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非诺贝特对高甘油三酯合并低高密度脂蛋白冠心病患者前列环素活性的影响

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中华心血管病杂志 1998年第1期26卷 30-32页

作者：李景东戴闺柱冯宗忱王淳本杨焰魏文宁周本财同济医科大学心血管病研究所

目的观察冠心病合并高甘油三酯（ＴＧ），低高密度脂蛋白－胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）血症患者应用非诺贝特治疗后，其血清对前列环素（ＰＧＩ２）生物活性的影响。方法选择冠心病组和正常组各２０例，以ＰＧＩ２对二磷酸腺苷（ＡＤＰ）诱导... 详细信息

目的观察冠心病合并高甘油三酯（ＴＧ），低高密度脂蛋白－胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）血症患者应用非诺贝特治疗后，其血清对前列环素（ＰＧＩ２）生物活性的影响。方法选择冠心病组和正常组各２０例，以ＰＧＩ２对二磷酸腺苷（ＡＤＰ）诱导的血小板聚集的抑制率作为ＰＧＩ２生物活性的指标，在冠心病组服用非诺贝特前及一个月后，比较两组患者的血清对ＰＧＩ２生物活性的影响及与血脂的关系。结果实验发现，在应用非诺贝特治疗前，冠心病组血清对ＰＧＩ２生物活性的稳定作用明显低于正常组（Ｐ＜０．０１）。应用非诺贝特治疗１个月后，冠心病组的血ＴＧ水平显著降低（Ｐ＜０．００１），血ＨＤＬ－Ｃ水平显著升高（Ｐ＜０．０１）；同时，冠心病组血清对ＰＧＩ２的稳定作用与正常组相比不再有显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结论本实验进一步证实了ＨＤＬ－Ｃ对ＰＧＩ２的保护作用。因低ＨＤＬ－Ｃ血症是冠心病的危险因子，因而其降低ＰＧＩ２生物活性从而增加血小板聚集很可能是其作用机制的一部分。经过调脂治疗后，升高血ＨＤＬ－Ｃ水平，恢复ＨＤＬ－Ｃ对ＰＧＩ２的保护作用对防止粥样斑块破裂和减少急性冠状动脉综合征的发生可能起重要作用。

关键词：冠心病高甘油三酯 HDC 药物疗法非诺贝特

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动脉壁细胞氧化修饰极低密度脂蛋白

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1997年第4期29卷 47-52页

作者：曹圣冯宗忱王淳本袁敏同济医科大学生化教研室

将正常极低密度脂蛋白（ｎ－ＶＬＤＬ）分别与动脉壁的三种主要细胞：巨噬细胞（Ｍ）、内皮细胞（ＥＣ）、平滑肌细胞（ＳＭＣ）温育２４小时后，ＶＬＤＬ的ＴＢＡＲＳ值明显增高，琼脂糖电泳速度加快，溶血卵磷脂（ＬｙｓｏＰＣ）与... 详细信息

将正常极低密度脂蛋白（ｎ－ＶＬＤＬ）分别与动脉壁的三种主要细胞：巨噬细胞（Ｍ）、内皮细胞（ＥＣ）、平滑肌细胞（ＳＭＣ）温育２４小时后，ＶＬＤＬ的ＴＢＡＲＳ值明显增高，琼脂糖电泳速度加快，溶血卵磷脂（ＬｙｓｏＰＣ）与卵磷脂（ＰＣ）的比值明显升高，载脂蛋白Ｂ１００（ａｐｏＢ１００）发生降解，未见集中的降解区带，ａｐｏＥ的相对含量在各组无明显变化，加入抗氧化剂２，６－叔丁基甲苯（ｂｕｔｙｌａｔｅｄｈｙｄｒｏｘｙｔｏｌｕｅｎｅ，ＢＨＴ）能抑制上述变化。这些结果表明：动脉壁的三种主要细胞在体外均能氧化修饰ＶＬＤＬ，在体内条件下可能存在这一过程。

关键词：平滑肌细胞内皮细胞巨噬细胞正常极低密度脂蛋白氧化极低密度脂蛋白

细胞培养液中微量多胺的高效液相色谱荧光检测法

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同济医科大学学报 1995年第2期24卷 94-97页

作者：王淳本柴锡禄雷景迈何善述武汉同济医科大学基础医学院生物化学教研室

先采用Ｃ１８样品预处理小柱浓缩培养液中的微量多胺，经ＤＮＳ－Ｃｌ荧光衍生，高效液相色谱分离，荧光检测，结果可使腐胺、精脒、精胺等组份得到完全分离。精密度批内ＣＶ分别为２．４９％、２．９５％、４．２６％；批间ＣＶ为４．... 详细信息

先采用Ｃ１８样品预处理小柱浓缩培养液中的微量多胺，经ＤＮＳ－Ｃｌ荧光衍生，高效液相色谱分离，荧光检测，结果可使腐胺、精脒、精胺等组份得到完全分离。精密度批内ＣＶ分别为２．４９％、２．９５％、４．２６％；批间ＣＶ为４．２９％、４．６９％、５．１６％；回收率为１０３．６％、１０１．６％、９９．０％。我们发现，许多常用人工合成培养基中均含有极低浓度的多胺，本法可分析培养细胞前后培养基中微量多胺的变化，为研究多胺对细胞增殖的调控作用提供了有用的手段。

关键词：培养基多胺分光光度法高效液相色谱

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巨噬细胞极低密度脂蛋白受体的调节作用

生物化学杂志 1992年第2期8卷 234-241页

作者：黄强冯宗忱邓耀祖王淳本同济医科大学生化教研室

本文研究了小鼠腹腔巨噬细胞极低密度脂蛋白(VLDL)受体的调节。用富含甘油三酯(TG)的VLDL与小鼠巨噬细胞预温育后,细胞结合^(125)I-VLDL的最大结合容量(Bmax)比对照细胞只降低5％(1071/1127ng/mg细胞蛋白质),当细胞内TG增加到对照的2.5... 详细信息

本文研究了小鼠腹腔巨噬细胞极低密度脂蛋白(VLDL)受体的调节。用富含甘油三酯(TG)的VLDL与小鼠巨噬细胞预温育后,细胞结合^(125)I-VLDL的最大结合容量(Bmax)比对照细胞只降低5％(1071/1127ng/mg细胞蛋白质),当细胞内TG增加到对照的2.5倍时,细胞摄取及降解^(125)I-VLDL的量分别下降40％和22％;乙酰-低密度脂蛋白(AC-LDL)预温育的细胞结合^(125)I-VLDL的Bmax比对照细胞只降低14％(633/831ng/mg细胞蛋白质),当细胞内胆固醇(Ch)增加到对照的23倍时,细胞摄取及降解^(125)I-VLDL的量只分别下降10％和21％。此后随着细胞内TG或Ch含量的增加,摄取及降解^(125)I-VLDL的量仍保持不变。结论:细胞内TG或Ch含量对VLDL受体的调节作用微弱,与TG相比,Ch的调节作用更弱。

关键词： VLDL 巨噬细胞动脉粥样硬化

两步超速离心法快速分离大量血浆极低密度脂蛋白及低密度脂蛋白

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同济医科大学学报 1995年第3期24卷 169-171页

作者：王淳本宗义强吴万生冯友梅邓耀祖冯宗忱同济医科大学基础医学院生物化学教研室

本法先使血浆中的脂蛋白快速富集浓缩，再将脂蛋白各组份分离纯化。即具备序列漂浮法分离样品量大的长处，又具有密度梯度法离心时间短的优点。使用ＢＥＣＫＭＡＮＬ８－８０Ｍ型超速离心机，Ｔｙｐｅ７０Ｔｉ转头，分离２８０ｍｌ血浆... 详细信息

本法先使血浆中的脂蛋白快速富集浓缩，再将脂蛋白各组份分离纯化。即具备序列漂浮法分离样品量大的长处，又具有密度梯度法离心时间短的优点。使用ＢＥＣＫＭＡＮＬ８－８０Ｍ型超速离心机，Ｔｙｐｅ７０Ｔｉ转头，分离２８０ｍｌ血浆只需超速离心５ｈ。所得极低密度脂蛋白（ＶＬＤＬ）及低密度脂蛋白（ＬＤＬ）经琼脂糖电泳、聚丙烯酰胺电泳（ＰＡＧＥ）及载脂蛋白ＳＤＳ－聚丙烯酰胺电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）鉴定纯度良好。本文为超速离心分离制备大量血浆ＶＬＤＬ、ＬＤＬ提供了一种快速、经济的新方法。

关键词：超速离心法脂蛋白类低密度脂蛋白

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不同脂蛋白稳定前列环素生物活性的研究

中华医学杂志 1998年第4期78卷 314-315页

作者：李景东戴闺柱冯宗忱王淳本杨焰魏文宁同济医科大学心血管疾病研究所

不同脂蛋白稳定前列环素生物活性的研究李景东戴闺柱冯宗忱王淳本杨焰魏文宁前列环素（ＰＧＩ２）具有强大的抗血小板聚集、扩张血管和保护细胞的作用，但其半寿期仅３～５分钟［１］。Ａｏｙａｍａ报道高密度脂蛋白（ＨＤＬ）是ＰＧＩ... 详细信息

不同脂蛋白稳定前列环素生物活性的研究李景东戴闺柱冯宗忱王淳本杨焰魏文宁前列环素（ＰＧＩ２）具有强大的抗血小板聚集、扩张血管和保护细胞的作用，但其半寿期仅３～５分钟［１］。Ａｏｙａｍａ报道高密度脂蛋白（ＨＤＬ）是ＰＧＩ２的稳定因子，为探讨ＨＤＬ２与ＨＤ...

关键词：前列环素生物活性脂蛋白冠心病

兔主动脉平滑肌细胞低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)的诱导表达调节

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中国生物化学与分子生物学报 2000年第4期16卷 510-513页

作者：从容冯友梅王淳本宗义强邓耀祖冯宗忱同济医科大学生化教研室武汉430030

在兔主动脉平滑肌细胞 ( SMC)培养基中分别加入正常低密度脂蛋白 ( N- LDL)、氧化低密度脂蛋白 ( ox- LDL)、正常极低密度脂蛋白 ( N- VLDL)、氧化极低密度脂蛋白 ( ox- VLDL)和 β-极低密度脂蛋白 (β- VLDL )培养 2 4 h后 ,用定量 RT-... 详细信息

在兔主动脉平滑肌细胞 ( SMC)培养基中分别加入正常低密度脂蛋白 ( N- LDL)、氧化低密度脂蛋白 ( ox- LDL)、正常极低密度脂蛋白 ( N- VLDL)、氧化极低密度脂蛋白 ( ox- VLDL)和 β-极低密度脂蛋白 (β- VLDL )培养 2 4 h后 ,用定量 RT- PCR和配体结合实验检测平滑肌细胞 LRP的m RNA和蛋白质水平的表达 .结果表明 :五种脂蛋白均能在转录和翻译水平诱导兔主动脉平滑肌细胞的 LRP表达 ,尤以富含胆固醇的 N- LDL ,ox- LDL和β- VLDL的刺激作用更明显 .用胆固醇单独或与脂蛋白共同温育 SMC后 ,发现胆固醇本身可促进 SMC的 LRP蛋白水平的表达 ,脂蛋白与胆固醇的共同刺激作用更为显著 .结果提示 :上述五种脂蛋白对 SMC上 LRP的表达有上调作用 ,其机制可能主要是通过其中的胆固醇来实现的 .

关键词： LRP 表达调控泡沫细胞动脉粥样硬化 SMC

高甘油三酯合并低HDL血症患者PGI_2生物活性的研究

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同济医科大学学报 1997年第3期26卷 167-169页

作者：李景东戴闺柱冯宗忱王淳本杨焰魏文宁周本财同济医科大学心血管病研究所武汉430022 同济医科大学基础医学院生物化学教研室武汉430030 同济医科大学血液病研究所武汉430022

为探讨甘油三酯（TG）升高、高密度脂蛋白（HDL）降低与前列环素（PGI2）生物活性改变间的相互关系，选择65例高TG合并低HDL血症患者，以PGI2对二磷酸腺苷（ADP）诱导的血小板聚集的抑制率作为PGI2生物活性的指标，观察了其对PGI2生物... 详细信息

为探讨甘油三酯（TG）升高、高密度脂蛋白（HDL）降低与前列环素（PGI2）生物活性改变间的相互关系，选择65例高TG合并低HDL血症患者，以PGI2对二磷酸腺苷（ADP）诱导的血小板聚集的抑制率作为PGI2生物活性的指标，观察了其对PGI2生物活性的影响。结果发现，高TG合并低HDL血症时血小板聚集抑制率在10、20、50min时分别为（69．8±21．5）％、（47．5±25．0）％、（26．7±23．3）％，而对照组分别为（77．2±17．3）％、（60．7±26．1）％、（36．0±15．6）％，P＜0．05或＜0．01，表明高TG合并低HDL血症时对PGI2生物活性的稳定作用明显降低（P＜0．01）。提示HDL对PGI2的稳定作用是由于其延长了PGI2的半寿期，而高TG血症可能通过使HDL降低而间接地影响PGI2的生物活性。

关键词：甘油三酯脂蛋白类高密度前列腺素X类

体外培养的人眼小梁细胞的糖胺多糖生化分析和意义

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眼科研究 1997年第3期15卷 170-172页

作者：袁莉娅王淳本何善述魏厚仁同济医科大学附属协和医院眼科

目的测定培养的人眼小梁细胞糖胺多糖（ｇｌｙｃｏｓａｍｉｎｏｇｌｙｃａｎ，ＧＡＧ）的构成比。方法在体外培养从无眼病尸体眼取得的小梁细胞（ｔｒａｂｅｃｕｌａｒｍｅｓｈｗｏｒｋｃｅｌ，ＴＭＣ），掺入氚标葡萄糖胺，再用生物化... 详细信息

目的测定培养的人眼小梁细胞糖胺多糖（ｇｌｙｃｏｓａｍｉｎｏｇｌｙｃａｎ，ＧＡＧ）的构成比。方法在体外培养从无眼病尸体眼取得的小梁细胞（ｔｒａｂｅｃｕｌａｒｍｅｓｈｗｏｒｋｃｅｌ，ＴＭＣ），掺入氚标葡萄糖胺，再用生物化学方法测定细胞层及培养液中的糖胺多糖，包括依次酶降解、醋酸纤维电泳及液体闪烁放射活性测定等。结果共获得５种糖胺多糖，其构成比是透明质酸３０．５％、硫酸软骨素２１．７％、硫酸皮质素１４．９％、硫酸类肝素１９．２％、硫酸角质素５．４％及其他物质８．３％。结论此结果与直接从人眼小梁细胞组织所测得的糖胺多糖的构成比颇为接近，可为进一步研究各种因素对人眼小梁细胞糖胺多糖代谢的影响及开角青光眼的发病学提供基础。

关键词：糖胺多糖眼小梁细胞细胞培养生物化学分析