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作者：甄军丽河北医科大学

学位级别：硕士

目的:癫痫是以脑神经元过度异常放电导致反复发作性和短暂性的中枢神经系统功能失常为特征的一种脑功能失调综合征,其发病机制仍不清楚。癫痫可致脑损伤,细胞凋亡或称程序性细胞死亡启动一系列复杂的蛋白酶级联反应,是癫痫致脑损伤的... 详细信息

目的:癫痫是以脑神经元过度异常放电导致反复发作性和短暂性的中枢神经系统功能失常为特征的一种脑功能失调综合征,其发病机制仍不清楚。癫痫可致脑损伤,细胞凋亡或称程序性细胞死亡启动一系列复杂的蛋白酶级联反应,是癫痫致脑损伤的一条重要途径。长时间癫痫反复发作后可出现脑内选择性的神经元凋亡坏死和海马硬化,一旦出现了海马硬化,则脑组织损伤及记忆功能障碍将不可逆。通过腹腔注射戊四氮(pentylenetrazol,PTZ)建立癫痫持续状态大鼠模型来观察大鼠海马组织的形态学改变,如采用Nissl染色法检测神经细胞丢失坏死情况;Timm染色法观察海马组织苔藓纤维出芽情况;电镜观察海马CA3区的超微结构;同时运用免疫组化法计算阳性细胞的平均光密度值;Western blot方法分别检测海马组织中caspase3和hsp70的表达情况。初步探讨了癫痫发作后caspase3介导的凋亡相关途径和Hsp70的动态表达情况,将有助于从分子水平上更有效的寻求癫痫的治疗靶点,及时进行干预并控制凋亡的发生,为减轻癫痫致脑损伤提供新方法。方法:选取清洁级(SPF级)雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠70只,实验起始体重(180±20)g, 12h光亮/黑暗条件、22℃-25℃环境温度,分笼喂养。实验动物随机分为癫痫持续状态组(status epilepticus,SE组)和对照组(normal control group,NC组)两个大组,SE组又分为癫痫发作后3h组、6h组、12h组、24h组,5组各14只。SE各组大鼠应用生理盐水溶解的1% PTZ溶液,首先按40 mg/kg腹腔注射,10 min后再给20 mg/kg,根据实验动物的发作情况再适量追加10 mg/kg,直至出现Ⅳ级或Ⅴ级发作为止。Racine将点燃分为六级评价标准,至今仍在实验中广泛应用。0级,无任何反应:Ⅰ级,湿狗样抖动,面部抽搐及咀嚼;Ⅱ级,颈部肌肉痉挛,表现为点头和/或甩尾;Ⅲ级,一侧前肢痉挛;Ⅳ级,双侧前肢痉挛伴站立;Ⅴ级,全身阵挛、失去平衡甚至跌倒。完全点燃的标准是达到Ⅳ级或Ⅴ级发作且持续30min以上。对照组注射同等容量的生理盐水。观察大鼠行为学改变,后将各组大鼠随机选取3只行Nissl染色和Timm染色法分别检测海马组织神经细胞丢失坏死情况和苔藓纤维出芽情况,3只用于电镜观察海马CA3区的超微结构,5只行免疫组化法计算阳性细胞的平均光密度值,3只用于Western blot法分别进行检测海马组织中caspase3和hsp70的表达情况。实验过程中因持续强直发作而抽搐死亡的大鼠应及时进行补充(已补充28只)。结果:1动物模型制备SE组有效应用的大鼠70只,11只应用40mg/ kg、14只50mg/ kg、15只60mg/ kg、18只70mg/ kg、8只80mg/ kg、4只90mg/ kg PTZ即开始出现惊厥,主要表现为节律性点头、肌阵挛。随着PTZ每10min注射一次,很快出现四肢抽搐,进入全面性强直发作致失去姿势控制,前、后肢强烈收缩,并伴有呼吸抑制,口周发紫,持续时间长短不等。强直阶段过后便出现全面性强直-阵挛发作。NC组动物均无行为学改变。 2大鼠海马组织学改变 2.1 Nissl染色观察SE组可见神经元皱缩体积缩小,胞核深染,有核分裂及核溶解,具有凋亡的特征,多数胞浆呈空泡状,海马CA1区细胞排列散乱,细胞密度小,尼氏体减少,部分神经元丢失,24h组最明显,3h脑损伤最轻;对照组海马神经元形态结构完整,胞核淡染、胞浆染色清晰,CA1区细胞几乎呈均匀一致的紫蓝色,细胞密度大,尼氏体着蓝色,形态接近正常。 2.2 Timm染色法观察SE各亚组和对照组的CA3区苔藓纤维出芽评分仅0～1分。 2.3海马CA3区超微结构观察SE组海马CA3区可见神经元核膜边界不清、可有内陷,染色质有边集,线粒体数量减少或有肿胀,24h组最明显,3h组较轻;对照组神经元核膜清晰,线粒体完整,细胞器基本完好。 3脑组织中caspase3和hsp70表达情况SE后3h caspase3和hsp70在海马神经细胞胞浆中着色开始增多,阳性细胞率(P <0.01与对照组比较),并随时间延长其阳性细胞率相应性升高,24h明显增高(P <0.01)。对照组可见caspase3和hsp70在海马胞浆中呈现散在着色。 4大鼠海马中caspase3和hsp70的蛋白表达SE后3h caspase3和hsp70表达开始增高(P <0.05与对照组比较),24h明显增高(P <0.05)。对照组仅有少量的caspase3和hsp70表达。结论:1腹腔注射戊四氮可成功诱导大鼠癫痫持续状态,是目前模拟全身强直-阵挛性癫痫发作的一种较为理想的动物模型。 2癫痫发作急性期虽然引起了脑组织不同程度的形态学

关键词：戊四氮癫痫凋亡海马 caspase3 hsp70

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卵圆孔未闭骑跨栓致矛盾栓塞一例

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中华神经科杂志 2016年第4期49卷 316-318页

作者：贾丽景谢涛甄军丽王智张学谦河北医科大学第二医院神经内科石家庄050000

25％～40％的缺血性脑血管病患者为不明原因卒中（cryptogeni cstroke，CS），有研究发现卵圆孔未闭（patent foramen ovale，PFO）和CS的关系密切，推测其发病机制可能和矛盾栓塞有关。我们在临床遇到1例PFO骑跨栓导致大面积脑梗死、... 详细信息

25％～40％的缺血性脑血管病患者为不明原因卒中（cryptogeni cstroke，CS），有研究发现卵圆孔未闭（patent foramen ovale，PFO）和CS的关系密切，推测其发病机制可能和矛盾栓塞有关。我们在临床遇到1例PFO骑跨栓导致大面积脑梗死、肺动脉栓塞及四肢周围血管栓塞的年轻患者，报道如下。

关键词：卵圆孔未闭矛盾栓塞骑跨栓脑血管病患者大面积脑梗死肺动脉栓塞不明原因发病机制

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人参皂苷Rb1对癫痫大鼠的脑保护作用及机制

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广东医学 2016年第12期37卷 1803-1805页

作者：呼建民王述莲刘献增甄军丽中国人民武装警察部队北京市总队第三医院内一科北京100141 中国人民武装警察部队北京市总队第三医院检验科北京100141 北京大学人民医院神经功能科北京100044 河北医科大学第二医院神经内科石家庄050000

目的通过动物实验分析人参皂苷Rb1对癫痫大鼠的脑保护作用及机制。方法选择健康性成年Wistar雄性大鼠60只,随机分为空白对照组（A组）（n=20）、癫痫组（B组,n=20）和人参皂苷Rb1干预癫痫组（C组,n=20）。C组大鼠腹腔注射1%人参皂苷Rb... 详细信息

目的通过动物实验分析人参皂苷Rb1对癫痫大鼠的脑保护作用及机制。方法选择健康性成年Wistar雄性大鼠60只,随机分为空白对照组（A组）（n=20）、癫痫组（B组,n=20）和人参皂苷Rb1干预癫痫组（C组,n=20）。C组大鼠腹腔注射1%人参皂苷Rb1注射液3 m L/kg（30 mg/kg）,A组与B组大鼠则腹腔注射等量生理盐水;同时B组与C组大鼠腹腔注射80万U/m L青霉素注射液9.5 m L/kg（760万U/kg）,对大鼠进行行为学、病理学观察,同时进行细胞凋亡与β-catenin阳性表达检测。结果 A组大鼠行为正常,未见癫痫发作;B组大鼠癫痫发作程度达Ⅲ-Ⅴ级;C组大鼠癫痫发作程度明显较轻。HE染色显示A组大鼠海马组织结构正常,神经元细胞整齐排列;B组神经元细胞出现变性坏死损伤改变,细胞排列紊乱;C组大鼠海马神经元细胞损伤程度较B组轻,部分细胞出现空泡变性。TUNEL法检测显示与A组比较,B组与C组海马区凋亡阳性细胞数明显增高（P〈0.05）;不过与B组比较,C组海马区凋亡阳性细胞数明显减少（P〈0.05）。同时与A组相比,B组与C组β-catenin蛋白阳性表达增高（P〈0.05）,且C组的β-catenin蛋白阳性表达明显少于B组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论青霉素腹腔注射可成功复制大鼠急性癫痫模型,主要表现为神经元的变性和坏死,而人参皂苷Rb1能抑制β-catenin蛋白的表达,可缓解癫痫的发作,具有一定的脑保护作用。

关键词：人参皂苷Rb1 癫痫大鼠脑保护作用海马组织

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盐酸美金刚对癫痫大鼠海马GSK-3β表达的影响

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中风与神经疾病杂志 2011年第10期28卷 931-934页

作者：田爽王维平王丽娜栗静媛甄军丽郭慧河北医科大学第二医院神经内科河北省神经病学重点实验室河北石家庄050000

目的探讨盐酸美金刚(memantine,MN)对戊四氮(pentylenetetrazol,PTZ)点燃慢性癫痫大鼠学习记忆能力及海马中糖原激酶合酶-3β(glycogen synthase kinase-3,GSK-3β)表达的影响。方法动物分为正常对照组(NC)、癫痫组(PTZ)、盐酸美金刚干... 详细信息

目的探讨盐酸美金刚(memantine,MN)对戊四氮(pentylenetetrazol,PTZ)点燃慢性癫痫大鼠学习记忆能力及海马中糖原激酶合酶-3β(glycogen synthase kinase-3,GSK-3β)表达的影响。方法动物分为正常对照组(NC)、癫痫组(PTZ)、盐酸美金刚干预组(MN),采用PTZ致痫模型,Morris水迷宫检测各组大鼠空间学习记忆能力,Western blot和RT-PCR方法检测大鼠海马GSK-3β、P-GSK-3β蛋白和GSK-3βmRNA表达。结果 PTZ组大鼠空间学习记忆能力受损,其海马中P-GSK-3β蛋白表达明显减少(P0.05)。MN组大鼠学习记忆能力明显好转,其海马中P-GSK-3β蛋白表达明显升高(P0.05)。结论 PTZ点燃慢性癫痫大鼠学习记忆受损,其海马组织中P-GSK-3β蛋白表达明显降低,P-GSK-3β可能参与癫痫后认知功能障碍发病机制;盐酸美金刚可提高P-GSK-3β蛋白表达水平,从而改善癫痫大鼠学习记忆能力。

关键词：盐酸美金刚癫痫海马学习记忆糖原激酶合酶-3β

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戊四氮致痫后大鼠海马中Caspase-3和Hsp70的动态表达变化

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中风与神经疾病杂志 2009年第6期26卷 664-667页

作者：甄军丽王维平安立伟李周平贾丽景河北医科大学第二医院神经内科河北石家庄050000

目的研究戊四氮(pentlenetrazol,PTZ)致癫痫发作后大鼠海马中caspase-3和hsp70的动态变化,以便及时进行干预并控制凋亡的发生。方法PTZ致痫急性发作后分别在3、6、12、24h,行免疫组化法计算阳性细胞的平均光密度值;Nissle染色法检测神... 详细信息

目的研究戊四氮(pentlenetrazol,PTZ)致癫痫发作后大鼠海马中caspase-3和hsp70的动态变化,以便及时进行干预并控制凋亡的发生。方法PTZ致痫急性发作后分别在3、6、12、24h,行免疫组化法计算阳性细胞的平均光密度值;Nissle染色法检测神经细胞丢失坏死情况;电镜观察海马CA3区的超微结构,Western blot方法分别检测海马组织中caspase-3和hsp70的表达情况。结果致痫后caspase-3和hsp70的表达趋势在各种方法中基本一致,即3h开始表达增高,6h后明显增高,24h时神经细胞表现典型的凋亡状态,明显高于对照组(P<0.05)。结论癫痫发作同时上调了caspase-3和hsp70的表达,可导致神经细胞发生凋亡,从而表明癫痫急性期诱导的细胞凋亡可能对脑组织在应激保护方面起了重要的角色。

关键词：癫痫发作凋亡 Caspase-3 hsp70 海马

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绿茶多酚对戊四氮致痫大鼠海马XIAP和Caspase-3表达的影响

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中风与神经疾病杂志 2013年第7期30卷 602-604页

作者：马彩云王维平甄军丽高新丽付兰阚敏宸肖伏龙河北医科大学第二医院神经内科河北省神经病学重点实验室河北石家庄050000

目的探讨绿茶多酚(Green tea polyphenols,GTPs)对癫痫大鼠海马中XIAP、caspase-3表达的影响。方法将雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(NS组)、癫痫组(PTZ组)和绿茶多酚组(GTPs组)。依据Racine分级标准观察各组动物行为学表现,用HE染... 详细信息

目的探讨绿茶多酚(Green tea polyphenols,GTPs)对癫痫大鼠海马中XIAP、caspase-3表达的影响。方法将雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(NS组)、癫痫组(PTZ组)和绿茶多酚组(GTPs组)。依据Racine分级标准观察各组动物行为学表现,用HE染色观察大鼠海马神经元损伤情况,Western Blot方法测定各组大鼠海马组织中XIAP及caspase-3蛋白表达变化。结果 PTZ组:大鼠海马XIAP表达水平(0.23±0.02)较NS组(0.47±0.05)明显降低(P<0.05);caspase-3蛋白(0.63±0.12)较NS组(0.24±0.07)明显升高(P<0.05)。与PTZ组比较,GTPs组大鼠海马XIAP表达(0.53±0.10)显著升高(P<0.05);caspase-3表达(0.30±0.09)显著降低(P<0.05)。结论癫痫可导致海马组织中抗凋亡蛋白XIAP表达下降,凋亡执行蛋白caspase-3表达增加;而GTPs则能够上调XIAP表达,降低caspase-3的表达,推测GTPs可能通过抗凋亡途径来发挥癫痫后的神经保护作用。

关键词：绿茶多酚癫痫戊四氮凋亡 X连锁凋亡抑制蛋白

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α-硫辛酸对电点燃致痫大鼠行为学及海马p38MAPK表达的影响

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中风与神经疾病杂志 2014年第2期31卷 133-135页

作者：房海波王维平王洪超臧红敏甄军丽马彩云王伟河北医科大学第二医院神经内科河北石家庄050000

目的探讨α-硫辛酸(α-LA)对电点燃致痫大鼠行为及海马p38MAPK表达的影响。方法将雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、α-LA组、假手术组、ES组、电低α-LA组、电高α-LA组。检测点燃前、后发放阈值(ADT)及达到每个发作等级所需的累积... 详细信息

目的探讨α-硫辛酸(α-LA)对电点燃致痫大鼠行为及海马p38MAPK表达的影响。方法将雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、α-LA组、假手术组、ES组、电低α-LA组、电高α-LA组。检测点燃前、后发放阈值(ADT)及达到每个发作等级所需的累积刺激数和累积后发放持续时间(ADD),应用Western blot检测海马p38MAPK及p-p38MAPK表达水平,碘化丙啶(PI)染色检测海马神经元凋亡率。结果与ES组相比:电高α-LA组达到第一次Ⅴ级发作所需的累积电刺激数明显增多(P<0.05)、点燃后ADT明显增高(P<0.05);电低α-LA组和电高α-LA组海马p-p38MAPK表达水平和神经元凋亡率明显降低(P<0.05)、达到第一次Ⅴ级发作所需的累积ADD明显缩短(P<0.05)。各组点燃后ADT较点燃前均明显降低(P<0.05)。结论癫痫可导致海马组织中pp38MAPK表达上调、神经元凋亡率明显增加;α-LA能够有效降低癫痫发作等级、缩短ADD、下调p-p38MAPK表达水平并降低神经元凋亡率,从而推测α-LA可通过抗凋亡途径来发挥神经保护作用。

关键词： α-硫辛酸癫痫电点燃凋亡 p38MAPK

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细辛脑注射液对槐定碱致痫大鼠Caspase3及热休克蛋白-70表达的影响

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中西医结合心脑血管病杂志 2010年第3期8卷 325-327页

作者：甄军丽王维平河北医科大学第二医院河北医科大学第二附属医院

目的通过对槐定碱致痫大鼠脑内Caspase3及热休克蛋白-70(hsp-70)含量的测定,探讨细辛脑注射液抗癫痫作用的机制。方法随机将42只大鼠分为6组,空白组、模型组、卡马西平阳性对照组及细辛脑低剂量组、中剂量组和高剂量组。通过免疫组化学... 详细信息

目的通过对槐定碱致痫大鼠脑内Caspase3及热休克蛋白-70(hsp-70)含量的测定,探讨细辛脑注射液抗癫痫作用的机制。方法随机将42只大鼠分为6组,空白组、模型组、卡马西平阳性对照组及细辛脑低剂量组、中剂量组和高剂量组。通过免疫组化学法和Nissle染色法,研究细辛脑注射液对Caspase3和hsp-70含量的影响。结果研究表明与模型组比较,细辛脑注射液中、高剂量组可显著减轻大鼠癫痫发作(P<0.05),可使槐定碱致痫大鼠的脑组织中减少Caspase3释放,降低hsp-70在大鼠脑内的表达。结论细辛脑注射液具有良好的抗癫痫效果,可减轻大鼠癫痫发作时对脑组织的损伤。

关键词：细辛脑注射液槐定碱 Caspase3 热休克蛋白-70

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椎管内外神经纤维瘤1例分析

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中国误诊学杂志 2009年第30期9卷 7522-7523页

作者：甄军丽王维平高志红河北医科大学第二医院神经内科河北石家庄050000 河北医科大学第二医院影像科河北石家庄050000

神经纤维瘤起缘于神经鞘,多属良性肿瘤,发生于外周神经、软组织、皮肤和骨,可多发成为神经纤维瘤病.而发生于颈、胸椎椎管内外巨大神经纤维瘤则较少见,现报告1例如下.

关键词：神经纤维瘤病例报告人类

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P-糖蛋白与难治性癫痫多药耐药

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河北医科大学学报 2009年第6期30卷 634-637页

作者：甄军丽贾丽景王维平河北医科大学第二医院神经内科河北石家庄050000

癫痫是神经系统最常见疾病之一，我国有癫痫病患者约600万，其中难治性癫痫（Intractable epilepsy，IE）约占25％。IE的诊断标准为频繁的癫痫发作，至少每月4次以上。用适当的一线抗癫痫药物（anti—epileptic drugs，AEDs）正规治疗... 详细信息

癫痫是神经系统最常见疾病之一，我国有癫痫病患者约600万，其中难治性癫痫（Intractable epilepsy，IE）约占25％。IE的诊断标准为频繁的癫痫发作，至少每月4次以上。用适当的一线抗癫痫药物（anti—epileptic drugs，AEDs）正规治疗且药物血药浓度在有效范围内，至少观察2年，仍不能控制且影响正常生活，并排除其它中枢神经系统疾病或占位病变。

关键词： P糖蛋白癫痫综述文献

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