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盐爪爪根际土壤产IAA菌株分离及促生特性分析

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草业学报 2024年第4期33卷 110-121页

作者：程鑫宇王继莲麦日艳古·亚生李明源喀什大学生命与地理科学学院新疆喀什844006 新疆帕米尔高原生物资源与生态自治区重点实验室新疆喀什844006

为丰富具有产吲哚-3-乙酸(IAA)功能的植物根际促生菌(PGPR),开发高效微生物菌肥,从南疆克孜勒苏柯尔克孜自治州耐盐植物盐爪爪根际土壤中分离产IAA的菌株。结合16S rDNA的限制性片段长度多态性PCR技术(PCR-RFLP)与16S rDNA序列分析进行... 详细信息

为丰富具有产吲哚-3-乙酸(IAA)功能的植物根际促生菌(PGPR),开发高效微生物菌肥,从南疆克孜勒苏柯尔克孜自治州耐盐植物盐爪爪根际土壤中分离产IAA的菌株。结合16S rDNA的限制性片段长度多态性PCR技术(PCR-RFLP)与16S rDNA序列分析进行菌种鉴定,分析高产IAA菌株对玉米和小麦种子发芽的影响,并通过盆栽试验验证其对盐碱胁迫下植株幼苗生长(株高、茎粗、地上干重等)的影响。结果表明,共筛选到67株PGPR菌株,其分泌IAA能力为16.65~71.63 mg·L^(-1),尤以PM14、PM18分泌量较高。PM14和PM18菌株同时兼具解磷、固氮能力。所有菌株分属6个菌属,以肠杆菌属占绝对优势。接种PM14和PM18均促进了玉米和小麦种子萌发,但菌液浓度高低对种子发芽的影响有显著差异(P<0.05)。接种处理增加了玉米株高、鲜重、地上干重、茎粗和根干重,分别增加了4.7%~37.2%、28.8%~94.5%、15.8%~157.9%、4.4%~35.5%和23.5%~82.4%,但叶绿素含量无显著变化。接种处理增加了小麦株高、茎粗、鲜重和地上干重,分别增加了9.5%~33.1%、13.0%~49.6%、57.4%~112.8%和71.4%~114.3%。除接种灭活的PM14导致小麦根干重与对照相比无显著差异,其他处理均有积极作用,提高了52.8%~69.0%,而所有处理对叶绿素含量均无显著影响。综上,本研究筛选的产IAA菌株提高了植株在盐碱胁迫下的抗性,对开发适用于盐碱地区的微生物菌肥有重要意义。

关键词：吲哚-3-乙酸植物根际促生菌盐碱胁迫促生微生物菌肥

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盐碱地旱生芦苇根际解磷菌株筛选及促生特性

江苏农业学报 2024年第1期40卷 64-74页

作者：王继莲王冬玲周茜张甜李明源喀什大学生命与地理科学学院新疆喀什844006 新疆帕米尔高原生物资源与生态自治区重点实验室新疆喀什844006

为进一步挖掘解磷菌菌种资源,研制适合于盐碱地作物的促生菌剂,利用选择性培养基从新疆克孜勒苏柯尔克孜自治州盐碱地旱生芦苇(Phragmites australis)根际土壤中筛选解磷菌株。结合限制性片段长度多态性技术与16S rDNA测序进行菌株鉴定... 详细信息

为进一步挖掘解磷菌菌种资源,研制适合于盐碱地作物的促生菌剂,利用选择性培养基从新疆克孜勒苏柯尔克孜自治州盐碱地旱生芦苇(Phragmites australis)根际土壤中筛选解磷菌株。结合限制性片段长度多态性技术与16S rDNA测序进行菌株鉴定,并挑选解磷能力突出的优良菌株开展植物接种试验。本试验共筛选到47株解磷菌,其中32株可溶解无机磷,溶磷量为55.8~722.3 mg/L;37株可溶解有机磷,溶磷量为11.8~34.4 mg/L。47株解磷菌隶属于7个属,以肠杆菌属(Enterobacter)占绝对优势。解磷菌株有效促进了拟南芥植株的生长和根系发育,以芽孢杆菌Bacillus ***-2和类芽孢杆菌Paenibacillus ***-1的促生作用最显著。解磷菌株对盐碱土中小麦地上部分(株高、茎粗、地上部分鲜质量和地上部分干质量)和地下部分(根鲜质量、根干质量)也表现出积极影响,以Enterobacter ***-9和Enterobacter ***-2促生作用最突出。本研究筛选的解磷菌株具有一定的应用潜力,对开发适用于盐碱地的微生物肥料有重要意义。

关键词：解磷菌盐碱土壤促生作用微生物肥料

发酵馕面团中优势菌群的分离及其在馒头发酵中的应用研究

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中国酿造 2024年第3期43卷 136-144页

作者：张甜刘艳全丁真真郁佳丽王继莲喀什大学生命与地理科学学院新疆喀什844000 新疆帕米尔高原生物资源与生态重点实验室新疆喀什844000

对新疆地区3份发酵馕面团样品中微生物进行分离、纯化,通过形态观察及分子生物学技术对分离菌株进行鉴定,并通过测定乳酸菌的产酸和酵母菌的产气能力,筛选优良菌株用于发酵馒头的制备,分析其对馒头感官品质及风味物质的影响。结果表明,... 详细信息

对新疆地区3份发酵馕面团样品中微生物进行分离、纯化,通过形态观察及分子生物学技术对分离菌株进行鉴定,并通过测定乳酸菌的产酸和酵母菌的产气能力,筛选优良菌株用于发酵馒头的制备,分析其对馒头感官品质及风味物质的影响。结果表明,分离纯化得到36株乳酸菌和51株酵母菌,乳酸菌包括旧金山乳杆菌(Lactobacillus sanfranciscensis)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)和粪肠球菌(Enterococcus faecalis)4种;酵母菌包括发酵毕赤酵母(Pichia fermentans)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和膜毕赤酵母(Pichia membranifaciens)3种。植物乳杆菌产酸量最大,为113.55~127.8 g/L;酿酒酵母和发酵毕赤酵母产气较快。发酵毕赤酵母与安琪酵母单独发酵馒头时,在醇类和酯类物质的种类和相对含量上差异较大,风味差异明显;植物乳杆菌与发酵毕赤酵母菌混菌发酵馒头时,随着发酵毕赤酵母添加量增加,可降低馒头中醇类、醛类和烃类物质的相对含量,增加酮类和酯类物质的相对含量,从而形成不同于安琪酵母发酵馒头的风味;当添加比例为1∶2时,馒头感官评分最高(87分)。

关键词：发酵馕面团乳酸菌酵母菌分离纯化鉴定馒头风味物质

具有抑菌活性乳酸菌的分离、鉴定及其生长特性研究

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中国酿造 2024年第2期43卷 119-124页

作者：张甜丁真真刘艳全徐明宜王继莲喀什大学生命与地理科学学院新疆喀什844000 新疆帕米尔高原生物资源与生态重点实验室新疆喀什844000

以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、大肠杆菌(Escherichia coli)、普通变形杆菌(Proteus vulgaris)为指示菌,采用传统培养分离法结合牛津杯法从传统发酵食品中筛选具有抑菌活性的乳酸菌,对其发酵上清液的稳定性及生长特性进行研究,并... 详细信息

以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、大肠杆菌(Escherichia coli)、普通变形杆菌(Proteus vulgaris)为指示菌,采用传统培养分离法结合牛津杯法从传统发酵食品中筛选具有抑菌活性的乳酸菌,对其发酵上清液的稳定性及生长特性进行研究,并通过分子生物学技术对其进行鉴定。结果表明,筛选得到4株具有良好抑菌活性的乳酸菌菌株,编号为Y1、Y4、Y14、Y15。4株菌株的发酵上清液均能抑制3种指示菌的生长,其中,菌株Y1抑菌活性较好,对3种指示菌的抑菌圈直径均>13 mm,其发酵上清液在60℃、100℃处理后的抑菌活力>69%;菌株Y1、Y14、Y15发酵上清液经酸碱处理后再调回后抑菌活力仍>67%。4株菌株的生长曲线与产酸特性和抑菌活性存在生长偶联相关性,进入稳定期后,抑菌圈直径趋于稳定,可在发酵12~18 h时终止发酵。4株菌株均在pH 5.0~7.0时生长良好,最适生长pH均为6.0,其中菌株Y15耐酸性及耐渗透性较好,菌株Y1耐碱性较好。经鉴定,菌株Y1和Y4均为发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum),菌株Y14和Y15均为植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)。

关键词：传统发酵食品乳酸菌抑菌活性分离筛选生长特性鉴定

产胞外多糖多功能促生菌的筛选鉴定及促生评价

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生物技术通报 2024年第3期40卷 273-285页

作者：常海霞李明源麦日艳古·亚生周茜王继莲喀什大学生命与地理科学学院喀什844000 新疆帕米尔高原生物资源与生态重点实验室喀什844000

【目的】探究产胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)菌株在促进盐碱土中植物生长,改善土壤性能等方面的影响,为研制适用于盐碱土壤修复的微生物菌剂奠定基础。【方法】从新疆喀什地区盐碱草地根际土壤中筛选产胞外多糖菌株,基于16S rRNA... 详细信息

【目的】探究产胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)菌株在促进盐碱土中植物生长,改善土壤性能等方面的影响,为研制适用于盐碱土壤修复的微生物菌剂奠定基础。【方法】从新疆喀什地区盐碱草地根际土壤中筛选产胞外多糖菌株,基于16S rRNA基因序列比对及系统发育分析对产胞外多糖菌株进行种属鉴定,采用单因素和响应面法优化最高产菌株的培养基组分,通过接种试验评估其对盐碱土栽培植物的促生效果及土壤团聚体的影响。【结果】共筛选出19株具有产胞外多糖能力的菌株,隶属于7个菌属,以假单胞菌属(Pseudomonas)占绝对优势。菌株产糖量介于236-1544 mg/L,尤以泛菌属Pantoea MQ A0产糖量最高,且兼具固氮、产吲哚乙酸(IAA)和铁载体、解磷等功能。MQ A0的最适产糖发酵培养基为甘油12.5 mL/L,蛋白胨9.0 g/L,酵母粉5.5 g/L,CaCO_(3)5.1 g/L,在此条件下菌株产糖量达2436 mg/L,较优化前增加57.8%。接种MQ A0发酵液使盐碱土栽培的玉米株高、鲜重、茎粗、须根数和总根长分别提高41.2%、203.0%、42.7%、30.4%和99.7%;粗多糖提取液对土壤团聚体的形成也有显著促进作用(P<0.05)。【结论】高产胞外多糖菌株MQ A0兼具多种促生特性,在促进盐碱土中植物生长和土壤改良方面效果显著。

关键词：产胞外多糖菌株盐碱草地响应面法盐碱土土壤团聚体

塔什库尔干地区传统手工乳制品中乳酸菌多样性及其功能分析

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微生物学通报 2024年第3期51卷 950-969页

作者：麦日艳古·亚生李明源王继莲刘润忠努尔古丽·热合曼喀什大学生命与地理科学学院新疆帕米尔高原生物资源与生态重点实验室新疆喀什844006 新疆师范大学生命科学学院新疆特殊环境物种保护与调控生物学实验室新疆乌鲁木齐830054

【背景】传统手工制作乳制品是塔吉克族农牧地区人们最喜爱的食品,蕴含着十分丰富的乳酸菌资源,亟待开发利用。【目的】通过解析塔吉克族农牧地区传统自制乳制品中乳酸菌的多样性和功能特性,为挖掘和保护其中的微生物资源提供保障,同时... 详细信息

【背景】传统手工制作乳制品是塔吉克族农牧地区人们最喜爱的食品,蕴含着十分丰富的乳酸菌资源,亟待开发利用。【目的】通过解析塔吉克族农牧地区传统自制乳制品中乳酸菌的多样性和功能特性,为挖掘和保护其中的微生物资源提供保障,同时为评估传统奶酪的安全性提供理论基础。【方法】采用高通量测序技术对自制乳制品中细菌16S rRNA基因的V3-V4可变区进行测序分析,利用传统培养法从MRS、Lee氏和M17培养基中筛选出可培养疑似乳酸菌,经生理生化试验及16S rRNA基因序列同源性分析技术对其进行属种鉴定,解析塔县地区传统乳制品中微生物的种类及其基因功能信息。【结果】四份乳制品中共鉴定出37个细菌属65个细菌种,其中奶酪和酸奶中的优势细菌属为Lactobacillus和Streptococcus,优势乳酸菌种为瑞士乳杆菌,并且奶酪中含少许致病菌。在此基础上,利用传统培养法从MRS、M17和Lee氏培养基筛选出38株可培养疑似乳酸菌,经生理生化试验及16S rRNA基因序列同源性分析技术对其进行属种鉴定。38株疑似乳酸菌分别为3株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、1株芽孢杆菌(Bacillus luti)、1株副炭疽杆菌(Bacillus paranthracis)、9株副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)、3株霍氏肠球菌(Enterococcus hormeachei)、1株溶血性葡萄球菌(Staphylococcus heamolyticus)、1株肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)、10株假肠膜明串珠菌(Leuconostoc pseudomesenteroides)、2株肠系膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides),4株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、1株塞内加尔醋杆菌(Acetobacter senegalensis)、1株乳肠球菌(Enterococcus durans)和1株粪肠杆菌(Enterobacter faecalis)。其中明串珠菌属(Leuconostoc)为优势菌属,其次为乳杆菌属(Lactobacillus),归类为7个属13个种。在乳酸菌的属种鉴定上,传统培养法能够更准确地将乳酸菌鉴定到种水平。从38株乳酸菌中选取代表性的11株菌进行抑菌特性试验,11株菌对大肠杆菌(Escherichia coli)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)均有抑制作用。奶酪微生物基因(clusters of orthologous groups of proteins COG)功能预测结果显示,奶酪中的微生物富含与氨基酸转运和代谢有关的基因。将各个样品的微生物群落组成与功能组成进行比较,发现各个样品的细菌群落组成虽存在明显差异,但其功能组成却具有高度相似性。【结论】以新疆塔县4个传统手工乳品为研究对象,采用现代分子生物学技术和常规培养技术对4种传统手工乳品进行菌种鉴定,发现其菌种组成、多样性均不高,并且有部分致病菌。这2种方法相结合能够更全面地了解奶酪中的微生物菌群结构,为实现乳品的工业生产奠定理论基础,并保护了塔吉克牧民地区微生物中丰富的资源。同时为评估乳酸菌安全性提供了理论基础。

关键词：奶酪微生物群落传统培养丰富度功能预测

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东帕米尔高原产纤维素酶菌株的分离鉴定

纤维素科学与技术 2024年第2期32卷 54-58页

作者：张甜李明源王继莲茹仙古丽·尤努斯喀什大学生命与地理科学学院新疆喀什844000 新疆帕米尔高原生物资源与生态重点实验室新疆喀什844000

为筛选出具有产纤维素酶能力的菌株,以东帕米尔高原金草滩植物根际土壤为样本,采用刚果红水解圈法初步筛选到了5株菌株,分别命名为:XY-14、XY-38、XY-39、XY-49和XY-65。这5株菌株在CMC-Na培养基上长势良好,菌落均呈现圆形、并产生白色... 详细信息

为筛选出具有产纤维素酶能力的菌株,以东帕米尔高原金草滩植物根际土壤为样本,采用刚果红水解圈法初步筛选到了5株菌株,分别命名为:XY-14、XY-38、XY-39、XY-49和XY-65。这5株菌株在CMC-Na培养基上长势良好,菌落均呈现圆形、并产生白色菌丝,最适生长温度为25℃。通过水解圈和滤纸崩解试验,确定XY-38、XY-39、XY-49这3株菌的酶活力较强。经分子鉴定,确定XY-38、XY-39为睾酮丛毛单孢菌(Comamonas testosteroni strain),XY-49为假单孢菌(Pseudomonas ***)。菌株的生长曲线和产酶特性表明,XY-39在第6天时酶活力最大,为9.33 U/mL,XY-49在第5天时酶活力最大,为10.49 U/mL。

关键词：东帕米尔高原根际土壤纤维素酶筛选

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烟用蛋白酶制剂的研发及其作用机制研究

烟用蛋白酶制剂的研发及其作用机制研究

作者：王继莲昆明理工大学

学位级别：硕士

烟叶的内在品质是决定烟叶可用性的重要基础,而烤后烟叶中残留的蛋白质会影响卷烟的吸食品质,进而影响烟叶的内在品质。近年来,越来越多的研究表明利用微生物产生的水解酶能有效降解烟叶中蛋白质含量,使烟叶中内在化学成分趋于协调,从... 详细信息

烟叶的内在品质是决定烟叶可用性的重要基础,而烤后烟叶中残留的蛋白质会影响卷烟的吸食品质,进而影响烟叶的内在品质。近年来,越来越多的研究表明利用微生物产生的水解酶能有效降解烟叶中蛋白质含量,使烟叶中内在化学成分趋于协调,从而达到提高烟叶品质的目的。因此利用生物酶技术处理烟叶,使烟叶中的大分子物质适度转化,改善烟叶内在质量,提高企业经济效益,已成为烟草行业关注的一项重要技术。本研究利用实验室从烟叶表面分离筛选得到的产蛋白酶菌株短小芽孢杆菌(B. pumilus)(B1)进行发酵培养,制备酶制剂。此蛋白酶为分泌性胞外酶。通过酶学性质研究表明,菌株B1所产蛋白酶对不同蛋白底物催化能力不同。最适反应温度为50℃,最适pH为6.0,通过对酶制剂发酵条件的优化,最终使酶制剂的酶活提高了一倍。在对酶制剂处理烟叶的条件研究中发现,酶量和烟叶水分对降低烟叶蛋白质,提高氨基酸的含量影响显著,而温度和作用时间的影响不显著。酶的最佳作用条件：加酶量120U/g烟叶、温度35℃,水分含量30%,发酵时间60h,在此条件下,烟叶经蛋白酶制剂处理后可使烟叶蛋白质降解18.27%,氨基酸增加19.71%。在规模化放大实验中,利用蛋白酶制剂处理2011年玉溪K326C4F复烤烟叶,结果表明处理后的烟叶蛋白质含量均有显著降低,氨基酸含量明显提高。加酶组的“糖碱比”和“糖氮比”高于对照组,评吸结果表明处理后的样品感官质量改善明显。因此,利用从烟叶表面筛选得到土著微生物菌株制备的酶制剂,不仅具有很好的使用安全性,同时能有针对性地降解烟叶中的蛋白质等大分子物质,结果表明处理效果比现有的商用酶好,能生成更多有利于改善烟叶品质的物质。

关键词：烤烟蛋白酶化学成分

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新疆石榴种质资源遗传多样性的SRAP分析

西北植物学报 2016年第5期36卷 916-922页

作者：陈芸王继莲丁晓丽马刘峰喀什大学生命与地理科学学院新疆喀什844006 叶尔羌绿洲生态与生物资源研究自治区重点实验室新疆喀什844006

采用SRAP分子标记技术,对21份新疆石榴品种的遗传多样性与亲缘关系进行分析。从36对引物组合中筛选出16对扩增条带清晰、多态性高的引物组合分析供试材料,共检测出271个位点,其中194个为多态性位点,多态性比率达71.59%,平均每对引物组... 详细信息

采用SRAP分子标记技术,对21份新疆石榴品种的遗传多样性与亲缘关系进行分析。从36对引物组合中筛选出16对扩增条带清晰、多态性高的引物组合分析供试材料,共检测出271个位点,其中194个为多态性位点,多态性比率达71.59%,平均每对引物组合产生16.94个位点和12.13个多态性位点。21份石榴样品间的相似性系数为0.63~0.89,平均为0.77。UPGMA聚类结果显示,在相似性系数为0.776时,21份材料可被分为5个类群。新疆石榴品种间平均观察等位基因数（Na）、有效等位基因数（Ne）、Neis基因多样性指数（H）及Shannons信息指数（I）分别为1.712 2、1.352 8、0.199 9及0.310 5。研究表明,新疆喀什地区石榴品种的遗传多样性最为丰富;SRAP聚类结果与石榴的表型特征存在一致性,且SRAP分子标记技术是研究石榴遗传多样性简单而有效的手段。

关键词：石榴 SRAP 遗传多样性