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改良的抑制素放射免疫测定及其对卵巢肿瘤的监测作用

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肿瘤 1998年第5期18卷 322-325页

作者：隋龙张令浩王成海由振东刘东罗建华金志军朱明伟第二军医大学附属长征医院妇产科第二军医大学神经生物学教研室上海医科大学妇产科研究所

目的研究并应用一种改良的抑制素（Ｉｎｈｉｂｉｎ，ＩＮＨ）放射免疫测定（ＲＩＡ）。方法对卵巢颗粒细胞瘤、卵泡膜细胞瘤及卵巢上皮性肿瘤等多种卵巢肿瘤进行监测。结果１．卵巢颗粒细胞瘤、卵泡膜细胞瘤和卵巢粘液性囊腺癌及恶性畸... 详细信息

目的研究并应用一种改良的抑制素（Ｉｎｈｉｂｉｎ，ＩＮＨ）放射免疫测定（ＲＩＡ）。方法对卵巢颗粒细胞瘤、卵泡膜细胞瘤及卵巢上皮性肿瘤等多种卵巢肿瘤进行监测。结果１．卵巢颗粒细胞瘤、卵泡膜细胞瘤和卵巢粘液性囊腺癌及恶性畸胎瘤患者血浆ＩＮＨ浓度均值高于其他肿瘤患者，差异非常显著，Ｐ＜０．０１。２．卵巢颗粒细胞瘤、卵泡膜细胞瘤和粘液性囊腺癌及内膜样癌患者血浆ＩＮＨ值术前异常升高，术后一周降至正常范围，并可动态监测病情变化。结论１．改良的ＩＮＨＲＩＡ方法方便、省时、定量、敏感性高。２．ＩＮＨ可作为卵巢肿瘤的良好监测指标，与ＣＡ┐１２５联合应用，将有助于卵巢癌的早期诊断。

关键词：抑制素卵巢肿瘤颗粒细胞瘤放射免疫法

慢病毒介导碱性成纤维细胞生长因子在大鼠羊膜上皮细胞中的表达和分泌

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解剖学报 2010年第5期41卷 679-685页

作者：谢佳芯袁建明郭金萍由振东路长林许家军第二军医大学人体解剖学教研室上海200433 第二军医大学神经生物学教研室上海200433

目的探讨以慢病毒作为载体,将带有分泌肽的人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因片段转入大鼠羊膜上皮细胞(AECs)中,构建能稳定表达并分泌bFGF多肽的细胞载体。方法取妊娠晚期SD大鼠的羊膜组织进行AECs原代培养,用免疫荧光细胞化学和RT-... 详细信息

目的探讨以慢病毒作为载体,将带有分泌肽的人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因片段转入大鼠羊膜上皮细胞(AECs)中,构建能稳定表达并分泌bFGF多肽的细胞载体。方法取妊娠晚期SD大鼠的羊膜组织进行AECs原代培养,用免疫荧光细胞化学和RT-PCR法鉴定;构建包含人神经生长因子(NGF)分泌肽-bFGF编码基因的慢病毒载体,并行慢病毒包装,用病毒上清对传代大鼠AECs进行感染并筛选,经免疫荧光细胞化学、RT-PCR及酶联免疫吸附法(ELISA)检测基因转染效果,体外培养观察基因转染后的细胞生长活性;用基因转染细胞的培养上清对PC12细胞进行培养,检测所分泌bFGF多肽的生物学活性。结果所培养的大鼠AECs经鉴定能表达上皮特异性标志物CK-19、神经类细胞标志物巢蛋白(nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)以及细胞多能性标志分子SSEA-4、Oct-4、Nanog、Sox2、波形蛋白(vimentin)等;经感染并筛选后扩增培养的大鼠AECs在mRNA水平及多肽水平均能检测到目的基因bFGF的表达,筛选后的转染细胞生长活性较未转染细胞明显提高,其培养上清能明显促进PC12细胞的生长和分化。结论用慢病毒作为载体能成功将bFGF基因转染入大鼠AECs中,所建立的基因修饰AECs能表达并分泌bFGF多肽,具有较强的生长活性及神经营养活性。

关键词：羊膜上皮细胞碱性成纤维细胞生长因子慢病毒基因转染免疫荧光细胞化学酶联免疫吸附法大鼠

p62Dok PTB结构域融合蛋白的表达和纯化

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河南医科大学学报 2001年第4期36卷 404-407页

作者：阎志勇吴爱群张勇由振东路长林周明明何成第二军医大学神经生物学教研室上海200433 河南医科大学解剖学教研室郑州450052

目的 :制备p6 2DokPTB结构域的GST融合蛋白。方法 :用PCR方法扩增编码p6 2DokPTB结构域的cD NA ,并将其克隆入表达载体pGEX 4T 3中 ,转化大肠杆菌BL 2 1,构建成表达GST PTB融合蛋白的菌株。经IPTG诱导表达后 ,经Glutathion Sepharose 4... 详细信息

目的 :制备p6 2DokPTB结构域的GST融合蛋白。方法 :用PCR方法扩增编码p6 2DokPTB结构域的cD NA ,并将其克隆入表达载体pGEX 4T 3中 ,转化大肠杆菌BL 2 1,构建成表达GST PTB融合蛋白的菌株。经IPTG诱导表达后 ,经Glutathion Sepharose 4B亲和层析柱纯化 ,用SDS PAGE进行分析 ,该融合蛋白的表达量超过菌体总蛋白的 2 5 %。结果 :获得重组GST PTB融合蛋白 ,纯度在 95 %以上 ,产物得率约 75 %。结论 :成功制备高纯度p6 2DokPTB结构域的GST融合蛋白 ,为进一步研究p6 2DokPTB结构域的结构和生物学功能奠定了基础。

关键词： p62Dok PTB结构域重组蛋白融合蛋白基因表达纯化

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神经肽与偏头痛研究进展

国际神经病学神经外科学杂志 2006年第2期33卷 157-159页

作者：王永久刘坤由振东青岛市第八人民医院神经内科 266100 上海第二军医大学神经生物教研室 200433

偏头痛的发病机制尚未明确,许多神经肽参与了偏头痛的发生。某些因素激活了脑血管周围的三叉神经末梢,释放神经肽,如降钙素基因相关肽(CGRP)、内皮素、P物质等,使脑血管过度扩张,血浆蛋白渗出,产生无菌性神经源性炎症,导致头痛的发生。... 详细信息

偏头痛的发病机制尚未明确,许多神经肽参与了偏头痛的发生。某些因素激活了脑血管周围的三叉神经末梢,释放神经肽,如降钙素基因相关肽(CGRP)、内皮素、P物质等,使脑血管过度扩张,血浆蛋白渗出,产生无菌性神经源性炎症,导致头痛的发生。多种神经肽的拮抗剂已被试验用于偏头痛的治疗,如CGRP的拮抗剂BIBN4096BS已在临床用于偏头痛的治疗。

关键词：偏头痛神经肽研究进展发病机制

可卡因-苯丙胺调节转录肽与肥胖关系研究进展

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癌变．畸变．突变 2008年第1期20卷 76-78页

作者：邹赢锌黄矛由振东第二军医大学基础部新药评价中心上海200433 第二军医大学基础部神经生物学教研室上海200433

可卡因-苯丙胺调节转录肽(cocaine-and amphetamine-regulated transcript peptides,CART)是近年来发现的一种内源性神经肽,参与人和动物多方面的生理功能。CART在进食行为和体内能量调节方面的作用受到广泛的关注,本文就CART的分布、... 详细信息

可卡因-苯丙胺调节转录肽(cocaine-and amphetamine-regulated transcript peptides,CART)是近年来发现的一种内源性神经肽,参与人和动物多方面的生理功能。CART在进食行为和体内能量调节方面的作用受到广泛的关注,本文就CART的分布、结构特点及其与肥胖关系的研究进展作一综述。

关键词：可卡因-苯丙胺调节转录肽(CART) 进食肥胖

视上核内电针和注射谷氨酸对脑部核团加压素含量的RIA

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放射免疫学杂志 1997年第5期10卷 257-259页

作者：赵小林由振东宋朝佑第二军医大学神经生物学教研室 200433

本工作应用RIA观察了在视上核(SON)内注射10μg L-谷氨酸(L-Glu)和电针(EA)对脑部核团精氨酸加压素(AVP)含量的变化。结果表明:(1)注射和电针后在SON内AVP含量无明显变化。注射后,在室旁核(PVN)内AVP含量先明显升高(p<0.05),而后明显降... 详细信息

本工作应用RIA观察了在视上核(SON)内注射10μg L-谷氨酸(L-Glu)和电针(EA)对脑部核团精氨酸加压素(AVP)含量的变化。结果表明:(1)注射和电针后在SON内AVP含量无明显变化。注射后,在室旁核(PVN)内AVP含量先明显升高(p<0.05),而后明显降低(P<0.05)。而注射和电针后室旁核内AVP先含量明显降低(P<0.05～0.01),而后升高(P<0.01)。(2)SON内注射L-Glu后,中缝大核(NRM)和蓝斑(LC)内AVP含量先明显升高(p<0.05)。以上结果提示。刺激的SON引起镇痛和加强EA镇痛效应与SON内AVP无明显关系,但PVN内AVP可能参与痛的调制过程。

关键词：精氨酸加压素视上核谷氨酸电针放射免疫法

电针足三里所致CNS中氨基酸类递质的变化及NMDA受体在针刺镇痛中的作用

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针刺研究 1997年第1期22卷 45-46页

作者：王春安严进叶阿莉由振东宋朝佑胡宗礼第二军医大学生理教研室上海200433 湖北医学院咸宁分院药理教研室

Ir-MEK/ir-LEK在N-硝基-L-精氨酸抑制吗啡耐受形成中的作用

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中国药理学通报 2003年第1期19卷 119-120页

作者：万兴旺黄矛何雅琴万丽李万亥由振东路长林第二军医大学东方肝胆外科医院国际合作生物信号转导研究中心上海200438 第二军医大学基础医学部新药评价中心上海200433 第二军医大学长海医院药学部上海200433 第二军医大学药学院药理学教研室上海200433 第二军医大学基础医学部神经生物学教研室上海200433

长期应用阿片类镇痛药将导致药物耐受。由于患者对阿片类药物耐受进而造成臧瘾所带来的公共卫生和社会问题日益突出~[1]。N-硝基-L-精氨酸（NO_[2]Arg）是一种经典的一氧化氮合成酶抑制剂~[2]。有研究表明NO_[2]Arg可抑制吗啡镇痛耐受... 详细信息

长期应用阿片类镇痛药将导致药物耐受。由于患者对阿片类药物耐受进而造成臧瘾所带来的公共卫生和社会问题日益突出~[1]。N-硝基-L-精氨酸（NO_[2]Arg）是一种经典的一氧化氮合成酶抑制剂~[2]。有研究表明NO_[2]Arg可抑制吗啡镇痛耐受的形成~[3]，然而关于其作用机制目前还未见文献报道。本文采用剂量递增法模拟临床阿片类药物耐受形成，利用放射免疫法测定大鼠积压脑分区、脊髓和血浆中甲硫脑啡肽（ir-MEK）、亮脑啡肽（ir-LEK）含量，以探讨内源性脑啡肽系统在NO_[2]Arg抑制吗啡镇痛耐受形成中的作用。

关键词： Ir-MEK/ir-LEK N-硝基-L-精氨酸吗啡耐受吗啡一氧化氮脑啡肽

刺激大鼠视上核后电针“足三里”对蓝斑灌流液中去甲肾上腺素含量的影响

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动物学报 1996年第3期42卷 275-280页

作者：黄爱军由振东宋朝佑王成海路长林林葆城第二军医大学神经生物学教研室上海200433

运用行为测痛结合蓝斑（ＬＣ）灌流液去甲肾上腺素（ＮＥ）的高压液相（ＨＰＬＣ）测定；观察大鼠痛阈（ＰＴ）与ＬＣ灌流液中去甲肾上腺素含量变化间的相互关系，结果表明：（ｌ）视上核（ＳＯＮ）内注射１０μｍＬ－谷氨酸（Ｌ－... 详细信息

运用行为测痛结合蓝斑（ＬＣ）灌流液去甲肾上腺素（ＮＥ）的高压液相（ＨＰＬＣ）测定；观察大鼠痛阈（ＰＴ）与ＬＣ灌流液中去甲肾上腺素含量变化间的相互关系，结果表明：（ｌ）视上核（ＳＯＮ）内注射１０μｍＬ－谷氨酸（Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｃａｃｉｄ，Ｌ－Ｇｌｕ）后３０分钟，大鼠ＰＴ较注射前增加１３３．２± ２１．４％，此时ＬＣ灌流液中ＮＥ含量从注射前的４３７．３±２０．４ｎｇ／ｍｌ降到２２９．２±１１．９ｎｇ／ｍｌ，注射后６０分钟ＰＴ仍比注射前高８３．９±１４．７％，而灌流液中ＮＥ的含量为３２８．６±２８．０ｎｇ／ｍｌ，与人工脑脊液（ＡＣＳＦ）对照组相比有非常明显的差别（Ｐ＜０．０５～０．００１）。（２）ＳＯＮ注射Ｌ－Ｇｌｕ后，电针足三里３０分钟（Ｌ－ＧＩＵ＋ＥＡ组）增加到注射前的１８８．２±２３．９％，同ＡＣＳＦ电针组（ＡＣＳＦ＋ＥＡ）的９４．９±７．１％相比有明显差异（Ｐ＜０．０１）。此时ＬＣ灌流液中ＮＥ的含量虽较注射前都明显降低、分别为１３７．６±７．５ｎｇ／ｍｌ和１５１，１±１１．５ｎｇ／ｍｌ，但两者相比无明显差异。停针后３０分钟Ｌ－Ｇｌｕ＋ＥＡ组的ＰＴ仍比注射前高１３３．８±２７．９％。

关键词：大鼠电针视上核蓝斑去甲肾上腺足三里穴