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固定化青霉素G酰化酶水解头孢菌素G制备7—ADCA的研究

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微生物学报 1997年第3期37卷 190-195页

作者：徐冠珠韩辉王祯祥高宏庆赵丽中国科学院微生物所北京100080 山东新华制药厂淄博255005

用聚丙烯腈纤维固定化青霉素酰化酶水解头孢菌素G制备7-ADCA,固定化酶对头孢菌素G的最适pH为9.0,最适温度50℃。在37℃、pH8.0固定化酶对头孢菌素G的表观米氏常数为1.67×10^(-2)mol/L。最大反应速度为3.01mmol·g^(-1)·min^(-1)。头... 详细信息

用聚丙烯腈纤维固定化青霉素酰化酶水解头孢菌素G制备7-ADCA,固定化酶对头孢菌素G的最适pH为9.0,最适温度50℃。在37℃、pH8.0固定化酶对头孢菌素G的表观米氏常数为1.67×10^(-2)mol/L。最大反应速度为3.01mmol·g^(-1)·min^(-1)。头孢菌素G溶液浓度在2％以上时,对固定化酶有明显的抑制作用。固定化酶水解头孢菌素G的最佳投料浓度为5％～6％,水解时用酶量以每克头孢菌素G投300U以上为好。按上述条件水解头孢菌素G,操作25批后固定化酶保留活力77.8％,7-ADCA平均收率92.68％。

关键词：固定化青霉素酰化酶头孢菌素G 7-ADCA 制备

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大肠杆菌青霉素酰化酶的提纯及其性质的研究

微生物学报 1986年第3期26卷 254-259页

作者：矫庆华张启先王祯祥中国科学院微生物研究所

大肠杆菌(Escherichia coli)AS1.76发酵液经有机溶剂处理,硫酸铵分级,再用聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳进行纯化,得到了聚丙烯酰胺凝胶电泳均一的青霉素酰化酶纯品。纯酶作用的最适温度为45—55℃,最适pH为7.0—7.7,在无NIPAB存在下,纯酶... 详细信息

大肠杆菌(Escherichia coli)AS1.76发酵液经有机溶剂处理,硫酸铵分级,再用聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳进行纯化,得到了聚丙烯酰胺凝胶电泳均一的青霉素酰化酶纯品。纯酶作用的最适温度为45—55℃,最适pH为7.0—7.7,在无NIPAB存在下,纯酶在45℃以下稳定,但在55℃保温一小时,酶活力残存33.58%,纯酶在pH5.0—8.0稳定。酶作用于重排酸的米氏常数为3.33×10-2g/ml。Ag~+对酶有抑制作用。用聚丙烯酰胺薄层凝胶等电聚焦测定酶的等电点(pI)为6.7—6.8,用SDS凝胶电泳测酶的亚基分子量分别为14300和58900。纯酶具有水解苯甘氨酸甲酯盐酸盐的作用,反应两小时产生12.74mM苯甘氨酸。

关键词：青霉素酰化酶重排酸青霉素G

基于Levenberg-Marquardt方法的内蒙古及邻区地震烈度影响场改进技术

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地震 2017年第3期37卷 117-126页

作者：杨彦明姜立新王祯祥内蒙古自治区地震局呼和浩特010010 中国地震台网中心北京100045

在收集和整理内蒙古及邻近地区1940年以来M_S4.0以上历史震害资料的基础上,对研究区域进行合理分区,选取65次中强地震事件的152条等震线数据,利用椭圆烈度衰减模型,采用Levenberg-Marquardt非线性反演方法,建立内蒙古及邻区的分区地震... 详细信息

在收集和整理内蒙古及邻近地区1940年以来M_S4.0以上历史震害资料的基础上,对研究区域进行合理分区,选取65次中强地震事件的152条等震线数据,利用椭圆烈度衰减模型,采用Levenberg-Marquardt非线性反演方法,建立内蒙古及邻区的分区地震烈度衰减关系,通过与地震灾害评估系统使用的华北地区地震影响场模型进行对比分析,综合分析研究认为,建立分区烈度衰减关系更符合研究区域地震灾害的地域性特点,对于地震灾害快速评估具有重要的参考意义。

关键词：烈度地震影响场衰减关系 Levenberg—Marquardt方法内蒙古地区

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聚丙烯腈纤维固定化青霉素酰化酶性质的研究

微生物学报 1998年第3期38卷 204-207页

作者：韩辉徐冠珠朱丽钊韩文珍王祯祥中国科学院微生物研究所北京100080

将巨大芽孢杆菌（Bacillusmegaterium）青霉素酞化酶连接到聚丙烯腈纤维载体上，制成固定化青霉素酰化酶。其表现活力约为2000u／g。水解青霉素G的最适温度为50℃；最适PH为9．0；在PHS．5～10．3、温度50℃以下酶的活力稳定；表观米氏... 详细信息

将巨大芽孢杆菌（Bacillusmegaterium）青霉素酞化酶连接到聚丙烯腈纤维载体上，制成固定化青霉素酰化酶。其表现活力约为2000u／g。水解青霉素G的最适温度为50℃；最适PH为9．0；在PHS．5～10．3、温度50℃以下酶的活力稳定；表观米氏常数Ka为1．33×10-8mol／L；最大反应速度Vm为2．564mmol·min-1；苯乙酸为竞争性抑制剂，抑制常数为0．16mol／L。水解10％的青霉素G钾盐溶液，使用20批，保留酶活力80％。

关键词：巨大芽孢杆菌青霉素酰化酶聚丙烯腈固定化酶

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固定化青霉素酰化酶的研究

微生物学报 1992年第3期32卷 212-217页

作者：徐冠珠王祯祥朱丽钊韩辉李庆中中国科学院微生物研究所

将巨大芽孢杆菌胞外青霉素酰化酶通过共价键连接到醋酸纤维素载体上,制成的固定化青霉素酰化酶的表观活力达2000 u/g左右(PDAB 法)。水解10%(W/V)的青霉素 G 钾盐溶液,使用30批,保留活力70%以上。6-氨基青霉烷酸(6-APA)总收率平均达88.... 详细信息

将巨大芽孢杆菌胞外青霉素酰化酶通过共价键连接到醋酸纤维素载体上,制成的固定化青霉素酰化酶的表观活力达2000 u/g左右(PDAB 法)。水解10%(W/V)的青霉素 G 钾盐溶液,使用30批,保留活力70%以上。6-氨基青霉烷酸(6-APA)总收率平均达88.37%。固定化青霉素酰化酶水解青霉素 G 的最适 pH 为9.95,最适温度为55℃,表观米氏常数为1.093×10^(-2)mol/L,在 pH 5.8—10.7,温度45℃以下酶的活力稳定。

关键词：青霉素酰化酶固定化酶

巨大芽孢杆菌BP931胞外青霉素G酰化酶的产生条件

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微生物学报 1996年第3期36卷 193-198页

作者：崔福绵韩文珍韩辉朱丽钊王祯祥中国科学院微生物研究所北京100080

研究了巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)BP 931胞外青霉素G酰化酶的产生条件。菌在由葡萄糖0.7％,氮源1号0.5％,酵母膏1.0％和苯乙酸0.8％组成的液体培养基(灭菌前pH9.0,灭菌后pH8.0)中,28℃振荡培养44h。以6-硝基-3-苯乙酰胺基苯甲... 详细信息

研究了巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)BP 931胞外青霉素G酰化酶的产生条件。菌在由葡萄糖0.7％,氮源1号0.5％,酵母膏1.0％和苯乙酸0.8％组成的液体培养基(灭菌前pH9.0,灭菌后pH8.0)中,28℃振荡培养44h。以6-硝基-3-苯乙酰胺基苯甲酸为底物,培养滤液酶活力为9.0IU/ml。诱导物苯乙酸于培养6h后加入,酶活力可以提高到11.0IU/ml。Ca^(2+)、Al^(3+)、Sn^(4+)、Mn^(2+)和Fe^(2+)离子降低酶的形成;Cu^+和C0^(2+)离子显著抑制菌生长,降低酶的形成;Zn^(2+),Cd^(2+)和Hg^(2+)离子完全抑制菌生长和酶形成。

关键词：巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶产酶条件

铜绿假单胞菌完整细胞α-氨基酸酯水解酶的性质

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微生物学报 1988年第2期28卷 143-148页

作者：寇秀芬王祯祥中国科学院微生物研究所

铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）As 1.204完整细胞α-氨基酸酯水解酶能催化α-氨基酸酯的水解秈转移α-氨基酸酯的酰基到胺亲核试剂上。在水解和转移反应中酶的一般性质相同,最适pH为5.2,最适温度都是40℃。 7-氨基脱乙酰氧基... 详细信息

铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）As 1.204完整细胞α-氨基酸酯水解酶能催化α-氨基酸酯的水解秈转移α-氨基酸酯的酰基到胺亲核试剂上。在水解和转移反应中酶的一般性质相同,最适pH为5.2,最适温度都是40℃。 7-氨基脱乙酰氧基头孢烷酸（7-ADCA）抑制苯甘氨酸甲酯（PG-OMe）的水解。因此,该酶催化7-ADCA和PG-OMc转化成相应的半合成头孢菌素。

关键词：铜绿假单胞菌 α-氨基酸酯水解酶半合成头孢菌素

固定化巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶酶促合成头孢氨苄的研究

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微生物学报 1996年第2期36卷 151-154页

作者：崔福绵朱丽钊韩文珍吴敏王祯祥中国科学院微生物研究所北京100080

β—内酰胺系列抗菌素抗菌谱广、疗效高、毒副作用小,国际上研究与应用日渐广泛深入。头孢氨苄(Cephalexin)是重要的半合成抗菌素之一,由头孢霉素母核7—氨基脱乙酰氧基头孢烷酸(简称7-ADCA)和侧链结构物苯甘氨酸或其甲酯(PGME)经酰化... 详细信息

β—内酰胺系列抗菌素抗菌谱广、疗效高、毒副作用小,国际上研究与应用日渐广泛深入。头孢氨苄(Cephalexin)是重要的半合成抗菌素之一,由头孢霉素母核7—氨基脱乙酰氧基头孢烷酸(简称7-ADCA)和侧链结构物苯甘氨酸或其甲酯(PGME)经酰化而生成。酰化有化学法和酶法两种。采用青霉素G酰化酶或a—氨基酸酯酶或,a—氨酰转移酶的酶法,具有工艺操作简单、无需基团保护、环境污染轻等优点。继日本人于70年代初试验成功酶法之后,80年代初我们开展了这方面研究。制备方面,胞外酶优于胞内酶;使用方面,固定化酶优于固定化细胞。在用具有青霉素G酰化酶活性的固定化大肠杆菌(Escherichia coli)细胞合成头孢氨苄的基础上,又研究了用固定化巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)BP931胞外青霉素G酰化酶酰化合成头孢氨苄的条件。本文报道这一研究结果。

关键词：头孢氨苄巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶

坚持科学统计,着力三个提高为省会现代化建设提供优质统计服务

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济南市人民政府公报 2010年第14期 30-31,29页

作者：王祯祥市统计局

近年来,在市委市政府的领导下,全市统计系统干部职工深入贯彻落实科学发展观,紧紧围绕"维护省城稳定,发展省会经济,建设美丽泉城"的总体思路和"转方式、调结构、促增长、惠民生、保稳定"的中心任务,解放思想,提升境界,正确定位,勇于担当... 详细信息

近年来,在市委市政府的领导下,全市统计系统干部职工深入贯彻落实科学发展观,紧紧围绕"维护省城稳定,发展省会经济,建设美丽泉城"的总体思路和"转方式、调结构、促增长、惠民生、保稳定"的中心任务,解放思想,提升境界,正确定位,勇于担当,不辱使命,经受住了考验,为应对国际金融危机的冲击、践行科学发展观提供了强有力的统计保障。

关键词：统计服务干部统计统计系统统计数据质量统计信息化现代化建设国际金融危机中心任务统计工作