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人参寡糖素对三七悬浮培养细胞生长的效应

广西植物 1994年第1期14卷 70-73页

作者：甘烦远郑光植中国科学院昆明植物研究所

从人参培养细胞的细胞壁中分离纯化到不同分子量的单体人参寡糖素。试验结果表明命名为人参寡糖素Ⅶ和人参寡糖素Ⅷ的两种寡糖素对三七悬浮培养细胞的生长具有明显的促进作用，其增长率分别为１９．３４％和１０．５８％，人参寡糖素Ⅶ... 详细信息

从人参培养细胞的细胞壁中分离纯化到不同分子量的单体人参寡糖素。试验结果表明命名为人参寡糖素Ⅶ和人参寡糖素Ⅷ的两种寡糖素对三七悬浮培养细胞的生长具有明显的促进作用，其增长率分别为１９．３４％和１０．５８％，人参寡糖素Ⅶ的适宜浓度为５—１０ｍｇ／ｌ。在高浓度下（大于２５ｍｇ／ｌ）稍抑制培养细胞生长。在细胞培养２２天（指数生长期）后．加入１０ｍｇ／ｌ的人参寡糖素Ⅶ．然后再培养２天。其生长速率即提高，加入人参寡糖素Ⅷ后．缩短了三七细胞悬浮培养生长的延缓期．提前进入对数生长期和指数生长期，并在对数生长期和指数生长期作用最明显，因而最终收获时培养细胞的产率增加。

关键词：人参寡糖素三七细胞悬浮培养

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人参培养细胞中活性六糖的分离及结构鉴定

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1996年第6期28卷 600-605页

作者：邓斌郑光植沈月毛罗建平甘烦远中国科学院昆明植物研究所兰州大学生物系中国烟草育种研究（南方）中心

将用酸水解人参细胞方法得到的寡糖素（ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｎｓｏｆＰａｎａｘｇｉｎｓｅｎｇ），是一组聚合度（ＤＰ）由３～１２单糖组成的水溶性混合物，经活性碳柱，Ｄｏｗｅｘ５０（Ｈ＋）柱，Ｂｉｏ－ＧｅｌＰ－２凝胶柱... 详细信息

将用酸水解人参细胞方法得到的寡糖素（ｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｎｓｏｆＰａｎａｘｇｉｎｓｅｎｇ），是一组聚合度（ＤＰ）由３～１２单糖组成的水溶性混合物，经活性碳柱，Ｄｏｗｅｘ５０（Ｈ＋）柱，Ｂｉｏ－ＧｅｌＰ－２凝胶柱后由半制备型ＯＤＳ柱在ＨＰＬＣ分离到一个六糖，通过ＧＣ，ＧＣ－ＭＳ，ＦＡＢ－－ＭＳ（包括ｌｉｎｋｅｄ－ｓｃａｎｎｉｎｇ，即联动扫描）和１３Ｃ－ＮＭＲ测定，推测出这个六糖有两种可能结构。

关键词：人参,培养细胞,寡糖DP-6 结构

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红花细胞培养中高产α-生育酚克隆系的筛选

云南植物研究 1992年第3期14卷 289-294页

作者：甘烦远郑光植中国科学院昆明植物研究所昆明650204

为了从红花(Carthamus tinctorius L.)培养细胞中筛选到具有高产α-生育酚性能的细胞变异体,利用细胞平板培养技术,利用HPLC法测定培养细胞中α-生育酚的含量,对200多个由单细胞或小细胞团发育而来的细胞克隆进行了筛选。结果发现,在细... 详细信息

为了从红花(Carthamus tinctorius L.)培养细胞中筛选到具有高产α-生育酚性能的细胞变异体,利用细胞平板培养技术,利用HPLC法测定培养细胞中α-生育酚的含量,对200多个由单细胞或小细胞团发育而来的细胞克隆进行了筛选。结果发现,在细胞生长速率和α-生育酚含量上,这些克隆之间存在着显著的差异。在克隆的第一代分析过程中,发现α-生育酚含量由0—138.9μg/gDW变化;细胞生产速率由0.20—0.53gDW/1.d变化。细胞生长速率与α-生育酚含量之间无明显相关性。对一些α-生育酚含量较高的克隆进行了稳定性观察,经近20代继代培养观察后,从中筛选到一个合成α-生育酚较稳定的高产克隆系(CT-289),其α-生育酚平均含量为114.4μg/gDW,是原始株系(15.83μg/gDW)的7.2倍;其生长速率为0.424gDW/1.d,与原始株系(0.417gDW/l.d)相差不大。

关键词：红花 α-生育酚细胞培养无性系

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提高植物培养细胞中次级代谢产物含量的途径

植物学通报 1991年第4期8卷 14-20页

作者：甘烦远郑光植中国科学院昆明植物研究所昆明650204

利用植物细胞培养的方法可以取代人工栽培、天然采集或人工合成的方法大量生产很多具有价值的产物(如药品、农药、香料、色素及食品添加剂等)。目前,利用紫草(Lithospermum erythrochizon)培养细胞生产紫草素,利用人参(Panax ginseng)... 详细信息

利用植物细胞培养的方法可以取代人工栽培、天然采集或人工合成的方法大量生产很多具有价值的产物(如药品、农药、香料、色素及食品添加剂等)。目前,利用紫草(Lithospermum erythrochizon)培养细胞生产紫草素,利用人参(Panax ginseng)根培养物生产食品添加剂等已进入商业市场。另外,利用黄连(Coptisjaponica)培养细胞生产小蘗碱、利用长春花(Catharathus roseus)培养细胞生产蛇根碱及阿吗碱和利用毛地黄(Digitalis lanata)培养细胞生产地高辛等亦都进行了工业化生产。尽管这样,由于植物培养细胞亦存在着一些缺点如很多培养物中代谢物含量很低或不存在,生长速度缓慢加上目前发酵成本过高、很多关键性问题未解决等等,使之未能广泛地应用于工业化生产。近年来,为了解决上述诸问题特别是解决培养物中代谢物含量低的问题,各国科研人员进行了不懈的努力,取得了长足的进展。本文着重对这方面近年来采用的新方法及新技术的研究作一概述。

关键词：植物细胞培养次级代谢产物

Chemical Constituents of the Suspension Cell Cultures of Maytenus hookeri

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Acta Botanica Sinica 2002年第5期44卷 603-610页

作者：鲁春华张建新甘烦远沈月毛中国科学院昆明植物研究所昆明650204 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室贵阳550002

Suspension cell cultures of Maytenus hookeri Loos. (Celastraceae) in SH media were established from the calli induced from the leaves and young steins of M. hookeri on MS media with the supplement of 2 mg/L 2,4-D and 0.1 mg/L KIN (kinetin). Ethyl acetate extract of the cultures showed inhibitory activities against Penicillium avellaneum UC-4376 which was sensitive to maytansinoids. Exhaustive isolation of natural products from a large scale of suspension cell cultures did not yield maytansine instead of affording nine compounds including one novel triterpenoid, named 2, 3-diacetoxyl maytenusone (1), and eight known ones including squalene (2), beta-sitosterol (3), 2', 3', 4-triacetyl-sitoindoside I (4), salaspermic acid (5), maytenonic acid (6), 2alpha-hydroxy-maytenonic acid (7), 6, 11,12-trihydroxy-8, 11, 13-abietrien-7-one (8) and 11, 12-dihydroxy-8, 11, 13-abietatrien-7-one (9) elucidated on the basis of 1D and 2D NMR data. The H-1-NMR and C-13-NMR assignments were made for 1, 5, 6 and 7, while the C-13-NMR assignments for 5 and 6 were revised. The chemical results suggested that the suspension cell cultures of M. hookeri did not produce maytansinoids under the reported experiment conditions.

关键词： Maytenus hookeri Celastraceae suspension cell cultures maytansine 2, 3-diacetoxyl maytenusone

各种因素对红花培养物中细胞生长及α-生育酚含量的影响

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Acta Botanica Sinica 1991年第7期33卷 516-522页

作者：甘烦远郑光植中国科学院昆明植物研究所

红花(Carthamus tinctorius)无菌苗的不同器官(胚恨、胚铀及子叶)和红花花蕾均能诱导出愈伤组织,这些愈防组织均有合成α-生育酚的能力。其中以由胚轴而来的愈伤组织的生长速率及α-生育酚含量为最高、蔗糖(30g/L)有利于细胞的生长,葡萄... 详细信息

红花(Carthamus tinctorius)无菌苗的不同器官(胚恨、胚铀及子叶)和红花花蕾均能诱导出愈伤组织,这些愈防组织均有合成α-生育酚的能力。其中以由胚轴而来的愈伤组织的生长速率及α-生育酚含量为最高、蔗糖(30g/L)有利于细胞的生长,葡萄糖(30g/L)有利于α-生育酚的积累。高含量的肌醇(0.55%)不仅促进细胞生长,而且明显刺激产物含量的增加。当细胞接种量为0.035—0.067g千重/瓶(50ml体积)时,细胞生长速率达到最高。培养于高浓度的CO_2(5%)条件下可有效地提高α-生育酚的积累。培养基中加入0.45—0.55%肌醇、10%椰子汁、0.1—0.5%酪蛋白氨基酸、30g/L蔗糖和10g/L的葡萄糖时,细胞的生长速率、α-生育酚含量和产率分别是对照的1.***.2.03和3.30倍。

关键词：红花生育酚生长速率组织培养

植醇与寡糖对红花悬浮培养细胞的生长及α-生育酚积累的效应

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植物生理学报（0257-4829) 1990年第4期16卷 361-366页

作者：甘烦远郑光植王世林中国科学院昆明植物研究所昆明650204

在红花细胞悬浮培养基中加入α-生育酚的前体植醇能显著增加α-生育酚的积累,较高浓度的植醇(50～100 ppm)能同时促进细胞的生长。在培养基中加入抗氧剂角鲨烯也能提高α-生育酚的积累。诱导因子寡糖对细胞的生长和α-生育酚含量均有提... 详细信息

在红花细胞悬浮培养基中加入α-生育酚的前体植醇能显著增加α-生育酚的积累,较高浓度的植醇(50～100 ppm)能同时促进细胞的生长。在培养基中加入抗氧剂角鲨烯也能提高α-生育酚的积累。诱导因子寡糖对细胞的生长和α-生育酚含量均有提高作用,其中以寡糖F_(11)效果较佳。悬浮细胞培养基中同时加入15ppm的寡糖F_(11),75ppm的植醇和100 ppm的角鲨烯,细胞生长速率可提高23.81％,α-生育酚含量及产率分别比对照提高2.8倍和3.6倍。

关键词：红花 α-生育酚细胞培养植醇

红花愈伤组织诱导、生长及其α-生育酚的产生

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云南植物研究 1991年第2期13卷 189-195页

作者：甘烦远郑光植中国科学院昆明植物研究所昆明650204

通过TLC和HPLC初步分析和鉴定,证明从红花(Carthamus tinctorius)无菌苗的胚根、胚轴及子叶和花蕾中诱导出的愈伤组织均具有合成α-生育酚的能力。其中以胚轴的愈伤组织和悬浮培养细胞的生长速率及α-生育酚的含量较高,分别达到0.35、0... 详细信息

通过TLC和HPLC初步分析和鉴定,证明从红花(Carthamus tinctorius)无菌苗的胚根、胚轴及子叶和花蕾中诱导出的愈伤组织均具有合成α-生育酚的能力。其中以胚轴的愈伤组织和悬浮培养细胞的生长速率及α-生育酚的含量较高,分别达到0.35、0.39克干重/升·天和0.62、2.28毫克/100克干重样品。对红花细胞生长较适宜的培养基为MC培养基。培养基中附加10％椰子汁或0.1％酪蛋白氨基酸可使细胞生长显著提高,分别达到0.45和0.41克干重/升·天。

关键词：红花愈伤组织 α-生育酚

人参寡糖素M对红花培养细胞生长与α-生育酚形成的影响

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植物生理学报（0257-4829) 1992年第4期18卷 355-360页

作者：甘烦远徐纯郑光植中国科学院昆明植物研究所昆明650204

人参寡糖素M能提高红花(Carthamus tinctorius)培养细胞的生长速率和培养细胞中代谢产物α-生育酚的含量。其最适作用浓度在愈伤组织培养中为5mg/L。在红花细胞悬浮培养加入人参寡糖素M1d后,培养细胞中α-生育酚的含量即提高,但由于累... 详细信息

人参寡糖素M能提高红花(Carthamus tinctorius)培养细胞的生长速率和培养细胞中代谢产物α-生育酚的含量。其最适作用浓度在愈伤组织培养中为5mg/L。在红花细胞悬浮培养加入人参寡糖素M1d后,培养细胞中α-生育酚的含量即提高,但由于累积效应,因而于细胞接种当天同时加入人参寡糖素M对细胞生长和α-生育酚含量的提高效果较好。加入人参寡糖素M可缩短红花悬浮培养细胞生长的延缓期,并于指数生长期作用最明显;另外可使细胞生长及α-生育酚积累同时提前达到最高值,因而缩短了细胞收获时间。

关键词：寡糖素红花细胞培养 α-生育酚