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桑白皮多糖提取工艺正交试验优化研究

中国中医药信息杂志 2012年第10期19卷 46-47页

作者：何洁英王汝上何洁宝邓小霞佛山市第一人民医院广东佛山528000 广州康臣药业有限公司肾病药物研究中心广东广州510530 佛山市顺德区第一人民医院广东佛山528300 广东省第二中医院广东广州510000

目的优选桑白皮多糖最佳提取工艺。方法采用正交试验设计,以提取次数、提取时间及醇沉浓度作为工艺因素,每个因素采用3个水平,选择L9(34)正交表进行试验,同时用硫酸-苯酚法测定桑白皮多糖的含量作为评价指标。结果桑白皮多糖的最佳提取... 详细信息

目的优选桑白皮多糖最佳提取工艺。方法采用正交试验设计,以提取次数、提取时间及醇沉浓度作为工艺因素,每个因素采用3个水平,选择L9(34)正交表进行试验,同时用硫酸-苯酚法测定桑白皮多糖的含量作为评价指标。结果桑白皮多糖的最佳提取工艺为超声提取30 min,提取2次,醇沉浓度为80%。结论优选的工艺多糖提取率稳定,提取率高,提取工艺合理可行。

关键词：桑白皮多糖正交试验提取工艺含量测定

超滤陶瓷膜精制黄芪葛根汤组成药物提取液的工艺参数研究

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广州中医药大学学报 2017年第5期34卷 753-757页

作者：胡琴王汝上程慧荃郑兆广广州康臣药物研究有限公司广东广州510530

【目的】优化无机陶瓷膜精制黄芪葛根汤方剂中黄芪、葛根药材提取液的工艺参数。【方法】以黄芪和葛根(剂量配比为1∶2)的提取液为研究对象,以含固量得率、葛根素转移率及特征峰面积之和的减少率为指标,通过对膜孔径、料液温度和超滤压... 详细信息

【目的】优化无机陶瓷膜精制黄芪葛根汤方剂中黄芪、葛根药材提取液的工艺参数。【方法】以黄芪和葛根(剂量配比为1∶2)的提取液为研究对象,以含固量得率、葛根素转移率及特征峰面积之和的减少率为指标,通过对膜孔径、料液温度和超滤压力等3个因素进行单因素与正交试验优化。【结果】以综合得分为评价指标,最佳优化参数如下:膜孔径为100 nm,料液温度为35℃,超滤压力为0.18 MPa。陶瓷膜孔径和超滤压力为主要影响因素,对精制工艺有显著性影响(P<0.05)。【结论】采用无机陶瓷膜超滤技术精制黄芪葛根汤方提取液是可行的,为陶瓷膜在中药提取液的精制研究方面提供了可靠的实验依据。

关键词：陶瓷膜超滤黄芪葛根汤正交试验葛根素

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不同产地桑白皮HPLC的指纹图谱的研究

药学研究 2016年第2期35卷 77-79,107页

作者：李宜划王汝上胡琴林子桐沈雪梅广东药学院中药学院广东广州510006 广州康臣药物研究有限公司广东广州510530

目的建立简单可行的桑白皮药材指纹图谱方法。方法采用高效液相色谱法,Agilent Extend-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相:以乙腈-0.2%甲酸进行梯度洗脱,流速:1 m L·min^(-1),柱温:30℃,检测波长:280 nm,进样量为10μL。结果... 详细信息

目的建立简单可行的桑白皮药材指纹图谱方法。方法采用高效液相色谱法,Agilent Extend-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相:以乙腈-0.2%甲酸进行梯度洗脱,流速:1 m L·min^(-1),柱温:30℃,检测波长:280 nm,进样量为10μL。结果用梯度洗脱得到的色谱图中各色谱峰分离较好,达到指纹图谱分析的效果。结论该方法重复性好、检测方法简便,可为桑白皮指纹图谱的质量控制提供依据。

关键词：桑白皮高效液相色谱指纹图谱

参芪十一味颗粒对胃癌放化疗大鼠免疫功能及不良反应的影响

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今日药学 2014年第7期24卷 484-488页

作者：袁慕荣王汝上蔡丽云侯思捷李秀琼广东省佛山市中医院广东佛山528000 广州康臣药物研究有限公司广东广州510530

目的研究参芪十一味颗粒对胃癌放化疗大鼠的免疫功能及不良反应的影响。方法以胃癌Wistar大鼠为模型,并将其随机分为4组,即参芪十一味颗粒组(治疗组)、单纯化疗组(化疗组)、模型组及正常大鼠组(空白组),4组大鼠都给予相应治疗措施且进... 详细信息

目的研究参芪十一味颗粒对胃癌放化疗大鼠的免疫功能及不良反应的影响。方法以胃癌Wistar大鼠为模型,并将其随机分为4组,即参芪十一味颗粒组(治疗组)、单纯化疗组(化疗组)、模型组及正常大鼠组(空白组),4组大鼠都给予相应治疗措施且进行观察和数据统计分析。比较评估大鼠的生存质量;采用流式细胞仪检测大鼠静脉血Th1、Th2及其比值;ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)法检测IFN-γ和IL-4的含量;测定白细胞(WBC)、血小板(PLT)、血红蛋白(Hb)指标。结果参芪十一味颗粒治疗组大鼠进食量、体质量和生存期较化疗组和模型组明显增加(P<0.05),但仍低于空白组;外周血Th1、Th2及其比值Th1/Th2较化疗组及模型组大鼠均有显著升高(P<0.05);与化疗组和模型组相比,治疗组IFN-γ的含量显著增加,而IL-4含量显著降低(P<0.05);治疗组外周血白细胞、血红蛋白以及血小板减少均显著低于化疗组和模型组(P<0.05)。结论参芪十一味颗粒能有效提高胃癌放化疗大鼠的机体免疫功能,降低毒副作用,改善生活质量,是胃癌放化疗治疗中有效的辅助用药,具有重要的临床使用价值。

关键词：参芪十一味颗粒胃癌放化疗免疫不良反应

Thoc1真核表达载体构建及其与ClC-3蛋白在人宫颈癌细胞HeLa中的共定位观察

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山东医药 2018年第16期58卷 26-29页

作者：刘学强郑兆广王汝上钟杰何桂芳徐彬广东药科大学生命科学与生物制药学院广州510006 广州康臣药业有限公司肾病药物研究中心

目的克隆Thoc1基因并构建pThoc1-DsRed2-N1真核表达载体,观察Thoc1和氯离子通道3(ClC-3)在人宫颈癌细胞HeLa中的共定位情况,分析ClC-3是否参与细胞转录过程。方法采用RT-PCR法扩增获得Thoc1基因的编码序列,将其克隆到p DsRed2-N1载体中... 详细信息

目的克隆Thoc1基因并构建pThoc1-DsRed2-N1真核表达载体,观察Thoc1和氯离子通道3(ClC-3)在人宫颈癌细胞HeLa中的共定位情况,分析ClC-3是否参与细胞转录过程。方法采用RT-PCR法扩增获得Thoc1基因的编码序列,将其克隆到p DsRed2-N1载体中,构建pThoc1-DsRed2-N1真核表达载体,经PCR、SacⅠ和Bam HⅠ双酶切、基因测序进行鉴定。将对数生长期HeLa细胞随机分为转染组、空转染组及空白对照组,分别采用Lipofectamine 2000转染pThoc1-DsRed2-N1质粒、p DsRed2-N1质粒及脂质体,转染48 h倒置荧光显微镜下观察红色荧光蛋白表达情况。取转染组细胞,采用免疫荧光技术观察Thoc1和ClC-3的共定位情况。结果 PCR鉴定结果显示在约2.1 kb处有一亮带;双酶切得到约4.7 kb和2.1 kb的两个片段,符合预期大小;基因测序结果显示与Genebank中Thoc1基因序列完全一致;证实成功构建pThoc1-DsRed2-N1真核表达载体。空转染组可观察到较强的红色荧光,空白对照组没有观察到红色荧光,转染组红色荧光强度介于空转染组与空白对照组之间;证实HeLa细胞中存在Thoc1表达。ClC-3分布于细胞核和细胞质中,主要是细胞核中;Thoc1只分布于细胞核中;两者叠加后在细胞核呈黄色荧光,证实ClC-3和Thoc1在HeLa细胞核上存在共同定位。结论成功构建了pThoc1-DsRed2-N1真核表达载体;Thoc1与ClC-3共定位于HeLa细胞核,提示ClC-3可能参与细胞转录过程。

关键词： Thoc1基因真核表达载体氯离子通道3 共定位人宫颈癌细胞HeLa

山楂消脂胶囊中大黄蒽醌类成分一测多评法的建立

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中国中医药信息杂志 2016年第1期23卷 89-92页

作者：李影雄李子鸿刘东文陈淑映王汝上佛山市中医院广东佛山528000 广州康臣药物研究有限公司广东广州510663

目的建立山楂消脂胶囊中大黄蒽醌类成分一测多评法的分析方法,并进行方法学考察。方法以大黄素为内参照物,建立芦荟大黄素、大黄酸和大黄酚与大黄素间的相对校正因子。分别采用外标法和一测多评法测定山楂消脂胶囊中4种蒽醌类成分的含量... 详细信息

目的建立山楂消脂胶囊中大黄蒽醌类成分一测多评法的分析方法,并进行方法学考察。方法以大黄素为内参照物,建立芦荟大黄素、大黄酸和大黄酚与大黄素间的相对校正因子。分别采用外标法和一测多评法测定山楂消脂胶囊中4种蒽醌类成分的含量,以验证一测多评法的合理性、可行性和可重复性。结果一测多评法的计算结果与外标法的实测值之间无显著差异。结论一测多评法可作为一种质量评价模式用于山楂消脂胶囊中蒽醌类成分的质量评价。

关键词：一测多评法高效液相色谱法山楂消脂胶囊蒽醌相对校正因子

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一测多评法测定猪胆粉中4种指标成分的含量

广州中医药大学学报 2023年第4期40卷 984-991页

作者：王汝上钟铖陈瑞君段子浩钟泓玲李政海广州康臣药物研究有限公司广东广州510663

【目的】建立一测多评法同时测定猪胆粉中牛磺猪去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、甘氨猪去氧胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸钠4种指标成分的含量,并完成方法学验证。【方法】采用Agilent 1260型高效液相色谱仪、DAD检测器和Agilent ZORBAX SBAq C18(4.... 详细信息

【目的】建立一测多评法同时测定猪胆粉中牛磺猪去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、甘氨猪去氧胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸钠4种指标成分的含量,并完成方法学验证。【方法】采用Agilent 1260型高效液相色谱仪、DAD检测器和Agilent ZORBAX SBAq C18(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.03 mol/L磷酸二氢钠(p H3.45)为流动相梯度洗脱,检测波长为200 nm,流速为1.0 mL/min,柱温为25℃。以牛磺猪去氧胆酸为内参物,通过外标法测定内参物含量,建立相对校正因子计算牛磺鹅去氧胆酸、甘氨猪去氧胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸钠的含量,同时对比一测多评法与外标法测定11批猪胆粉中4种指标成分的含量。【结果】猪胆粉中牛磺猪去氧胆酸与牛磺鹅去氧胆酸、甘氨猪去氧胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸钠的相对校正因子(f)分别为1.214、1.260、1.243;各指标成分依次在0.181 6~4.540 6、0.162 9~4.073 4、0.746 1~18.653 0、0.495 9~12.397 5μg范围内线性关系良好(r>0.999);平均加样回收率分别为100.00%、100.11%、97.30%、98.23%;相对标准偏差(RSD)分别为1.11%、4.15%、1.13%、1.17%;该方法精密度、重复性、稳定性的RSD均小于5.0%。11批猪胆粉中4种指标成分一测多评法计算值与外标法实测值间结果相对偏差均小于5%,表明2种检测方法结果无显著性差异。【结论】一测多评法检测猪胆粉中牛磺猪去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、甘氨猪去氧胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸钠的含量,可降低对照品的使用成本,该方法高效快捷、准确度高,方法简便。

关键词：猪胆粉一测多评法高效液相色谱含量测定质量控制

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尿毒清颗粒HPLC指纹图谱研究

中国中医药信息杂志 2013年第6期20卷 45-47页

作者：黄晓玲朱荃郑兆广屈夏菁程慧荃王汝上广州康臣药物研究有限公司广东广州510530

目的建立尿毒清颗粒的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,探讨共有特征峰的药材所属。方法利用二极管阵列检测器,色谱柱为Synergi(4μm,4.6 mm×250 mm),流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸(B),梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长230 nm,通过药材阴性和... 详细信息

目的建立尿毒清颗粒的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,探讨共有特征峰的药材所属。方法利用二极管阵列检测器,色谱柱为Synergi(4μm,4.6 mm×250 mm),流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸(B),梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长230 nm,通过药材阴性和阳性对照试验进行原药材与成品的相关性研究。结果建立23个共有特征峰的HPLC指纹图谱,确定了指纹图谱中共有特征峰的药材归属。结论本研究有助于提高该制剂的质量控制水平。

关键词：尿毒清颗粒指纹图谱高效液相色谱法相关性研究相似度评价

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平台依附型就业者权利统一的机制弥合

江汉论坛 2024年第1期 124-129页

作者：秦前红王汝唯武汉大学法学院

生产资料和劳动方式的变革催生了多种类型的灵活就业群体，平台依附型就业者由此而生。就业权形式平等与实质平等的统一，是平台依附型就业者权利统一的理论动因，但平台依附型就业者就业风险分担不平等、劳动基准保护不平等、司法裁判... 详细信息

生产资料和劳动方式的变革催生了多种类型的灵活就业群体，平台依附型就业者由此而生。就业权形式平等与实质平等的统一，是平台依附型就业者权利统一的理论动因，但平台依附型就业者就业风险分担不平等、劳动基准保护不平等、司法裁判不一致等因素的存在，要求从现实层面注重平台依附型就业者权利的保护。推动平台依附型就业者权利形式平等与实质平等的统一应适度拓展社会保险权利，构建良性的风险分担机制；适度提供劳动基准保护，构建良性的生存保障机制；适度调整劳动关系认定标准，构建良性的司法裁判机制。通过找准平台依附型就业者权利形式平等与实质平等之间的差距，来构建适宜的弥合机制，进而推动就业领域法律平等目标的实现。

关键词：权利统一实质平等形式平等平台依附灵活就业者