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微囊化的ANP cDNA转染细胞降低高血压大鼠血压

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航天医学与医学工程 2003年第1期16卷 77-78页

作者：陈立国屈艺彭文珍王跃锜肖静王正荣四川大学华西医学中心生物医学工程教研室四川成都610041

目的探讨微囊化的转基因细胞表达产生药物活性心房肽 (ANP)的治疗体系。方法将人ANP基因 (cDNA)转染入CHO细胞 ,然后将细胞包被在聚己内酯 (PCL)管内形成微囊化 ,并移植到盐敏感高血压鼠腹腔内检测其长时间CHO细胞存活情况和分泌的心房... 详细信息

目的探讨微囊化的转基因细胞表达产生药物活性心房肽 (ANP)的治疗体系。方法将人ANP基因 (cDNA)转染入CHO细胞 ,然后将细胞包被在聚己内酯 (PCL)管内形成微囊化 ,并移植到盐敏感高血压鼠腹腔内检测其长时间CHO细胞存活情况和分泌的心房肽 (ANP)。结果微囊化的转基因细胞植入2d后 ,明显的延迟了高血压的发展 ,此作用至少持续 5个月。同时 ,增加了肾血流 ,肾小球滤过率 ,钠排泄 ,尿液分泌 ,提高了血浆ANP浓度。

关键词：高血压血压微囊化聚己内酯心房肽基因治疗

不同光暗周期对小鼠白细胞数量分类计数与自发运动活动的影响

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航天医学与医学工程 2005年第3期18卷 219-221页

作者：郭莉刘延友杨波江舟王跃锜王正荣四川大学华西基础与法医学院生物医学工程研究室四川成都610041

目的探讨不同光暗周期对小鼠白细胞数量分类计数与自发运动活动的影响。方法144只小鼠分3组,置于14h、24h及32h光暗周期条件下,第8周眼眶取血,行外周血白细胞计数及分类计数。另9只小鼠亦采用上述光暗周期,分成3组,连续监测小鼠的自发... 详细信息

目的探讨不同光暗周期对小鼠白细胞数量分类计数与自发运动活动的影响。方法144只小鼠分3组,置于14h、24h及32h光暗周期条件下,第8周眼眶取血,行外周血白细胞计数及分类计数。另9只小鼠亦采用上述光暗周期,分成3组,连续监测小鼠的自发运动活动。结果小鼠自发运动活动周期与光暗循环周期一致;不同光暗周期对小鼠外周血白细胞计数及分类计数有不同影响。结论不同光暗周期不仅影响小鼠自发运动活动,而且影响其白细胞计数及分类计数,提示不同光暗周期对机体免疫可能产生不同的作用。

关键词：光暗循环白细胞自发运动活动时间生物学

节律基因Period2对肿瘤细胞生长及放射敏感性的影响

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航天医学与医学工程 2006年第4期19卷 257-259页

作者：李颖朱彬王跃锜华慧何垠波王正荣四川大学华西医学中心基础医学与法医学院四川成都610041 四川大学华西医院肿瘤中心放疗科四川成都610041

目的探讨Period2(Per2)基因对细胞生长及放射敏感性的影响。方法体外培养C6神经胶质瘤细胞(C6g liom a ce lls),使用脂质体包裹法将Per2表达质粒(pcDNA3.1-Per2)转导入C6细胞内;以免疫组化及流式细胞术检测Per2表达;通过流式细胞术和克... 详细信息

目的探讨Period2(Per2)基因对细胞生长及放射敏感性的影响。方法体外培养C6神经胶质瘤细胞(C6g liom a ce lls),使用脂质体包裹法将Per2表达质粒(pcDNA3.1-Per2)转导入C6细胞内;以免疫组化及流式细胞术检测Per2表达;通过流式细胞术和克隆形成试验检测稳定转染Per2阳性表达的C6细胞在正常情况下和γ射线照射后的凋亡、生长。结果未经γ射线照射的Per2阳性表达的C6细胞较对照组细胞增殖减慢、凋亡率增加,但γ射线照射后的较对照组细胞增殖速度快、凋亡率减少。结论节律基因Per2过表达会增加肿瘤细胞的凋亡,但在射线照射情况下会降低肿瘤细胞对射线的敏感性。

关键词：时间生物学近日节律 Per2基因转染 C6胶质瘤细胞细胞凋亡放射敏感性

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二十二碳六烯酸对豚鼠顺铂所致耳毒性的影响

重庆医学 2015年第9期44卷 1171-1173,1176页

作者：郭文杰陈焱王跃锜蔡佩玲成都大学医护学院解剖教研室成都610106 四川大学第二附属医院生殖内分泌科成都610000

目的通过动物实验,研究二十二碳六烯(DHA)全身给药对顺铂所致豚鼠耳毒性的保护作用。方法将健康豚鼠24只分为正常对照组、DHA加顺铂组、顺铂组,DHA加顺铂组连续给予植物油稀释后的DHA灌胃,500 mg·kg-1·d-1,共30d。在灌胃22d时,开始生... 详细信息

目的通过动物实验,研究二十二碳六烯(DHA)全身给药对顺铂所致豚鼠耳毒性的保护作用。方法将健康豚鼠24只分为正常对照组、DHA加顺铂组、顺铂组,DHA加顺铂组连续给予植物油稀释后的DHA灌胃,500 mg·kg-1·d-1,共30d。在灌胃22d时,开始生理盐水稀释后的0.25mg/mL的顺铂溶液腹腔注射,连续9d,正常对照组和顺铂组只给予相同剂量植物油灌胃。结果顺铂造模后,顺铂组和DHA加顺铂组ABR阈值明显高于正常对照组,DHA加顺铂组明显低于顺铂组。DHA加顺铂组外毛细胞残存数明显高于顺铂组,组织形态优于顺铂组,螺旋神经节细胞形态顺铂组差于DHA加顺铂组。结论 DHA灌胃给药对临床顺铂化疗耳毒性并发症有一定的保护作用。

关键词：顺铂二十二碳六烯(DHA) 耳毒性

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阻断节律基因达到戒除毒品成瘾

阻断节律基因达到戒除毒品成瘾

脱氧核酶抑制近日基因period1表达的实验研究

2004全国时间生物医学学术会议

作者：王跃锜四川大学华西医学中心生物医学工程研究室

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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中国科学（C辑） 2005年第2期35卷 98-103页

作者：周薇王跃锜刘延友彭文珍肖静朱彬王正荣四川大学华西基础与法医学院生物医学工程研究室成都610041 四川大学华西基础与法医学院生物化学与分子生物学教研室成都610041

研究脱氧核酶对近日钟基因period1(per1)表达的影响,进而寻找治疗和近日节律有关疾病的基因疗法.设计合成针对per1的脱氧核酶DRz164,DRz256,并构建pcDNA3-per1164:256体外转录载体,将转录产物和脱氧核酶混合,在一定反应条件下进行体外... 详细信息

研究脱氧核酶对近日钟基因period1(per1)表达的影响,进而寻找治疗和近日节律有关疾病的基因疗法.设计合成针对per1的脱氧核酶DRz164,DRz256,并构建pcDNA3-per1164:256体外转录载体,将转录产物和脱氧核酶混合,在一定反应条件下进行体外切割反应,地高辛酶联免疫及酶催化显色法检测脱氧核酶的体外切割效率.将pcDNA3-per1和DRz164或DRz256在脂质体的介导下转染NIH3T3细胞,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、流式细胞术(FCM)检测脱氧核酶对近日基因表达的影响.于37℃孵育2h后,DRz164对底物的剪切百分率为63%,DRz256为50.5%.RT-PCR半定量检测per1mRNA表达水平明显下降,FCM结果显示细胞内Per1蛋白的合成受到抑制.脱氧核酶DRz164,DRz256体外具有定点切割近日钟基因per1mRNA组分的活性,使转染细胞per1mRNA和Per1蛋白表达下降.

关键词：实验研究酶抑制 NIH3T3细胞脱氧核酶聚合酶链反应 mRNA表达 RT-PCR 流式细胞术半定量检测设计合成基因疗法近日节律体外转录转录产物切割反应反应条件切割效率酶联免疫基因表达蛋白表达转染细胞钟基因

吗啡依赖及戒断小鼠脑内节律基因mPeriod1表达的研究

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航天医学与医学工程 2006年第3期19卷 176-178页

作者：王晓佳王跃锜刘延友华慧幸浩洋王正荣四川大学华西医学中心基础医学与法医学院四川成都610041

目的研究吗啡依赖和吗啡戒断小鼠脑组织内节律基因mPeriod1(mPer1)表达的变化。方法以雄性BALB/C小鼠的吗啡条件性位置偏爱为指标,观测吗啡依赖组、吗啡戒断组小鼠与正常盐水组小鼠的药物精神依赖的变化;应用免疫组化SP法检测3组小鼠脑... 详细信息

目的研究吗啡依赖和吗啡戒断小鼠脑组织内节律基因mPeriod1(mPer1)表达的变化。方法以雄性BALB/C小鼠的吗啡条件性位置偏爱为指标,观测吗啡依赖组、吗啡戒断组小鼠与正常盐水组小鼠的药物精神依赖的变化;应用免疫组化SP法检测3组小鼠脑内mPer1的表达情况;利用图像软件对免疫组化结果进行分析和处理。结果吗啡依赖组的小鼠脑内mPer1表达峰值相位较正常盐水组有明显改变。而吗啡戒断组小鼠脑内mPer1表达峰值相位较正常盐水组没有显著性差异。结论研究结果表明吗啡成瘾影响了以mPer1为重要部件的近日钟的自激振荡过程,使近日节律发生了改变。

关键词：生物节律节律基因基因表达药物成瘾

食管癌细胞线粒体中MYH9蛋白的分布及与SLP-2结合的研究

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肿瘤防治研究 2015年第3期42卷 229-232页

作者：王跃锜张旭何海蓉张雪妍成都学院医护学院药理教研室成都610106

目的研究非肌性肌球蛋白重链9(myosin,heavy chain 9,non-muscle,MYH9)蛋白在食管鳞癌细胞线粒体内的分布,及MYH9蛋白与线粒体相关蛋白SLP-2的结合情况。方法使用抗stomatinlike protein 2(SLP-2)抗体,在食管鳞癌细胞系KYSE150细胞的裂... 详细信息

目的研究非肌性肌球蛋白重链9(myosin,heavy chain 9,non-muscle,MYH9)蛋白在食管鳞癌细胞线粒体内的分布,及MYH9蛋白与线粒体相关蛋白SLP-2的结合情况。方法使用抗stomatinlike protein 2(SLP-2)抗体,在食管鳞癌细胞系KYSE150细胞的裂解液里进行免疫共沉淀,共沉淀物使用MALDI-TOF-MS蛋白质质谱进行分析,以分析与线粒体相关蛋白SLP-2结合的分子。对分析结果再继续使用免疫共沉淀及GST pull down法进行验证。使用蔗糖密度梯度离心纯化分离细胞线粒体,利用Western blot明确MYH9在食管癌细胞线粒体内的分布。结果在食管鳞癌细胞系KYSE150细胞的裂解液内,MYH9蛋白可与SLP-2蛋白共沉淀,并且MYH9蛋白也能与GST-SLP-2结合。MYH9蛋白既存在于KYSE150细胞分离纯化后的细胞质中,也存在于分离出的线粒体中。结论 MYH9在食管癌细胞内部分分布于线粒体中,并与线粒体相关蛋白SLP-2相互结合。MYH9可能影响食管癌细胞线粒体的功能。

关键词：非肌性肌球蛋白重链9 SLP-2 线粒体食管鳞癌细胞

脱氧核酶对Period1 mRNA的体外切割及对小鼠吗啡奖赏效应的影响

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航天医学与医学工程 2005年第3期18卷 224-226页

作者：周薇刘延友王跃锜刘英辉汪宇辉王正荣四川大学华西基础与法医学院生物医学工程研究室四川成都610041

目的研究脱氧核酶对Period1mRNA的体外切割作用,及注射脱氧核酶对阿片类药物奖赏效应的影响。方法设计合成针对Period1(Per1)mRNA的脱氧核酶(DRz164),并构建pcDNA3.1(+)-Per1164体外转录载体;将体外转录产物和脱氧核酶按一定条件混合,... 详细信息

目的研究脱氧核酶对Period1mRNA的体外切割作用,及注射脱氧核酶对阿片类药物奖赏效应的影响。方法设计合成针对Period1(Per1)mRNA的脱氧核酶(DRz164),并构建pcDNA3.1(+)-Per1164体外转录载体;将体外转录产物和脱氧核酶按一定条件混合,检测脱氧核酶的体外切割效率。脑室注射DRz164,建立小鼠条件位置偏爱模型,观察脱氧核酶对吗啡奖赏效应的影响。结果DRz164对Per1mRNA组分有切割作用,在反应30、60、90和120min的剪切百分率分别为36.4%、40.5%、47.8%和63%。给予DRz164后小鼠未能形成对吗啡的位置偏爱。结论DRz164在体外能够切割per1mRNA,在一定范围内剪切活性随时间延长而升高,小鼠脑室注射DRz164可拮抗吗啡所引起的奖赏效应,缓解对吗啡的精神依赖。

关键词：基因表达脱氧核酶体外切割吗啡条件位置偏爱