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抗肾细胞癌G250基因疫苗的构建及真核表达

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抗肾细胞癌G250基因疫苗的构建及真核表达

第十五届全国泌尿外科学术会议

作者：田仁礼解放军总医院泌尿外科

目的:构建含有人肾细胞癌特异性抗原G250主要T细胞表位区域、猴和鼠G250部分片段区域融合基因的真核表达质粒,并在猴肾cos7细胞中表达。方法:通过基因合成和PCR技术构建人、猴和鼠G250区域融合基因tG250,将其插入含有人Igκ链前导信号肽... 详细信息

目的:构建含有人肾细胞癌特异性抗原G250主要T细胞表位区域、猴和鼠G250部分片段区域融合基因的真核表达质粒,并在猴肾cos7细胞中表达。方法:通过基因合成和PCR技术构建人、猴和鼠G250区域融合基因tG250,将其插入含有人Igκ链前导信号肽(sig)、人IgG-Fc和糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定信号肽融合基因序列的细胞膜锚定修饰真核表达载体pCI-Fc-GPI中,继而又将酶切后的sig-TG250-Fc-GPI融合基因导入含有细小病毒内部核糖体结合位点(IRES)基因且可以共表达人GM-CSF和B7.1融合基因的真核表达载体pVAX1-IRES-GM/B7中;将构建的重组质粒pVAX1-sig-tG250-Fc-GPI-GM/B7(简称pVAX1-tG250FcGB)转染293T细胞,利用流式细胞仪和免疫荧光检测其表达情况。结果:tG250融合基因经测序正确,PCR和酶切鉴定证明已成功连入真核表达载体pVAX1-IRES-GM/B7中;流式细胞仪和免疫荧光的检测结果显示,重组质粒pVAX1-tG250FcGB在cos7细胞中得到很好的表达。结论:成功构建了重组质粒pVAX1-tG250FcGB,且在cos7细胞中可以有效表达,为对该基因疫苗的后续功能研究奠定了基础。

关键词：肾细胞癌基因疫苗真核表达

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中国大豆产业现状、趋势及应对措施浅见

大豆科技 2009年第4期 1-7页

作者：田仁礼九三粮油工业集团有限公司

2008/2009粮食年度,全球大豆价格大幅度下跌,我国进口大豆数量迅猛增加,国产大豆出现了市场不认可,企业不收购,国储存不下,农民卖豆难,豆农种植热情再次受挫,食用油市场再起风波已有前奏。大家知道,美国大豆期货从2008年7月3日的1 641... 详细信息

2008/2009粮食年度,全球大豆价格大幅度下跌,我国进口大豆数量迅猛增加,国产大豆出现了市场不认可,企业不收购,国储存不下,农民卖豆难,豆农种植热情再次受挫,食用油市场再起风波已有前奏。大家知道,美国大豆期货从2008年7月3日的1 641美分下跌到12月5日的790美分,暴跌851美分,跌幅达51·9%。同期,国内大豆市场也跟随美豆波动,中国大豆期货从5 326元/t下跌到2 890元/t,暴跌2 346元/t,跌幅达45·7%;中国豆油期货从14 697元/t下跌到5 648元/t,暴跌9 049元/t。跌幅达61·5%;豆粕期货从4 311元/t下跌到2 148元/t,暴跌2 163元/t,跌幅达50·2%;中国大豆现货从5 309元/t下跌到3 538元/t,暴跌1 771元/t,跌幅达33·4%;豆油从15 994元/t下跌到6 971元/t,暴跌9 023元/t,跌幅达56·4%,豆粕从4 790元/t下跌到3 082元/t,暴跌1 708元/t,跌幅达35·7%。这次大豆价格的暴涨暴跌,不但影响到城乡居民的利益,国家也为此付出了巨额的经济损失,据估算,仅大豆一项外国资本赚取的利润就超过了32...

关键词：中国大豆产业现状食用油市场进口大豆国产大豆

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浅谈如何加强校园文化建设

浅谈如何加强校园文化建设

SPRY2正向调节TNF-α诱导的成纤维细胞瘤L929细胞毒作用

全国德育教学研究会2011年年会

作者：田仁礼刘积斌山东省莱阳卫生学校

适应21世纪对对人才的要求,提高学生的文化素质和道德水准成了学校素质教育的重要课题,而校园文化建设则为素质教育提供了一个广阔的舞台。本文探讨了校园文化的内涵、作用、内容及其与素质教育的关系,强调了校园文化建设对提高学生综... 详细信息

适应21世纪对对人才的要求,提高学生的文化素质和道德水准成了学校素质教育的重要课题,而校园文化建设则为素质教育提供了一个广阔的舞台。本文探讨了校园文化的内涵、作用、内容及其与素质教育的关系,强调了校园文化建设对提高学生综合素质能力的重要意义。

关键词：校园文化素质教育学生素质

来源： cnki会议评论

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免疫学杂志 2014年第7期30卷 569-573页

作者：朱静潆杜芝燕王芳殷小涛田仁礼王启宇武帅张巍新疆大学生命科学与技术学院乌鲁木齐830046 军事医学科学院基础医学研究所转化医学研究室北京100850

目的探索SPRY2分子在肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的L929细胞毒作用中的调节作用。方法应用RT-PCR方法观察SPRY2基因在不同质量浓度TNF-α刺激作用下表达水平的变化;应用重组腺病毒介导SPRY2基因过表达方法观察其对TNF-α细胞毒活性的调... 详细信息

目的探索SPRY2分子在肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的L929细胞毒作用中的调节作用。方法应用RT-PCR方法观察SPRY2基因在不同质量浓度TNF-α刺激作用下表达水平的变化;应用重组腺病毒介导SPRY2基因过表达方法观察其对TNF-α细胞毒活性的调解效应。结果 L929细胞中存在SPRY2基因的天然表达,并且其表达水平随TNF-α刺激质量浓度的升高而升高,过表达SPRY2基因促进TNF-α诱导的L929细胞死亡。结论 SPRY2分子在TNF-α介导的肿瘤细胞杀伤效应中发挥正向调节作用。

关键词： SPRY2 TNF-α L929细胞细胞毒性

β-hCG蛋白在大肠杆菌系统的表达、纯化及活性鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2013年第5期29卷 481-484页

作者：王伟殷小涛李云奇田仁礼吴昊阎瑾琦高江平于继云解放军总医院泌尿外科北京100853 军事医学科学院基础医学研究所北京100850

目的获得β-人绒毛膜促性腺激素(β-hCG)融合蛋白β-hCG/GST并验证其抗原活性。方法利用PCR法扩增β-hCG全长基因,将其克隆至原核表达载体pET-42a中,构建重组质粒pET-42a-β-hCG,将该重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中IPTG诱导表达,经S... 详细信息

目的获得β-人绒毛膜促性腺激素(β-hCG)融合蛋白β-hCG/GST并验证其抗原活性。方法利用PCR法扩增β-hCG全长基因,将其克隆至原核表达载体pET-42a中,构建重组质粒pET-42a-β-hCG,将该重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中IPTG诱导表达,经SDS-PAGE分析,亲和层析法纯化融合蛋白,目的蛋白用Western blot法鉴定,ELISA检测纯化得到的融合蛋白的抗原活性。结果测序结果证实成功扩增出目的基因β-hCG;酶切和测序结果证实pET-42a-β-hCG原核表达载体构建成功;转化后可以成功诱导并纯化出大小与预期一致的蛋白;Western blot法及ELISA检测证实纯化后的β-hCG/GST融合蛋白具有良好的免疫原性。结论成功获得β-hCG/GST融合蛋白,该蛋白具有良好的免疫原性,为以β-hCG为靶位的抗肿瘤主动免疫治疗研究奠定了基础。

关键词： β-hCG 原核表达蛋白纯化

肾癌相关抗原G250-MN/CAⅨ在肾癌疫苗和免疫治疗研究中的应用

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军事医学科学院院刊 2007年第6期31卷 582-585页

作者：张亮田仁礼阎瑾琦于继云军事医学科学院基础医学研究所疫苗工程研究室北京100850

肿瘤疫苗主要是通过肿瘤相关抗原,尤其是肿瘤特异性抗原,激活免疫系统产生针对肿瘤的特异性免疫反应来达到治疗目的。G250在肾细胞癌中的特异性表达使它成为肾癌疫苗潜在的靶抗原和肾癌免疫治疗的重要靶分子。本文主要针对以G250-MN/CA... 详细信息

肿瘤疫苗主要是通过肿瘤相关抗原,尤其是肿瘤特异性抗原,激活免疫系统产生针对肿瘤的特异性免疫反应来达到治疗目的。G250在肾细胞癌中的特异性表达使它成为肾癌疫苗潜在的靶抗原和肾癌免疫治疗的重要靶分子。本文主要针对以G250-MN/CAⅨ为特异性靶点的肾癌疫苗和免疫治疗研究进展作一综述。

关键词：肾肿瘤抗原,肿瘤癌症疫苗 G250-MN/CAⅨ 靶抗原免疫疗法

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试论识字教学中人文素养的培养

课外阅读（中下） 2012年第18期 138-139页

作者：胡秀英田仁礼莱阳师范附属小学山东莱阳265200 山东莱阳卫生学校山东莱阳265200

识字是阅读和写作的基础，小学阶段又是培养、奠定良好的语文素养和人文精神的重要时期。在识字教学过程中，不仅要关注识字的数量与速度，更应关注、开掘汉字蕴含的人文素养，让学生初步领悟汉字的文化内涵，了解汉字所负载的文化思想... 详细信息

识字是阅读和写作的基础，小学阶段又是培养、奠定良好的语文素养和人文精神的重要时期。在识字教学过程中，不仅要关注识字的数量与速度，更应关注、开掘汉字蕴含的人文素养，让学生初步领悟汉字的文化内涵，了解汉字所负载的文化思想、文化精神，提高文化品位和语文素养，培植热爱祖国语言文字的情感。

关键词：识字教学人文素养培养语文素养小学阶段人文精神教学过程文化内涵

小鼠CD40分子胞外段基因的克隆、原核表达及活性鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2013年第11期29卷 1200-1204页

作者：田仁礼朱静潆殷小涛王伟林晓亮徐元基阎瑾琦张巍高江平于继云解放军总医院泌尿外科北京100853 军事医学科学院基础医学研究所北京100850 新疆大学生命科学与技术学院

目的构建含小鼠CD40(mCD40)分子胞外段序列的原核表达载体,在大肠杆菌中表达,并对mCD40/GST融合蛋白进行纯化和抗原活性鉴定。方法从小鼠DC2.4细胞系中扩增目的基因mCD40并克隆至原核表达载体pGEX-6P-1,构建重组表达载体pGEX-6P-1-mCD40... 详细信息

目的构建含小鼠CD40(mCD40)分子胞外段序列的原核表达载体,在大肠杆菌中表达,并对mCD40/GST融合蛋白进行纯化和抗原活性鉴定。方法从小鼠DC2.4细胞系中扩增目的基因mCD40并克隆至原核表达载体pGEX-6P-1,构建重组表达载体pGEX-6P-1-mCD40,并将该载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达mCD40/GST融合蛋白,并采用GST琼脂糖凝胶纯化重组蛋白。纯化后的重组蛋白经Western blot法、间接ELISA鉴定其抗原活性。结果 PCR扩增产物经测序分析与GenBank公布的小鼠CD40胞外段序列一致;重组表达载体经酶切鉴定正确;IPTG诱导后经SDS-PAGE分析证实得到了相对分子质量(M r)为45 000的重组蛋白;Western blot法和ELISA检测证实纯化的mCD40/GST蛋白能够与特异性抗体发生反应。结论成功构建了原核表达载体pGEX-6P-1-mCD40,利用原核表达系统实现了mCD40/GST融合蛋白的可溶性表达并证明其具有较高的抗原活性。

关键词： CD40 原核表达蛋白纯化活性检测

中职学校心理咨询服务需求的现状研究——以山东省莱阳卫生学校为例

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教师 2022年第1期 9-11页

作者：于娇娇邢路平田仁礼山东省莱阳卫生学校山东烟台265200

文章通过对中职生心理咨询服务需求的问卷调查,发现大部分中职生通过中职学校知晓心理咨询服务,且更愿意通过中职学校心理中心接受心理咨询服务,非常看重心理咨询服务的安全性和隐私性,最关注情绪及其管理、人际关系、压力与挫折应对等... 详细信息

文章通过对中职生心理咨询服务需求的问卷调查,发现大部分中职生通过中职学校知晓心理咨询服务,且更愿意通过中职学校心理中心接受心理咨询服务,非常看重心理咨询服务的安全性和隐私性,最关注情绪及其管理、人际关系、压力与挫折应对等方面的问题。中职生对心理咨询服务的需求较大,但想要主动寻求心理咨询服务及实际寻求心理咨询服务的却不多。因此,中职学校需要加强心理咨询及心理健康知识的宣传和普及,多开展团队辅导和朋辈辅导等多种形式的咨询工作,以满足中职生不同的需求,让中职生更积极主动地寻求心理咨询服务。

关键词：中职学校心理咨询心理健康