加以分析,详细阐述WEP安全协议和WPA安全协议的安全机制,找出存在的安全漏洞。并且完成课题中两个重要的任务: (1)针对WEP协议的两个安全漏洞,RC4算法问题和初始向量问题,实施实验对其进行破解。 (2)分析WPA协议的安全机制,找出WPA的安全漏洞,配对主密钥(PMK)以及服务集标识符(SSID)的安全隐患,阐述一个完整的WPA破解过程。最后结合本课题中实验结果,以及现有的安全漏洞解决方法,分析并得出最合适的解决方案: (1)对于WEP协议的两个漏洞问题,采用短期的解决方法(TKIP)和长期的解决方法(CCMP),最终实现无线局域网的安全。 (2)对于WPA协议的主要漏洞,采用高级加密标准(AES)和添加轮次密钥,实现无线局域网的安全。通过本课题的研究,实现加深对无线局域网安全机制的理解,找到存在的安全漏洞,并得出合理解决方案,从而使无线局域网变得更加安全可靠。相信无线局域网的发展前景不可限量。

关键词：无线局域网无线破解 WEP WPA WPA2

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对羟基苯乙酸稀土(Pr,Tb,Lu)配合物的合成、晶体结构及荧光性质

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中国稀土学报 2013年第1期31卷 7-13页

作者：秦毅吴小勇刘建风赵国良浙江师范大学行知学院浙江金华321004 浙江师范大学化学与生命科学学院浙江金华321004

合成了3个双核稀土配合物[Ln2(HPAA)6(bipy)2(H2O)2].H2O(Ln=Pr,1;Tb,2;Lu,3;HPAA-=对羟基苯乙酸根;bipy=4,4'-联吡啶),通过元素分析、红外光谱、热重分析对其进行表征,用单晶X射线衍射方法测定了配合物的晶体结构。结构分析表明三种晶... 详细信息

合成了3个双核稀土配合物[Ln2(HPAA)6(bipy)2(H2O)2].H2O(Ln=Pr,1;Tb,2;Lu,3;HPAA-=对羟基苯乙酸根;bipy=4,4'-联吡啶),通过元素分析、红外光谱、热重分析对其进行表征,用单晶X射线衍射方法测定了配合物的晶体结构。结构分析表明三种晶体属于异质同晶型,同属于三斜晶系,空间群为P 1。测定了固态Tb(Ⅲ)配合物的荧光光谱,结果表明:在形成配合物后,依然显示Tb(Ⅲ)离子的特征发射,配体将吸收的能量有效地转移给了中心离子,配体起到了很好的敏化作用。

关键词：稀土配合物对羟基苯乙酸 4,4'-联吡啶晶体结构荧光光谱

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格雷码结合相移的编码结构光三维重建技术研究

格雷码结合相移的编码结构光三维重建技术研究

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作者：侯风芝西安电子科技大学

学位级别：硕士

三维重建技术是计算机视觉技术的一个分支,是计算机视觉和计算机图像图形处理相结合的一个研究方向。它在生产自动化、机器人视觉、文化遗产保护、虚拟现实和计算机辅助医学等领域都有着广泛的应用前景。如何快速准确地获取被测物体表... 详细信息

三维重建技术是计算机视觉技术的一个分支,是计算机视觉和计算机图像图形处理相结合的一个研究方向。它在生产自动化、机器人视觉、文化遗产保护、虚拟现实和计算机辅助医学等领域都有着广泛的应用前景。如何快速准确地获取被测物体表面的信息,并根据这些信息重建被测物体,是一项重要而有难度的研究课题。本论文研究并设计开发了一种格雷码结合相移编码方法的双目立体视觉测量系统。论文对基于编码结构光的三维重建技术的相关理论和方法做了深入的分析;论述了双相机联合定标的原理及实现方法,建立了双相机与投影图案间的视觉几何约束关系及其代数描述模型;对投影图案的各种编码设计方法进行了分类和对比,设计了7位格雷码结合16次相移的编码方法;结合硬件平台完成了图像的采集、边缘提取、解码、三维点云计算和重建的全部软件工作。本文在实验室环境下对该系统进行了可行性分析实验,实现了被测物体的三维点云重建。该系统编码简单,容易实现,并且在减少扫描时间及提高重建精度上,有较明显的优势。

关键词：编码结构光相机定标三维测量点云重建

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致密砂岩气藏纳米封堵型低伤害压裂液研究

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西南石油大学学报（自然科学版） 2022年第3期44卷 139-147页

作者：谭佳刘殷韬潘宝风中国石化西南油气分公司石油工程技术研究院四川德阳618000

针对常规胍胶压裂液对致密砂岩气藏伤害大的难题,通过分子结构设计和正交实验,研制了一种纳米封堵型低伤害压裂液,在致密气藏压裂施工中能封堵部分压裂液于储层基质外,施工后液体能快速返排,从而有效降低稠化剂分子的滞留吸附与液相伤... 详细信息

针对常规胍胶压裂液对致密砂岩气藏伤害大的难题,通过分子结构设计和正交实验,研制了一种纳米封堵型低伤害压裂液,在致密气藏压裂施工中能封堵部分压裂液于储层基质外,施工后液体能快速返排,从而有效降低稠化剂分子的滞留吸附与液相伤害。该压裂液在35~140℃、170 s^(-1)条件下剪切120 min,终黏度大于80 mPa.s:能彻底破胶,残渣含量低,破胶液表面张力为25.91 mN/m,对致密砂岩岩芯伤害率低于15%,封堵性能及其他综合性能满足现场施工要求。该压裂液在ZJ125井现场应用,效果良好,施工后液体返排快,返排率高达75.94%,比邻井提高47%,天然气产量1.6475×10^(4)m^(3)/d,是邻井JS316HF井产量的两倍,显示了其在致密砂岩气藏中良好的低滞留特性。

关键词：致密砂岩气藏纳米封堵低伤害压裂液

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MicroRNA-206靶向c-Met基因抑制甲状腺乳头状癌细胞增殖和迁移的研究

MicroRNA-206靶向c-Met基因抑制甲状腺乳头状癌细胞增殖和迁移的...

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作者：杜喜风山西医科大学

学位级别：硕士

研究背景及目的:甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）是临床中最常见的内分泌恶性肿瘤,近年来其发病率逐年上升,约有10%-15%的PTC患者常出现远处转移和复发,导致其对标准治疗的效果较差,预后不佳。因此,研究PTC形成和发... 详细信息

研究背景及目的:甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）是临床中最常见的内分泌恶性肿瘤,近年来其发病率逐年上升,约有10%-15%的PTC患者常出现远处转移和复发,导致其对标准治疗的效果较差,预后不佳。因此,研究PTC形成和发展的分子机制是十分必要的,对寻找PTC治疗新药,提高PTC患者的预后具有重要意义。微小RNA（microRNA,miRNA,miR）是一类长约22个核苷酸的非编码RNA,参与调节细胞分化、增殖和代谢等基本的生理过程。异常表达的miRNA能够从转录后水平调控各种致癌或抑癌基因的表达,从而调控多种恶性肿瘤的发生和发展,而miR-206在多种癌症中如乳腺癌、肝癌、胃癌等有异常表达,其在甲状腺乳头状癌组织中的表达量较正常组织中低,但miR-206对甲状腺乳头状癌具体生物功能及机制尚未阐明。肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor,HGF）的受体c-Met与HGF结合后,可导致酪氨酸残基磷酸化并激活PI3K/Akt/mTOR通路,异常激活的c-Met/Akt/mTOR信号通路与甲状腺癌、宫颈癌等多种恶性细胞的增殖和迁移密切相关,然而,在PTC中,miR-206能否通过抑制c-Met/Akt/mTOR信号通路而发挥抑癌作用,尚未见相关报道。本研究目的是探索miR-206对甲状腺乳头状癌K1细胞增殖和迁移的影响,验证c-Met为miR-206的靶基因,并研究与其调控相关的可能的信号通路,为甲状腺乳头状癌临床靶向治疗筛选新的分子干预靶点。方法:取对数生长期甲状腺乳头状癌K1细胞,分为3组,即空白组（Blank组）:未行任何转染;阴性对照组（miR-NC组）:转染miR-206阴性对照物;实验组（miR-206mimic组）:转染hsa-miR-206 mimic（miR-206模拟物）。采用逆转录定量PCR（RT-qPCR）技术检测转染后各组细胞miR-206的表达水平;CCK-8实验和台盼蓝染色活细胞计数检测K1细胞的增殖能力;Transwell迁移小室实验检测K1细胞的迁移能力;利用生物信息学软件预测miR-206的靶基因;采用双荧光素酶报告基因检测法验证miR-206和c-Met的靶向关系;Western blot检测c-Met/AKT/mTOR通路中各蛋白水平的变化。结果:K1细胞瞬时转染miR-206 mimic后,RT-qPCR检测实验组K1细胞中miR-206的相对表达量较空白组和阴性对照组明显升高,差异有统计学意义（P均＜0.05）;CCK-8及台盼蓝染色活细胞计数实验表明,与空白组、阴性对照组相比,转染miR-206 mimic的实验组中K1细胞的增殖能力明显受到抑制（P均＜0.05）;Transwell实验发现实验组K1细胞的迁移数低于空白组和阴性对照组（P均＜0.05）;双荧光素酶报告基因检测表明miR-206可负调控靶基因c-Met的表达;Western blot结果显示实验组细胞中p-Met、p-AKT和p-mTOR蛋白的表达水平明显降低（P＜0.05）。结论:上调miR-206的表达可抑制甲状腺乳头状癌K1细胞的增殖和迁移能力,其作用机制可能与miR-206靶向调控c-Met抑制AKT/mTOR信号通路激活有关。

关键词： MicroRNA-206 甲状腺乳头状癌K1细胞细胞增殖细胞迁移 c-Met

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元气淋漓—我在山水画创作过程中的点滴体会

元气淋漓—我在山水画创作过程中的点滴体会

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作者：马风民山东艺术学院

学位级别：硕士

元、始也,为万物之始,万物之本。庄子说气“至大无外,谓之大一;至小无内,谓之小一”,但确实真实的存在,是可以感知的真是存在。山水画的“元气”就是画者创作之前的画者原始的创作意图和要展现的内心的山水景象和意境。山水画的创作就... 详细信息

元、始也,为万物之始,万物之本。庄子说气“至大无外,谓之大一;至小无内,谓之小一”,但确实真实的存在,是可以感知的真是存在。山水画的“元气”就是画者创作之前的画者原始的创作意图和要展现的内心的山水景象和意境。山水画的创作就是指画者从创作的“元气”的驱使下,借助描绘客观物象来实现内心之山水气象,来描绘内心创作之初景象的山水画。山水画创作之始,画者首先要明确创作的创作意图和目标是什么?要表达的客观或是主观的物象是什么模样?在创作时能酣畅淋漓第把要创作初的“元气”展现在一幅山水画中,这便是杜甫题画中讲到“元气淋漓障犹湿”的山水画。结合这几年的学习和工作经验,得到些许心得,要想创作出一幅元气淋漓的山水画,需要做到几点:首先要加强自身的美学修养及知识积累,创作的知识面要广,元气不仅要广还要厚,在创作前保证有足足的元气;其次要提高自己的绘画技术,认真学习各种山水画技法、提高自己的绘画技术水平,这需要认真向古人学习,多多研习各种名画的创作技法,须师法自然,多搜尽奇峰,多打草稿。最后在创作过程中酣畅淋漓地展现出创作初的元气,元气尽至,酣畅淋漓地完成一幅元气淋漓的山水画。同时,在这几年的学习、创作中有诸多的失败,在总结分析创作失败的问题时,发现很多的问题出现在创作的过程控制上,过程控制的成败直接制影响着作品最终的成败,也积累一些教训给大家展现。

关键词：山水画创作过程创作

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基于风险的张城垸化工园区整体性安全评估研究

基于风险的张城垸化工园区整体性安全评估研究

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作者：阳云风武汉工程大学

学位级别：硕士

随着我国石油与化工行业的不断发展,国内以化工产业为主导的化工园区如雨后春笋般地涌现出来。化工园区的建立固然可以促进化工行业整体发展以及推动所在地经济发展,但同时也为区域带来了更大的风险。化工园区主要功能之一是资源的合理... 详细信息

随着我国石油与化工行业的不断发展,国内以化工产业为主导的化工园区如雨后春笋般地涌现出来。化工园区的建立固然可以促进化工行业整体发展以及推动所在地经济发展,但同时也为区域带来了更大的风险。化工园区主要功能之一是资源的合理分配,而在资源的合理分配过程中往往伴随着危险源的聚集现象,一旦发生事故将造成难以估量的后果。因此,研究和分析化工园区整体性安全风险评估,对保障园区安全生产和避免重特大事故的发生都有重大意义。基于此,本文开展了以下研究工作:（1）论文首先利用化工园区的事故数据分析和典型事故案例研究,得出化工事故的风险特征,再结合张城垸化工园区的实际情况,将园区划分为园区选址及规划单元、园区内布局单元、园区内企业生产状况单元、配套功能设施单元和园区一体化安全管理及应急救援单元5个风险评估单元。（2）论文重点介绍了几种基本的安全评估方法。再根据评估方法自身的特点和张城垸化工园区的实际情况,从园区重大危险源和整体性安全两个角度出发,选择采用基于风险的定量评估方法和基于模糊数学的综合评估方法,来对化工园区进行安全风险评估应用研究。（3）论文对张城垸化工园区进行基于风险的评估方法应用,运用CASST-QRA重大危险源区域定量风险评价软件对园区进行事故后果模拟和分析,进一步计算出园区的个人风险和社会风险值,并将其与风险可接受标准进行比对,得出园区的个人风险和社会风险均是可接受的。（4）论文从园区选址及规划、园区内布局、园区内企业生产状况、配套功能设施和一体化安全管理及应急救援5个评估单元出发,构建了一套完整的化工园区整体性安全风险评估体系。然后在建立的体系的基础上,从园区整体性安全的角度出发,应用模糊综合数学模型,对张城垸化工园区进行安全风险评估应用研究,以验证所构建体系的合理性和可行性。结果显示,张城垸化工园区整体性安全风险等级为一般风险,安全评级为合格,与张城垸化工园区的实际情况和定量风险评估的结果均相符合。本文以张城垸化工园区为例,从园区重大危险源和整体性安全两个角度出发,选用基于风险的定量评估方法和基于模糊数学的综合评估方法,来对化工园区进行安全风险评估应用研究。同时,本研究中所构建的化工园区整体性安全风险评估体系可应用于同类型化工园区的整体性安全评估,具有一定的实际应用价值。

关键词：化工园区整体性安全风险风险评估评估指标体系模糊综合评价

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草莓离体再生及根癌农杆菌介导CBF1基因遗传转化的研究

草莓离体再生及根癌农杆菌介导CBF1基因遗传转化的研究

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作者：袁维风安徽农业大学

学位级别：硕士

草莓（Fragaria×ananassa Duch）是世界上最重要的经济浆果之一。多年来草莓新品种选育的主要途径是杂交育种，但由于草莓本身遗传性状的高度杂合和多倍性，使得常规育种费时费力、周期长，见效慢，而且目标性状与不良性状连锁，造成... 详细信息

草莓（Fragaria×ananassa Duch）是世界上最重要的经济浆果之一。多年来草莓新品种选育的主要途径是杂交育种，但由于草莓本身遗传性状的高度杂合和多倍性，使得常规育种费时费力、周期长，见效慢，而且目标性状与不良性状连锁，造成育种效率低，不能适应草莓生产发展的需要。耐寒耐旱、抗虫、抗病等优良品种的缺乏仍是目前草莓大田生产上一个严重的问题。植物基因工程的发展和应用则为草莓育种开辟了一条新途径。由于农杆菌介导的遗传转化主要依赖于受体材料的再生能力及农杆菌的转化效率，因此，首先良好而高效的受体再生体系建立是进行成功的基因转化关键所在。本试验以草莓品种达斯莱克特、童子1号、枥乙女、意大利1号为试材，研究了草莓离体再生过程中基因型、基本培养基、激素配比、蔗糖及琼脂浓度、苗龄和外植体等对草莓离体再生不定芽的影响，获得了草莓高效的离体再生体系。在此基础上，对影响农杆菌转化效率的主要因素进行筛选，得到一个最佳的转化体系。通过根癌农杆菌介导将转录激活因子CBF1基因导入草莓基因组，获得转化植株。Kan筛选、PCR检测证明目的基因已经整合到草莓基因组中。叶片抗寒电导率测定和植株抗寒生长恢复实验均证实了CBF1基因已在草莓转化植株中得到表达。主要研究结果如下：（一）建立了草莓离体再生体系1 草莓不同基因型再生能力差异很大，再生频率94%%。在四个供试草莓品种中达斯莱克特再生能力最强，童子1号和意大利1号次之，枥乙女再生能力最弱，几乎不能诱导出芽。2 在不定芽诱导中以3.0mg/L6-BA+0.1mg/L 2,4-D对达斯莱克特叶片诱导效果最佳，低浓度的2,4-D有利于不定芽再生。IAA 、IBA、NAA分别以浓度1.0、0.5、0.1 mg/L诱导较好，但它们对不定芽的总体诱导效果都不及2,4-D。高浓度2,4-D、IBA、NAA不利叶片再生。TDZ对达斯莱克特无明显促进效果，且不及6-BA。3 基本培养基MS+B5大大促进了叶片不定芽的分化。蔗糖、琼脂浓度分别以3%、0.7%诱导效果最好。4 叶片再生能力远大于叶柄和根。叶片采取近轴面接触培养基效果最佳。以继代35～42天的试管苗幼嫩、平展叶片作为接种外植体为宜。叶柄最高再生频率只达40%，根未诱导出不定芽。（二）建立了草莓遗传转化体系并获得一批转化植株。1 在农杆菌介导的基因转化中，确定了有效的Kan选择压为20 mg/L;通过抑菌实验，确定了合适的抗菌素及其浓度（即500mg/L Cef）。

关键词：草莓转录因子CBF1基因再生根癌农杆菌遗传转化 PCR 抗寒性鉴定

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