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NcFBPase通过激活小鼠巨噬细胞MAPK和AKT通路诱导炎性细胞因子表达

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畜牧与兽医 2021年第6期53卷 104-110页

作者：陈梦阁李新张旭王晓岑孙智超张西臣宫鹏涛李建华吉林大学动物医学学院吉林长春130062

为探究新孢子虫果糖-1,6-二磷酸酶(NcFBPase)在宿主免疫应答中的作用,通过构建pGEX-4T-1-NcFBPase载体,诱导表达获得可溶性重组NcFBPase蛋白(rNcFBPase)并与小鼠腹腔巨噬细胞共孵育,采用CCK8法筛选rNcFBPase安全浓度,Western blot检测... 详细信息

为探究新孢子虫果糖-1,6-二磷酸酶(NcFBPase)在宿主免疫应答中的作用,通过构建pGEX-4T-1-NcFBPase载体,诱导表达获得可溶性重组NcFBPase蛋白(rNcFBPase)并与小鼠腹腔巨噬细胞共孵育,采用CCK8法筛选rNcFBPase安全浓度,Western blot检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和蛋白激酶B(AKT)信号通路相关蛋白水平,ELISA检测白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-12(IL-12)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌情况。结果显示:成功构建了pGEX-4T-1-NcFBPase原核表达载体,并获得大小为65 ku的rNcFBPase;50μg/mL是rNcFBPase刺激小鼠腹腔巨噬细胞的安全浓度,用该浓度的rNcFBPase刺激小鼠腹腔巨噬细胞能显著提高p38、ERK和AKT蛋白的磷酸化水平;p38、ERK和AKT抑制剂预处理细胞,rNcFBPase诱导的IL-6、IL-12和TNF-α的分泌量显著降低。结果表明:NcFBPase可通过激活MAPK和AKT信号通路诱导细胞因子IL-6、IL-12和TNF-α的分泌,为NcFBPase蛋白功能研究及宿主抗新孢子虫免疫提供重要参考。

关键词：新孢子虫果糖-1 6-二磷酸酶丝裂原活化蛋白激酶蛋白激酶B 细胞因子

活性氧介导的NLRP3炎症小体在新孢子虫感染中的作用

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活性氧介导的NLRP3炎症小体在新孢子虫感染中的作用

2021中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第16次学术研讨会

作者：李璐王晓岑宫鹏涛李新李建华张西臣吉林大学动物医学学院

新孢子虫是一种引起牛、羊等中间宿主生殖障碍等疾病的细胞内寄生虫。深入了解宿主与新孢子虫感染之间的免疫机制可有利于对该病的防治。前期工作发现宿主感染新孢子虫后可通过NLRP3炎症小体抵抗新孢子虫感染,但NLRP3炎症小体在新孢子... 详细信息

新孢子虫是一种引起牛、羊等中间宿主生殖障碍等疾病的细胞内寄生虫。深入了解宿主与新孢子虫感染之间的免疫机制可有利于对该病的防治。前期工作发现宿主感染新孢子虫后可通过NLRP3炎症小体抵抗新孢子虫感染,但NLRP3炎症小体在新孢子虫感染中激活的机制需进一步阐明。本研究通过建立新孢子虫感染小鼠的体内外感染模型,利用免疫学和分子生物学等手段检测新孢子虫、ROS和NLRP3炎症小体之间的关系。结果发现新孢子虫可呈剂量依赖性诱导腹腔巨噬细胞产生ROS,而ROS抑制剂NAC不仅降低新孢子虫诱导的ROS产生,还减弱NLRP3炎症小体反应,但增加胞内荷虫量。ROS诱导剂pyrogallol（PG）能够随剂量促进ROS和IL-1β的释放,同时细胞荷虫量显著降低。新孢子虫感染WT和Mrp3小鼠后,PG显著上调WT小鼠血清中IL-18的分泌,降低腹腔灌洗液细胞中的荷虫量;而在Nlrp3小鼠中,PG处理未导致IL-18升高,荷虫量仅轻微降低,但仍显著高于PG处理的WT小鼠。进一步动物试验表明PG可显著提高小鼠生存率,减少组织中的荷虫量和病理损伤。新孢子虫诱导的ROS在NLRP3炎症小体活化和控制寄生虫中起重要作用,并且ROS诱导剂PG介导NLRP3炎症小体活化控制宿主内外新孢子虫感染,ROS-NLRP3通路能够成为寻找治疗新孢子虫病的潜在药物靶标。

关键词：新孢子虫活性氧 NLRP3炎症小体腹腔巨噬细胞

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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三亚市中医药膳食疗发展现状分析

国际中医中药杂志 2020年第10期42卷 943-946页

作者：陈小勇王增铎王晓岑刘卓航三亚学院健康医学院 572022

采用问卷调查的方式,了解海南中医药膳食疗的发展现状。设计调查问卷,从调查对象对药膳食疗的认知程度、药膳食疗消费市场的发展现状2个方面进行调研。共发放调查问卷450份,回收363份,有效问卷363份,有效回收率为80.67%。调查对象中,49.... 详细信息

采用问卷调查的方式,了解海南中医药膳食疗的发展现状。设计调查问卷,从调查对象对药膳食疗的认知程度、药膳食疗消费市场的发展现状2个方面进行调研。共发放调查问卷450份,回收363份,有效问卷363份,有效回收率为80.67%。调查对象中,49.59%(180/363)明确了解药膳,43.80%(159/363)认可药膳食疗,半数以上使用药膳的目的是补气补血和美容减肥;选择药膳食疗中,44.63%(162/363)的调查对象看重疗效,31.40%(114/363)的调查对象看重口味;药膳食疗人均消费160元以内接受程度较高。调研还发现,药膳餐厅的口碑是消费者选择就餐的重要因素。同时,应加强专业人才队伍的建设,以应对药膳食疗服务与管理的专业人才缺乏的现状;政府部门采用国际标准加强对药膳食疗产业链的管控,并利用海南当地特色文化建设药膳餐厅,促进海南自由贸易港经济、社会和文化的发展。

关键词：药膳疗法膳食疗法海南自由贸易港调查问卷

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荜拨体外抗新孢子虫的作用

中国生物制品学杂志 2020年第5期33卷 516-520页

作者：李璐王晓岑张楠宫鹏涛李建华李新马丹关贵全张西臣吉林大学动物医学学院人兽共患病研究教育部重点实验室吉林长春130062 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室甘肃兰州730046

目的研究荜拨(piperlongumine,PL)体外抗新孢子虫的作用。方法通过细胞毒性试验确定PL对Vero细胞增殖率完全无影响的安全浓度,用安全浓度的PL处理Vero细胞,检测PL对细胞内新孢子虫增殖、细胞感染率以及虫体超微结构的影响。结果处理24和... 详细信息

目的研究荜拨(piperlongumine,PL)体外抗新孢子虫的作用。方法通过细胞毒性试验确定PL对Vero细胞增殖率完全无影响的安全浓度,用安全浓度的PL处理Vero细胞,检测PL对细胞内新孢子虫增殖、细胞感染率以及虫体超微结构的影响。结果处理24和48 h,PL浓度为0.6和1.25μg/mL对Vero细胞活力均无影响;PL呈剂量依赖性抑制Vero细胞内新孢子虫增殖,非剂量依赖性降低Vero细胞的感染率,可显著损伤新孢子虫的正常形态结构,使虫体胞质水肿,大量空泡产生,类锥体与棒状体丢失,虫体崩解。结论PL能显著抑制细胞内新孢子虫的增殖,降低虫体感染Vero细胞的能力,损伤虫体的超微结构,发挥较好的抗新孢子虫作用,在治疗新孢子虫病方面具有潜在的药用价值。

关键词：新孢子虫荜拨 Vero细胞增殖细胞感染率超微结构

哈尔滨市香坊区黑土型水稻土可溶性硅受环境因子的影响研究

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现代农业科技 2016年第14期 194-196页

作者：许景钢杨大志孙涛王晓岑东北农业大学资源与环境学院黑龙江哈尔滨150030 黑龙江省标准化研究院绥化市气象局

研究黑土型水稻土可溶性硅受环境因子的影响,结果表明：无作物条件下温度、pH值和浸水方式均能对土壤可溶性硅的释放产生影响。环境温度的升高有利于土壤可溶性硅的释放,在5-40℃范围内,温度每提高1℃,黑土型水稻土中可溶性硅的释放量增... 详细信息

研究黑土型水稻土可溶性硅受环境因子的影响,结果表明：无作物条件下温度、pH值和浸水方式均能对土壤可溶性硅的释放产生影响。环境温度的升高有利于土壤可溶性硅的释放,在5-40℃范围内,温度每提高1℃,黑土型水稻土中可溶性硅的释放量增加0.64mg/kg。当pH值在4.5-9.0范围内,黑土型水稻土中可溶性硅释放随p H值的升高呈下降趋势。土壤可溶性硅浓度随持续浸水时间的增加呈先增加后降低的趋势,在持续浸水20 d达到最大值,为53.87 mg/kg,且较持续浸水10 d提高了12.91%。持续浸水20 d后土壤可溶性硅浓度开始下降,到第50天土壤可溶性硅下降到17.78 mg/kg。采用间歇浸水,土壤可溶性硅浓度稳定在32.57-38.32 mg/kg之间,表明间歇灌水的方式有利于持续稳定地供给水稻生产过程中对可溶性硅的需求。

关键词：土壤可溶性硅温度 pH值浸水黑龙江哈尔滨香坊区

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新孢子虫天冬氨酰蛋白酶ASP5功能研究

中国病原生物学杂志 2023年第4期18卷 427-431页

作者：张云瀚李新王晓岑张旭张西臣宫鹏涛张楠李建华杜博亚吉林大学动物医学学院吉林长春130062

目的制备抗新孢子虫NcASP5多克隆抗体,对NcASP5蛋白进行亚细胞定位;构建NcASP5基因敲除虫株(△NcASP5),探究NcASP5蛋白在虫体入侵、生长及致病中的作用。方法原核表达NcASP5蛋白,纯化后免疫小鼠,制备抗NcASP5蛋白多克隆抗体,免疫荧光法... 详细信息

目的制备抗新孢子虫NcASP5多克隆抗体,对NcASP5蛋白进行亚细胞定位;构建NcASP5基因敲除虫株(△NcASP5),探究NcASP5蛋白在虫体入侵、生长及致病中的作用。方法原核表达NcASP5蛋白,纯化后免疫小鼠,制备抗NcASP5蛋白多克隆抗体,免疫荧光法观察NcASP5蛋白亚细胞定位;运用CRISPR-cas9技术构建△NcASP5虫株,通过噬斑试验、入侵试验、增殖试验、逸出试验和动物试验探究NcASP5蛋白在虫体入侵、生长及致病中的作用。结果成功制备抗NcASP5蛋白多克隆抗体,免疫荧光法观察NcASP5蛋白定位于虫体细胞质;成功构建△NcASP5虫株,其噬斑面积、入侵率和逸出率与野生虫株比较差异均无统计学意义(均P>0.05),增殖率△NcASP5虫株在含1个与8个速殖子的纳虫空泡的数量所占百分比差异有统计学意义(P0.05)。结论敲除NcASP5基因对新孢子虫虫体增殖有显著影响,而对虫体的生长、入侵及毒力等无显著影响,这为揭示新孢子虫致病机制和新孢子虫病防控提供了理论依据。

关键词：新孢子虫 NcASP5 CRISPR-cas9 基因功能

活性云母组合物液抗鸡柔嫩艾美尔球虫感染的效果

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中国病原生物学杂志 2021年第4期16卷 438-441页

作者：肇英池王晓岑张楠王希峰宫鹏涛李建华李新张西臣吉林大学动物医学学院人兽共患病研究教育部重点实验室吉林长春130062 长春沃古曼云母发酵应用研究院

目的观察活性云母组合物液对柔嫩艾美尔球虫(***)感染雏鸡的防治效果。方法 7日龄雏鸡200只,随机分为10组(每组20只),分别为A组(空白对照组,不感染球虫,不用活性云母组合物液组)、B组(阳性对照组,即感染球虫,不用活性云母组合物液组)、C... 详细信息

目的观察活性云母组合物液对柔嫩艾美尔球虫(***)感染雏鸡的防治效果。方法 7日龄雏鸡200只,随机分为10组(每组20只),分别为A组(空白对照组,不感染球虫,不用活性云母组合物液组)、B组(阳性对照组,即感染球虫,不用活性云母组合物液组)、C组(地克珠利预防组)、D组(6%活性云母组合物液预防组)、E组(4%活性云母组合物液预防组)、F组(2%活性云母组合物液预防组)、G组(地克珠利治疗组)、H(6%活性云母组合物液治疗组)、I组(4%活性云母组合物液治疗组)、J组(2%活性云母组合物液治疗组)。C、D、E、F组分别于8日龄起通过饮水给予地克珠利和不同浓度的活性云母组合物液,连续7 d。14日龄时除空白对照组外其余各组分别经口感染柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊5×104个/只。感染球虫卵囊后,C、D、E、F组饮用水换成不含地克珠利和活性云母组合物液的水;G、H、I、J组分别通过饮水给予地克珠利和不同浓度活性云母组合物液,保证饮水充足,连续7 d。所有雏鸡自由采食和饮水。攻虫后第8 d剖杀,通过平均增重、相对增重率、盲肠病变、卵囊排出情况计算抗球虫指数(Anticoccidial index, ACI)结果 D组的平均增重与对照组B组的平均增重进行两两相比差异有统计学意义(t=-46.0341,P<0.05),相对增重率为76.73%;E组的平均增重与对照组B组的平均增重进行两两相比差异有统计学意义(t=-77.9200,P<0.05),相对增重率为72.97%;C组和G组的平均增重均显著高于对照组B组的平均增重(t1=-147.9948,t2=-40.2998,P<0.05),相对增重率分别为86.48%和83.99%。D组卵囊减少率为93.4%,E组为91.3%,高于I组和J组。综合抗球虫指数显示D组和E组预防柔嫩艾美尔球虫感染效果较好,其抗球虫指数ACI分别为171.7和166.0;其次为H组和I组抗柔嫩艾美尔球虫感染效果较好,其抗球虫指数ACI分别为163.6和161.7;其余两组ACI值均小于160,抗球虫效果一般。结论 6%活性云母组合物液对鸡***感染具有较好的预防效果,而治疗效果一般。

关键词：柔嫩艾美尔球虫添加剂活性云母组合物液

苦参碱、蛇床子素和硝唑尼特3种药物抗人五毛滴虫的作用效果

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中国兽医学报 2022年第10期42卷 2031-2035页

作者：程一丹张西臣张洪波李建华宫鹏涛王晓岑李新张楠吉林大学动物医学学院/人兽共患病研究教育部重点实验室吉林长春130062

探讨苦参碱、蛇床子素和硝唑尼特对人五毛滴虫的作用效果,为人五毛滴虫病的防治提供新的参考。分别以4.00,2.00,1.00,0.50,0.25 g/L的苦参碱、蛇床子素和10.000,5.000,2.500,1.250,0.625 mg/L的硝唑尼特在不同作用时间0,2,4,8,12,18,24 ... 详细信息

探讨苦参碱、蛇床子素和硝唑尼特对人五毛滴虫的作用效果,为人五毛滴虫病的防治提供新的参考。分别以4.00,2.00,1.00,0.50,0.25 g/L的苦参碱、蛇床子素和10.000,5.000,2.500,1.250,0.625 mg/L的硝唑尼特在不同作用时间0,2,4,8,12,18,24 h体外观察对人五毛滴虫的生长抑制作用。应用透射电镜观察3种药物在其作用10 h后的超微结构变化。同时观察以25,50,100 mg/kg剂量的苦参碱、蛇床子素和0.5,1.0,2.0 mg/kg剂量的硝唑尼特分别对小鼠人五毛滴虫感染的治疗效果。结果显示,在体外试验中,4 g/L苦参碱作用12 h、10 mg/L硝唑尼特作用18 h可完全杀灭虫体,而4 g/L蛇床子素作用24 h的杀虫率为97.88%。在透射电镜下,苦参碱和蛇床子素处理后的人五毛滴虫多聚核糖体解聚、粗面内质网脱颗粒,硝唑尼特处理组人五毛滴虫出现胞质空化的现象。体内试验发现,硝唑尼特、苦参碱、蛇床子素的作用剂量分别为1,25,50 mg/kg时,肠道和粪便镜检未见虫体,经巢式PCR扩增后未扩增到人五毛滴虫。因此,苦参碱(4 g/L、12 h)和硝唑尼特(10 mg/L、18 h)可完全杀灭人五毛滴虫,但蛇床子素(4 g/L、24 h)不能完全杀灭人五毛滴虫。小鼠体内试验中苦参碱(25 mg/kg)、蛇床子素(50 mg/kg)和硝唑尼特(1 mg/kg)均有良好的治疗效果。

关键词：小鼠人五毛滴虫苦参碱蛇床子素硝唑尼特

2003～2007年盘锦市碘盐监测结果分析

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中国地方病防治 2008年第2期23卷 122-122页

作者：佟丽娟潘萍王晓岑计洋盘锦市疾病预防控制中心盘锦124010

盘锦市是辽宁省碘缺乏病轻病区，按照全国碘盐监测方案要求，我们于2003—2007年对全市生产销售、居民用户的碘盐分层次进行系统监测，以保证合格碘盐的市场供应。现将结果报道如下。

关键词：碘盐监测方案监测结果盘锦市碘缺乏病市场供应合格碘盐轻病区辽宁省