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活细胞传感仪在嗜酸乳酸杆菌培养过程中的应用

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食品工业科技 2012年第21期33卷 152-155,159页

作者：罗艳霞黄明志郭元昕王泽建储炬华东理工大学生物反应器国家重点实验室国家生化工程技术研究中心上海200237

活细胞是嗜酸乳酸杆菌发酵过程的目标产物,但长期以来一直缺乏一种能快速、准确地检测发酵液中活细胞量的方法,本文引入了一种基于电容原理的活细胞量测量新方法,探讨了其在嗜酸乳杆菌培养过程中在线应用的可行性。研究结果表明,活细胞... 详细信息

活细胞是嗜酸乳酸杆菌发酵过程的目标产物,但长期以来一直缺乏一种能快速、准确地检测发酵液中活细胞量的方法,本文引入了一种基于电容原理的活细胞量测量新方法,探讨了其在嗜酸乳杆菌培养过程中在线应用的可行性。研究结果表明,活细胞传感仪测定的活细胞数与平板活菌计数法测定的菌体浓度有非常好的线性关系,相关系数达0.9944,在相同的实验条件下,仪器测定数据具有较好的重复性,基于电容值计算出的比生长速率比基于CER、OUR计算出的比生长速率更可信。因此活细胞传感仪为嗜酸乳杆菌培养过程在线监测提供了一种简便、精确的方法。

关键词：活细胞传感器电容嗜酸乳杆菌

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湘莲腐败病的发生与防治

中国花卉园艺 2003年第16期 38-39页

作者：王泽建

根据刘国安等研究,莲腐败病病原菌是尖镰孢菌(Fusarium oxysporum).它主要危害莲的地下根茎.我国福建、江西、湖南三大子莲产区,每年都有不同程度的发生.其主要病征是:早期染病的地下茎外表皮与正常者无别,横切面中心部位呈浅褐色,随后... 详细信息

根据刘国安等研究,莲腐败病病原菌是尖镰孢菌(Fusarium oxysporum).它主要危害莲的地下根茎.我国福建、江西、湖南三大子莲产区,每年都有不同程度的发生.其主要病征是:早期染病的地下茎外表皮与正常者无别,横切面中心部位呈浅褐色,随后色泽加深,且向四周蔓延直至新生的藕鞭.后期病藕出现深褐色或紫黑色病斑,腐烂或不腐纵皱.从病茎上生出的叶片减绿,渐渐从叶缘开始干枯,最后整叶卷缩呈青枯状,叶柄也随之枯死.由病茎抽出的花蕾瘦小,继而枯瘪.

关键词：湘莲腐败病症状发生规律防治尖镰孢菌

大肠杆菌表达高性能融合鱿鱼环齿-类弹性蛋白的发酵优化

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华东理工大学学报（自然科学版） 2024年第1期50卷 71-79页

作者：姜正日殷仁凯王泽建钱江潮华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室上海200237

为了实现重组蛋白SRT-ELP36在大肠杆菌中的高效表达,利用携带重组蛋白SRTELP36基因的pET-25b(+)表达载体,分别在摇瓶和5 L发酵罐上进行了发酵条件优化,并在50 L发酵罐中进行放大验证。经转化表达质粒后,宿主菌BL21(DE3)的菌体生长和蛋... 详细信息

为了实现重组蛋白SRT-ELP36在大肠杆菌中的高效表达,利用携带重组蛋白SRTELP36基因的pET-25b(+)表达载体,分别在摇瓶和5 L发酵罐上进行了发酵条件优化,并在50 L发酵罐中进行放大验证。经转化表达质粒后,宿主菌BL21(DE3)的菌体生长和蛋白体积产量均高于BLR(DE3),可用于蛋白SRT-ELP36表达。摇瓶发酵条件优化结果表明,TB(Terrific Broth)培养基、装液比(装液量与摇瓶体积之比)为5%、诱导温度为37℃、对数生长结束期添加0.5 mmol/L的IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导剂,菌体最高OD_(600)(波长600 nm处的吸光值)达到22.3,最高蛋白体积产量达0.60 g/L。在5 L发酵罐中进行补料分批培养条件优化,在OD_(600)为35时添加终浓度为0.5 mmol/L的IPTG启动诱导,并控制过程菌体氧消耗速率(OUR)为(180±5) mmol/(L·h),菌体的最高OD_(600)和蛋白体积产量分别达到了88、1.85 g/L,单位菌体蛋白产量为70 mg/g。在50 L发酵罐中,参照5 L工艺控制条件进行发酵过程放大,菌体最高OD_(600)达到103,重组蛋白SRT-ELP36的体积产量和单位菌体产量进一步提高到了2.22 g/L和90 mg/g,是目前文献报道SRT蛋白表达的最高水平,为高性能融合鱿鱼环齿-类弹性蛋白的工业化生产提供了基础。

关键词：大肠杆菌鱿鱼环齿蛋白类弹性蛋白力学性能发酵优化

重组毕赤酵母发酵表达人乳头瘤病毒病毒样颗粒培养工艺条件的优化

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华东理工大学学报（自然科学版） 2016年第2期42卷 180-186页

作者：赵晶王泽建郭美锦储炬张嗣良楼觉人华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海200237 上海生物制品研究所有限责任公司上海200052

对重组毕赤酵母表达人乳头瘤病毒病毒样颗粒发酵条件进行了优化。在全合成摇瓶培养基的基础上,考察了诱导过程中培养液pH、温度、铵离子、油酸对人乳头瘤病毒病毒样颗粒发酵的影响。研究表明发酵过程中单体蛋白16L1的表达条件与组装条... 详细信息

对重组毕赤酵母表达人乳头瘤病毒病毒样颗粒发酵条件进行了优化。在全合成摇瓶培养基的基础上,考察了诱导过程中培养液pH、温度、铵离子、油酸对人乳头瘤病毒病毒样颗粒发酵的影响。研究表明发酵过程中单体蛋白16L1的表达条件与组装条件不同：pH=4.5最适于单体L1表达,而pH=3.5则最适于VLPs组装;28℃利于单体L1表达,而30℃则促进VLPs组装;发酵指数生长期诱导时铵离子浓度为0.26~0.30mol/L,利于菌体生长、单体L1表达与组装;生长稳定期时铵离子浓度为0.34~0.42mol/L,最有利于单体的合成与组装。进一步研究发现,诱导初期添加油酸,会抑制单体L1表达,而在诱导中期添加φ=5%油酸则能够极大地促进L1自组装。毕赤酵母发酵过程中胞内单体L1表达与自组装的最优化工艺条件的考察,为工业发酵优化表达人乳头瘤病毒病毒样颗粒提供了应用基础。

关键词：重组毕赤酵母人乳头瘤病毒病毒样颗粒发酵条件优化自组装

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烷烃为底物合成槐糖脂发酵过程供氧控制优化

华东理工大学学报（自然科学版） 2022年第2期48卷 194-202页

作者：刘畅陈阳田锡炜庄英萍储炬王泽建华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物工程学院上海200237

以正十六烷为疏水底物考察了不同供氧水平对槐糖脂合成代谢的影响。通过对发酵过程中的代谢通量分布和关键酶活性的整合分析,发现供氧水平显著影响细胞脂肪酸和羟基脂肪酸的合成,同时显著影响葡萄糖和烷烃的利用程度。在线生理参数呼吸... 详细信息

以正十六烷为疏水底物考察了不同供氧水平对槐糖脂合成代谢的影响。通过对发酵过程中的代谢通量分布和关键酶活性的整合分析,发现供氧水平显著影响细胞脂肪酸和羟基脂肪酸的合成,同时显著影响葡萄糖和烷烃的利用程度。在线生理参数呼吸商(RQ)能够很好地表征胞内代谢通量的变化,后续有望成为过程调控的关键参数并可以进一步应用于过程优化。最后,在槐糖脂合成期提供合适的供氧水平,不但能够有效提升相对昂贵底物烷烃的利用率,而且能够显著降低功率输入,从而在两个方面提高生产经济性。本文研究结果同样适用于其他菜籽油、油酸等疏水性底物的槐糖脂发酵过程,并为工业规模槐糖脂发酵过程控制策略的开发和应用提供坚实的理论基础。

关键词： Candida bombicola 槐糖脂正十六烷烃氧代谢代谢通量

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增大罐压提高脱氮假单胞菌发酵生产维生素B_(12)的产量

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微生物学通报 2012年第3期39卷 309-317页

作者：刘玉伟王建王泽建黄明志华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室国家生化工程技术研究中心(上海) 上海200237

【目的】提高发酵罐的罐压,增加维生素B12的产率。【方法】利用常规代谢通量分析(MFA)方法,对脱氮假单胞菌生产维生素B12的发酵过程进行研究。【结果】发现随着VB12合成速率的加快,磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)羧化生成草酰乙酸(OAA)的通量明... 详细信息

【目的】提高发酵罐的罐压,增加维生素B12的产率。【方法】利用常规代谢通量分析(MFA)方法,对脱氮假单胞菌生产维生素B12的发酵过程进行研究。【结果】发现随着VB12合成速率的加快,磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)羧化生成草酰乙酸(OAA)的通量明显加大,以满足维生素B12合成对前体的需求。根据该分析结果,对发酵工艺进行了改进,即在脱氮假单胞菌进入合成维生素B12阶段时,提高发酵罐的罐压,增加发酵液中二氧化碳的溶解度,从而强化了羧化回补途径。维生素B12的产率明显增加,发酵160 h的产物浓度为176 mg/L,比对照批次终浓度147 mg/L高出了19.7%。【结论】通过增大罐压提高了脱氮假单胞菌进入合成维生素B12的产量。

关键词：脱氮假单胞菌罐压羧化途径合成速率

智能的新型溶氧电极---光学溶氧电极在工业发酵过程监测及优化中的应用

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流程工业 2013年第19期 58-58,60,61页

作者：张鑫王泽建

本文介绍了光学溶氧电极在工业发酵过程优化中的应用。光学溶氧电极相对于传统极谱氧电极具有精度高，漂移小，响应快等优点。同时其自身的智能功能以及配套软件的传感器管理功能，在发酵过程中具有代替传统极谱氧电极的巨大潜力。

关键词：极谱氧电极智能功能工业发酵过程优化过程监测光学应用传感器管理

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信息化进程及其给现代企业带来的格局变化

财经理论与实践 1998年第4期19卷 37-39页

作者：曾宏坤王泽建湖南省财政厅信托投资公司

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三孢布拉霉菌发酵番茄红素提取工艺的优化

华东理工大学学报（自然科学版） 2016年第3期42卷 343-350页

作者：庞昆云吴嘉琦王泽建储炬庄英萍张嗣良华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室国家生化工程技术研究中心(上海)上海200237

番茄红素作为一种类胡萝卜素,具有提高免疫力、延缓衰老等多种功能。利用发酵法生产番茄红素是满足市场需求的重要途径。为了更好地提升番茄红素的提取收率,降低发酵过程中各种杂质的含量。研究了不同的溶媒及处理方法对湿菌体进行直接... 详细信息

番茄红素作为一种类胡萝卜素,具有提高免疫力、延缓衰老等多种功能。利用发酵法生产番茄红素是满足市场需求的重要途径。为了更好地提升番茄红素的提取收率,降低发酵过程中各种杂质的含量。研究了不同的溶媒及处理方法对湿菌体进行直接高效萃取的新方法。将番茄红素发酵液经过抽滤、洗涤处理得到湿菌丝体,采用有机溶剂和超声波破碎结合的处理方法,考察了菌丝体状态、皂化条件、脱水剂、提取溶剂、菌丝量与提取溶剂的料液比例、提取时间和提取温度对番茄红素提取率的影响。实验结果表明,利用湿菌体直接提取番茄红素的方法是可行的,并确定了湿菌体直接提取的最优条件:用0.6mol/L NaOH溶液皂化,乙醇脱水处理10min,乙酸乙酯作为提取剂,菌丝体质量(g)与提取溶剂体积(mL)之比为1∶75,在45℃超声处理20min,可获得最高的番茄红素提取率。

关键词：三孢布拉霉菌番茄红素有机溶剂提取